Summary
이 동영상은 herbivory에 호스트 식물 저항의 메커니즘을 설명 및 저항을 spittlebug하기 위해 항생과 관용의 상대적인 기여도를 추정 노 선택 테스트를 보여줍니다
Abstract
antixenosis, 항생 및 관용 1 : 식물 세 확장 메커니즘을 통해 herbivore 손상에 저항하실 수 있습니다. Antixenosis은 herbivore 다른 식물에게 2를 선택할 수있을 때 발전소를 피할 수있다 정도입니다. 항생은 식물이 1 먹이 herbivore의 적합성에 영향을 미치는 정도입니다. 공차가 공장이 herbivore의 성장과 재생산 1 손상시키지 않고 견딜 또는 herbivore으로 인한 손상을 복구할 수있는 정도입니다. 농업 환경에서 herbivore 저항의 내구성은 농작물 번식 노력 셋 중에 선호하는 저항 메커니즘에 큰 정도에 따라 달라집니다.
우리는 Brachiaria 종에 spittlebug 저항하는 항생과 관용의 상대적인 기여도를 추정하기위한 노 선택 실험을 보여줍니다. 속 Brachiaria의 아프리카 목초의 여러 종의 Neotropics에 귀중한 마초와 파스투레 식물, 그러나 그들이 심각 spittlebugs 여러 토착 종 (Hemiptera : Cercopidae)에 의해 도전을하실 수 있습니다. spittlebugs들의 저항을 평가 4, 식물 vegetatively - 전달됩니다 줄기 잘라 의해 및 spittlebugs는 피드 수있는 피상적인 뿌리의 성장을 허용, 약 한 달 동안 성장을 수있었습니다. 그 시점에서, 각 시험 공장은 개별적으로 부화 근처 여섯 spittlebug 달걀과 도전이다. Infestations는 공장 손상과 곤충의 생존을 평가하기 전에 한 달 동안 진행하기 위해 사용할 수 있습니다. 곤충의 생존을 득점하는 것은 항생의 추정치를 제공하면서 설비의 손상을 득점하는 것은 내성을 예측할 수 있습니다. 이 프로토콜은 상업 brachiariagrases 5 spittlebug 저항을 강화하기 위해 식물 번식 목표를 촉진하고 있습니다.
Protocol
1. 식물
- 성숙한 식물의 단일 줄기 잘라는 실험 단위로 사용됩니다. 잘라는 심는 재료의 균일을 위해 10cm로 손질합니다.
- 식물 병원균에 의해 오염을 방지하기 위해, 잘라 2 분 3 % 나트륨 차아 염소 산염의 용액에 씻은 후 수돗물로 씻어서 thoughroughly 있습니다.
- 각각의 절단은 CA에 심어져 있습니다. 원통형 PVC 튜브에 무균 토양 36g는 (6.5 cm 높이의 직경 외부 5.3 ㎝) 스티로폼 컵에있는 낮은 끝에 봉인 및 PVC 부싱로 덮인. 절단은 부시의 중심 오프닝에 배치 거품 링에 의해 장소에서 개최됩니다.
- 적절한 토양 수분을 유지하기 위해 필요에 따라 식물은 수정된하고 물결 무늬가있는 있습니다.
- 식물은 뿌리 - 목부 수유의 spittlebug의 nymphs을위한 사이트를 먹이 역할을 외면 뿌리의 개발을 허용, 곤충에 의해 도전되기 전에 한 달 동안 성장을합니다.
- 뿌리 잘라와 PVC 튜브는 부분적으로 루트 아키텍처 고유의 차이에 대한 조정, 더 이상 외면 뿌리의 성장을 촉진하기 전에 침입 8 D에 대한 반전됩니다. 이 단계는 우리가 24헥타르 일을 제공 빛의 인공 소스를 필요로합니다. 이 역전의 치료 실험에서 제거 후 herbivore 저항과 혼란함을 주죠 herbivory에서 탈출을 피하기 위해 각각의 공장은 거의 또는 전혀 외면 뿌리로 복제합니다. 이 제거는 그들의 유전자형의 철폐로 이어지는 결코 드문 있어야합니다.
2. 곤충
- 어른 spittlebugs는 현장에서 수집한 종을 발견하고, 그들에 대한 피드에 감염될 brachiariagrasses의 단풍을 제공 산란 연습장에 소개합니다. 여자들은 토양에 알을은 새장의 바닥에 놓인 얕은 이동식 트레이에 포함되어 있다고 믿는다.
- 며칠 후, 흙은 물에 중단되고 계란을 수집 sieves 일련의 (42, 60 및 150 메쉬) 통과. 30 % 생리 식염수에 sieved 자료를 중지하면 미숙 계란 및 잔류 유기물 뒤에두고, 성숙한 난자가 부동하게됩니다.
- 곤충 병원체의 오염을 방지하기 위해, 계란은 5 분 0.5 % 나트륨 차아 염소 산염의 용액에 소독 후 증류수로 씻어서 있습니다.
- 각각의 시험 공장 (실험 장치) 6 성숙 난자로 토양 표면에 감염됩니다. 부화에 가까운만이 성숙한 난자가 infestations 위해 선택됩니다. 곤충의 복부에 대응하는 자신의 사후 부분에 핑크색 표시,,, 그리고 완벽하게 확장 operculum 그들은 두 개의 빨간 곤충의 눈을에 대응하는 자신의 앞쪽에 부분 점의 존재에 의해 확인할 수 있습니다.
- 성공적인 부화은 어떤 안깐 계란은 우리의 식민지에서 neonate spittlebug으로 대체되는 시점에서 4 D 나중에 확인됩니다.
- 테스트 식물은 유전자형 최대 6 복제와 함께 무작위로 전체 블록 설계에 정렬됩니다.
3. 평가
- 실험은 CA를 평가합니다. 침입 후 30 D (정확한 시간은 공부 벌레 종류에 따라 다릅니다.)
- 피해 1 눈에 띄는 손상과 죽은 식물 (그림 1) 5에 해당에 해당하는 1-5 시각적 척도에 점수입니다. 식물의 피해를 채점하는 것은 내성을 예측할 수 있습니다.
Brachiaria 종의 spittlebug herbivory에 내성을 평가하기 위해 사용 그림 1. 피해 규모. 1 = 없음 감지 손상, 2 = 0~25% 괴사성 단풍, 3 = 25-50% 괴사성 단풍, 4 = 50~75% 괴사성 단풍, 5 = 75-100% 괴사성 단풍.
- 곤충 생존들은 최종 instar 또는 성인 무대 (그림 2) 중 하나를 도달하는 곤충을 계산하여 평가합니다. 곤충 생존을위한 채점하는 것은 항생의 예측을 제공합니다.
첫 instar (왼쪽)에서 성인 (오른쪽)에 그림 2. Spittlebug 개발. 평가 날짜 적어도 최종 instar을 (화살표)에 도달만이 벌레가로 계산됩니다 "생존자."
4. 대표 결과
spittlebug Aeneolamia reducta에 대한 저항을위한 대표적인 분석 심사 Brachiaria의 하이브리드의 결과는 그림 3에 제공됩니다.
그림 3. spittlebug Aeneolamia reducta에 저항 Brachiaria의 하이브리드를 검사의 결과. herbivory 자신의 응답이 음모의 절반 아랫부분에 일인 경우 우리는 식물이 저항하는 것이 좋습니다. 오른쪽에서 왼쪽 및 관용 위에서 아래로 증가 항생 증가. 화살표 우리 내성 검사에서 가리 킵니다.
Discussion
herbivore 저항 메커니즘 간의 차별하는 것은 작물 번식 노력 3 밝게하실 수 있습니다. 강력한 항생에 따라 저항이 어떤 상황에서보다 적극적인 해충 biotypes에 대한 선택 압력을 만들 수 있습니다. 한편, 관용에 따라 저항은 오차가 결국 압도 때까지 해충 인구가 증가 허용할 수 있습니다. 튼튼한 저항 번식, 따라서 어떤 저항 메커니즘은 특정 작물 / 해충 시스템에 대한 대부분의 안정성을 부여 것입니다 [케네디 외 볼의 신중하게 고려해야합니다. (1987) 주제] 3 종합 토론.
이 비디오 데모는 brachiariagrasses 6-9에서 spittlebug 저항하는 항생과 관용의 상대적인 기여도를 평가하기위한 몇 가지 이전의 연구에 빌드. 선택 시험 또는 현장 실험과 대조적으로, 노 - 선택 시험 따라서 herbivore 행동 (예, 호스트 환경 설정, 집합)에서 발생하는 차이에 대한 제어를 제공하는 모든 식물이 같은 herbivore 압력을 받게 보장합니다. 이러한 이유로, 그러나, - 선택 시험은 antixenosis에 의해 저항을 평가하기위한 적합하지 않습니다.
인위적으로 곤충 식민지를 양육하는 것은 저항 심사 assays 10 테스트 곤충을 얻기 위해 선호하는 방법입니다. 식민지은 연중 11 시간을 실시하는 실험 알려진 시대의 spittlebugs의 신뢰할 수와 유니폼 소스를 제공합니다. 그것은, 그러나, 정기적으로 식민지 관련 현장 인구 10 유전 이탈하지 않도록하기 위해 식민지에 야생 개인 달이다해야 할 수도 있습니다. 이러한 인위적 - reared herbivores의 적합성을 평가하고, 시간이 지남에 따라 자신의 공격성에 가능한 변화를 모니터링하기 위해서는 모든 검사는 알려진 저항 수준의 적절한 검사를 포함하는 것이 중요합니다.
여러 개의 매개 변수는 신중하게 적절한 저항 심사 분석을 설계 정의해야합니다. 우리가 테스트를 설계하는 생각이 몇 가지 주요 매개 변수는 호스트 식물의 나이, 종 및 spittlebugs의 발달 단계, 침입 수준 및 식물 곤충 담당자 8,9,12 기간을 포함합니다. 실험 및 프로토콜 세련의 여러 반올림은 적절하게 현장에서 herbivore 저항을 예측 신속하고 비용 효율, 신뢰성, 분석에 도달하는 데 필요한 수 있습니다.
Disclosures
관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.
Acknowledgments
이것은 생산 및 실험 작업은 여기에 친절 리나 아귀레, 길버토 코르도바, 윌리엄 메라, Ximena Bonilla, 그리고 다리오 Viveros 지원 레이 날도 Pareja의 헌신적이고 열정적인 도움을 반영 제시. 우리는 또한 우리가 비디오와 원고를 향상 도움이 덧글에 대한 존 마일즈 세 익명 리뷰어 감사합니다.
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