玻璃体内注射眼部疾病模型建立

Summary

玻璃体内注射液是一种视觉科学的研究，广泛用于眼部疾病或局部治疗的直接应用的技术。该视频展示了玻璃体内注射用1ml注射器与玻璃吸管的协议。有用的技巧，如何避免大出血和晶状体损伤。

Abstract

玻璃体内注射液是一种广泛使用的技术在视觉科学的研究。它可用于建立与眼部疾病或局部治疗的直接应用的动物模型。本视频介绍了如何使用简单和便宜的工具来完成的玻璃体内注射过程。使用1毫升注射器，而不是一个hemilton注射器，使用。实用技巧，如何作出适当的注射针头，用玻璃移液管以完美的技巧，以及如何轻松地连接用玻璃吸管将注射器针头紧紧地握在一起。

要进行一个很好的的玻璃体内注射，有三个方面来观察：1）注射部位不应该破坏视网膜结构; 2）出血应避免，以减少感染的风险; 3）镜头应不变，以避免外伤性白内障。简单地说，最重要的一点是正常的眼部结构，以减少中断。为了避免中断视网膜，被选为优越的鼠眼的鼻地区。另外，在标准杆的平面，这是从鼠眼的角膜缘地区约1.5 mm针的穿刺点。轻轻推少量的玻璃体通过穿刺孔，以减少注射前的眼压。喷射角度45度，这是不太可能导致在大鼠眼外伤性白内障，从而避免了从透镜因素相关的并发症和影响力。在这次行动中，有没有切割，无出血，结膜和眼部肌肉。快速和轻微的损伤，一个成功的玻璃体内注射可以在几分钟内完成。

在这个特殊的协议概述注入玻璃体内注射的具体。然而，这里介绍的方法和材料也可以用于其他注射给药程序的小型哺乳动物的脑，脊髓或其他器官。

Protocol

1. 准备使用移液器拉马的玻璃吸液管，连接到1ml注射器，并用封口膜密封连接。退回到吸液管的尖端解决方案2毫升，并准备注射。
2. 麻醉大鼠腹腔注射氯胺酮（80mg/kg）和甲苯噻嗪（8mg/kg）（体积比为2:1）。
3. 应用一个前玻璃体内注射局部麻醉剂对大鼠的眼睛，下降0.5％alcaine。
4. 大鼠的位置，并揭露鼻地区优越的眼睛。
5. 使用30号针头穿刺杆扁平疣水平优于鼻巩膜。避免接触眼部肌肉和血管。
6. 给眼球轻微的压力，打通后房型从穿刺孔除去少量的玻璃体。
7. 在45 °角巩膜通过插入玻璃吸管提示通过穿刺孔进入玻璃体。注入后房2溶液，并保持在大约几秒钟，然后轻轻取出针。避免接触镜头及人工血管。
8. 玻璃体内注射后，适用于眼科Tobrex软膏对大鼠的眼睛，以防止感染。

Discussion

良好的玻璃体内注射液是用于建立动物模型以及直接人工处理。首先，注射部位不应该破坏视网膜结构。二，出血，应避免使用，以减少感染的风险。第三，镜片应不变，以避免外伤性白内障。最重要的是正常的眼部结构，以减少中断。

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Operating Microscope	Olympus Corporation	OME
Glass Pipettes	World Precision Instruments, Inc.
Pipette Puller	David Kopf Instruments
1ml syringes			single use
30G needles			single use
Ketamine	Aldasan		anesthetic
Xylazine	Aldasan		anesthetic
Alcaine	Alcon		0.5% proparacaine hydrochloride
Tobrex	Alcon		ointment, 3% tobramyxin.