Summary
Perioperative और क्रिटिकल केयर संबंधित तीव्र गुर्दे की चोट के लिए एक शक्तिशाली मॉडल प्रस्तुत किया है. पूरे शरीर कार्डियक गिरफ्तारी यह संभव है करने के लिए लगभग नैदानिक अकी के histologic और कार्यात्मक परिवर्तनों को दोहराने से प्रेरित hypoperfusion का उपयोग करना.
Abstract
तीव्र गुर्दे चोट (अकी) एक आम, गंभीर बीमारी के अत्यधिक घातक जटिलता है, जो एक उच्च मृत्यु दर 1-4 और जो सबसे अधिक बार पूरे शरीर hypoperfusion की वजह से है है 5,6 कृंतक मॉडल में पूरे शरीर hypoperfusion की सफल प्रजनन है . कठिनाई से भरा गया है 7-9,9,10 मॉडल जो फोकल ischemia रोजगार बार बार परिणाम जो नैदानिक सेटिंग है, और बड़े पशु मॉडल है जो पूरे शरीर hypoperfusion कमी आनुवंशिक हेरफेर के पूर्ण toolset करने के लिए उपयोग के लिए अनुमति देते हैं करने के लिए अनुवाद नहीं दिखा दिया है. माउस में संभव है. 11,12 हालांकि, हाल के वर्षों में हृदय की गिरफ्तारी और कार्डियोपल्मोनरी resuscitation के एक माउस मॉडल में उभरा है जो मॉडल अकी के लिए अनुकूलित किया जा सकता है है यह मॉडल 13 मज़बूती से शारीरिक, कार्यात्मक, शारीरिक, और histologic नैदानिक अकी में देखा परिणामों reproduces . तेजी से repeatable है, और एक murine शल्य चिकित्सा मॉडल के महत्वपूर्ण लाभ के सभी आनुवंशिक जोड़ तोड़ तकनीक, कम लागत बड़े जानवरों के सापेक्ष, और उपयोग में आसानी के लिए उपयोग सहित प्रदान करता है. हमारे समूह इस मॉडल के उपयोग के साथ व्यापक अनुभव विकसित की है अकी में अंग विशेष के परिणामों के एक नंबर का आकलन 14,15.
Protocol
सभी वर्णित प्रक्रियाओं के अनुसार स्वास्थ्य देखभाल और अनुसंधान और सभी जानवर प्रोटोकॉल Oregon स्वास्थ्य एवं विज्ञान विश्वविद्यालय संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया में पशुओं के उपयोग के लिए दिशा निर्देशों के राष्ट्रीय संस्थानों के साथ आयोजित की जाती हैं.
1. सर्जिकल तैयारी
- माउस वजन. वर्णित प्रक्रिया C57BL / 6 के बीच 20 और 25 जी वजन चूहों पर किया जाता है संज्ञाहरण एक प्रेरण 3-4 isoflurane% का उपयोग कर बॉक्स में प्रेरित है, और बाद में हवा / ऑक्सीजन मिश्रण में 1.5-2.5 isoflurane% का उपयोग कर बनाए रखा.
- आँखें चिकना और एक हीटिंग पैड पर पशु लापरवाह स्थिति. 4 टेप का उपयोग extremities स्थिर करना. हिंद पंजे एक सामान्य स्थिति में टेप किया जा सकता है, तथापि, forepaws छाती की दीवार के पास के रूप में सुरक्षित किया जाना चाहिए संभव के रूप में सीने compressions के दौरान पूर्ण सीने दीवार भ्रमण करने की अनुमति.
- चिकना और एक गुदा तापमान जांच जगह. तापमान एक हीटिंग पैड और एक इलेक्ट्रॉनिक तापमान नियंत्रक (Digi-नब्ज, कोल Parmer, Vernon हिल्स आईएल), ° जो 37.0 बनाए रखने के लिए सेट कर दिया जाता है सी. से जुड़े दीपक का उपयोग करने के लिए नियंत्रित किया जाता है क्योंकि यह संभव है कि जानवर के भीतर एक तापमान ढाल नहीं प्रवाह राज्य के दौरान विकास कर सकते हैं, यह महत्वपूर्ण है कि तापमान मापा और हित के अंग के पास नियंत्रित.
- 2.5 सेमी 22 गा teflon (Insyte डब्ल्यू, बी.डी., फ्रेंकलिन न्यू जर्सी) कैथेटर और एक angled introducer (Frova परिचयकर्ता, कुक चिकित्सा, में ब्लूमिंगटन) की कटौती बाहर का अंत का उपयोग ट्रेकिआ Intubate. Tracheal इंटुबैषेण के अन्य तरीकों स्वीकार्य हैं, तथापि, angled introducer के उपयोग के एक थोड़ा बढ़ाया स्थिति है, जो नसों में कैथेटर की नियुक्ति के लिए शल्य चिकित्सा जोखिम का अनुकूलन में गर्दन के उचित स्थिति की अनुमति देता है. अंतःश्वासनलीय कैथेटर हब छेनी के लिए सीवन के एक पाश के साथ सुरक्षित है और सीने compressions के दौरान सिर स्थिर मामूली तनाव के साथ बनाए रखा.
- यंत्रवत् एक कृंतक वेंटीलेटर μL 140, 150 साँस / मिनट के लिए सेट के साथ माउस हवादार. यह वजन के लिए समायोजित नहीं है इस प्रोटोकॉल के रूप में हमेशा 20-25 ग्राम पशुओं में किया जाता है. संज्ञाहरण खत्म - गहरा नहीं है. इस impairs पुनर्जीवन के रूप में अंत expiratory दबाव लागू करने के लिए वेंटीलेटर सेट मत करो.
- बाँझ तकनीक और एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप का उपयोग करना, गले नस में एक पूर्व प्लावित पीई 10 कैथेटर जगह है. किसी भी पक्ष से, इस्तेमाल किया जा सकता है, लेकिन ऑपरेटर के लिए निकटतम पक्ष के उपयोग के सीने compressions या अन्य जोड़तोड़ के दौरान कैथेटर dislodgement का मौका कम कर देता है. 0.5% bupivicaine, 0.1 एमएल घाव किनारों में infitrated पश्चात दर्द को नियंत्रित करने के लिए.
- Cyanoacrylate शल्य चिपकने के साथ त्वचा बंद में पीई - 10 कैथेटर सुरक्षित.
- उपचर्म ईकेजी इलेक्ट्रोड प्लेस और निगरानी उपकरण से कनेक्ट. संकेत और ही संकेत के रास्ते अधिकतमकरण के लिए सावधान ध्यान पुनर्जीवन की सफलता के लिए महत्वपूर्ण है. सुनिश्चित करें कि सभी तारों ऑपरेटिंग सतह के लिए सुरक्षित कर रहे हैं, संकेत क्रॉसिंग कम से कम, और संकेत पथ के भीतर insulators के (खोखले सुई या फंसे तार में हवा की तरह) कम से कम. ठोस nonstranded नेतृत्व तार जुड़ा सुइयों या खरीदा जा सकता है प्रयोगशाला में किए गए. एक बार जुड़ा हुआ है, ईकेजी मॉनिटर पर संकेत का अनुकूलन.
2. कार्डियक गिरफ्तारी
- सुनिश्चित करें कि माउस normothermic है, गुदा तापमान 36.5 डिग्री सेल्सियस के रूप में परिभाषित - 37.5 डिग्री सेल्सियस कमरे के तापमान 0.5 एम पोटेशियम क्लोराइड के 40 μL नसों प्रशासन और isoelectric निरीक्षण ईकेजी पर अनुरेखण. खुराक समायोजन के लिए वजन सीमा के भीतर आवश्यक नहीं है 20-25 जी गिरफ्तारी टाइमर प्रारंभ.
- वेंटीलेटर डिस्कनेक्ट. संवेदनाहारी वाष्प बंद. हीटिंग पैड और किसी अन्य उपकरण है जो इलेक्ट्रॉनिक शोर है कि ईकेजी निगरानी के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं उत्पादन बंद है. माउस पर एक इन्सुलेट कंबल प्लेस.
- रिकार्ड तापमान कार्डियक गिरफ्तारी के दौरान हर मिनट. यदि आवश्यक हो, एक हीटिंग दीपक normothermic रेंज के कोर तापमान लाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. कार्डियक गिरफ्तारी के दौरान, आपूर्ति और उपकरणों (उदाहरण के लिए, एपिनेफ्रीन सिरिंज) के पुनर्जीवन के लिए तैयार है. एक चेकलिस्ट उपयोगी हो करने के लिए निर्बाध पुनर्जीवन है, जो अस्तित्व के लिए आवश्यक है सुनिश्चित कर सकते हैं.
- 7 मिनट, कार्डियक गिरफ्तारी के 30 सेकंड के बाद, वेंटीलेटर जोड़ने और 180 साँस / मिनट की दर में वृद्धि, पूर्व गिरफ्तारी सेटिंग में ज्वार मात्रा रखते हुए.
- 8 मिनट 300 BPM पर सीने compressions आरंभ करें. ईकेजी पर मोशन artifact के न्यायाधीश सीपीआर दर करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. सीने compressions सूचकांक उंगली, xiphoid प्रक्रिया ऊपर 5 मिमी और थोड़ा midline की बाईं के साथ दिया जाना चाहिए. सीने 1/3-1/2 anteroposterior दूरी की संकुचित होना चाहिए और पूर्ण हटना compressions के बीच अनुमति दी जानी चाहिए. फिंगर स्थिति और इष्टतम कम्प्रेशन प्रेशर पूरी तरह से गंभीर हैं. इस मॉडल में अस्तित्व हासिल करने में विफलता लगभग हमेशा suboptimal सीपीआर करने के लिए कारण है.
- एपिनेफ्रीन के 0.5 एमएल, 15 μg / एमएल सीपीआर के पहले 30 सेकंड में, पतला दिखे. कुल एपिनेफ्रीन खुराक 8-12 μg है. ध्यान से सहज परिसंचरण (ROSC) की वापसी के लिए ईकेजी निरीक्षण. संकीर्ण जटिल क्यूआर परिसरों सम्पीडन कलाकृतियों के बीच देखा जाता है. ROSC आमतौर पर 90 सेकंड और सीपीआर शुरू करने के बाद 2 मिनट के बीच होता है. पुनर्जीवन अगर ROSC 3 मिनट से घटित नहीं करता है के लिए छोड़ दिया है. अक्सर समयपूर्व निलय संकुचन और ईकेजी धुरी में परिवर्तन ROSC के बाद पहली 2 मिनट में मनाया जाता है, और लगभग हमेशा 2 मिनट पर स्थिर साइनस tachycardia में हल.
- पुनर्जीवन और एपिनेफ्रीन खुराक के कुल समय का रिकार्ड. रिकार्ड तापमान ROSC के बाद 10 मिनट के लिए हर मिनट.
- ईकेजी सुराग हटाया जा जब सहज श्वसन शुरू कर सकते हैं ROSC के बाद 12-15 मिनट के भीतर आमतौर पर.
- ट्रेकिआ Extubate जब सहज श्वसन दर> 60/min है.
- एक वसूली पिंजरे में एक तापमान नियंत्रित 37 के लिए सेट की सतह पर माउस प्लेस डिग्री सेल्सियस पहले 2 घंटे postprocedure के लिए भोजन और पानी के लिए आसान पहुँच सुनिश्चित करने. पिंजरे तो मानक पश्चात आवास की स्थिति के लिए ले जाया जा सकता है जब माउस पूरी तरह से संज्ञाहरण से बरामद किया है और सक्रिय है.
3. Exsanguination / परफ्यूज़न फिक्सेशन और गुर्दे हार्वेस्ट
- 24 सीए / सीपीआर के बाद, isoflurane 3-4% के साथ संज्ञाहरण प्रेरित और एक धूआं हुड जो formalin के साथ प्रयोग के लिए उपयुक्त है के भीतर एक शल्य चिकित्सा की सतह पर लापरवाह स्थिति में जानवर सुरक्षित ..
- धीरे - धीरे 5% संवेदनाहारी वाष्प एकाग्रता बढ़ती द्वारा संवेदनाहारी गहरा और यह सुनिश्चित करने के लिए माउस गहरा anesthetized सहज श्वसन की समाप्ति के रूप में द्वारा evidenced है.
- एक कौड़ी thoracotomy प्रदर्शन और मानक तकनीक के अनुसार हृदय के बाएं वेंट्रिकल की शिखर पंचर के माध्यम से माउस रक्तहीन करना.
- एक ही सुई के माध्यम से, 0.9% धीमी जलसेक द्वारा खारा प्रशासन. छिड़काव exsanguination / acclerate, कैंची के साथ सही आलिंद उपांग निक. Laparotomy प्रदर्शन और गुर्दे का निरीक्षण. जब वे blanched कर रहे हैं, खारा निर्धारण के लिए चार formalin% पर बदला जा सकता है. गुर्दे तो आयल और ट्यूबलर उपकला परिगलन की मात्रा का ठहराव के लिए Fluoro - जेड बी के साथ दाग में एम्बेडेड रहे हैं.
4. प्रतिनिधि परिणाम:
जब सीए प्रेरित है, धमनी (एमएपी) के दबाव और शून्य के पास क्षेत्रीय गुर्दे रक्त प्रवाह (RRBCF) के लिए ड्रॉप का मतलब और स्थिर रहेगा जब तक पुनर्जीवन शुरू होता है (चित्रा 1 ). / 24 के बाद सीए सीपीआर, गुर्दे समारोह (रक्त यूरिया नाइट्रोजन, बन और क्रिएटाइन) के सीरम सूचकांक काफी दिखावा संचालित जानवरों करने के लिए सापेक्ष बुलंद कर रहे हैं. AST / ALT भी बुलंद हैं, गहरा पूरे शरीर ischemia (चित्रा 2) के सबूत की पेशकश . न्युट्रोफिल gelatinase जुड़े (NGAL) lipocalin, गुर्दे इस्कीमिक चोट का एक संवेदनशील संकेतक व्यापक सीए / CPR (चित्रा 3) के बाद upregulated 24 घंटों का है . अंत में, photomicrographs ट्यूबलर उपकला और hematoxylin और eosin पर luminal भरने के thinning (चित्रा 4, पैनल) दाग और दिमाग़ी ट्यूबलर उपकला में व्यापक कोशिका मृत्यु जब fluoro - जेड बी के साथ दाग के साथ बद, दिमाग़ी परिगलन इस्कीमिक गुर्दे की चोट के ठेठ का प्रदर्शन ( चित्रा 4, पैनल ख).
चित्रा 1 कार्डियक गिरफ्तारी छिड़काव दबाव के तुरंत नुकसान लाती है, यहाँ का प्रतिनिधित्व के रूप में धमनी (एमएपी) और्विक धमनी में दबाव मापा, हृदय की गिरफ्तारी की अवधि के दौरान लगभग पूरा क्षेत्रीय गुर्दे cortical रक्त प्रवाह (RRCBF) की समाप्ति में जिसके परिणामस्वरूप (छायांकित मतलब क्षेत्र). सीने compressions और एपिनेफ्रीन रिटर्न के साथ पुनर्जीवन सामान्य करने के लिए एमएपी और RRCBF तेजी से पोस्ट पुनर्जीवन अवधि में ही उगता 14 से अनुमति के साथ पुनर्प्रकाशित..
चित्रा 2. 24 postprocedure, रक्त यूरिया नाइट्रोजन (BUN), सीरम creatinine, और ट्यूबलर कोशिका मृत्यु की हद तक सभी कर रहे हैं / सीए सीपीआर के रूप में एक दिखावा प्रक्रिया के साथ इलाज के जानवरों के साथ तुलना में आया पशुओं में काफी ऊंचा है. / सीए सीपीआर एक पैन organismal इस्कीमिक अपमान, यहाँ जिगर समारोह एंजाइमों का बड़े पैमाने पर पदोन्नति के द्वारा evidenced alanine अमीनो transferase (ALT) और सीए / CPR चूहों में (AST) के रूप में नकली इलाज जानवरों के साथ तुलना aspartate aminotransferase. लाती
चित्रा 3. वेस्टर्न ब्लॉट न्युट्रोफिल gelatinase जुड़े (NGAL) lipocalin, गुर्दे इस्कीमिक चोट का एक संवेदनशील संकेतक पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करते हुए प्रदर्शन किया. मूत्र के नमूने तुरंत पहले ("पूर्व") और 24 ("24") के बाद सीए / CPR (लेबल, ऊपर ख, ग और घ) के 4 पशुओं में प्राप्त किया गया. NGAL व्यापक माउस में upregulated हैसीए / CPR बाद मूत्र 14 से अनुमति के साथ पुनर्प्रकाशित.
चित्रा 4) Hematoxylin और eosin सीए / सीपीआर के बाद एक छोटी अक्ष गुर्दे ऊतक 24 घंटों का hilar अनुभाग के दाग. बद लेकिन स्पष्ट ट्यूबलर plugging के साथ मस्तिष्क और corticomedullary tubules को नुकसान है. तीर सूजन, corticomedullary जंक्शन पर pyknotic नाभिक के साथ क्षतिग्रस्त नलिकाओं को इंगित करें. बी) Flouro - जेड बी एक ही पशुओं में एक ही क्षेत्र के दाग, सीए / CPR बाद 24. Fluoro - जेड बी दाग परिगलित चमकीले हरे रंग की कोशिकाओं, बद corticomedullary ट्यूबलर परिगलन दिखा. तीर corticomedullary जंक्शन पर चमकीले दाग क्षतिग्रस्त नलिकाओं को इंगित करें. इन निष्कर्षों को काफी गुर्दे मनुष्य जो अकी विकसित से बायोप्सी निष्कर्ष के समान हैं, और अकी के अन्य पशु मॉडल द्वारा उत्पादित उन लोगों के विपरीत.
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Discussion
हृदय और माउस में कार्डियोपल्मोनरी resuscitation गिरफ्तारी के normothermic मॉडल एक मॉडल है जो pathophysiology और अकी, पूरे शरीर hypoperfusion की सबसे आम नैदानिक कारण के आकारिकी replicates में मूल्यांकन के कई रास्ते प्रदान करता है. हाइपोथीसिस परीक्षण आनुवंशिक हेरफेर तकनीकों और अच्छी तरह से समझ और विशेषता शारीरिक रचना और प्रयोगशाला माउस के शरीर क्रिया विज्ञान के एक आड़ के लिए उपयोग के द्वारा सहायता प्राप्त हो सकता है.
के रूप में यहाँ वर्णित है, अनुभवी हाथों में अस्तित्व के 80% है. हालांकि शल्य तैयारी और बाद गिरफ्तारी देखभाल सीधा कर रहे हैं, एक गिरफ्तार माउस के वास्तविक पुनर्जीवन एक चुनौतीपूर्ण शल्य चिकित्सा कौशल है जो महत्वपूर्ण अभ्यास की आवश्यकता है है. हमारे अनुभव में सफल resuscitations एक अनुभवहीन सर्जन द्वारा अलग - अलग जानवरों resuscitating पहले 30-50 प्रयास के बारे में बाद आदर्श बन जाते हैं, और लगातार चोट और पुनर्जीवन अतिरिक्त अभ्यास ले. विशेष रूप से, तकनीक (यानी, पहले 20 पशुओं के लिए) सीखने के प्रारंभिक चरण के दौरान, सार्थक अस्तित्व की संभावना नहीं है, और अनावश्यक संकट को रोकने के किसी भी बचे पुनर्जीवन के तुरंत बाद euthanized किया जाना चाहिए. प्रारंभिक प्रशिक्षण के बाद, जब बचे पुनर्जीवन निम्नलिखित मिनट में जोरदार हृदय वसूली का प्रदर्शन करते हैं, तो यह उचित है 15 मिनट के निशान के बाद ROSC के माध्यम से जीवित पशुओं जारी है. पशु कि उस बिंदु से जोरदार सहज सांस प्रयासों का प्रदर्शन की संभावना उचित वसूली के साथ 24 बच जाएगा. इस अभ्यास चरण विशेष रूप से IACUC प्रोटोकॉल में संबोधित किया जाना चाहिए. सबसे मुश्किल कौशल सीखने की छाती खुद compressions के रूप में यह मुश्किल है के लिए हानिकारक स्तर तक दबाव में वृद्धि के बिना आवश्यक दर पर compressions के उद्धार. यांत्रिक resuscitators तैयार किया गया है और हमारी प्रयोगशाला और 16 अन्य लोगों में इस्तेमाल किया लेकिन कोई यांत्रिक रिसस्क्युरेटर तारीख के लिए माउस स्वीकार्य अस्तित्व का उत्पादन किया गया है .
इस मॉडल के लिए कुछ सीमाएं हैं. सबसे पहले, कोई माउस मॉडल पूरी तरह से मानव शरीर विज्ञान के मॉडल, कर सकते हैं और परिणामों को सम्मान के साथ व्याख्या की जानी चाहिए के लिए मतभेद interspecies. विशेष रूप से, माउस दिल मजबूत है, हम हृदय की गिरफ्तारी के 8 मिनट पर 80% प्राप्त करने के अस्तित्व, लेकिन नैदानिक अध्ययन में मानव अस्तित्व के पुनर्जीवन शुरुआत की गिरफ्तारी के बाद 2-3 मिनट के साथ भी कम से कम 50% है 17 माउस के छोटे आकार . तकनीकी रूप से मांग प्रक्रियाओं renders, और सीने compressions के लिए विशेष रूप से एक महत्वपूर्ण सीखने की अवस्था है. दूसरा, इस प्रोटोकॉल में, दवा की खुराक और वेंटीलेटर सेटिंग्स पशु वजन के लिए नहीं अनुक्रमित रहे हैं. यह है क्योंकि हम 20-25 ग्राम वजन सीमा में केवल जानवरों का उपयोग करने के लिए उपकरण आकार के प्रभाव को कम. उदाहरण के लिए, हम एक 22 गेज कैथेटर का उपयोग करने के लिए ट्रेकिआ intubate, प्राप्त मुहर ही 30 ग्राम माउस में नहीं है क्योंकि यह एक 25 ग्राम माउस में है और बढ़ गैस रिसाव physiologically महत्वपूर्ण हो सकता है है. हालांकि, एक परिभाषित वजन सीमा में पशुओं का उपयोग ईमानदारी से शरीर वर्गों है कि नैदानिक ischemia-reperfusion की चोट के अधीन हैं की विविधता reproduce नहीं है. तीसरा, कोई प्रवाह राज्य ईमानदारी से कम प्रवाह राज्यों से परिणामों नकल नहीं हो सकता है. विशेष रूप से, तापमान gradients माउस के भीतर नहीं प्रवाह के दौरान विकसित हो सकता है. परिणामों पर gradients के प्रभाव (यदि कोई हो) को कम करने के लिए, तापमान ब्याज के अंग के पास मापा जाता है. अंत में, हमारी प्रयोगशाला है जो postarrest अवधि में महत्वपूर्ण चयापचय अम्लरक्तता की पुष्टि से जल्दी डेटा की वजह से, हम पुनर्जीवन के दौरान hyperventilate. के रूप में हाल ही के डेटा कि hyperventilation से संकेत मिलता है के दौरान सीपीआर हानिकारक है, 18,19 है यह संभव है कि इस अभ्यास मॉडल में अस्तित्व को कम कर देता है. पूरे शरीर ischemia reperfusion चोट के लिए कई विकल्प मॉडल मौजूद हैं. उदाहरण के लिए, / सीए सीपीआर कुत्तों में वर्णित किया गया है, 20 खरगोश, भेड़ के बच्चे 21, 22 सूअरों, 23 चूहों, 16 और आर्कटिक जमीन गिलहरी 24.
हम पता चला है कि पश्चात गुर्दे समारोह रासायनिक, प्रतिरक्षाविज्ञानी, या 24 घंटे में histological तकनीक का एक नंबर के द्वारा मूल्यांकन किया जा सकता है. पशु 24 घंटों की तुलना में समय के लिए बच जा सकता है, तथापि, और अकी के क्षणिक प्रकृति के इस वसूली और / या स्थायी चोट के तंत्र की जांच के लिए उपयोग करने के लिए एक आकर्षक एक मॉडल बनाता है. चोट ही सीए के दौरान समय और तापमान के मापदंडों में फेरबदल द्वारा titratable है. अब उच्च तापमान की गिरफ्तारी और रखरखाव अधिक से अधिक चोट की उपज है (लेकिन प्रतिकूल प्रभाव अस्तित्व). के रूप में हम शामिल जिगर समारोह डेटा के साथ दिखाया है, अन्य अंग प्रणालियों भी और प्रभावित कर रहे हैं इस मॉडल के रूपांतरों का उपयोग कर जांच की जा सकती है, तथापि, महत्वपूर्ण प्रयास प्रयोगात्मक शर्तों के हित के अंग प्रणाली के लिए अनुकूलन की आवश्यकता हो सकता है.
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Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Potassium Chloride | Abbott Laboratories | 06653-5 | |
| Isoflurane | Abbott Laboratories | 05260-05 (and others) | |
| Epinephrine HCl | Multiple Suppliers | Multiple | |
| Digi-Sense temperature controller | Cole-Parmer | EW-89000-00 | |
| Angiocath IV Cath | VWR international | 381134 | |
| Frova angled airway introducer | Cook | G27282 | |
| MicroVent Ventilator for Mice | Harvard Apparatus | 733591 |
References
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