Summary
Intravitreous инъекции широко используемый метод в исследовании визуального наук для глазных болезней или в виде прямого применения местного лечения. Это видео показали протокол для intravitreous инъекций применяют 1 мл шприца со стеклянной пипетки. Полезные советы об уходе от массивного кровотечения и повреждения линзы заданы.
Abstract
Intravitreous инъекции широко используемый метод в исследовании визуального наук. Он может быть использован для создания моделей на животных с глазных болезней или прямого применения местного лечения. Это видео представляет, как использовать простые и недорогие инструменты для отделки intravitreous процедуры инъекции. Использование 1 мл шприца, вместо шприца Хэмилтон, используется. Практические советы о том, как внести соответствующие игл инъекции с использованием стеклянных пипеток с совершенным советы, и как легко подключить иглу шприца со стеклянной пипетки плотно вместе, приведены.
Провести хорошее инъекции intravitreous, Есть три аспекта, которые необходимо соблюдать: 1) инъекции не должна нарушать структуру сетчатки, 2) кровотечения следует избегать, чтобы уменьшить риск заражения, 3) объектив должен быть нетронутым, чтобы избежать травматической катаракты. Короче говоря, самый важный момент состоит в сокращении прерывания нормального строения глазного яблока. Чтобы избежать остановки работы сетчатки, начальник носовой области крысы глаз был выбран. Кроме того, прокол точку игла по номинальной плоской, что составило около 1,5 мм от лимба области крысы глаз. Небольшое количество стекловидного мягко выталкивается через отверстие прокола снизить внутриглазное давление до инъекции. С углом 45 инъекций °, это менее вероятно, вызовет травматический катаракты у крыс глаз, что позволяет избежать осложнений и влияния факторов линзовидные. В этой операции, не было резки мышц конъюнктивы и глаз, без кровотечения. С быстрым и легким травмам, успешное введение intravitreous может быть сделано за считанные минуты.
Инъекции, описываемых в данном протоколе является специфическим для intravitreous инъекции. Тем не менее, методы и материалы, представленные здесь, могут также использоваться для других процедур, инъекций для доставки лекарств в мозг, спинной мозг или другие органы, в небольших млекопитающих.
Protocol
- Подготовка стеклянной пипетки использованием пипетки съемник, подключите его к 1 мл шприц, и печатью связи с парафильмом. Вывод 2 мл раствора в кончике пипетки и получить готовый для инъекции.
- Анестезировать крыс внутри-перитонеального инъекции кетамина (80mg/kg) и ксилазина (8mg/kg) (объемное соотношение 2:1).
- Применяют по одной капле 0,5% alcaine для крыс глазах местных анестетиков перед intravitreous инъекции.
- Позиция крысы и выставить высший носовой области глаз.
- Используйте 30 иглой проколоть превосходной носовой склеры на уровне номинальной Плана. Старайтесь не прикасаться глазных мышц и сосудов.
- Дайте глазного яблока умеренное давление, чтобы избавиться от небольшого количества стекловидной через прокол отверстие с задней камеры.
- Вставьте кончик стеклянной пипетки через прокол отверстие под углом 45 ° через склеру в стекловидное тело. Inject 2 мл раствора в заднюю камеру и держать на месте в течение нескольких секунд, затем аккуратно удалить иглу. Старайтесь не касаться линзы и внутриглазного судов.
- После intravitreous инъекции, применять мазь офтальмологических Tobrex на крысу глаз, чтобы предотвратить инфекцию.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Хорошо инъекции intravitreous полезно для создания модели животных, а также прямые внутриглазного лечения. Во-первых, место инъекции не должна нарушать структуру сетчатки. Во-вторых, кровотечения следует избегать, чтобы уменьшить риск заражения. В-третьих, объектив должен быть нетронутым, чтобы избежать травматической катаракты. Самое главное заключается в снижении прерывания нормального строения глазного яблока.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Животных были обработаны в соответствии с протоколом для использования животных в исследованиях одобрена Комитетом по использованию живых животных в области преподавания и исследований (CULATR) из университета Гонконга и Ассоциация научных исследований в области зрения и офтальмологии отчетность за Использование животных в офтальмологический и Vision Research.
Acknowledgments
Изучению глаукомы в этой лаборатории проводится при поддержке Национального Глаукома Исследования, проведенные американским фондом помощник здравоохранения.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Operating Microscope | Olympus Corporation | OME | |
| Glass Pipettes | World Precision Instruments, Inc. | ||
| Pipette Puller | David Kopf Instruments | ||
| 1ml syringes | single use | ||
| 30G needles | single use | ||
| Ketamine | Aldasan | anesthetic | |
| Xylazine | Aldasan | anesthetic | |
| Alcaine | Alcon | 0.5% proparacaine hydrochloride | |
| Tobrex | Alcon | ointment, 3% tobramyxin. |
References
- Chiu, K., Lam, T. T., Ying Ku, W. W., Caprioli, J., Kwong Kwong, J. M. Calpain and N-methyl-d-aspartate (NMDA)-induced excitotoxicity in rat retinas. Brain Research. 1046, 207-215 (2005).
- Fisher, D., Pavlidis, M., Thanos, S. Cataractogenic lens injury prevents traumatic ganglion cell death and promotes axonal regeneration both in vivo and in culture. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41, 3943-3954 (2000).
- Ji, J. -Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. -W., Hugon, J., So, K. -F. CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway. European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).
- Lam, T. T., Abler, A. S., Kwong, J. M. K., Tso, M. O. M. N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)-Induced Apoptosis in Rat Retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).
