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Neuroscience

नसों में स्वयं प्रशासन के लिए एक माउस मॉडल में तरीके

Published: December 8, 2012 doi: 10.3791/3739
Automatic Translation
1, 1, 1
1Addictions Unit, McGill University Health Centre

Summary

नसों में आत्म - प्रशासन प्रतिमान (IVSA) कृन्तकों में दुरुपयोग की दवाओं के मजबूत गुणों की जांच में सोने के मानक माना जाता है. इस पांडुलिपि प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं और शल्य चिकित्सा तकनीक के लिए विश्वसनीय IVSA डेटा प्राप्त करने के लिए आवश्यक रूपरेखा. विशेष रूप से, सावधानीपूर्वक कैथेटर आरोपण और रखरखाव डाला जाता है.

Abstract

पशु मॉडल के लिए दवाओं के मजबूत प्रभाव नसों में आत्म - प्रशासन प्रतिमान (IVSA) सहित, का अध्ययन करने के लिए विकसित किया गया है. एक IVSA प्रतिमान का उपयोग करने के लिए कोकीन के रूप में इस तरह के दुरुपयोग की दवाओं के मजबूत गुणों का अध्ययन का लाभ तथ्य यह है कि दवा के बजाय आत्म प्रशासित experimenter प्रशासित सुदृढीकरण की अनुसूची बदल किया जा सकता है, और की मात्रा का सही माप शामिल दवा के रूप में के रूप में अच्छी तरह से भस्म समय और चतुर्थ इंजेक्शन के पैटर्न को प्राप्त किया जा सकता है. इसके अलावा, प्रशासन की नसों मार्ग पहले पारित चयापचय या स्वाद के लिए संबंधित संभावित घालमेल से बचा जाता है, और खून और दिमाग दवा के स्तर में तेजी से वृद्धि का उत्पादन. इस वीडियो के रूप में बताया गया है, नसों में आत्म - प्रशासन सर्जरी और सावधानीपूर्वक दैनिक कैथेटर के दौरान सावधान कैथेटर प्लेसमेंट निस्तब्धता और रखरखाव के बाद पूर्व खाद्य प्रतिबंध या पहले दवा प्रशिक्षण के बिना प्राप्त किया जा सकता है. प्रायोगिक इस में उल्लिखित प्रक्रियाओंकागज पशु आवास के विवरण और दशानुकूलन विधियों, स्फूर्त प्रशिक्षण मीठा दूध समाधान का उपयोग, और कैथिटर आरोपण सर्जरी शामिल हैं.

Protocol

1. पशु आवास और acclimatization प्रक्रियाएं

  1. नर और मादा चूहों सीडी-1 एक ही सेक्स littermates, पिंजरे प्रति मानक प्लास्टिक बीटा चिप बिस्तर और तार ग्रिड lids साथ nestlet पैड, जिसमें पानी की बोतलें और भोजन को समायोजित पिंजरों में जानवरों के लिए 5, के साथ रखे जाते हैं. मानक माउस चाउ और पानी प्रयोग भर घर पिंजरों में उपलब्ध यथेच्छ हैं.
  2. चूहे एक रिवर्स प्रकाश अंधेरे अनुसूची (22:00-10:00 पर रोशनी) पर रखा जाता है.
  3. चूहे प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं की शुरुआत से पहले एक सप्ताह के लिए IVSA परीक्षण कमरों में acclimatize करने के लिए अनुमति दी जाती है.

2. Operant प्रशिक्षण

  1. मीठा दूध प्रशिक्षण और नसों में नशीली दवाओं के सत्र आत्म - प्रशासन सहित सभी व्यवहार प्रक्रियाओं बाहर किया जाता है operant 15.9 x 14 x 12.7 सेमी, 2 अति संवेदनशील माउस levers, लघु सप्तर्षि कप, उत्तेजना रोशनी और microliter सिरिंज पंप (मेड एसोसिएशन के साथ सुसज्जित मापने कक्षों का उपयोगates इंक, सेंट Albans, VT, संयुक्त राज्य अमरीका). मंडलों मेड एसोसिएट्स स्मार्ट सीआर इंटरफ़ेस और मेड पीसी सॉफ्टवेयर का उपयोग कर कंप्यूटर के सुदृढीकरण की अनुसूची कार्यक्रम और डेटा इकट्ठा करने के लिए interfaced हैं.
  2. अनुभवहीन चूहों operant कक्षों के आदी रहे हैं और लीवर प्रेस का उपयोग कर एक मीठा दूध (0.1 मिलीलीटर) इनाम एक लघु सप्तर्षि कप में प्रस्तुत करने के लिए प्रशिक्षित किया. Operant दूध प्रशिक्षण 1-घंटे के सत्र में 5-7 दिनों के लिए आयोजित किया जाता है. सक्रिय लीवर पर एक निश्चित अनुपात अनुसूची (एफआर) के समापन लघु सप्तर्षि कप और एक प्रोत्साहन प्रकाश की रोशनी की प्रस्तुति में हुई. मीठा दूध समाधान sucrose (10 मिलीग्राम / मिलीलीटर, ACS अभिकर्मक, सिग्मा Aldrich इंक सेंट लुइस MO, संयुक्त राज्य अमरीका) सारा दूध (3.25% वसा सामग्री) के शामिल. एक मीठा दूध समाधान या एक तरल भोजन reinforcer के साथ स्फूर्त प्रशिक्षण एक आम के लिए चूहों 1,2 में operant प्रतिसाद दे रहा है की सुविधा के लिए तकनीक का इस्तेमाल किया है.

3. उपकरण की तैयारी करने के लिए सर्जरी के दौरान इस्तेमाल किया जा

RequiRed उपकरण - 23, 20, और 26 गेज सुई, चक्की, 1 सीसी सीरिंज, tygon टयूबिंग, टांका लोहा, हेपरिन, एंटीबायोटिक दवाओं और एनाल्जेसिक.

  1. कैथेटर की प्रविष्टि का मार्गदर्शन करने के लिए नीचे एक 20 गेज सुई शेविंग द्वारा गले नस में सुई तैयार. सुई के शाफ्ट नीचे मुंडा एक चक्की का उपयोग करने के लिए सुई नस में कैथेटर टयूबिंग गाइड के भीतर एक चैनल के रूप में. सुई चैनल ध्यान कि जमा किया गया हो सकता है किसी भी धातु के मलबे के लिए जाँच की जानी चाहिए. चैनल में किसी भी अवरोधों ठीक इत्तला दे दी संदंश का उपयोग कर बाहर scraped किया जाना चाहिए.
  2. दो 1-सीसी निस्तब्धता और कैथिटर की जाँच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सीरिंज अनुकूलन. 12 Tygon टयूबिंग सेमी टुकड़े ले रही है और उन्हें एक अंत में 26 गेज 1 सीसी सीरिंज चिपका सुइयों को देते हैं, और 23 गेज सुई पर टयूबिंग के दूसरे छोर खींच कर दो सीरिंज तैयार. एक सिरिंज एक heparinized ticarcillin (समाधान ticarcillin की 33 मिलीग्राम के साथ 0.9% बाँझ खारा और अन्य के साथ भरा जाना चाहिएऔर बाँझ खारा की 10 मिलीलीटर प्रति हेपरिन के 0.3 मिलीग्राम).
  3. कैथेटर प्रवेशनी टोपियां तैयार. एक 23 गेज सुई पर Tygon टयूबिंग फैला है, और बेवल से 1 सेमी में कटौती. टयूबिंग के खुले अंत के लिए एक मोटी मुहर बनाने पिगलो. टयूबिंग पिघल जाना चाहिए ताकि पूरे प्रवेशनी टोपी कैथेटर प्रवेशनी पर फिट, मोहरबंद अंत फिटिंग के साथ प्रवेशनी के अंत पर snugly लंबे समय पर्याप्त है. ध्यान दें कि अगर टोपी बहुत लंबा है, वहाँ एक जोखिम है कि यह और तुला जाएगा पेंच पर कैथेटर शामिल संलग्न की प्रक्रिया के दौरान बाद में छेदा है. इस प्रकार कैथेटर टोपी के सावधान तैयारी की सिफारिश की है, क्रम में प्रवेशनी के लिए एक अच्छी फिट प्रदान करते हैं.
  4. आवश्यक समाधान तैयार करें. सभी अभिकर्मकों सिग्मा Aldrich इंक (सेंट लुइस MO, संयुक्त राज्य अमरीका) से खरीदे जाते हैं.
    1. कैथेटर निस्तब्धता के लिए Heparinized Ticarcillin समाधान .33 g (disodium नमक) Ticarcillin और बाँझ खारा के 10 मिलीलीटर में 0.003 हेपरिन की छ भंग. समाधान के 0.03 मिलीलीटर thr प्लावित हैough दैनिक कैथेटर. एंटीबायोटिक समाधान विकसित करने से रक्त के थक्के और संक्रमण को रोकने के लिए किया जाता है.
    2. उपचर्म इंजेक्शन के लिए (एंटीबायोटिक) Amikicin - एक एकल उपचर्म इंजेक्शन 10 मिलीग्राम / किलो पोस्ट ऑपरेटिव संक्रमण को रोकने की एक खुराक में सर्जरी के बाद दिया जाता है.
    3. उपचर्म इंजेक्शन के लिए (एनाल्जेसिक) ketoprofen - एक एकल उपचर्म इंजेक्शन 5 मिलीग्राम / किलो के लिए किसी भी पोस्ट ऑपरेटिव दर्द का प्रबंधन की एक खुराक पर सर्जरी के बाद दिया जाता है.

4. कैथेटर आरोपण सर्जरी

आवश्यक उपकरण और अभिकर्मकों: isoflurane, बाँझ खारा, शराब (70%), 1 और 3 सीसी सिरिंजों बाँझ खारा, 1-सीसी अनुकूलित सीरिंज, एंटीबायोटिक और एनाल्जेसिक 3 ऊपर अनुभाग, माउस कैथेटर (CamCaths, कैम्ब्रिजशायर, ब्रिटेन में तैयार समाधान के साथ भरा ), कैथेटर (वैज्ञानिक, मॉन्ट्रियल, क्यूबेक HRS से क्रिस्टल टोपी) शामिल हैं, आंख स्नेहक, 4 सेमी प्लास्टिक की नस (इस बार तरक्कीप्लास्टिक क्यू की नोक), polysporin, बाँझ swabs और धुंध, घुमावदार और सीधे संदंश, धमनी clamps, ठीक कैंची से निर्माण किया जा सकता है.

चरण 1

  1. मानक सड़न रोकनेवाला तकनीक शल्य बेंच, सर्जिकल उपकरणों, और कैथेटर का उपयोग सर्जरी से पहले निष्फल रहे हैं. उचित बंध्याकरण तकनीकों सर्जिकल उपकरणों और कैथेटर CamCaths से खरीदी के लिए वाष्पदावी विसंक्रण भाप शामिल हैं. ग्लास मनका नसबंदी सर्जिकल उपकरणों के सुझावों पर भी इस्तेमाल किया जा सकता है. Ethylene ऑक्साइड नसबंदी जोखिम पिघलने कि अधिक नाजुक कैथेटर या सामग्री पर नियोजित किया जा सकता है. कृंतक शल्य सड़न रोकनेवाला तकनीक के एक अधिक विस्तृत विवरण संलग्न संदर्भ 1,2 में पाया जा सकता है. बेंच की स्थापना के लिए, उपकरणों और रखरखाव के लिए नाक शंकु संज्ञाहरण तस्वीर में सचित्र है.
  2. चूहे isoflurane गैस साथ anaesthetized हैं, और एक सफाई प्रणाली के तहत एक श्वास नली का उपयोग संज्ञाहरण के अंतर्गत रखा. नेत्र स्नेहक (आँसू Naturale PM) दोनों आंखों के लिए आवेदन किया है उन्हें प्रक्रिया के दौरान बाहर सुखाने से रोकने. एक उपयुक्त शल्य मार्जिन जानवर की पीठ पर और गर्दन के आसपास साफ है. इससे पहले किसी भी चीरों बना रहे हैं, शल्य चिकित्सा के क्षेत्र बाँझ पर्दे का उपयोग प्रतिबंधित कर रहे हैं.
  3. प्रविष्टि के लिए आदेश में दिल की सही atrium में कैथेटर को तैयार करने के लिए अतिरिक्त कैथेटर ट्यूबिंग काट है कैथेटर की बल्ब से 1.2 सेमी. इस इष्टतम वयस्क सीडी 1 चूहों, उम्र के लगभग 8 सप्ताह, 20-25 ग्राम शरीर के वजन के लिए स्थापित लंबाई है. कैथेटर टयूबिंग की लंबाई को थोड़ा समायोजित किया जा (परीक्षण और त्रुटि के द्वारा), तनाव और चूहों के आकार और उम्र के आधार पर, की आवश्यकता हो सकती है. प्रविष्टि के लिए पहले, सिरिंज बाँझ खारा युक्त (3.2 अनुभाग) कैथेटर प्रवेशनी जुड़ा हुआ है, और कैथिटर प्लावित है और लीक के लिए जाँच की. रखनाइस शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के दौरान कैथेटर जुड़े सिरिंज. यह कैथेटर फ्लश, और वापस 4.7 चरण में खून आकर्षित करने के लिए उपयोग किया जाएगा.
  4. 70% शराब के साथ नसबंदी के बाद, एक 2 सेमी लंबी midscapular चीरा की पीठ पर बीच में शुरू करने और सिर्फ गर्दन से नीचे समाप्त करने में कैथेटर के आधार को समायोजित करने के लिए है. संयोजी ऊतक संदंश के साथ अलग हो मजबूर किया जाना चाहिए त्वचा के नीचे कैथेटर आधार के लिए जगह बनाने के लिए.
  5. अपनी पीठ पर पशु दे, एक दूसरे उथले 1 - 2 सेमी विकर्ण चीरा सही जानवरों जबड़े ऊपर की ओर जा रहा है हंसली से बनाया गया है, के बाद क्षेत्र में 70% शराब के साथ किया गया swabbed है. गले नस गर्दन की त्वचा के नीचे अल्पज्ञता मिल जाएगा. कैथेटर की प्रविष्टि के लिए तैयार करने में, कैथेटर के आधार से टयूबिंग पीठ पर चीरा के माध्यम से खींचा जाता है और त्वचा के नीचे सिर्फ दाएँ कंधे पर टयूबिंग गुजर द्वारा गले नस के करीब लाया. कैथेटर टयूबिंग अंततो एक धमनी क्लैंप से जुड़ी है और यह जगह में रखने के लिए पशु पक्ष में रखा.
  6. सही गले नस धीरे दूर जानवर की गर्दन के चारों ओर चीरा से सतही संयोजी और वसा ऊतकों हिल द्वारा स्थित है. नस के आसपास संयोजी ऊतक के अलावा टूटी हुई है घुमावदार संदंश का उपयोग और नस तो एक बाँझ प्लास्टिक पट्टी का उपयोग कर ऊपर उठाया है. ढीला खुला सीवन समुद्री मील नस के प्रत्येक के अंत के आसपास बना रहे हैं और कैथेटर टयूबिंग शीर्ष गाँठ के माध्यम से जोड़ दिया गया है और सिवनी धागा आराम करने के दाएँ कंधे पर unclamped पर looped.
  7. प्रविष्टि के लिए पहले, गीला दोनों 20 गेज प्रविष्टि सुई और बाँझ खारा के साथ नस घर्षण को कम करने. सुई समानांतर नस करने के लिए आयोजित किया जाता है, और ऊंचा नस (नोट: सुई टिप के लगभग 0.5 सेमी की नस में प्रवेश करने की जरूरत है) के नीचे के पास धीरे डाला. संदंश का प्रयोग, सुई की शाफ्ट नीचे नस में कैथेटर टयूबिंग स्लाइड. प्रतिरोध का संकेत मिलता है कि टयूबिंग मैंसंयोजी ऊतक के भीतर और नस के भीतर नहीं है. यकीन है कि वहाँ कोई लीक करने की नस के माध्यम से 0.03 खारा के सीसी पुश. लीक का संकेत मिलता है कि नस या कैथेटर टयूबिंग प्लेसमेंट को एडजस्ट करने की जरूरत है कि छेद किया जा सकता है.
    नोट: जांच अगर टयूबिंग नस के भीतर है, तो कुछ खून आकर्षित संलग्न खारा सिरिंज का उपयोग करने का प्रयास. यदि रक्त तुरंत ऊपर नहीं तैयार कर सकते हैं, नस या दिल की दीवार कैथेटर टिप occluding किया जा सकता है, या नस छेदा नहीं किया गया है, टयूबिंग समायोजित और फिर कोशिश. सुई पुनर्निवेशन आवश्यक हो सकता है यदि रक्त अभी भी नहीं किया जा खींचा जा सकता है.
  8. आदेश में जगह में कैथेटर को सुरक्षित करने के लिए, सम्मिलन बिंदु कैथेटर बल्ब धक्का और सुई को हटा दें. नीचे गाँठ बाँध और फिर बार के खिलाफ बल्ब ऊपर 2 गाँठ सही बांधने से पहले कैथेटर फ्लश खींच. फिर से परीक्षण करने के लिए अगर खून तैयार किया जा सकता है देखने के लिए और समुद्री मील थोड़ा अगर जरूरत ढीला. त्वचा और सिवनी के तहत कैथेटर टयूबिंग टकजानवर की गर्दन के चारों ओर उदर चीरा. एक बाँझ कपास टिप applicator, या किसी भी अन्य एंटीबायोटिक अधिमानतः बंद चीरा कुछ एनाल्जेसिक युक्त मरहम का उपयोग तेजी से चंगा Polysporin लागू.
  9. अपने पेट पर पशु के साथ पीठ की त्वचा के नीचे तैयार चीरा के भीतर कैथेटर आधार जगह. सुनिश्चित करें कि अतिरिक्त टयूबिंग न्यूनतम looped है और अच्छी तरह से कैथेटर आधार के तहत छिपा चबाने और यह भेदी जानवर की संभावना को कम करने. कैथेटर आधार के दोनों पक्षों पर चीरा सीवन, और Polysporin चंगा एक बाँझ कपास टिप applicator का उपयोग कर फास्ट लागू.
  10. 0.03 टयूबिंग यह चिपका (3.2 अनुभाग) के साथ heparinized ticarcillin सिरिंज का उपयोग कर समाधान के सीसी के साथ कैथेटर फ्लश. प्लास्टिक प्रवेशनी और सफेद कैथेटर कवर पर टोपी स्क्रू के साथ प्रवेशनी कैप. कुछ चूहों में कि सर्जरी से ताजा कर रहे हैं, खून कैथेटर का रिसाव पहले प्रवेशनी छाया हुआ है. यह महत्वपूर्ण है कि फिर से फ्लश जानवर और rapidly प्रवेशनी टोपी की जगह से पहले रक्त के लिए बाहर प्रवाह करने का मौका है. पशु कैथेटर प्रत्यक्षता बनाए रखने के लिए एक दैनिक आधार पर प्लावित किया जाना चाहिए.
  11. नीचे 70% इथेनॉल के साथ जानवरों के पैरों के बीच इंजेक्शन क्षेत्र पोंछते के बाद, subcutaneously 5 मिलीग्राम / किग्रा की एक खुराक में एक तरफ एनाल्जेसिक ketoprofen, सुई और दूसरी तरफ 10 / किलो मिलीग्राम की एक खुराक पर एंटीबायोटिक amikicin.
  12. बाद संज्ञाहरण बंद कर दिया है, पशुओं के लिए 5 से 7 दिनों के लिए भोजन और पानी के लिए आसान पहुँच के साथ एक साफ पिंजरे में ठीक करने के लिए अनुमति दी जाती है. चूहे पोस्ट ऑपरेटिव हाइपोथर्मिया को रोकने के एक गर्म रात कैबिनेट में रखा जाना चाहिए.

चरण 2

5. व्यवहार परीक्षण अंतःशिरा स्व - प्रशासन

  1. व्यवहार परीक्षण कैथेटर से पहले 0.9% बाँझ खारा के साथ प्लावित कर रहे हैं. चूहे तो जगह हैd operant कक्षों में और जलसेक लाइनों और आसव पंप से जुड़ा है. सक्रिय लीवर प्रेस एक 3.2 सेकंड 18 μl दवा प्रोत्साहन प्रकाश की रोशनी के साथ मिलकर जलसेक में परिणाम. प्रत्येक लीवर प्रेस एक अवधि के बाहर 8 सेकंड जो समय के दौरान उत्तेजना प्रकाश पर रहता है के द्वारा पीछा किया जाता है.
  2. चालू सत्र के बाद, चूहों कैथेटर से पहले किया जा रहा है उनके घर पिंजरे में लौट heparinized ticarcillin समाधान के साथ प्लावित कर रहे हैं.
  3. चूहे 3 प्रत्येक खुराक में लगातार 2 घंटा सत्र के लिए स्वयं प्रशासन के लिए अनुमति दी जाती है. खुराक प्रत्येक माउस के लिए एक यादृच्छिक क्रम में प्रस्तुत किया गया है, के रूप में निम्न खंड में दिखाया गया है.
  4. कैथेटर प्रत्यक्षता दैनिक सुनिश्चित करना है कि दोनों खारा और एंटीबायोटिक समाधान कैथेटर के माध्यम से निकाले जा सकता द्वारा मूल्यांकन किया है. इसके अतिरिक्त, एक परीक्षण / ketamine midazolam संलग्न संदर्भ 5 में वर्णित के रूप में आयोजित किया जा सकता है. संक्षेप में, संज्ञाहरण के 5 सेकंड के भीतर 0.02-0.03 मिलीग्राम ketamine (15 मिलीग्राम / एमएल) की एक प्रेरणा के गतिहीनता जैसे लक्षण,या (0.75 मिलीग्राम / एमएल) midazolam midazolam एक पेटेंट 5 कैथेटर के सबूत है.

Representative Results

चित्रा 1
चित्रा 1 नसों में नशीली दवाओं के आत्म - प्रशासन के लिए जवाब देने के पैटर्न दवा, खुराक सीमा और माउस तनाव कार्यरत द्वारा अलग अलग होंगे. प्रस्तुत आंकड़ा कोकीन सफल catherization वीडियो में वर्णित प्रक्रिया का उपयोग सर्जरी के बाद आत्म - प्रशासन के आंकड़ों से पता चलता है. आंकड़ा (SEM ±) मतलब अर्जित कोकीन सुई लेनी और मतलब (SEM ±) कोकीन की खपत 4 कोकीन सुदृढीकरण के एक FR1 समय पर एक यादृच्छिक क्रम में प्रस्तुत खुराक की एक सीमा के पार (मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन) से पता चलता है. भुज: जलसेक प्रति आत्म प्रशासित दवा की खुराक. वाम तालमेल: सुई लेनी की कुल संख्या 2 घंटा operant सत्र के दौरान अर्जित किए हैं. सही तालमेल: परीक्षण 2 घंटा सत्र के दौरान मिलीग्राम / किलो में कुल कोकीन सेवन. सभी 13 कैथेटर अध्ययन की अवधि (4 सप्ताह) के लिए पेटेंट बने रहे. एक एक तरह खुराक पर आयोजित की एनोवा से पता चला है कि micई एक खुराक पर निर्भर फैशन में कोकीन प्रशासन थे [(1,12) एफ = 42.8, पी <0.05]. खुराक - प्रतिक्रिया वक्र (3,36) एफ = 29.6, पी 0.05 <] लीवर अधिक मात्रा में दबाव में कमी के बावजूद अधिक कोकीन की खपत में वृद्धि हुई है. प्रत्येक डेटा बिंदु प्रत्येक कोकीन (SEM ±) खुराक सीडी 1 चूहों (n = 13 / खुराक, पुरुषों और महिलाओं संयुक्त) में एकत्र 3 परीक्षण सत्र के औसत का प्रतिनिधित्व करता है. सक्रिय (दवा प्रबलित) बनाम निष्क्रिय खुराक प्रतिक्रिया वक्र भर में जवाब लीवर की तुलना में दो तरह से एनोवा का उपयोग करने के लिए सुनिश्चित करें कि चूहों दो levers के बीच भेदभाव करने के लिए किए गए थे. CD1 चूहों के लिए सक्रिय लीवर के लिए एक प्राथमिकता [(1,12) एफ = 10.255, पी 0.05 <] पूरी खुराक - प्रतिक्रिया वक्र (डेटा यहाँ दिखाया नहीं) पर विश्लेषण से पता चला

Discussion

मादक पदार्थों के सेवन के पशु मॉडल मादक पदार्थों से संबंधित व्यवहार के आनुवंशिक आधार को समझने में विशेष रूप से उपयोगी हैं. उदाहरण के लिए, विभिन्न आनुवंशिक प्रोफाइल के साथ चूहों उनके 6-8 कोकीन के लिए संवेदनशीलता में मतभेद दिखाने पैतृक और पहचान करने की क्षमता जीन उम्मीदवारों mediating प्ररूपी परिवर्तनशीलता मनाया 9 मदद. अंतःशिरा कैथीटेराइजेशन इस पत्र में वर्णित प्रक्रियाओं काफी सफलता के साथ इस्तेमाल किया गया है के रूप में के रूप में अच्छी तरह से चूहों विभिन्न आनुवंशिक पृष्ठभूमि 10 के चूहों के विभिन्न प्रकारों में दवा IVSA की जांच.

इस वीडियो में दिखाया प्रक्रियाओं के दौरान पर ध्यान केंद्रित करने के लिए महत्वपूर्ण कारकों पर प्रकाश डाला और catherization सर्जरी के बाद के क्रम में विश्वसनीय नसों में आत्म - प्रशासन डेटा प्राप्त. सबसे पहले, सही atrium के भीतर कैथेटर टयूबिंग की नियुक्ति के लिए महत्वपूर्ण है, क्रम में दाग के थक्कों से कैथेटर विफलता को रोकने के लिए. शल्य चिकित्सा के दौरान यह सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है कि कैथेटरअंत बेरोक है, और या तो दिल या नस ऊतक द्वारा occluded नहीं. दूसरा, दैनिक कैथेटर निस्तब्धता दोनों के पहले और बाद में चालू सत्र के क्रम में रुकावटों को रोकने की आवश्यकता है. अंत में, कैथेटर प्रवेशनी दोनों प्रवेशनी कैप और क्रिस्टल को शामिल किया गया है जब पशुओं के लिए उनके घर के पिंजरों में हैं के साथ लगातार कवर चाहिए, मलबे के प्रवेश को रोकने के लिए. कैथेटर प्रवेशनी के मामूली रुकावट एक ठीक 26 गेज सुई का उपयोग करते हुए, लेकिन दैनिक निस्तब्धता दिनों जब जानवरों IVSA के लिए परीक्षण नहीं कर रहे पर के साथ heparinized एंटीबायोटिक समाधान की आवश्यकता है, विशेष रूप से उखाड़ फेंकना जा सकता है.

पशु अस्तित्व सर्जरी, सड़न रोकनेवाला तकनीक का अच्छा ज्ञान प्रदर्शन, analgesia और संज्ञाहरण आवश्यक है. जबकि इस वीडियो उचित शल्य चिकित्सा प्रशिक्षण की जगह नहीं है, यह इस प्रतिमान के लिए आवश्यक तकनीक हासिल करने के इच्छुक शोधकर्ताओं के लिए एक गाइड के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है.

Disclosures

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

Acknowledgments

जानवरों पर प्रयोग पशु की देखभाल और मैकगिल विश्वविद्यालय पशु देखभाल समिति के कनाडा परिषद द्वारा निर्धारित दिशा निर्देशों और नियमों के अनुसार में प्रदर्शन किया गया. इस शोध स्वास्थ्य अनुसंधान (CIHR) की कनाडा के संस्थानों से केजी के लिए सम्मानित किया गया धन के द्वारा समर्थित किया गया. ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ticarcillin Disodium Salt Sigma-Aldrich T5639-1G 1 gram bottle
Tears Naturale P.M (Eye lubricant) Alcon N/A 3.5 gram tube
This eye lubricant can be found in most pharmacies. Any ophthalmic eye lubricant can be used.
Cocaine Medisca Pharmaceutique 0723-06 1 gram bottle
Ketamine Medisca Pharmaceutique 1754-04 25 gram bottle
Midazolam Medisca Pharmaceutique 2519-06 1 gram bottle
Heparin sodium salt Sigma-Aldrich H4784-250MG 250 gram bottle
Ketoprofen Sigma-Aldrich K1751-1G 1 gram bottle
Amikicin Sulphate salt Sigma-Aldrich A2324-5G 5 gram bottle
Sucrose ACS Reagent Sigma-Aldrich S5016-500G 500 gram bottle
Standard mouse catheters with soft mesh CamCaths MIVSA/20/26/BC-1S Tubing specifications: 26SWG;0.451;0.254
Crystal cap applicator HRS Scientific 313CAC This is the white catheter cap.
Tygon Micro Bore Tubing Thomas Scientific 9561S41 Tubing specifications (bore x o.d. x wall thickness in inches): .01 x .03 x .01

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References

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Kmiotek, E. K., Baimel, C., Gill, K. … More

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