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Neuroscience

टेल सस्पेंशन टेस्ट

Published: January 28, 2012 doi: 10.3791/3769
Automatic Translation
*1, *1,2, 3, 1, 1, 1,3,4
1Department of Psychiatry, University of Maryland School of Medicine, 2Tulane University School of Medicine, 3The Program in Neuroscience, University of Maryland, 4Department of Pharmacology and Experimental Therapeutics, University of Maryland School of Medicine
* These authors contributed equally

Summary

पूंछ निलंबन परीक्षण करने के लिए एक प्रयोगात्मक चूहों में दवा उपचार के एंटी प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने की प्रक्रिया के रूप में मान्य है. चूहे अपनी दुम द्वारा छह मिनट के लिए निलंबित कर दिया है और भागने से संबंधित व्यवहार का मूल्यांकन कर रहे हैं. हम पूंछ निलंबन परीक्षण में इस्तेमाल किया प्रक्रियाओं का वर्णन.

Abstract

परीक्षण पूंछ - निलंबन एक माउस व्यवहार संभावित एंटी दवाओं की जांच में उपयोगी परीक्षण है, और है कि अवसाद संबंधी व्यवहार को प्रभावित करने की उम्मीद कर रहे हैं अन्य जोड़तोड़ के आकलन. चूहे अपनी दुम द्वारा टेप के साथ निलंबित कर रहे हैं एक ऐसी स्थिति है कि यह बच या नहीं पास के सतहों पर पकड़ कर सकते हैं,. इस परीक्षण के दौरान, आम तौर पर अवधि में छह मिनट, जिसके परिणामस्वरूप बच उन्मुख व्यवहार मात्रा निर्धारित कर रहे हैं. पूंछ निलंबन परीक्षण भावी एंटी यौगिकों के उच्च throughput स्क्रीनिंग के लिए दवाओं की खोज में एक महत्वपूर्ण उपकरण है. यहाँ, हम कि होते हैं और उन्हें कैसे से बचने के लिए हो सकता है संभावित समस्याओं पर अतिरिक्त जोर देने के साथ इस परीक्षण के कार्यान्वयन के लिए आवश्यक जानकारी का वर्णन करता है. हम भी पूंछ चढ़ाई व्यवहार करने के लिए एक समाधान है, व्यापक रूप से इस्तेमाल किया C57BL / 6 के रूप में एक आम समस्या यह है कि इस परीक्षण के कुछ माउस उपभेदों में बेकार renders, प्रदान करते हैं. विशेष रूप से, हम एक छोटे से प्लास्टिक के माध्यम से माउस पूंछ से गुजर रहा पूंछ चढ़ाई के व्यवहार को रोकने केनिलंबन से पहले सिलेंडर. अंत में, हम विस्तार से मैन्युअल रूप से व्यवहार है कि इस परीक्षा में प्रकट होते हैं कैसे स्कोर करने के लिए.

Protocol

1. सामग्री

1. सस्पेंशन बॉक्स

पूंछ निलंबन परीक्षण (TST) अपनी दुम द्वारा जमीन के ऊपर निलंबित चूहों शामिल है. सबसे बुनियादी स्तर पर, प्रक्रिया केवल निलंबन पट्टी या शेल्फ कगार, और टेप की आवश्यकता है. हालांकि, experimenter एक पृष्ठभूमि है कि इष्टतम विपरीत प्रदान करता है के उपयोग पर विचार करना चाहिए. इसके अतिरिक्त, यह समझदारी है के लिए अन्य जानवरों है कि परीक्षण किया जा रहा है देख से चूहों को रोकने के लिए कदम उठाने. हमारी प्रयोगशाला में, हम विशेष रूप से निर्मित पूंछ निलंबन बक्से, (चार घंटो के दिन, बाल्टीमोर एमडी) आयाम (55 ऊँचाई एक्स चौड़ाई 60 X 11.5 सेमी गहराई) के साथ प्लास्टिक का बना का उपयोग करें. आदेश में देख या बातचीत एक दूसरे से पशुओं को रोकने के लिए, प्रत्येक माउस की अपनी तीन दीवारों आयताकार डिब्बे (55 ऊंचाई 15 एक्स चौड़ाई एक्स 11.5 सेमी गहराई) के भीतर निलंबित कर दिया है. माउस इस डिब्बे के बीच में निलंबित कर दिया है और चौड़ाई और गहराई पर्याप्त आकार रहे हैं ताकि माउस सह नहीं कर सकते हैंदीवारों के साथ ntact. इस सेटिंग में, माउस नाक और तंत्र मंजिल के बीच अनुमानित दूरी 20-25 सेमी है. वहाँ चार तंत्र में ऐसे समान डिब्बों हमें एक समय में चार चूहों का परीक्षण करने के लिए अनुमति देता है. एक एल्यूमीनियम निलंबन (1 सेमी ऊंचाई एक्स 1 सेमी चौड़ाई लंबाई x 60 सेमी.) बार, प्रत्येक माउस की पूंछ को निलंबित करने के लिए प्रयोग किया जाता है, बॉक्स के शीर्ष पर तैनात है. आयाम है कि हम हमारी प्रयोगशाला में प्रयोग एक सामान्य संदर्भ के रूप में माना जाना चाहिए. उदाहरण के लिए, पूंछ निलंबन बॉक्स के अलग - अलग डिब्बों के आकार में वृद्धि हो सकता है अगर एक बड़े outbred माउस तनाव (जैसे CD-1) प्रयोग किया जाता है सकते हैं.

प्रत्येक डिब्बे के नीचे हम एक detachable एल्यूमीनियम ट्रे है कि जानवरों से मल या मूत्र एकत्र जगह है. हम सूरजमुखी मनुष्य जानवरों के लिए एक अंधेरे ग्रे बॉक्स और अन्य कोट रंग की चूहों के लिए एक क्रीम रंग बॉक्स का उपयोग करें. यह व्यवस्था हमें बेहतर विपरीत और इसलिए अधिक विश्वसनीय परीक्षण के व्यवहार स्कोरिंग देता है.

2. टेप

3. घड़ी

4. वीडियो रिकॉर्डिंग डिवाइस

एक वीडियो कैमरा और एक तिपाई (या अन्य समर्थन संरचना) की जरूरत है. इस परीक्षण के बाद से आमतौर पर एकाधिक एक ही समय में परीक्षण किया जा रहा है जानवरों शामिल है, जीना स्कोरिंग मुश्किल हो सकता है और सलाह दी नहीं है जाएगा. हाय में वीडियो कैमरा रिकॉर्ड चाहिएgh पर्याप्त संकल्प है कि व्यवहार स्कोरिंग के लिए बाद में उपयोग किया जाएगा एक गुणवत्ता के चित्र रेंडर. हमेशा यह निश्चित है कि कैमरे में परीक्षण शुरू करने से पहले पर्याप्त रिकॉर्डिंग स्मृति है. हम एक वीडियो कैमरा है कि शारीरिक मीडिया (यानी वीडियो कैसेट) के उपयोग के बिना डिजिटल रिकॉर्ड का उपयोग, वीडियो का सीधा हस्तांतरण के लिए अनुमति देता है.

5. सफेद शोर जनरेटर

शोर जनरेटर आंतरायिक पर्यावरण लगता है मुखौटा चाहिए. एक शोर जनरेटर का उपयोग विशेष रूप से प्रयोगशाला वातावरण में जहां अचानक जोर शोर है कि संभावित चूहों को डराना होगा सुना जा सकता है है की सिफारिश की है. हमारे प्रयोगात्मक कमरे में परिवेश शोर स्तर (सफेद शोर जनरेटर सक्रिय के बिना) 60 डीबी के आसपास है. स्थान है जहाँ TST आयोजित किया जाता है पर सक्रिय सफेद शोर जनरेटर के साथ कुल ध्वनि स्तर 70-72 DB है. तथापि, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि ये आंकड़े केवल उदाहरण के रूप में प्रदान की जाती हैं चाहिए, और प्रत्येक प्रयोगशाला का चयन करना चाहिएउनके अद्वितीय पर्यावरण और परिस्थितियों के अनुसार सही शोर के स्तर.

6. आपूर्ति क्लीनिंग

निलंबन बॉक्स प्रत्येक सत्र के बाद अच्छी तरह से किया जाना चाहिए नसबंदी समाधान या MB 10-जैसे, ताना लेबोरेटरीज इंक, Wilmington, डे, (समान) के साथ नष्ट.

7. Climbstoppers (वैकल्पिक इस्तेमाल किया तनाव पर निर्भर)

C57BL / 6 के रूप में कुछ पृष्ठभूमि, चूहे एक परीक्षण के दौरान अपनी पूंछ चढ़ाई कर सकते हैं. साफ खोखले (4 सेमी लंबाई, व्यास 1.6 सेमी के बाहर, अंदर व्यास 1.3 सेमी, 1.5 ग्राम) सिलेंडरों कि polycarbonate टयूबिंग से चार सेमी लंबाई (FourHourDay इंक, बाल्टीमोर के प्रबंध निदेशक द्वारा) (# 8585K41, McMaster Carr, Santa Fe Springs करने के लिए काट रहे हैं , सीए) चूहों की पूंछ के आसपास रखा जाता है जैसे 2,3 व्यवहार चढ़ाई पूंछ को रोकने. इन उपकरणों को आम उपकरणों और सामग्री के साथ किसी भी प्रयोगशाला में बनाया जा सकता है है.

2. व्यवहार प्रक्रिया

  1. स्थिति में कैमरा रखें. कैमरा के रूप में संभव के रूप में में क्रम में पशुओं के उच्चतम संभव संकल्प प्राप्त करने के करीब होना चाहिए.
  2. टेप टुकड़े कि सत्र के दौरान इस्तेमाल किया जाएगा, कटौती की जानी चाहिए चिह्नित है, और सत्र के लिए तैयार है.
  3. सफेद शोर जनरेटर प्रारंभ, अगर इस्तेमाल किया जा रहा है, पहले चूहों कमरा परीक्षण करने के लिए शुरू कर रहे हैं. सफेद शोर के स्तर केवल बाहरी शोर मुखौटा करने के लिए पर्याप्त होना चाहिए. एक उच्च मात्रा से बचें और यह सुनिश्चित करें कि सफेद शोर का एक ही स्तर के सभी जानवरों के लिए प्रयोग किया जाता है.
  4. एक लाओपरीक्षण कमरे में imals. यदि कमरे जहां जानवरों रहते हैं और परीक्षण के कमरे में इसी तरह के परिवेश की स्थिति के साथ एक दूसरे के लिए आसन्न हैं, कोई दशानुकूलन अवधि आवश्यक हो सकता है. अन्यथा, परीक्षण के कमरे में दशानुकूलन (आम तौर पर एक कम से कम घंटे) की अवधि के लिए पशुओं जगह. पता है कि एक ही कमरे में रखा अन्य जानवरों घ्राण और अल्ट्रासोनिक cues समझ सकते हैं.
  5. यदि C57BL6 जम्मू / जैसे उनके पूंछ, चढ़ाई करने के लिए जाना जाता तनाव, पूंछ के आसपास किया जा रहा है जगह Climbstoppers पहले प्रयोग किया जाता टेप आवेदन.
  6. चूहों की पूंछ टेप पालन करें. टेप के रूप में चिह्नित के अंत का प्रयोग करें और सुनिश्चित करें कि टेप और वापस ही पर पूंछ से चिपक. टेप टेप के बाहर शेष पूंछ के 2-3 मिलीमीटर के साथ पूंछ के बहुत अंत तक लागू किया जाना चाहिए.
  7. एक बार टेप का एक टुकड़ा एक माउस पूंछ से जुड़ी है पिंजरे के भीतर की दीवारों के लिए टेप के मध्य भाग छड़ी. यह टेप टुकड़ों के एक दूसरे के tangling को रोकने में मदद मिलेगी. ध्यान दें कि गइस फैशन में onfinement तनाव का कारण है और यह प्रत्येक जानवर के रूप में जल्द से जल्द टेप लागू करने की प्रक्रिया को पूरा करने के लिए महत्वपूर्ण है कि हो सकता है.
  8. एक बार सभी टेप लागू किया जाता है, रिकॉर्डिंग शुरू करने और सत्र की पहचान से पहले चूहों को निलंबित कर रहे हैं.
  9. निलंबन पट्टी या शेल्फ पर एक आदेश है कि उपचार समूहों के बीच counterbalanced है में टेप के मुक्त अंत रखकर पशुओं को निलंबित. निलंबित एक तरीका है कि करता है बाधा डालती है क्योंकि पूरे TST सत्र और रन हो जाएगा बाधा डालने कैमरा असमर्थता के लिए नेतृत्व करने के लिए उस समय के दौरान व्यवहार का आकलन करेंगे कैमरे के दृश्य नहीं है में चूहों. जाँच करें कि सभी टेप समाप्त होता है समानांतर प्रत्येक माउस के लिए एक सुस्त के समान लंबाई के साथ निलंबन पट्टी या शेल्फ पर लटक रहे हैं.
  10. सत्र (जो आम तौर पर छह मिनट) के अंत में, उनके homecage जानवरों लौटने और ध्यान से प्रत्येक पूंछ से धीरे इसे खींच बंद करके टेप हटाने. पूंछ से टेप को चीर के बाद से ऐसा करने दर्द mic करने के कारण हो सकता है मतई.
  11. अपनी कॉलोनी कमरे में चूहों लौटने के बाद fecal और संग्रह ट्रे से बोलि मूत्र त्यागने और एक स्टरलाइज़ समाधान के साथ तंत्र पोंछ.

3. व्यवहार विश्लेषण

  1. आम तौर पर, TST शुरू से लंबाई में छह मिनट खत्म. एक और व्यापक रूप से इस्तेमाल एंटी प्रभावकारिता प्रक्रिया के विपरीत, मजबूर तैरना परीक्षण, पूरे सत्र रन बनाए है. यह लग रहा है कि चूहों प्रकट गतिहीनता TST में पहले करते हैं सामान्य की वजह से है.
  2. हमारी प्रयोगशाला में हम वीडियो फ़ाइलों को सीधे अपलोड कैमरे से एक पीसी जहां विश्लेषण आयोजित किया जाता है.
  3. व्यवहार विश्लेषण समय है कि प्रत्येक माउस खर्च करता है के रूप में मोबाइल मापा जाता है के दौरान. हालांकि यह संभव है सीधे गतिहीनता समय को मापने है, हम यह आसान का पता लगाने और ऐसे आंदोलनों की कमी के बजाय सक्रिय आंदोलनों उपाय मिल गया है.
  4. TST व्यवहार विश्लेषण का सबसे महत्वपूर्ण पहलू आंदोलन की लगातार पहचान हैहै कि सदाशयी गतिशीलता के रूप में दर्ज हैं. सत्र की शुरुआत में विशेष रूप से चूहे,, प्रकट व्यवहार कि खुलकर बच संबंधित हैं. ये तंत्र की दीवारों और निलंबन पट्टी, शरीर के मजबूत मिलाते हुए, और चलाने के लिए सदृश अंग के आंदोलन तक पहुँचने की कोशिश कर रहा शामिल हैं. इन आंदोलनों को स्पष्ट रूप से गतिशीलता का गठन. ये तो व्यवहार कम और subtler बन जाते हैं. हमारी प्रयोगशाला छोटे आंदोलनों कि सामने पैर तक ही सीमित हैं, लेकिन पिछले पैरों की भागीदारी के बिना गतिशीलता के रूप में नहीं गिने जाते हैं. इसके अतिरिक्त, दोलनों और है कि गति के कारण झूलों की तरह पेंडुलम पहले गतिशीलता मुकाबलों के दौरान प्राप्त की भी गतिशीलता के रूप में नहीं गिने जाते हैं.
  5. हमारी प्रयोगशाला में हम समय मापन के लिए एक स्क्रीन पर स्टॉपवॉच (Xnote स्टॉपवॉच, dnSoft अनुसंधान समूह) सॉफ्टवेयर का उपयोग करें. दो अलग - अलग stopwatches स्क्रीन पर इस्तेमाल किया जाता है. पहली स्टॉपवॉच 360 सेकंड और चेतावनियों से नीचे पर्यवेक्षक मायने रखता है जब व्यवहार विश्लेषण अवधि समाप्त होता है. दूसरा stopwatch पर्यवेक्षक के उपाय समय मोबाइल खर्च द्वारा नियंत्रित है. कुछ स्टॉपवॉच सॉफ्टवेयर कुंजी असाइन करने के लिए शुरू और कार्यों को बंद करो, ताकि स्क्रीन पर कुंजीपटल स्टॉपवॉच पर नियंत्रण कर सकते हैं करने की क्षमता है. एक नियमित कुंजीपटल के बजाय, हम आमतौर पर एक 'gamepad stopwatches नियंत्रण के रूप में जाना जाता है एक इनपुट डिवाइस का उपयोग करें.
  6. यदि वहाँ एक से अधिक परीक्षण और स्क्रीन पर मौजूद माउस अन्य जानवरों को कवर इतना है कि उनके आंदोलनों पर्यवेक्षक विचलित नहीं होगा यह एक अच्छा विचार है. यह किसी अन्य प्रोग्राम विंडो का उपयोग करके या शारीरिक रूप से कागज के साथ स्क्रीन पर अन्य चूहों को कवर द्वारा पूरा किया जा सकता है.
  7. वहाँ कुछ पूर्वाग्रह घटनेवाला अगर गतिशीलता समय की कुल राशि के लिए एक विशेष माउस बीत विश्लेषण सत्र के पूरा होने से पहले दिख रहा है हो सकता है. यदि एक स्टॉपवॉच पर स्क्रीन प्रयोग किया जाता है, हम सभी लेकिन स्टॉपवॉच के millisecond दशमलव कवर का सुझाव देते हैं. स्टॉपवॉच को कवर करके पर्यवेक्षक ही जानता है कि स्टॉपवॉच हैपर या बंद किसी भी बिंदु पर है, लेकिन कुल समय बीत और इसलिए किसी पक्षपात के द्वारा प्रभावित नहीं किया जा सकता है नहीं पता है. इस दृष्टिकोण का उपयोग पर्यवेक्षक, जबकि पशुओं के समूह कार्य को अंधा, प्रत्येक जानवर में गतिशीलता के स्तर की एक सामान्य विचार नहीं होगा.
  8. एक interobserver विश्वसनीयता का परीक्षण हर नए पर्यवेक्षक के लिए आयोजित किया जाना चाहिए परीक्षण पशुओं से डेटा एकत्रित करने की शुरुआत से पहले. हमारी प्रयोगशाला में प्रत्येक नए पर्यवेक्षक पहले एक अनुभवी पर्यवेक्षक देखता है, जबकि वह या वह स्कोरिंग है. नई पर्यवेक्षकों के बाद पर्याप्त आत्मविश्वास हासिल गतिहीनता से गतिशीलता अंतर, वे तो अनुभवी पर्यवेक्षक देख रहा है और किसी भी गलतियों की ओर इशारा करते के साथ वास्तविक समय में स्कोर. एक बार इस चरण को सफलतापूर्वक पूरा हो गया है, नई पर्यवेक्षकों TST वीडियो है कि हम हमारी प्रयोगशाला में प्रशिक्षण प्रयोजनों के लिए बनाए रखने की एक विशिष्ट सेट का विश्लेषण करेगा. Interobserver सहसंबंध के एक उच्च स्तर के बाद ही अनुभवी पर्यवेक्षक के साथ प्राप्त की है एक अन्वेषक वास्तविक से TST वीडियो का विश्लेषणप्रयोगों. हम इन प्रशिक्षण विश्लेषण से डेटा प्रयोगशाला के लिए एक आंतरिक मानक का गठन करने के लिए संग्रह. हम उपभेदों के बीच तरीके में मतभेद है जिसमें वे गतिशीलता व्यक्त (और गतिहीनता) व्यवहार, और लिंगों के बीच गतिहीनता समय मतलब मनाया है. जब एक नया तनाव, लिंग, या आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस मॉडल प्रयोगशाला में परीक्षण किया है यह फिर से विश्वसनीयता विश्लेषण के इस प्रकार का कार्य करने के लिए आवश्यक है.

4. प्रतिनिधि परिणाम

हम TST का इस्तेमाल किया है विभिन्न माउस उपभेदों में लिथियम का इलाज (चित्रा 1) 3 के लिए एंटी की तरह प्रतिक्रियाओं का आकलन है. इस प्रयोग के प्रायोगिक जानकारी कर सकते हैं, एट अल. 3 २०११ में प्रकाशित कर रहे हैं.

चित्रा 1
चित्रा 1 पांच जन्मजात माउस उपभेदों में पुरानी लिथियम प्रशासन के बाद पूंछ निलंबन परीक्षण में गतिहीनता समय. चूहे समूह घर थेघ, पिंजरे प्रति चार चूहों. लिथियम उपचार समूह में चूहे प्राप्त लिथियम चाउ तीन सप्ताह के लिए 4 ग्राम / किलो LiCl युक्त. नियंत्रण जानवरों लिथियम क्लोराइड के बिना समान भोजन प्राप्त किया. **: पी <0.01, ***: पी <.001 एक महत्वपूर्ण unpaired टी परीक्षण निरूपित. डेटा मतलब ± SEM के रूप में व्यक्त कर रहे हैं. n प्रत्येक तनाव के लिए प्रति :10-12 समूह जानवरों. (3 से reproduced आंकड़ा).

इस उदाहरण में, पुरानी भोजन में दिया लिथियम के एक महत्वपूर्ण उपचार प्रभाव C57BL/6J और DBA/2J उपभेदों में ही मनाया जाता है. अन्य तीन उपभेदों में गतिहीनता के समय में कोई सांख्यिकीय महत्वपूर्ण कमी मनाया गया. इन आंकड़ों से संकेत मिलता है कि एक एंटी की तरह पुरानी लिथियम उपचार करने के लिए प्रतिक्रिया निर्भर तनाव के रूप में भी अन्य एंटी दवाओं 4-8 के साथ देखा गया है.

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Discussion

Steru एट अल द्वारा TST विकास 9 पहले से विकसित मजबूर तैरना 10-12 परीक्षण से प्रभावित किया गया था. मजबूर TST चूहों में तैरना परीक्षण, इसी प्रकार एक अपरिहार्य लेकिन मामूली तनावपूर्ण स्थिति में रखा जाता है. भागने से संबंधित व्यवहार का अभाव गतिहीनता माना जाता है. मजबूर तैरना परीक्षण की तरह, TST एक सबसे अच्छा दवाओं के एंटी प्रभावकारिता के मूल्यांकन के लिए मान्य परीक्षण है, लेकिन यह भी पर्यावरण, neurobiological, और आनुवंशिक जोड़तोड़ 13-18 के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए इस्तेमाल किया. मजबूर तैरना परीक्षण करने के लिए इसके विपरीत, TST में 19 पानी में डुबकी कारण हाइपोथर्मिया का कोई खतरा नहीं है. experimenters ध्यान में रखना चाहिए और कि जब मजबूर तैरना परीक्षण और TST इसी तरह प्रथम दृष्टया हैं, वहाँ उनकी संवेदनशीलता और प्रदर्शन में विभिन्न महत्वपूर्ण मतभेद रहे हैं एक परीक्षण के परिणामों जरूरी दूसरे में नहीं दोहराया जा सकता है . मतभेद ख का एक उत्कृष्ट विवरण के लिएetween इन दो परीक्षण निम्नलिखित 4,20,21 संदर्भ में देखते हैं. हालांकि सबसे antidepressants के सप्ताह लेने के लिए रोगियों में चिकित्सकीय महत्वपूर्ण प्रभाव डालती है, antidepressants TST में उनके प्रभाव और मजबूर तैरना परीक्षण दोनों निम्नलिखित तीव्र और जीर्ण उपचार 20,22,23 लागू कर सकते हैं. हालांकि, वहाँ कई अन्य व्यवहार चूहों कि आम तौर पर पुरानी केवल उपचार के प्रति संवेदनशील कर रहे हैं में एंटी की तरह प्रभाव का आकलन किया परीक्षण कर रहे हैं. ये पुरानी अप्रत्याशित तनाव 24, सामाजिक हार तनाव 25, और 26 खिला दबा नवीनता शामिल हैं.

अपने छोटे पदचिह्न, कम लागत और स्थापना के रिश्तेदार आसानी के अलावा, TST में डेटा संग्रह के स्वचालन भी संभव है 9,27,28. स्वचालन के लिए दो मुख्य दृष्टिकोण विद्युत यांत्रिक माप प्रणालियों और वीडियो विश्लेषण कर रहे हैं. विद्युत यांत्रिक दृष्टिकोण में, पशु एक तनाव गेज से निलंबित कर दिया है और जानवरों के आंदोलनों (जैसे एम मापा जाता हैएड एसोसिएट्स इंक, सेंट Albans, VT, हार्वर्ड उपकरण, Holliston, एमए). एक अन्य दृष्टिकोण TST वीडियो रिकॉर्डिंग (, Cleversys इंक, Reston, VA जैसे Noldus इंक, नीदरलैंड) के सॉफ्टवेयर आधारित विश्लेषण है. हालांकि, स्वचालन के साथ भी, मानव हस्तक्षेप अभी भी आवश्यक हो जाएगा, के बाद से लागू मापदंडों प्रत्येक नया माउस मॉडल या तनाव के लिए समायोजित किया जाना चाहिए और परिणाम गुणवत्ता नियंत्रण के प्रयोजनों के लिए एक मानव पर्यवेक्षक द्वारा सत्यापित किया जाना चाहिए.

एक लगातार समस्या यह है कि TST के साथ विशेष ध्यान देने योग्य कुछ चूहों के व्यवहार पूंछ चढ़ाई, विशेष रूप से आमतौर पर इस्तेमाल किया / 6 C57BL 1,20 तनाव है. इन जानवरों तक पहुँचने के लिए और अपने स्वयं के पूंछ चढ़ाई की ओर एक प्रवृत्ति है. चूहों कि सफलतापूर्वक अपनी दुम पर चढ़ने से सीखा है कि भागने संभव है. ऐसे चूहों इसलिए विश्लेषण है, जो आवश्यक चूहों की संख्या बढ़ जाती है और प्रक्रिया की विश्वसनीयता कम हो जाती है से बाहर रखा जाना चाहिए. तथ्य यह है कि C57BL 6 / माउस तनाव सबसे गommon neurobiological और आनुवंशिक अनुसंधान में इस्तेमाल तनाव इस समस्या के प्रभाव exacerbates. इस पत्र में, हम पूंछ चढ़ाई व्यवहार है कि हमारे 2,3 प्रयोगशाला में विकसित किया गया था करने के लिए एक समाधान की विस्तृत जानकारी दी . आदेश में पूंछ - चढ़ाई व्यवहार को रोकने के लिए, हम चूहों की पूंछ के आधार पर चारों ओर खोखले सिलेंडर की जगह है. चूहों इन सिलेंडरों पर पकड़ नहीं है और इसलिए उनके पूंछ नहीं चढ़ाई कर सकते हैं कर सकते हैं. हमने देखा है कि कोई चूहों उनके पूंछ चढ़ा है जब इस 2,3 दृष्टिकोण का उपयोग कर. इसके अतिरिक्त, हम पता चला है कि लिथियम के एंटी की तरह प्रभाव, TST में पहले 29 सिलेंडरों की इन प्रकार के बिना, रिपोर्ट कर रहे हैं अभी भी मौजूद है जब उन्हें 3 का उपयोग कर.

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि TST चूहों जैसे भारी कृन्तकों के लिए अनुशंसित नहीं है, क्योंकि यह इन जानवरों के लिए संभावित दर्दनाक केवल उनके पूंछ के द्वारा अपने वजन का समर्थन है. द्वारा एक ही टोकन, सावधानी असामान्य रूप से भारी चूहों (जैसे चूहों के लिए प्रयोग किया जाता के साथ लिया जाना चाहिएमॉडलिंग मोटापा), और इन मामलों में प्रयोगकर्ताओं मजबूर तैरने 10 परीक्षण यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि किसी भी जोड़तोड़ कि समग्र गतिविधि के स्तर को प्रभावित कर सकते हैं संभवतः नकली निष्कर्ष करने के लिए अग्रणी TST में गतिशीलता को बदल सकता है जैसे वैकल्पिक परीक्षण के लिए दिखना चाहिए. इस वजह से, यह अलग व्यवहार परीक्षण है कि खुले मैदान परीक्षण 30 जैसे चूहों में समग्र गतिविधि के स्तर को मापने के साथ TST के परिणामों को सत्यापित करने के लिए महत्वपूर्ण है.

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Disclosures

लेखक ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा.

Acknowledgments

इस अध्ययन को अनुदान NIHM MH091816 R01 और R21 TDG MH084043 द्वारा समर्थित किया गया.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Tape
Timer
Video Camera
White Noise Generator (optional)
Climbstoppers (optional; depending upon strain used)

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References

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Can, A., Dao, D. T., Terrillion, C.… More

Can, A., Dao, D. T., Terrillion, C. E., Piantadosi, S. C., Bhat, S., Gould, T. D. The Tail Suspension Test. J. Vis. Exp. (59), e3769, doi:10.3791/3769 (2012).

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