Summary
एक bioprinter में हिमाचल प्रदेश Deskjet 500 प्रिंटर कन्वर्ट करने के लिए इस्तेमाल किया तरीकों की एक विवरण. प्रिंटर जीवित कोशिकाओं है, जो झिल्ली में क्षणिक है pores का कारण बनता है प्रसंस्करण के लिए सक्षम है. इन pores के मुद्रित कोशिकाओं में फ्लोरोसेंट जी - actin सहित छोटे अणुओं, को शामिल करने के लिए उपयोग किया जा सकता है.
Protocol
1. हिमाचल प्रदेश Deskjet 500 परिवर्तित
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि इस तकनीक में कई व्यावसायिक inkjet प्रिंटर के साथ काम करना चाहिए. हालांकि, पुराने प्रिंटर के लिए बेहतर काम के रूप में वे स्याही कारतूस की बड़ा व्यास नलिका के साथ, जो के रूप में आसानी से नहीं रोकना है का उपयोग करते हैं. इसके अलावा, पुराने प्रिंटर के यांत्रिक कागज फ़ीड सेंसर है कि बायपास करने के लिए आसान कर रहे हैं का उपयोग करते हैं. ऑप्टिकल सेंसर के साथ प्रिंटर लेकिन धोखा दिया जा सकता है प्रत्येक चक्र के दौरान प्रिंटर के दूर किनारे पर कागज के एक छोटे से पट्टी का उपयोग कर, लेकिन "चाल" के लिए यांत्रिक प्रणाली की तुलना में थोड़ा और अधिक मुश्किल है. वर्तमान में व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रिंटर कि सबसे अच्छा काम कम संकल्प (डीपीआई).
उच्च संकल्प प्रिंटर करने के लिए और अधिक आसानी से रोकना करते हैं. हिमाचल प्रदेश Deskjet 500 के संकल्प 300 डीपीआई है. कई व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रिंटर (हिमाचल प्रदेश Deskjet श्रृंखला और दूसरों) 600 डीपीआई के एक संकल्प है. प्रिंटर के इस प्रकार केवल नोक में एक छोटे से वृद्धि के साथ किया जा सकता हैमुद्दों कि सावधान सफाई का उपयोग alleviated किया जा सकता है (धारा 3) clogging.
- प्रिंटर के नीचे आधार से कई प्लास्टिक क्लिप ताला खोलने और धीरे धीरे ऊपर से उठाने के द्वारा प्रिंटर के ऊपर प्लास्टिक के मामले निकालें.
- खोल देना / बटन प्रदर्शन प्रिंटर के ऊपर से प्रकाश पैनल, यह प्रिंटर मदरबोर्ड से जुड़ा है छोड़ने.
- प्रिंटर के अंदर साफ, विशेष रूप से क्षेत्रों में जहां स्याही कारतूस टिकी हुई है और जहां मुद्रण होता है.
- कागज फ़ीड तंत्र के लिए बिजली की आपूर्ति केबल का पता लगाएँ और उन्हें motherboard से हाल चलाना.
- HP 500 डेस्क में, इन के सामने बाईं ओर कागज ट्रे के ठीक नीचे पाया जाता है.
- कागज का पता लगाने तंत्र का पता लगाएँ. एक स्ट्रिंग या तार पाश के लिए एक पुस्तिका खींच संभाल के रूप में सेवा affixing तंत्र बाईपास.
- HP 500 डेस्क में, कागज का पता लगाने तंत्र एक ग्रे प्लास्टिक लीवर ऊपर और पीछे फ़ीड / मुद्रण कागज तंत्र पाया है.
- कारतूस प्रिंट सिर के नीचे एक स्तर के लिए इच्छित मुद्रण स्लाइड लाने के क्रम में कागज फ़ीड तंत्र जहां से खिलाया कागज किया जाएगा और जमा के सामने एक मंच बनाएँ.
- हमारे प्रयोगों के लिए, 15 एमएल अपकेंद्रित्र ट्यूबों के लिए फोम शिपिंग धारक कई खुर्दबीन स्लाइड के साथ मुद्रण क्षेत्र में जगह में टेप करने के लिए वांछित ऊंचाई करने के लिए स्लाइड की अंतिम स्तर पर लाने के लिए इस्तेमाल किया गया था.
- सड़न रोकनेवाला तकनीक को बनाए रखने के लिए, प्रिंटर एक मानक biohazard कैबिनेट या tabletop लामिना का प्रवाह के हुड के अंदर रखा जा सकता है.
- यह नोट करना महत्वपूर्ण है कि एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रिंटर स्याही जेट संशोधित आमतौर पर प्रिंटर के निर्माता की वारंटी शून्य होगा.
2. परिवर्तित स्टॉक अश्वशक्ति इंक कारतूस (हिमाचल प्रदेश 26 काली स्याही कारतूस)
- इसकी पैकेजिंग से कारतूस निकालें, प्रिंटर और कुछ समय के लिए संपर्क प्रिंट सिर को कवर सुरक्षात्मक टेप छोड़ने.
- शरीर स्थिर कीया तो एक दबाना या शिकंजा (बस मजबूती से हाथ से कारतूस आमतौर पर के रूप में अच्छी तरह से काम उत्साहित) के साथ, किसी भी बाधा की हरी शीर्ष स्पष्ट छोड़ने कारतूस (काला भाग).
- चिमटा या एक समायोज्य रिंच का उपयोग, कारतूस के ऊपर हरे रंग की समझ और आगे और पीछे कई बार मोड़ जब तक यह मुक्त टूटता है.
- यह इतना बल नहीं लेते हैं, लेकिन शीर्ष की जरूरत नहीं रह गया है चाहिए, तो यह ठीक है अगर यह टूट जाता है जब इसे हटाने है.
- Screwdrivers का प्रयोग, स्पष्ट प्लास्टिक टुकड़ा अब उजागर जिज्ञासा.
- फिर, यह बहुत बल नहीं ले, लेकिन यह आवश्यक नहीं किया जाएगा चाहिए, तो यह ठीक है अगर यह हटाने के दौरान टूटता है.
- किसी भी जलाशय से शेष खाली.
- प्लास्टिक सुरक्षात्मक प्रिंटर संपर्कों और प्रिंट सिर को कवर टेप निकालें.
- अच्छी तरह से पानी के साथ जलाशयों फ्लश.
- एक विंदुक या सिरिंज का उपयोग करने के लिए चैनलों के माध्यम से पानी धक्का.
- पानी के दौरान होने की संभावना प्रिंट सिर से रिसावइस प्रक्रिया, यह स्वीकार्य है, और कारतूस की कार्यक्षमता के लिए किसी भी क्षति के कारण नहीं करता है.
- जब पानी स्पष्ट चलाता है, कारतूस शुष्क करने की अनुमति देते हैं.
3. सफाई इंक कारतूस
- आदेश में एक स्वच्छ मुद्रण वातावरण बनाए रखने के लिए, स्याही कारतूस से पहले और बाद के उपयोग साफ किया जाना चाहिए.
- यह भी लवण और कारतूस है कि रुकावटों का कारण सकता है में अन्य जैविक सामग्री की crystallization से बचने के साथ मदद करता है.
- पूरी तरह से डूब एक de-ionized पानी से भरा बीकर में कारतूस, और मुद्रण के पहले और बाद में 15 मिनट के लिए sonicate.
- Sonication के बाद, कारतूस को पानी से निकालने के लिए, और अतिरिक्त पानी बाहर हिला.
- कारतूस के लिए एक अधिक सड़न रोकनेवाला माहौल बनाने में स्प्रे 70% इथेनॉल.
- सुनिश्चित करें कि इथेनॉल bioink मुद्रण समाधान जोड़ने से पहले सूख गया है.
4. सेल सस्पेंशन बनाना "बायोस्याही "
- संस्कृति कोशिकाओं तक पारित होने के लिए तैयार है.
- 3T3 fibroblasts के लिए: T-75 बोतल पर 1.3x10 लगभग 10% भ्रूण गोजातीय सीरम (FBS) के साथ 4 / कोशिकाओं Dulbeccos संशोधित ईगल्स मध्यम (DMEM) के में 2 सेमी में बीज कोशिकाओं. संस्कृति कोशिकाओं को एक मशीन में दो दिनों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस और 5% सीओ 2.
- 50 μg / फास्फेट बफर समाधान (पीबीएस) में मिलीलीटर फ्लोरोसेंट जी actin एकाग्रता में स्टॉक समाधान.
- पारित होने कोशिकाओं.
- 3T3 fibroblasts के लिए: कुप्पी से मीडिया निकालें और पीबीएस के साथ दो बार कुल्ला. 5 मिलीलीटर 0.25% trypsin + EDTA और सेते हैं के साथ 5 मिनट के लिए कोशिकाओं को कवर.
- ताजा माध्यम के 5 मिलीलीटर जोड़ें और एक 15 मिलीलीटर शंक्वाकार अपकेंद्रित्र और 5 मिनट के लिए 1000 rpm पर ट्यूब अपकेंद्रित्र में सेल निलंबन विंदुक. महाप्राण (व्यंजन) मध्यम बिताया.
- Resuspend, पीबीएस में फ्लोरोसेंट जी actin के स्टॉक bioink बनाने के समाधान के साथ कोशिकाओं.
- Bioink 10 μg / मिलीलीटर और एक सेल सह जी actin की अंतिम एकाग्रता चाहिए1x10 सेल मिलीलीटर / 5 के ncentration. यह एकाग्रता के लिए ड्रॉप और प्रिंटर सिर clogging प्रति कोशिकाओं की मात्रा सीमित करने के लिए अनुकूलित किया गया है 8.
- ध्यान दें कि bioink की 250 μl तीन चित्रा 2 में दिखाया गया पैटर्न के साथ कवर निकल जाता है प्रिंट.
5. Bioprinting
- पर बिजली और जाने प्रिंटर गर्म.
- जगह 1.6 चरण में तैयार मंच के केंद्र पर मुद्रण सतह (यहाँ, हम 22 x 22 मिमी coverslips मिमी का उपयोग करें) वांछित.
- एक मुद्रण पैटर्न फ़ाइल बनाएँ.
- ओपन माइक्रोसॉफ्ट वर्ड (या किसी भी अन्य ड्राइंग सॉफ्टवेयर), और वांछित पैटर्न आकर्षित.
- एक वांछित premade फ़ाइल में सेल मुद्रण के लिए प्रिंट पैटर्न उठाओ.
- वांछित सेल निलंबन के साथ तैयार कारतूस लोड.
- कारतूस कम्पार्टमेंट के तल पर अच्छी तरह से छोटे परिपत्र में विंदुक निलंबन. लगभग समाधान के 100-120 μl का उपयोग करें. मुद्रित ड्रॉप आकार लगभग 130 हैpicoliters 8 ...
- हिमाचल प्रदेश Deskjet 500 प्रिंटर के साथ फ़ाइल को मुद्रित.
- सर्वोत्तम परिणामों के लिए, छोटे पैटर्न शब्द संसाधन प्रोग्राम में वांछित प्रतियों की राशि बदलकर कई बार (5) मुद्रित.
- प्रिंटर फिर से गर्म होगा, तो कारतूस "तैयार" स्थिति के लिए कदम होगा.
- जब कारतूस तैयार (थोड़ा स्याही ड्रिप के नीचे अच्छी तरह से छोड़ दिया है और वहाँ रहता है) की स्थिति में ले जाता है, कागज फ़ीड तंत्र तार पर खींच, और छपाई शुरू करना चाहिए.
- मुद्रण के कई प्रतियों के लिए, कागज फ़ीड तंत्र हर चक्र या पृष्ठ मुद्रित के बाद जारी किया जाएगा. कारतूस तो "तैयार" स्थिति में लौट जाएगा, और कागज फ़ीड तंत्र तार फिर से उठाया जाना चाहिए.
- 5.2 चरण में मुद्रण मंच के केंद्र पर रखा गया (चित्र 2 देखें) coverslip प्रिंटर पर मुद्रित होगा.
6. प्रतिनिधि परिणाम </ P>
एक मानक, बंद-the-शेल्फ अश्वशक्ति Deskjet 500 के पूरे रूपांतरण की प्रक्रिया के प्रतिनिधि परिणाम, मानक अश्वशक्ति 26 श्रृंखला कारतूस के कई प्रकार के विश्लेषण के लिए सेल के समाधान मुद्रण जैसा कि पहले कहा की क्षमता के साथ एक प्रिंटर पैदा करेगा. रूपांतरण के बाद पूरा प्रिंटर 3 चित्र में दिखाया गया है, एक मुद्रण के साथ मंच पर माइक्रोस्कोप कवर पर्ची जगह. प्रिंटर विश्लेषण में कई क्षेत्रों में उपयोगी हो सकता है सहित, लेकिन सीमित नहीं हैं: एकल कक्ष यांत्रिकी, ऊतक इंजीनियरिंग, जीन अभिकर्मक, biosensor micropatterning, और प्रत्यक्ष सेल उपचार 1-10, 16-22.
इस उदाहरण में, हिमाचल प्रदेश Deskjet 500 प्रिंटर और हिमाचल प्रदेश के 26 श्रृंखला स्याही कारतूस bioprinting के लिए संशोधित किया गया है. एक monomer के जी actin के समाधान में एक fibroblast सेल निलंबन से मिलकर bioink के साथ इस प्रिंटर सेटअप का प्रयोग, कोशिकाओं को कांच खुर्दबीन coverslips पर मुद्रित किया गया चित्रा 1 प्रतिनिधि रेस दिखाता है. मुद्रित fibroblast कोशिकाओं के ults, जो शामिल फ्लोरोसेंट actin के monomers बताते हैं. परिणाम एक सड़न रोकनेवाला पर्यावरण नियंत्रित है जो कोशिकाओं अनुकूलन पैटर्न में मुद्रित किया गया है में प्राप्त किया गया.
इस उदाहरण में प्रयुक्त पैटर्न माइक्रोसॉफ्ट वर्ड (चित्रा 2) में बनाया गया था. यह पैटर्न खुर्दबीन स्लाइड के बहुमत भर में मुद्रण समाधान की एक सतत लाइन बनाया चित्रा 4 सीधी रेखा जो के में bioink और कोशिकाओं को पारस्परिक रूप से जमा कर रहे हैं दिखाता है. यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि मुद्रण के तुरंत बाद, वहाँ पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति की वृद्धि हुई है क्योंकि bioink समाधान, जो कोशिकाओं में निलंबित कर रहे हैं, मुक्त अतिरिक्त फ्लोरोसेंट actin के monomers. इस पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति कोशिकाओं (चित्रा 1) है, जो सब्सट्रेट से अधिक monomer के washes के विकास के मीडिया के अलावा के बाद काफी कम हो जाती है.
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चित्रा 1 संशोधित inkjet प्रिंटर का उपयोग मुद्रण के बाद 3 घंटे 3T3 fibroblasts की प्रतिनिधि छवियाँ. कोशिकाओं के आंतरिक शामिल fluorescently टैग actin के monomers है दिखाते हैं. स्केल सलाखों 50 माइक्रोन का प्रतिनिधित्व करते हैं.
चित्रा 2. Bioink मुद्रित किया डिजाइन.
चित्रा 3 स्टायरोफोम मंच के साथ रूपांतरण के बाद प्रिंटर. मध्य में नारंगी तार कागज फ़ीड लीवर सेंसर नजरअंदाज.
चित्रा 4 3T3 fibroblasts की एक स्थानीय मुद्रण क्षेत्र में मुद्रित प्रतिनिधि छवि. माइक्रोस्कोपी छवि 20x बढ़ाई मुद्रण के बाद 5 मिनट लिया.
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चित्रा 5 प्रतिदीप्ति (40x बढ़ाई) छवि मुद्रण भली भाँति फ्लोरोसेंट actin के monomers के साथ एक तंतुप्रसू दिखाने के बाद 3 घंटे लिया. पैमाने बार 50 माइक्रोन का प्रतिनिधित्व करता है.
6 आंकड़ा एक मुद्रण के बाद 15 मिनट लिया सेल के प्रतिदीप्त माइक्रोस्कोपी (20x बढ़ाई). छवि दोनों (हरा) जी actin और नाभिक (नीला) से पता चलता है. बाएं से दाएं: जी actin एलेक्सा 488 स्त्राव के साथ, नाभिक DAPI, और दोनों का एक उपरिशायी के साथ.
7 चित्रा प्रतिदीप्त मुद्रण के बाद 3 घंटे के एक लाइन पैटर्न में दो fibroblasts दिखा माइक्रोस्कोपी. बाईं तरफ छवि fluorescently लेबल कोशिकाओं के अंदर actin monomers से पता चलता है. सही पर इस छवि पृष्ठभूमि छवि के साथ फ्लोरोसेंट चैनल के एक उपरिशायी को दिखाने के लिए है कि हालांकिवहाँ स्लाइड (नीचे बाएँ कोने) पर कुछ मलबा हो सकता है, यह प्रतिदीप्ति नहीं करता है. स्केल सलाखों के 50 माइक्रोन का प्रतिनिधित्व करते हैं अगर आकार संकेत दिया दूर सही गैर मुद्रित कोशिकाओं के एक नियंत्रण समूह को 3 घंटे के लिए incubated fluorescently टैग monomers के साथ नहीं है. इस पर नियंत्रण करने के लिए दिखाने के लिए कि monomers सेल मुद्रण द्वारा कोशिका झिल्ली नहीं झिल्ली permeabilization के बिना सकता है घुसना है.
Discussion
bioprinting के लिए एक मानक inkjet डेस्कटॉप प्रिंटर परिवर्तित प्रक्रिया विशेष रूप से मुश्किल नहीं है. सबसे चुनौतीपूर्ण कदम का निर्धारण कैसे बायपास करने के लिए कागज फ़ीड तंत्र है, जो ब्रांड और प्रिंटर के मॉडल का इस्तेमाल किया पर निर्भर है. हालांकि, यह अपेक्षाकृत सरल है जब कागज फ़ीड सेंसर यांत्रिक है के रूप में यहाँ वर्णित है. ऑप्टिकल फ़ीड सेंसर के साथ मॉडलों के लिए, अन्य तकनीकों के लिए यह कागज का उपयोग कर रहा है सोच में प्रिंटर चाल के लिए नियोजित किया जा आवश्यकता हो सकती है, उदाहरण के लिए, एक प्रिंटर के माध्यम से कागज का एक छोटा सा टुकड़ा चलाने के समय यह खुर्दबीन स्लाइड पर प्रिंट कर सकते हैं. कागज फ़ीड व्यवस्था को दरकिनार अलग प्रिंटर के मॉडल के लिए इन प्रक्रियाओं को लागू करने में सबसे कठिन कदम होने की संभावना है.
जब एक मंच के निर्माण के लिए मुद्रण के लिए coverslips पकड़, यह उचित संरेखण और ऊंचाई को सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है. चरण coverslip के लिए अनुमति देने के लिए मुद्रण क्षेत्र के बीच में रखा जाना चाहिए. इसके अलावा, यह pl चाहिएइक्का एक पर्याप्त ऊंचाई पर coverslip करने के लिए प्रिंट कारतूस के लिए निकासी में बाधा पहुँचा के बिना स्लाइड पर पारित करने के लिए अनुमति देते हैं. चरण का सही ऊंचाई प्रिंटर मॉडल पर निर्भर करेगा.
यह सुनिश्चित करने के लिए कि मुद्रित कोशिकाओं को दूर धोया नहीं करते, स्लाइड के तुरंत बाद लगभग 30 मिनट के लिए मुद्रण के लिए सेल लगाव के लिए अनुमति देने से पहले अतिरिक्त सेल विकास मीडिया जोड़ा गया एक मशीन में रखा गया है. क्योंकि कोशिकाएं एक समाधान है कि पीबीएस की बड़ी मात्रा में कोशिकाओं को बाहर सूखी नहीं था और व्यवहार्य बने रहे शामिल में छपी थी. कोशिकाओं प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी का उपयोग करने के लिए टैग (आंकड़े 1, 5-7) सेल के अंदर जी actin के monomers का वितरण कल्पना imaged थे. जब 3T3 fibroblasts के साथ मुद्रण, चित्रा 5 actin सेल करने के लिए प्रतिदीप्ति के बहुत से कारण है, लेकिन वृद्धि की चमक की तर्ज प्रदर्शन के साथ एक प्रतिनिधि परिणाम से पता चलता है. का समावेश fluorescently cytoskeleton में जी actin टैग कीcytoskeletal गतिशीलता और सेलुलर यांत्रिकी के अध्ययन के लिए उपयोगी है. 12-15 इस तकनीक की एक सीमा है कि यह केवल अणुओं और प्रोटीन है कि लगभग 10 एनएम से छोटे व्यास के लिए लागू है.
यह सुनिश्चित करने के लिए है कि कोशिकाओं को वास्तव में परिवर्तित प्रिंटर द्वारा संसाधित किया जा रहा DAPI (पीबीएस में 1:5000) को शुद्ध पीबीएस की मात्रा के आधे की जगह में bioink जोड़ा गया है. फ्लोरोसेंट दाग DAPI डीएनए के एमिनो एसिड अमीर भाग नाभिक में स्थित बांध है. इसलिए DAPI fluorescently मुद्रित कोशिकाओं के नाभिक इमेजिंग में एक उपयोगी दाग चित्रा 6 है. दोनों एलेक्सा 488 स्त्राव (actin) और DAPI प्रतिदीप्ति (नाभिक) दोनों के एक उपरिशायी छवि के साथ प्रदर्शित सेल के एक प्रतिनिधि छवि से पता चलता है. 7 चित्रा भी दिखाता है कोशिकाओं को एक बार प्रतिदीप्ति, जबकि गैर जैविक सामग्री है कि नमूने में जमा किया गया है absenc की वजह से नहीं प्रतिदीप्ति जी actin के monomers को शामिल किया गया हैजी actin monomers के ए.
Bioprinting के लिए एक महत्वपूर्ण विचार जलीय मीडिया bioink के लिए इस्तेमाल किया जा रहा है. यह पाया गया कि सीरम के साथ मानक सेल विकास मीडिया का उपयोग कर असंगत परिणाम सामने आए. यह सबसे अधिक संभावना है सीरम प्रोटीन से प्रिंट सिर नलिका के clogging की वजह से है. पीबीएस का उपयोग मुद्रित पैटर्न की स्थिरता में वृद्धि हुई है और कोशिकाओं की संख्या में जमा है. पीबीएस का उपयोग करने के लिए एक दोष यह है कि कोशिकाओं समय की लंबी अवधि के लिए निलंबन में नहीं छोड़ा जाना चाहिए. हालांकि, इन उदाहरणों में fibroblasts सेल व्यवहार्यता में कोई परिवर्तन नहीं के साथ कम से कम एक घंटे के लिए bioink की स्थिति को बर्दाश्त करने में सक्षम थे. यह कई पूर्व निष्कर्ष है, जो रिपोर्ट है कि थर्मल inkjet तंत्र के माध्यम से मुद्रित कोशिकाओं उच्च व्यवहार्यता दर है दिखाया गया है के साथ संगत है 2-8.
यह संशोधित प्रिंटर सेटअप सेल मुद्रण के अलावा अन्य अनुप्रयोगों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है 16-22 कोलेजन या fibrone रूप में मैट्रिक्स प्रोटीन,.ctin, आसानी से इस तकनीक है, जो सेल patterning के लिए उपयोगी हो सकता है के साथ substrates पर मुद्रित किया जा सकता है. उदाहरण के लिए, कोलेजन टाइप के लिए मैं लाइन पैटर्न में गठबंधन कोलेजन substrates कि इन विट्रो में सेल संस्कृति के अध्ययन में 17. के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है मैट्रिक्स प्रोटीन, वृद्धि कारकों सहित अन्य अणुओं के अलावा में परिणाम होगा मुद्रित, मज़बूती से सेल के अध्ययन के लिए किया जा सकता substrates पर स्थानीय और संभावित चिकित्सीय अनुप्रयोगों 18
उपरोक्त कदम में वर्णित डिजाइन के एक प्रमुख सीमा है कि इस प्रिंटर एक से अधिक आयाम में मुद्रण के लिए सक्षम नहीं है. यह ऐसी पाड़ मुद्रण के रूप में नमूनों अनुप्रयोगों में प्रयोग के लिए क्षमता की सीमा. 3 डी मुद्रण के लिए अनुमति देने के लिए, एक विशेष मंच का उपयोग किया जा करने की जरूरत है. चरण bioink की परत दर परत बयान के लिए वृद्धिशील ऊंचाई समायोजन की जरूरत है.
Bioprinting ऊतक इंजीनियरिंग के लिए एक कुशल और लागत प्रभावी तरीका के रूप में वादा दिखाया है, जीन अभिकर्मक micropatterning है, और माइक्रोएरे निर्माण 1-12, 16-22 डिवाइस के इस प्रकार के भविष्य के अनुप्रयोगों के कई हैं, जिनमें शामिल हैं:. नियंत्रित और नमूनों सेलुलर microenvironments, बड़े अणुओं के cytoplasm कोशिका में शामिल है, और कोशिकाओं के बयान की scaffolds पर निर्माण और संरचनाओं कि स्वाभाविक रूप से या कुशलतापूर्वक नहीं होती है.
Disclosures
हम खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.
Acknowledgments
लेखकों के लिए सेल मुद्रण के लिए हिमाचल प्रदेश Deskjet प्रिंटर का उपयोग करने के विचार के लिए डॉ. थॉमस Boland स्वीकार करना होगा. NSF के RII से ईपीएस 0903795 और HL0922280 K25 एनआईएच से इस परियोजना के लिए अनुदान.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| HP DeskJet 500 | Hewlett-Packard | C2106A | Discontinued from manufacturer. Purchased refurbished DEC Trader. |
| HP 26 Black Ink Cartridge | Hewlett-Packard | 51626A | |
| Actin from rabbit muscle, Alexa Fluor 488 conjugate, 200 μg | Invitrogen | A12373 | |
| Phosphate Buffered Saline (PBS) | MP Biomedicals | ICN1860454 | |
| Dulbeccos Modified Eagles Medium (DMEM) | Thermo Fisher Scientific, Inc. | SH3002201 | |
| Fetal Bovine Serum | Sigma-Aldrich | F4135 | |
| Amphotericin B | Sigma-Aldrich | A2942 | Used at 0.5% in cell culture media |
| Penicillin-Streptomycin | Sigma-Aldrich | P4333 | Used at 0.5% in cell culture media |
| Unidirectional Flow Clean Bench | Envirco | VLF 797 | Optional housing for keeping printer aseptic |
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