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Biology

लेजर स्तनधारी ऊतक की कैद Microdissection

Published: October 1, 2007 doi: 10.3791/309

Summary

Abstract

लेजर कब्जा माइक्रोस्कोपी, लेजर microdissection (LMD) के रूप में भी जाना जाता है, या स्थिर या formalin-तय, आयल एम्बेडेड ऊतक वर्गों से कोशिकाओं और ऊतकों के छोटे संख्या को अलग करने के लिए उपयोगकर्ता सक्षम बनाता है. LMD तकनीक थर्मामीटरों अस्थिर के शीर्ष पर या तो रखा झिल्ली, या नीचे, ऊतक अनुभाग पर भरोसा करते हैं. एक विधि में, लेजर ऊर्जा ध्यान केंद्रित अंतर्निहित कोशिकाओं, जो तब ऊतक अनुभाग के बाहर उठाया जा सकता है पर झिल्ली को पिघला करने के लिए प्रयोग किया जाता है. दूसरे में, लेजर ऊर्जा ऊतक पर एक "तैयार" पथ के किनारे पन्नी वाष्पीकृत, चयनित कक्षों को एक संग्रह डिवाइस में गिर करने के लिए अनुमति देता है. प्रत्येक तकनीक कई microns के एक न्यूनतम संकल्प के साथ कोशिकाओं के चयन की अनुमति देता है. डीएनए, शाही सेना, प्रोटीन, और लिपिड के नमूने और अलग किया जा सकता है सूक्ष्म dissected नमूनों से विश्लेषण किया. इस वीडियो में, हम सात क्षेत्रों में LMD के सिद्धांतों के लिए एक परिचय के रूप में LMD लेजर microdissection साधन Leica के उपयोग सहित प्रदर्शित, उपयोग के लिए साधन, नमूना तैयार करने के लिए सामान्य विचार, आरंभ नमूना बढ़ते और कब्जा ट्यूबों की स्थापना खुर्दबीन aligning, कब्जा नियंत्रण समायोजन, और ऊतक नमूनों पर कब्जा. लेजर कब्जा सूक्ष्म विच्छेदन अन्वेषक कुछ सेल समकक्ष के रूप में छोटे रूप में शुद्ध सेल आबादी के नमूनों को अलग करने के लिए सक्षम बनाता है. यह ब्याज की कोशिकाओं है कि पड़ोसी contaminants, जो प्रयोगात्मक परिणाम उलझाना कर सकते हैं स्वतंत्र हैं का विश्लेषण की अनुमति देता है.

Tags

8 अंक बेसिक प्रोटोकॉल लेजर कैद Microdissection Microdissection तकनीक Leica
लेजर स्तनधारी ऊतक की कैद Microdissection
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Edwards, R. A. Laser CaptureMore

Edwards, R. A. Laser Capture Microdissection of Mammalian Tissue. J. Vis. Exp. (8), e309, doi:10.3791/309 (2007).

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