Summary
وصفنا 2 اللمس طرق الاختبار الحسي لفترات حادة أو مزمنة من اصابات الحبل الشوكي في الفئران. ويمكن لهذه الإجراءات التحقق من صحة الكشف عن تطوير وصيانة allodynia مثل الأحاسيس.
Abstract
اصابات الحبل الشوكي (النخاع الشوكي) يضعف أنظمة حسية تسبب allodynia 1-8. لتحديد أسباب الخلوية والجزيئية من allodynia وحساسة والتجارب الحسية صالحة في نماذج الفئران اصابات النخاع الشوكي هو مطلوب. ومع ذلك، حتى وقت قريب، كان قد تم التحقق من صحة أي نهج اختبار واحد لاصابات النخاع الشوكي بحيث طرق موحدة لم يتم تنفيذها عبر المختبرات. وبالإضافة إلى ذلك، لا يمكن أن طرق الاختبار متاح تنفذ تماما، أو عندما حاد محرك العاهات وجدت، ومنع دراسات لتطوير اصابات النخاع الشوكي التي يسببها allodynia 3. هنا نقدم 2 التحقق من صحة طرق الاختبار الحسي باستخدام فون فراي الشعر (VFH) المجذوذه التي قياس التغيرات في العتبات الحسية عن طريق اللمس بعد اصابات النخاع الشوكي 4-5. اختبار واحد هو راسخة يصل أسفل اختبار والذي يدل على حساسية عالية وخصوصية عبر بالقسوة اصابات النخاع الشوكي مختلفة عند اختبار 5 مزمنة. الاختبار الآخر هو المطورة حديثا اختبار VFH الظهرية التي يمكن تطبيقها بشكل حاد بعد اصابات النخاع الشوكي عندماllodynia يتطور، وذلك قبل 4-5 استرداد السيارات. كل حيدة VFH ينطبق قوة معايرة عندما تطرق إلى الجلد من مخلب هند حتى ينحني. في طريقة ما يصل إلى أسفل، وتستخدم VFHs بالتناوب القوات أعلى أو أقل في قطاع جلدي في L5 أخمصي لتحديد عتبات انسحاب المثنية. وتطبق القوات أعلى تباعا حتى انسحاب يحدث بعد ذلك يتم استخدام VFHs أقل قوة حتى انسحاب يتوقف. عتبة اللمس يعكس القوة المطلوبة للحصول الانسحاب في 50٪ من المنبهات. لاختبار جديد، يتم تطبيق كل VFH إلى قطاع جلدي على ظهري L5 من مخلب في حين يتم اعتماد الفئران بواسطة الفاحص. تحفيز VFH يحدث في ترتيب تصاعدي من قوة حتى على الأقل 2 من 3 طلبات في قوة معينة تنتج انسحاب مخلب. عتبة الحسية عن طريق اللمس هو أدنى قوة للحصول انسحاب من 66٪ من الوقت. وصفت تأقلم والاختبار وإجراءات التسجيل. وتحدد التجارب الشاذة التي تحتاج إلى إعادة الإختبار والتجارب النموذجية. حيوان استخدام ثكما وافقت عليها ولاية أوهايو رعاية الحيوانات وجامعة لجنة الاستخدام.
Protocol
1. أعلى / أسفل أخمصي فون فراي اختبار
والغرض من هذا الاختبار هو لتحديد حساسية اللمس عن طريق قياس مدى قوة مطلوبة كثيرا للحصول انسحاب مخلب من التحفيز. وتستخدم المتاحة تجاريا معايرة الشعر فراي المجذوذه فون التي تتراوح بين 4،56 و 6،10 لتحفيز مخلب. يمكن المدخلات الحسية الأخرى، مثل تصور من التحفيز أو استقبال الحس العميق نخلط التدابير عتبة اللمس حتى الردود على أساس المدخلات البصرية أو التحفيز غير صالحة. للحيلولة دون تصور للحيدة لمس الجلد، واختبار ونحن فقط في حين أن الفئران يأكل الحبوب. هذا تشويش المعرفي، ويضمن أيضا أن يتم اختبار جميع الفئران عند مستويات خط الأساس مماثلة من الراحة. لتجنب ردود بسبب التحفيز بدلا من المدخلات عن طريق اللمس، ونحن لا تشمل المحاكمات حيث حيدة ترفع أو نقل مخلب.
إجراءات التأقلم ألف لنهج UP-DOWN
- الحاضر ثمرة CEREAل في قفص المنزل حتى الفئران الاعتراف والسعي للحصول على مكافأة الغذاء. الفئران لا تحتاج إلى أن تكون المواد الغذائية المحرومين في أي لحظة في عملية gentling أو الاختبار.
- الفئران جاهزة للتأقلم مع البيئة اختبار وإجراءات مرة واحدة يأكلون الحبوب الفاكهة في قفص المنزل. تأقلم يحدث خلال ما لا يقل عن 4 دورات من 10 دقيقة قد تكون هناك حاجة لكل منهما ولكن أكثر من ذلك. وتستخدم عشر جلسات دقيقة بحيث لا تصبح الفئران الاشباع قبل نهاية الدورة.
- وضع فأر في غرفة الاختبار مع ثلاث قطع من الفاكهة الحبوب. تقديم المزيد من الحبوب الفواكه 1-2 في وقت واحد كما انها تؤكل. في الدورة الثالثة في حين أن الفئران يتم تناول الطعام، وتنتج حركات اليد تحت الأرض الأسلاك بحيث يصبح الفئران الذين اعتادوا على التنقل دون مخلب لها. في الدورة الرابعة، تطبيق حيدة 5،18 إلى السطح الأخمصي لمخلب مرة واحدة ما يقرب من دقيقة واحدة ليصبح المجموع 10 عروض. وينبغي أن يكون فأر ساذج لم تستجب لهذا التحفيز عتبة الفرعية.
- طويلذ قطعة من الحبوب المستهلكة، وتواتر التبول والتغوط، وتجميد، والسلوكيات الاستمالة. سلوك تجميد يحدث بطريقتين: أ) جاثم على الفئران منخفضة على الأرض عادة بالقرب من الجدار الخلفي أو تواجه بعيدا عن الفاحص ويبقى بلا حراك؛ ب) منحنية على الفئران خلال في منتصف القفص والسمار عادة أنيابها . قد السلوكيات تجميد تستمر لفترات طويلة من الزمن.
- وهناك فأر gentled التي هي على استعداد لاختبار تأكل بشكل مستمر تقريبا لمدة 10 دقائق. وسوف تتحرك بسهولة في القفص وطلب الحبوب الفاكهة بشكل سريع جدا بعد استهلاك الماضي. الأهم من ذلك، فإن الفئران ليس التوقف عن الأكل أو يصرف من قبل حركات اليد تحت الأرض الأسلاك أو تطبيق حيدة إلى مخلب.
إجراءات الاختبار باء للنهج UP-DOWN
- الفئران تنتج الالفاظ الضائقة التي هي فوق لدينا مجموعة أذني الإنسان. ينبغي أن تظل الفئران انتظار لفحصها في غرفة منفصلة، بحيث لا يمكن سماع هذه المركبات العضوية المتطايرةalizations.
- يجب أن الفئران مع اصابات الحبل الشوكي التي هي مناسبة لمدة تصل إلى أسفل فون اختبار الشعر فراي شرح تحمل الوزن مع أطرافه. لا يمكن أن الأطراف التي هي غير قادرة على دعم الفئران يمكن اختبار موثوق بها لأن التطبيق من المجذوذه يحرك مخلب قبل الانحناءات الشعر.
- وضع فأر في غرفة الاختبار مع 2 أو 3 قطع من الحبوب الفاكهة. يجب أن يكون تناول الطعام الفئران خلال تطبيق كل VFH.
- لفة يموت لتحديد أي HL للبدء في أول اختبار. أرقام حتى تمثل مخلب الحق والأعداد الفردية تمثل اليسار.
- بدء جلسة اختبار مع 5.18 حيدة. يمكن أن تحدث استجابات انسحاب 4،56-6،10 في الفئران العادية واصابات النخاع الشوكي وحيدة 5.18 يقع في منتصف النطاق.
- لا تطبيق حيدة في حين تجمد فأرا، يجلس أو لا تأكل. إذا كان اختبار ينتظر، في بعض الأحيان وهذه الشروط حل والاختبار يمكن أن تستأنف. إذا كانت الفئران يعرض هذه السلوكيات والوقت الإجمالي في التطبيقaratus 20 دقيقة، وقف اختبار وإعادة اختبار من بداية اليوم التالي. لا تقم بإزالة الفئران في الوقت الذي يتم عرض هذه السلوكيات لأن هذا قد يزيد من وقوعها. انتظر حتى الفئران تندلع من هذه الأنماط قبل التعامل مع الامر لتجنب تعزيز هذه السلوكيات.
- تلمس حيدة لقطاع جلدي على أخمصي L5 من مخلب هند بين منصات القدم حتى ينحني (انظر الشكل 1A). وينبغي تطبيق هذه أملس ثابت يستغرق نحو ثانية واحدة ثم إزالته من الجلد. تجنب لمس أي جزء من منصات القدم مثل حساسية الجلد هو أقل من ذلك بكثير في هذه المجالات. هذه لمسة واحدة يشكل تجربة واحدة.
- الرد الايجابي يحدث عندما يرفع الفئران بسرعة تصل مخلب بعيدا عن حيدة. ويجب أن يبدأ الانسحاب في الوقت تتم إزالة حيدة من أجل تأكيد أن يرتبط استجابة مع تطبيق حيدة.
- مشاهدة هذا الحيوان للحصول على أدلة أخرى من الوعي مولمسة nofilament مثل النطق، وتبحث نحو الانخفاض، الى الوراء أو على مخلب اختبارها، لعق مخلب، سحب مخلب المستمر أو الوخز الأذنين. لاحظ لهم في ورقة البيانات. عندما تحدث هذه السلوكيات مع انسحاب مخلب أنها بمثابة دليل على الإدراك فوق الشوك من التحفيز.
- إذا كان هناك رد فعل إيجابي، تطبيق حيدة أدنى المقبل. إذا لم يكن هناك استجابة (السلبية)، نقل ما يصل الى حيدة الأعلى التالية. سماح 30 ثانية بين كل طلب حيدة لالمستقبلات الحسية للعودة إلى إطلاق خط الأساس قبل إعادة الاختبار (لمنع التكيف).
- مواصلة تطبيق المجذوذه أعلى أو أدنى للمخلب هند بناء على ردود فعل إيجابية أو سلبية حتى يكون لديك 10 محاكمات. ثم كرر على مخلب للهند الأخرى. (انظر ورقة البيانات سبيل المثال).
- أعلى VFH التي يمكن اختبارها من دون تقديم مساهمة التحفيز ورفع مخلب هو 6.10. لا ينبغي 6.45VFH وأكبر يمكن استخدامها لأن مخلب يرفع قبل monofilament الانحناءات. إذا لم يكن هناك استجابة في الساعة 6.10 بعد ذلك وستبدأ المحاكمة بعد تطبيق 6.10 ثانية.
- وينبغي أن يفرغ استجابة ويجب أن تكون المحاكمة إعادة اختبار إذا كان أحد ما يلي يحدث خلال تطبيق حافز أو سحب مخلب:
- الفأر لم يتم تناول الطعام بشكل مستمر.
- الفأر يتحرك بعيدا عن التحفيز VFH قبل الانحناء للحيدة، مما يجعل من المستحيل معرفة قوة تطبيق الذي يتسبب الاستجابة للانسحاب.
- يتم رفع مخلب من VFH (إما قبل أو بعد VFH عازمة) وتوفير التحفيز، بالإضافة إلى التحفيز عن طريق اللمس.
- دورة الاختبار عادة ما يمكن الانتهاء منه في أقل من 15 دقيقة لكلا hindlimbs.
جيم معالجه البيانات للنهج UP-DOWN
- وهناك تجربة ناجحة لديها 10 محاكمات متتابعة لكل مخلب.
- قيمة عتبة عن طريق اللمس هو أدنى حيدة التي تنتج عن انسحاب مخلب & Gه، وقد منح 50٪ من العروض و3 أو أكثر من العروض التي قدمها حيدة (انظر ورقة البيانات سبيل المثال، يتم حلقت عتبات).
- لم يتم تحديد حيدة فقط مع 2 التجارب الإجمالية حسب عتبة حتى عند تجربة واحدة هو إيجابي والآخر سلبي. عروض متعددة من الحوافز هي أفضل المؤشرات الدالة على نمط من الاستجابة لتلك القوة.
- إذا لم يكن هناك حيدة أن تنتج ردود الفعل الإيجابية على ما لا يقل عن 50٪ من الاختبارات، ويتم إعطاء الفئران على درجة من 6،45. هذا يعني أن الفئران لم يكشف عن أعلى حيدة قابلة للاختبار من 6.10 وراء فرصة عشوائي. ويرد قيمة 6،45 لأنه يمثل قيمة المقبل أعلى من النطاق قابلة للاختبار من المجذوذه.
- تحويل قيمة عتبة لالكفوف اليمين واليسار نفاذ غرام. وسيتم توفير القيم قوة غرام من المورد من الشعر فراي فون. . بالنسبة للبيانات من الإصابات بين البلدين، يمكن أن متوسط القوة غرام عتبة الكفوف اثنين معا لانتاجعلى درجة واحدة.
2. ظهري فون فراي اختبار
والغرض من هذا الاختبار هو لتحديد حساسية اللمس في الفئران مع مثل التحكم في المحركات الفقيرة التي لا يمكن اختبارها باستخدام طرق نموذجية VFH أخمصي. انه يحدد مدى قوة بكثير وهناك حاجة لمسة لإنتاج استجابة مكره. لتجنب الاستجابات للمؤثرات التحفيز، ونحن لا تشمل المحاكمات التي يتم نقل مخلب من خلال تطبيق VFH. بالإضافة إلى ذلك، نحن لا تشمل المحاكمات التي VFH ينزلق أو يتم تجاهل عبر السطح الظهري من القدم.
إجراءات التأقلم أ للحصول على الظهرية اختبار FREY VON
- لطيف الفئران لمدة أربع دورات كل 10 دقائق قبل الاختبار خط الأساس واصابات الحبل الشوكي.
- التفاف فضفاضة الفأر في منشفة صغيرة جدا يتعرض لها الخلف كما هو مبين أدناه (الشكل 1B). وضع فأر على جدول مع الكفوف هند يستريح قليلا على السطح. استخدام نفسدافئ ولكن ليس التفاف ضيق وعقد لكل فأر. قد تستعد الساعد على حافة طاولة تقليل التباين بين الفئران.
- وهناك فأر gentled التي هي على استعداد للاختبار لا يقاوم، محتجزين في منشفة لدقائق عدة متتالية، ولكن قد تضطر إلى إعادة التفاف جرذ 1 أو 2 مرات خلال اختبار على حد سواء الكفوف الخلفيتين.
إجراءات الاختبار باء للالظهرية اختبار FREY VON
- لفة يموت لتحديد الطرف الذي الخلفيتين لبدء أول اختبار. أرقام حتى تمثل مخلب الحق والأعداد الفردية تمثل اليسار.
- التفاف فضفاضة الفأر في منشفة ترك الخلف عرضة للخطر.
- يتم تطبيق التحفيز عن طريق اللمس فقط بعد ان الفئران هي الهدوء والسكينة ما لا يقل عن 10 ثانية.
- بدءا من VFH 4.56، تطبيق حيدة عموديا على السطح الظهري في مشط القدم بين الأولى والثانية حوالي 1 سم الأقرب إلى مشترك (الشكل 1C). تطبيق حيدة في الظريف، على نحو سلسعدي الطريقة على مدى فترة ثانية واحدة حتى ينحني ثم إزالته. هذه لمسة واحدة يشكل تجربة واحدة.
- الرد الايجابي يحدث عندما فأر يتحرك بسرعة مخلب بعيدا عن عملية التحفيز. اتجاه الحركة في كثير من الأحيان الخلفية أو خارجي قبل أن يتم توخي المرونة في أطرافه الخلفية. ويجب أن يبدأ الانسحاب في الوقت تتم إزالة حيدة من أجل تأكيد أن يرتبط استجابة مع تطبيق حيدة.
- تطبيق حيدة 4،56 أكثر مرتين مع ما لا يقل عن 30 ثانية بين التطبيقات من أجل منع الحسية "windup" والسماح للمستقبلات حسية للعودة إلى خط الأساس اطلاق النار قبل إعادة الاختبار (لمنع التكيف).
- يجب إعادة تطبيق اختبار التحفيز إذا كانت زلات VFH والجروح بلطف على الجلد، مما يجعل من تسليم قوة أكثر من التنظيف أو حملة بدلا من الاتصال مدببة.
- إذا كانت هناك ردود فعل إيجابية أقل من 2 (أي 1 أو 0) إلى 4،56 حيدة، يتم تطبيق VFH أكبر المقبل 3مرة بالطريقة نفسها.
- بهذه الطريقة، يتم تطبيق VFHs أكبر تدريجيا من 4.56 حتى 5.88 من خلال اثنين أو أكثر من ردود الفعل الإيجابية تحدث أو حتى يتم الوصول إلى أكبر VFH.
- عتبة انسحاب مخلب هو أدنى VFH الذي يتسبب في ردود فعل إيجابية لا يقل عن 2 من 3 محاكمات.
- كرر على مخلب أخرى.
- دورة الاختبار عادة ما يمكن استكماله خلال 15 دقيقة لكل من الكفوف الخلفيتين.
3. ممثل النتائج
وهناك تجربة ناجحة تؤدي إلى انسحاب فوري وسريع من مخلب هند إلى VFH تطبيقها عموديا الى المنطقة منتصف أخمصي (الشكل 1A) أو السطح الظهري بين ش 1 و 2 الثانية ومشط 1 سم من (1C الشكل) مشترك . وأحصت هذه الاستجابات لاشتقاق عتبة اللمس لكل مخلب هند. وأظهرت عتبات اللمس من الاختبارات VFH الظهري في النخاع الشوكي الحادة الاخلاص ممتازة مع عتبات VFH أخمصي اشتقاقد أحيانا مزمن (الشكل 2). انخفاض عتبات اللمس المستقاة من الاختبارات أخمصي أو ظهري يحدث لاصابات النخاع الشوكي متدرج (الشكل 3 3،5). هذه الحساسية تظهر في وقت مبكر بعد 7 أيام من اصابات النخاع الشوكي والتي تحتفظ لمدة التجربة 3-4،6. في حين أن مجموعة من بالقسوة اصابات النخاع الشوكي لا تؤثر على عتبات الحسية عن طريق اللمس من مخلب، وانخفاض في عتبات تحدث لاصابات النخاع الشوكي أكثر حدة (الشكل 3). الأهم من ذلك، وضع أقل من المستوى allodynia هو رد فعل كل شيء أو لا شيء يحدث عندما يكون هناك فقدان أكثر من 60٪ من المادة البيضاء في بؤرة الآفة. (الشكل 4 3).
ويمكن عن طريق اللمس عتبات الاضمحلال وتنتج ردود الاصطناعي لقوات VFH منخفض. يمكن أن اثنين على الأقل من شروط إنتاج الاضمحلال عتبة - تطبيق بسرعة VFH على الجلد بطريقة أو بدس لكز أو ليس انتظار طويلة بما فيه الكفاية بين التطبيقات التحفيز. أن تكون على ثقة من أنعلى عتبات اللمس هي حقيقية، لا بد من الحرص على تطبيق كل VFH استخدام نهج مماثل سرعة منخفضة، والفاصل الزمني interstimulus يجب أن تكون على الأقل 30 ثانية. أظهرنا أيضا أن تناول سلوك يقلل من تسوس عتبة 5.
الشكل 1. تخطيطي وصورة مسيئة للموقع من التحفيز VFH لاختبار (VFH) أخمصي وظهري شعر فراي فون. أ) لاختبار VFH أخمصي، ينبغي تطبيق الشعر فراي فون عموديا إلى hindpaw منتصف أخمصي حوالي 1 سم الخلفي لحزب الكتائب الأوسط (كما يدل على ذلك المربع الأحمر في الرسم البياني لسطح أخمصي من hindpaw) في بطء سرعة تتفق حتى ينحني. باء وجيم) وبالنسبة للتقنية VFH ظهري، ومن لف فضفاضة الفأر في منشفة الجراحية كما هو مبين في الصورة. يتم تطبيق VFH على السطح الظهري للمخلب في مشط القدم بين approximatel في الأول والثانيذ 1 سم الأقرب إلى مشترك.
الشكل 2. الظهرية الشعر فراي فون العتبات الحسية متطابقة إلى VFH أخمصي القياسية. (N-44؛ بيرسون معامل = 0.503، P <0.01، R2 = 0.67). الخطوط المتقطعة تظهر عتبة قطع للإحساس allodynic باستخدام إما VFH الظهرية أو في أساليب VFH أخمصي وتشير إلى أن العتبات allodynic في 7 أيام بعد اصابات النخاع الشوكي باستخدام اختبار VFH الظهرية التنبؤ مزمن دون المستوى allodynia تحدده أساليب VFH أخمصي.
الشكل 3. المبكر ظهري الشعر فراي فون العتبات الحسية التنبؤ حساسية اللمس allodynic وغير allodynic، عبر بالقسوة اصابة في timepoints في وقت لاحق. العتبات الحسية للمقارنة وقعت في الفترة بين 7 أيام آخر VFH الظهرية اصابات النخاع الشوكي و 28 يوما آخر التدابير اصابات النخاع الشوكي VFH أخمصي. وقع التشابه الملحوظ لل ولاحظت مجموعة واسعة من اصابات النخاع الشوكي، مع allodynia كبيرة في متوسطة الى شديدة اصابات النخاع الشوكي (P <0.05 تشريد 1.1 ملم مقابل كل المجموعات الأخرى).
الشكل 4. النسبة المئوية من الفئران التي كانت تتلقى استئصال الصفيحه (لا توجد اصابات النخاع الشوكي) والجماعات اصابات النخاع الشوكي تظهر hindpaw allodynia في 6 أسابيع بعد اصابات النخاع الشوكي. كان ينظر فقط Allodynia في الفئران مع معتدلة أو شديدة ردود اصابات النخاع الشوكي في حين الفئران مع اصابات خفيفة (0.3، 0.5، 0.7 مم التشريد الحبل الشوكي) عرضت (جامعة ولاية أوهايو ESCID جهاز 0.9، 1.1، 1.25، 1.3 تشريد الحبل ملم) العادية لتحفيز عن طريق اللمس. ممثل الاكليلية أقسام النخاع الشوكي ملطخة للالمايلين في بؤرة آفة لاستئصال الصفيحه (مراقبة يصب بأذى)، خفيف (0.5 تشريد مم)، يتم تضمين معتدلة (1.1 تشريد ملم) وحاد (1.3 مم الإزاحة) كدمات في النخاع الشوكي لإظهار درجة من محور عصبي تجنيب مقترن هذه الحساسية المفرطة. (شريط مقياس = 0.5 مم).
الشكل 5. ورقة بيانات العينة لمدة تصل إلى أسفل فون اختبار الشعر فراي. وتسجل قيمة الشعر والنتيجة (إيجابية أو سلبية) لكل محاكمة. لاحظت مؤشرات على وعي فوق الشوك للاختبار. في نهاية الاختبار، واذاعتها في الردود على كل قيمة الشعر. وحلقت قيمة العتبة المحددة للبيانات سبيل المثال.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
قدمت طرق الاختبار VFH هنا تمثل نماذج اختبار 2 التي تعتبر حساسة وصالحة للاستخدام في نماذج اصابات النخاع الشوكي على الفئران. الأهم من ذلك، تم إنشاء اختبار VFH ظهري لتقييم استعادة الاحساس باللمس من الكفوف هند بعد تماما في منتصف الصدر اصابات النخاع الشوكي عند الفئران غير قادرين على الوقوف على الخلف بهم. ويمكن أيضا اختبار هذا النموذج يتم استخدامها عند الفئران على استعادة القدرة على دعم وزنهم وعلى أطرافه الخلفية بعد اصابات النخاع الشوكي عنق الرحم.
أظهرت نماذج 2 الاستفادة من هنا VFH معايرة لتحديد عتبة عن طريق اللمس من كل مخلب هند. الأساليب الأخرى تحديد وتيرة انسحاب إما إلى التحفيز عادة حميدة أو ضارة عادة. لقد أظهرنا في وقت سابق ان التحسينات الصغيرة في العتبات عن طريق اللمس يمكن أن تمثل الفرق بين وجود آلام الأعصاب المزمنة والاحساس باللمس العادي. وبالتالي الاستفادة من طرق الاختبار التجريبي التي تستمد الألم عتبات مايو كرة القدمcilitate ترجمة من التدخلات العلاجية المحتملة إلى العيادة.
كما هو الحال مع جميع الاختبارات السلوكية، لا بد للتقليل من عدد من الإرباك داخل بيئة الاختبار التي قد تؤثر على نتائج الاختبار السلوكية 9. وبالتالي، فمن المهم أن كل دورة الاختبار يحدث في نفس الوقت من اليوم، في نفس درجة الحرارة والرطوبة تسيطر عليها غرفة. وبالإضافة إلى ذلك، منذ الفئران التواصل جهارا في نطاق الموجات فوق الصوتية، من المهم أن يتم الاحتفاظ الفئران انتظار لفحصها في غرفة منفصلة حتى تبدأ تجاربها. وأظهرت لانجفورد وآخرون 10 دليل على أن الحيوانات درامية ساذجة تجربة الألم بعد نشهد cagemate تتعرض لتحفيز الضارة. لمزيد من القضاء على التباين في التجارب الحسية عن طريق اللمس، ونحن الاستفادة من الحبوب مسكر باعتباره distractor المعرفية خلال اختبار VFH أخمصي. في القيام بذلك، ونحن على استقرار استجابات الحيوان. العتبة هو أقل عرضة للتسوس في جميع أنحاءاختبار عندما يتم توفير distractor من عند واحد ليست 5. هذا الاستقرار هو على الأرجح نتيجة لتلطيف من السلوكيات hypervigilant وcatastrophizing، دولتين الاستباقي حيث التهديد ألم ينشط الخوف والمراكز العاطفية في المخ.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
Acknowledgments
المعاهد الوطنية للصحة NS43798 (DMB)؛ المعاهد الوطنية للصحة F31 NS058138 (MRD)؛ P30-NS045758 (CBSCR)، ومشلولا المحاربين القدماء الامريكيين # 2451 (DMB) و # 2707 (MRD).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Semmes-Weinstein Monofilaments | Stoelting Co. | 58011 | |
| Fish Breeder Box | Any Supplier | Hole drilled in side for cereal delivery | |
| Elevated wire mesh (1/4" X 1/4" grid) | Hardware Store | ||
| Elastic to hold fish breeder box in place | Any Supplier | ||
| Sugared Cereal | Grocery Store | ||
| Surgical Huck Towel 16"x 23" | Medical Supply Store | ||
References
- Cruz-Almeida, Y., Felix, E. R., Martinez-Arizala, A., Widerstrom-Noga, E. G. Pain symptom profiles in persons with spinal cord injury. Pain Med. 10, 1246-1259 (2009).
- Hulsebosch, C. E. From discovery to clinical trials: treatment strategies for central neuropathic pain after spinal cord injury. Curr. Pharm. Des. 11, 1411-1420 (2005).
- Kloos, A. D., Fisher, L. C., Detloff, M. R., Hassenzahl, D. L., Basso, D. M. Stepwise motor and all-or-none sensory recovery is associated with nonlinear sparing after incremental spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 191, 251-265 (2005).
- Detloff, M. R. Remote activation of microglia and pro-inflammatory cytokines predict the onset and severity of below-level neuropathic pain after spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 212, 337-347 (2008).
- Detloff, M. R. Validity of acute and chronic tactile sensory testing after spinal cord injury in rats. Exp. Neurol. 225, 366-376 (2010).
- Hutchinson, K. J., Gomez-Pinilla, F., Crowe, M. J., Ying, Z., Basso, D. M. Three exercise paradigms differentially improve sensory recovery after spinal cord contusion in rats. Brain. 127, 1403-1414 (2004).
- Carlton, S. M. Peripheral and central sensitization in remote spinal cord regions contribute to central neuropathic pain after spinal cord injury. Pain. 147, 265-276 (2009).
- Lindsey, A. E. An analysis of changes in sensory thresholds to mild tactile and cold stimuli after experimental spinal cord injury in the rat. Neurorehabil. Neural Repair. 14, 287-300 (2000).
- Basso, D. M. Behavioral testing after spinal cord injury: congruities, complexities, and controversies. J. Neurotrauma. 21, 395-404 (2004).
- Langford, D. J. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312, 1967-1970 (2006).
