Summary
Intravitreal enjeksiyon, göz hastalıkları veya lokal tedavi doğrudan uygulama olarak görsel bilimler araştırma yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Bu video cam pipet yardımıyla 1 ml şırınga kullanarak intravitreal enjeksiyon için bir protokol gösterdi. Masif kanama ve lens hasarı önlemek konusunda yararlı ipuçları verilmiştir.
Abstract
Intravitreal enjeksiyon görsel bilimler araştırma yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Göz hastalıkları ile veya doğrudan uygulama lokal tedavi olarak hayvan modellerinde kurmak için kullanılabilir. Bu video intravitreal enjeksiyon işlemi, basit ve ucuz araçların nasıl kullanılacağını tanıtır. Yerine, bir hemilton şırınga, 1 ml şırınga kullanın kullanılır. Uygun enjeksiyon iğneleri, mükemmel ipuçları ile cam pipetler kullanarak ve nasıl kolayca sıkıca cam pipet ile birlikte şırınga iğnesi bağlamak için ne yapmak için pratik ipuçları verilmektedir.
1 enjeksiyon yerinde retinanın yapısını bozmayacak); 2) kanama, enfeksiyon riskini azaltmak için kaçınılmalıdır; 3) travmatik katarakt lens önlemek için bakir olmalıdır: iyi bir intravitreal enjeksiyon yapmak için, dikkat edilmesi gereken üç yönü vardır. Özetle, en önemli nokta, normal göz yapısı kesinti azaltmaktır. Retinanın kesintiye uğramaması için, sıçan göz üstün burun bölgesi seçildi. Ayrıca, sıçan göz limbal bölgede yaklaşık 1.5 mm idi par düzlemsel, iğne ponksiyon noktası oldu. Vitreus küçük bir miktar hafifçe enjeksiyon öncesi göz içi basıncı azaltmak için ponksiyon delikten dışarı itilir. 45 ° enjeksiyon açısına sahip, böylece lentiküler faktörler ilgili komplikasyonlar ve etkisi kaçınarak, sıçan göz travmatik katarakt neden daha az olasıdır. Bu operasyonda, konjonktiva ve oküler kas hiçbir kesim, hiçbir kanama vardı. Hızlı ve küçük bir yaralanma ile başarılı bir intravitreal enjeksiyon dakika içinde yapılabilir.
Enjeksiyon bu özel protokolde belirtilen değerini intravitreal enjeksiyon için özeldir. Ancak, burada sunulan yöntemler ve malzemeler aynı zamanda beyin, omurilik ya da diğer organlarda küçük memeliler, ilaç dağıtım, diğer enjeksiyon işlemleri için kullanılan olabilir.
Protocol
- Cam pipetler, pipet çektirmenin kullanarak hazırlayın, 1 ml şırınga bağlamak ve parafilm ile bağlantı mühür. 2 ml solüsyon, pipet ucu içine çekiniz ve enjeksiyon için hazır olsun.
- Ketamin (80mg/kg) ve xylazine (8mg/kg) (2:1 hacim oranı)-periton içi enjeksiyon yoluyla sıçan uyuşturan.
- Sıçan gözleri intravitreal enjeksiyon öncesi lokal anestezik kremler olarak% 0.5 alcaine bir damla uygulayın.
- Sıçan yerleştirin ve gözün üstün burun bölgesi maruz.
- Ponksiyon par plana düzeyde üstün burun sklera 30 iğne kullanın. Oküler kas ve damarların dokunmaktan kaçının.
- Vitreus küçük bir miktar arka kamara ponksiyonu delikten kurtulmak için göz topu hafif basınç verin.
- Vitreus vücuda sklerasına ponksiyon delikten cam pipet ucu ile 45 derecelik bir açıyla yerleştirin. Arka odasına 2 ml solüsyon enjekte edilir ve birkaç saniye boyunca bir yerde saklayın, daha sonra iğne yavaşça çıkarın. Lens ve göz içi damarları dokunmaktan kaçının.
- Intravitreal enjeksiyondan sonra, oftalmik Tobrex merhem sıçan göz enfeksiyonu önlemek için de geçerlidir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
İyi intravitreal enjeksiyon doğrudan göz içi tedavi yanı sıra hayvan modeli oluşturmak için yararlıdır. İlk olarak, enjeksiyon bölgesinde retina yapısını bozmayacak. İkincisi, kanama, enfeksiyon riskini azaltmak için kaçınılmalıdır. Üçüncü olarak, objektif, travmatik katarakt önlemek için bakir olmalıdır. En önemlisi, normal göz yapısı kesinti azaltmak için.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Vizyon ve Oftalmoloji Tablolar Hong Kong Üniversitesi ve Araştırma Derneği, Eğitim ve Araştırma Canlı Hayvan Kullanımı (CULATR) Komitesi tarafından onaylanan araştırma hayvan kullanımı için protokole göre hayvanların ele alındı Oftalmik ve Vizyon Araştırma hayvanların kullanın.
Acknowledgments
Bu laboratuvarda glokom çalışmada Ulusal Glokom Araştırma, Amerikan Sağlık Yardımcısı Vakfı tarafından desteklenmektedir.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Operating Microscope | Olympus Corporation | OME | |
| Glass Pipettes | World Precision Instruments, Inc. | ||
| Pipette Puller | David Kopf Instruments | ||
| 1ml syringes | single use | ||
| 30G needles | single use | ||
| Ketamine | Aldasan | anesthetic | |
| Xylazine | Aldasan | anesthetic | |
| Alcaine | Alcon | 0.5% proparacaine hydrochloride | |
| Tobrex | Alcon | ointment, 3% tobramyxin. |
References
- Chiu, K., Lam, T. T., Ying Ku, W. W., Caprioli, J., Kwong Kwong, J. M. Calpain and N-methyl-d-aspartate (NMDA)-induced excitotoxicity in rat retinas. Brain Research. 1046, 207-215 (2005).
- Fisher, D., Pavlidis, M., Thanos, S. Cataractogenic lens injury prevents traumatic ganglion cell death and promotes axonal regeneration both in vivo and in culture. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41, 3943-3954 (2000).
- Ji, J. -Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. -W., Hugon, J., So, K. -F. CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway. European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).
- Lam, T. T., Abler, A. S., Kwong, J. M. K., Tso, M. O. M. N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)-Induced Apoptosis in Rat Retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).
