Summary
Moxi Z लघु स्वचालित सेल काउंटर एक उपन्यास साधन है कि पेटेंट सेंसर पतली फिल्म प्रौद्योगिकी और एक मालिकाना सॉफ्टवेयर एल्गोरिथ्म करने के लिए आकार देने वाले प्रदर्शन के साथ और कणों का एक व्यापक रेंज आकार की गिनती के रूप में के रूप में अच्छी तरह लिए monodisperse के समग्र स्वास्थ्य का निर्धारण कल्टर सिद्धांत को जोड़ती है स्तनधारी सेल संस्कृतियों. यह प्रोटोकॉल गिनती और सेल संस्कृतियों के स्वास्थ्य का आकलन करने के लिए इस उपकरण के उपयोग का वर्णन करता है.
Protocol
1. नमूनों की तैयारी
- पतला सेल निलंबन ORFLO मंदक या एक उपयुक्त मंदक के साथ इतना है कि सेल एकाग्रता साधन (प्रकार एम कैसेट के लिए 3,000 करने के लिए 500.000 कोशिकाओं / एमएल, या 3000 के लिए 2,500,000 कोशिकाओं / एस प्रकार के कैसेट के लिए एमएल) का परिचालन सीमा के भीतर है.
- 01:05 से 01:20 (टाइप एम कैसेट) के 01:05 मन्दन प्रकार कैसेट नहीं मन्दन मन्दन सबसे स्तनधारी सेल लाइनों की सिफारिश की है, लेकिन उपयुक्त मन्दन कोशिका प्रकार और बोने घनत्व पर निर्भर करेगा. एक सटीक गणना करने के लिए आवश्यक मात्रा लगभग 75 μL है.
2. रनिंग नमूने
- पर सत्ता बटन दबाने और होम स्क्रीन प्रदर्शित किया जाएगा द्वारा Moxi Z बारी.
- प्रेस नीचे ट्रे और Moxi पिपेट 75μL नमूना ... स्क्रीन प्रदर्शित किया जाएगा जेड में एक कैसेट डालें.
- कैसेट (नीले अंडाकार का भरण बंदरगाह में एक 75 μL नमूना विंदुक1 या 2 कैसेट का जो अंत पर निर्भर करता है, लेबल उपकरण में डाला गया था). ये डिस्पोजेबल कैसेट, जो 2 परीक्षण किया जा सकता है. नोट: प्लेस लोडिंग में सीधे विंदुक ~ कोण ° 45 में अच्छी तरह से इतना है कि टिप अच्छी तरह से सामने होंठ के तहत पकड़ा है टिप. जब वितरण, यह महत्वपूर्ण है कि वैक्यूम नहीं "आगे मिलता है" तरल पदार्थ के वितरण की हवा की जेब के रूप में पैदा करने के लिए कैसेट में प्रवेश कर सकता है. यह वितरण के दौरान अच्छी तरह से अधिक तरल पदार्थ के रूप का एक छोटा सा मनका (अच्छी तरह से प्रवेश के आकार) की सिफारिश की है.
- सबसे स्तनधारी कोशिकाओं की गिनती करने के लिए, कहीं भी स्क्रीन को छूने के लिए शुरू. बहुत छोटे कण (4 से 8 माइक्रोन प्रकार एम और 3-8 प्रकार की औसत व्यास माइक्रोन के लिए औसत व्यास) की गिनती के लिए, Moxi Z लघु कण मोड में चला जा सकता है. नोट: कैसेट प्रकार स्क्रीन के शीर्ष पर काली पट्टी में संकेत दिया है. इस मोड में, Moxi Z डिफ़ॉल्ट के रूप में 2 से 10 माइक्रोन व्यास पैमाने सेट और गिनती यू प्रदर्शनछोटे कोशिकाओं का पता लगाने के लिए अनुकूलित मापदंडों गाना. यहाँ छुआ लघु कण मोड बटन के लिए परीक्षण शुरू करने और इस मोड में चला (काला वर्ग) प्रेस.
- Moxi Z परीक्षण शुरू करने और सेल गिनती परिणाम के लगभग 8 प्रकार (एम कैसेट) सेकंड या 15 सेकंड (एस प्रकार कैसेट) में पूरा हो जाएगा.
- वक्र फिटिंग और MVI गणना स्वचालित रूप से शुरू करते हैं और केवल कुछ अतिरिक्त सेकंड की आवश्यकता होती है. जब एक उपयुक्त फिट पाया जाता है, परिणाम तो स्वचालित रूप से स्क्रीन पर प्रदर्शित होगा.
- Gating डिफ़ॉल्ट अधिग्रहण मोड, वक्र फ़िट गणना के Gating मोड में टॉगल बटन दबाएँ.
- इस बिंदु पर कैसेट इकाई से हटाया जा सकता है.
3. प्रबंध डेटा
- यदि AutoMode स्केलिंग बंद हो गया है, परिणाम शुरू में 2-34 माइक्रोन का व्यास (प्रकार एम कैसेट) पैमाने पर एक वक्र फिट गिनती या 2-26 μ के लिए प्रदर्शित कर रहे हैंमीटर (एस प्रकार कैसेट). यदि Automode स्केलिंग पर है, तो Moxi जेड स्वचालित रूप से सीमा है कि वक्र फिट आबादी की चौड़ाई के सबसे करीब है, जबकि यह सुनिश्चित करना सभी वक्र फिट डेटा प्रदर्शित किया जाता है के लिए क्षैतिज अक्ष (x-अक्ष) पैमाने पर होगा.
- यदि AutoMode स्केलिंग बंद है, मैन्युअल रूप से एक उच्च संकल्प पर परिणाम प्रदर्शित, 2-26 माइक्रोन (टाइप एम) चिह्न या 2-18 माइक्रोन चिह्न (एस प्रकार) छुओ. टिप्पणी: कैसेट प्रकार नीले बॉक्स में स्क्रीन के बाईं शीर्ष पर संकेत दिया है. यह जब छोटे कोशिकाओं या कणों दोनों वक्र फिटिंग के रूप में के रूप में अच्छी तरह से उपयोगकर्ता नेत्रहीन डेटा की बारीकियों भेदभाव के क्षमता क्षमताओं में सुधार की गिनती की सिफारिश की है.
- क्षैतिज संकल्प में वृद्धि पर, स्केलिंग बटन गतिशील उपलब्ध x-अक्ष के पैमाने पर्वतमाला के बीच साइकिल चालन के लिए अनुमति को समायोजित करेगा: 2-34, 2-26, 2-18, और प्रकार एम कैसेट के लिए 2-10 माइक्रोन, या 2 एस प्रकार के कैसेट के लिए -26, 2-18, 2-10 और माइक्रोन. यह सुविधा केवल availa हैble तुरंत एक सेल गिनती के बाद.
- हिस्टोग्राम के बाईं ओर के तहत वक्र फिट या gated क्षेत्र के लिए जानकारी गिनती / (कोशिकाओं मिलीलीटर) एक ब्लैक बॉक्स में प्रदर्शित होता है. हिस्टोग्राम के दाईं ओर के तहत सेल आकार जानकारी मीन ब्लैक बॉक्स में प्रदर्शित होता है.
- MVI मूल्य हिस्टोग्राम के ऊपर सही पर एक नीला बॉक्स प्रदर्शित होता है. यदि परीक्षण छोटे कण मोड में चला गया था, MVI लागू करते हैं और नहीं MVI = एसपीएम "के रूप में प्रदर्शित किया जाएगा करता है. इसके अतिरिक्त यदि कक्षों की एकाग्रता MVI ऑपरेटिंग रेंज, MVI रेंज के बाहर = "संदेश के बाहर प्रदर्शित किया जाएगा.
- वर्तमान हिस्टोग्राम बचाने के लिए, ठीक है आइकॉन को छू. यह टेस्ट एरोटिक जहां एरोटिक इसी परीक्षण संख्या के नाम के साथ डेटा को बचाता है.
- मैन्युअल हिस्टोग्राम गेट, वक्र फ़िट गिनती बटन को टॉगल छुओ. यह डिफ़ॉल्ट अधिग्रहण मोड Gating बनाता है. तो प्रत्येक नीले gating के मार्कर स्लाइड द्वार सेट या वें नलई ठीक गेट के समायोजन के लिए बाएँ और दाएँ तीर (इन नीले gating के मार्कर को छू पर दिखाई देते हैं) केवल मार्करों के बीच कोशिकाओं गिना जाता है. हिस्टोग्राम ऊर्ध्वाधर पैमाने पर स्वचालित रूप से जनसंख्या वक्र फिट आयाम के आधार पर बढ़ाया है. इस ऊर्ध्वाधर पैमाने को समायोजित करने के लिए, ज़ोर से मारना या हिस्टोग्राम क्षेत्र में स्क्रीन के नीचे
- Gated गणना परिणाम बटन टच वक्र फिट मोड पर लौटने के प्रदर्शन और वक्र फिट डिफ़ॉल्ट अधिग्रहण मोड.
- तो ठीक है आइकन प्रेस करने के लिए परिणामों को बचाने के लिए और होम स्क्रीन पर लौटने के लिए. परिणामों को हटाने के लिए, किसी भी समय हटाएँ आइकन प्रेस करने के लिए स्थायी रूप से परीक्षण के परिणामों को हटा दें.
4. पहले एक्वायर्ड डेटा का विश्लेषण
- को बचाया परीक्षण खोलने के लिए, होम स्क्रीन पर हिस्टोग्राम आइकन प्रेस.
- नौ बचाया histograms के लिए माउस को स्क्रीन पर प्रदर्शित किया जाएगा.प्रेस ब्याज के परीक्षण के लिए उपयुक्त चिह्न या पृष्ठ के ऊपर या माउस नीचे करने के लिए और अधिक परीक्षण के परिणाम को देखने के दबाएँ.
- प्रत्येक हिस्टोग्राम या तो वक्र फ़िट गणना मोड या Gated गणना मोड में खोला जाएगा, यह कैसे सहेजा गया है पर निर्भर करता है. Gated गणना मोड में, gating के मार्करों तैनात किया जा के रूप में स्वतंत्र रूप से प्रत्येक नीले gating के मार्कर फिसलने से वांछित कर सकते हैं वांछित शिखर को छू ऑटो गेट. टच Gated गणना और वक्र फ़िट गणना मोड के बीच टॉगल करने के लिए.
- ज़ूम और Unzoom माउस प्रेस हिस्टोग्राम की ऊर्ध्वाधर पैमाने को समायोजित करने के लिए. ऊर्ध्वाधर पैमाने पर भी प्रदर्शन को बढ़ाने के ऊपर या नीचे (कम) पर खड़ी एक उंगली swiping के द्वारा बदला जा सकता है.
- हटाएँ आइकन प्रेस करने के लिए स्थायी रूप से परीक्षण के परिणामों को हटा दें.
- प्रेस ठीक है आइकनपरीक्षण के परिणाम को बंद करने और होम स्क्रीन पर लौटने. (नोट: जूम देखने को बचाया नहीं किया जाएगा.)
5. एक पीसी के लिए डेटा स्थानांतरित
- डेटा एक पीसी या मैक के लिए Moxi जेड यूएसबी केबल plugging द्वारा एक Orflo Moxichart आवेदन का उपयोग कर पीसी या USB हस्तांतरण के माध्यम से स्थानांतरित किया जा सकता है. ब्लूटूथ के स्थानांतरण के लिए (MoxiChart), पहले Moxi Z इकाई के घर स्क्रीन पर ब्लूटूथ आइकन दबाकर इकाई ब्लूटूथ आईडी निर्धारित.
- कंप्यूटर पर, MoxiChart आवेदन खोलने के लिए और ऊपरी दाएँ कोने में ब्लूटूथ आइकन पर क्लिक करें तो, उपकरण है जो Moxi जेड के ब्लूटूथ आईडी से मेल खाती है का चयन करें और अपलोड फ़ाइलों के लिए एक गंतव्य फ़ोल्डर का चयन करें.
- Moxichart स्वचालित रूप से ब्लूटूथ कनेक्शन के माध्यम से निर्दिष्ट निर्देशिका में सभी फ़ाइलों को हस्तांतरण होगा.
- (MoxiChart) ब्लूटूथ या यूएसबी से स्थानांतरित फ़ाइलें और analy खोला जा सकता हैMoxiChart आवेदन के साथ जेड सीधे, या स्वरूपित कर रहे हैं क्योंकि वे csv फ़ाइलें., वे सीधे अतिरिक्त / कस्टम विश्लेषण के लिए किया जा सकता है Microsoft Excel या अन्य डेटा विश्लेषण प्रोग्राम में खोला.
6. प्रतिनिधि परिणाम
Moxi जेड की सटीक सटीकता का आकलन करने के लिए, HEK 293 कोशिकाओं HELA कोशिकाओं, चो K1, खमीर, Jurkat E6-1 कोशिकाओं, PC12 कोशिकाओं, और गिना जाता है 0-500,000 कोशिकाओं से लेकर सांद्रता के साथ मनका निलंबन सटीक-calibrated / एमएल (प्रकार एम कैसेट) और 0-2 - 2.5e 6 कोशिकाओं / एमएल (एस प्रकार कैसेट) गिना गया और एक कल्टर Z2 और Moxi जेड का उपयोग सभी स्तनधारी कोशिकाओं अमेरिकी प्रकार संस्कृति संग्रह (ATCC) से प्राप्त किया गया की तुलना में और सुसंस्कृत रूप में पहले से 7-11 वर्णित है. संक्षेप में, कोशिकाओं को निलंबन में 75 मिमी 1640 RPMI (Jurkat E6-1, PC12), सदस्य कोशिकाओं (HEK 293, HeLa) के, या F12K (चो K1) कोशिकाओं के मुख्य मीडिया के साथ 2 टिशू कल्चर बोतल में संवर्धित किया गया. सभी मीडिया के साथ पूरक10% से भ्रूण गोजातीय सीरम और 100 यू penicillin/100 μg स्ट्रेप्टोमाइसिन. बोतल एक मशीन में 37 डिग्री सेल्सियस पर 5% सीओ 2 के साथ बनाए रखा गया. कोशिकाओं हर 3 दिन passaged गया. खमीर कोशिकाओं (X5, सी. albicans, विन 13) दान और तुरंत के रूप में प्रदान की इस्तेमाल किया गया ~ 500,000 कोशिकाओं प्रकार एम कैसेट और डेटा ~ ~ 2 - 2.5e 6 प्रकार कैसेट कोशिकाओं / मिलीग्राम / मिलीग्राम की प्रारंभिक नमूना सांद्रता कल्टर Z2 का उपयोग कर स्थापित किया गया. बाद सैद्धांतिक एकाग्रता स्तर शारीरिक बफ़र्स (Isoton द्वितीय या हांक संतुलित नमक समाधान) के साथ धारावाहिक dilutions के माध्यम से तैयार थे. प्रत्येक एकाग्रता में, समान नमूने दोनों प्रणालियों द्वारा मापा गया और एक दूसरे के खिलाफ साजिश रची. चित्रा 2 में देखा है, वहाँ एक मजबूत रैखिक संबंध था (प्रकार एम r 2> 0.9886, प्रकार एस 2 r> 0.9781) सभी नमूनों के लिए मायने रखता है के बीच. सांद्रता भी उम्मीद / सैद्धांतिक दोनों Moxi Z और Z2 के साथ सेल सांद्रता की तुलना में थे (
सटीक आकलन, HEK 293 और HeLa कोशिकाओं की गिनती का उपयोग कर प्रदर्शन किया गया कल्टर Z2, Moxi जेड, और एक hemocytometer बदलाव का मतलब (CV, n = 19) सेल मायने रखता है का उपयोग कर Moxi Z (टाइप एम कैसेट) के, कल्टर Z2 और एक hemocytometer के गुणांक के साथ CV 200,000-300,000 कोशिकाओं / एमएल रेंज में 5 अलग गिनती से मापा है गणना की गई. Moxi जेड के छोटे औसत सीवी (चित्रा 4) के Z2 की तुलनीय और कल्टर आधारित गिनती प्रौद्योगिकियों के साथ ही प्राप्य परिशुद्धता के उच्च स्तर का प्रतिनिधि है.
Moxi Z उपकरण के साइज़िंग परिशुद्धता खरीदा, परिशुद्धता कैलिब्रेटेड polystyrene मनकों की माप के माध्यम से अगले मूल्यांकन किया गया था. Moxi जेड से औसत कण आकार माप (n = 5) निर्माता रिपोर्ट आकार के खिलाफ साजिश रची थे. मैं के रूप में देखा जा सकतापता चित्रा 5, Moxi जेड माप लगातार एक उच्च रैखिक सहसंबंध (आर 2 = .9989) के साथ निर्माता मूल्यों मिलान.
आकार और गिनती की जानकारी के अलावा, Moxi Z एक अभिकर्मक मुक्त, एक रिपोर्ट Moxi व्यवहार्यता (MVI) सूचकांक मूल्य के साथ स्तनधारी सेल संस्कृति स्वास्थ्य की सामान्य मूल्यांकन प्रदान करता है. इस सूचकांक में कुल कण की गिनती के लिए सम्मान के साथ ब्याज की आबादी में कोशिकाओं की संख्या के अनुपात से उत्पन्न होता है. MVI माप क्षमताओं का प्रदर्शन, MVI रीडिंग (प्रकार एम कैसेट) मानक मैनुअल और प्रवाह cytometric लाइव / मृत माप तकनीक की तुलना में थे मृत HEK (<व्यवहार्य 10%) 293 और HELA कोशिकाओं की आबादी को जीवित कोशिकाओं की रात incubations के माध्यम से पोषक तत्व मुक्त, 37 सोडियम मंदक (Isoton द्वितीय, Beckman कल्टर) युक्त फ्लोराइड डिग्री सेल्सियस में बनाया गया था नियंत्रित सैद्धांतिक व्यवहार्यता स्तर ratiometrically रहते हैं और मृत कोशिकाओं के मिश्रण में जाना सांद्रता द्वारा तैयार किए गए. रिसulting समाधान दोनों hemocytometer मायने रखता है और प्रवाह cytometer माप के साथ दो प्रतियों में व्यवहार्यता स्तर के लिए विश्लेषण किया गया. Hemocytometer माप 0.1% Trypan ब्लू समाधान और कोशिकाओं के एक पारंपरिक 50/50 मिश्रण का उपयोग किया गया. प्रवाह cytometry माप अमरूद पीसीए कोशिकामापी (मर्क) का उपयोग कर Viacount अभिकर्मक और निर्माता - निर्दिष्ट प्रोटोकॉल (मर्क) का उपयोग किया गया. चित्रा 6 में दिखाया गया है, Pearson सहसंबंध गुणांक (2) आर HEK कोशिकाओं और HELA कोशिकाओं "MVI डेटा के लिए अनुरूप hemocytometer व्यवहार्यता प्रतिशत की रैखिक फिट" मान 2 = .९९३७ और r 2 = 0.९७२८ क्रमशः, आर थे. इन परिणामों दिखाना है कि इस दृष्टिकोण सेल viabilities है कि लाइव / मृत एक प्रवाह cytometer या hemocytometer का उपयोग प्राप्त मापन के लिए तुलना कृपापूर्वक का एक व्यापक रेंज भर में संस्कृति के स्वास्थ्य की जानकारी प्रदान करता है.
टेबल्स और आंकड़े (Dittami एट अल, 2011.) 15:
आकृति 1. पतली फिल्म कल्टर गिनती: विद्युत वर्तमान पतली फिल्म कैसेट की सेल सेंसिंग के क्षेत्र के माध्यम से पारित कर दिया है. के रूप में कक्षों CSZ के माध्यम से एक फ़ाइल प्रवाह, वोल्टेज में क्षणिक बढ़ जाती है Moxi जेड द्वारा मापा
चित्रा 2. Moxi जेड मायने रखता है को कल्टर Z2 की गिनती के लिए तुलना कर रहे हैं सेल और मनका निलंबन की समान मायने रखता है दोनों एक कल्टर Z2 और Moxi जेड गिनती का उपयोग किया गया Moxi जेड गिनती की गिनती मान (पता 3-4 =) औसत के संबंध में प्लॉट किए जाते थे. कल्टर इसी Z2 मायने रखता है और आर 2 रैखिक फिट की मूल्यों को निर्धारित किया गया है. ) एक प्रकार एम कैसेट - 0 की एकाग्रता सीमा - 500.000 कोशिकाओं / एमएल. बी) एस प्रकार कैसेट - 0 की एकाग्रता सीमा - 2 - 2.5e 6 / ml.Error बार्स ± 1 मानक विचलन का संकेत
चित्रा 3. Moxi Z एकाग्रता माप सैद्धांतिक सेल सांद्रता बनाम एक प्रकार) एम कैसेट - सैद्धांतिक एकाग्रता मूल्यों एक प्रारंभिक 500.000 कोशिकाओं / एमएल नमूना धारावाहिक dilutions से तैयार बी) एस प्रकार कैसेट - 2.5e 6 कोशिकाओं / एमएल नमूना सैद्धांतिक एकाग्रता मूल्यों एक प्रारंभिक 2 के धारावाहिक dilutions से तैयार किए गए थे. त्रुटि बार्स ± 1 मानक विचलन का संकेत मिलता है.
चित्रा 4. कल्टर Z2, Moxi जेड (प्रकार एम कैसेट), और Hemocytometer के लिए रूपांतर की गुणांक. बदलाव का मतलब गुणांक (CV, n = 19) HEK 293 और HeLa कोशिकाओं की गिनती के प्रत्येक दृष्टिकोण के लिए 5 अलग से मापा सीवी के साथ गणना की गई 300,000 कोशिकाओं / मिलीलीटर रेंज HEK 293 और HELA कोशिकाओं 200.000 में गिना जाता है. त्रुटि बार्स ± 1 मानक विचलन का संकेत मिलता है.
चित्रा 5. कण आकार Moxi Z - Moxi जेड का उपयोग माप के प्रेसिजन मनका आकार मापा (प्रकार एम कैसेट) बनाम निर्माता मनका आकार की सूचना दी. त्रुटि बार्स ± 1 मानक विचलन का संकेत मिलता है.
6 चित्रा. संस्कृति स्वास्थ्य MVI का उपयोग आकलन MVI (प्रकार एम कैसेट) बनाम दृश्य, trypan नीला दाग व्यवहार्यता एक hemocytometer का उपयोग मायने रखता है और अमरूद पीसीए Viacount व्यवहार्यता माप की तुलना
Discussion
अंतर्निहित कार्यान्वयन कल्टर दृष्टिकोण अत्यधिक माप के समग्र सटीकता के नियतात्मक हो सकता है. "संयोग घटनाओं जहां एक साथ दो या अधिक कक्षों एपर्चर के माध्यम से पारित कर रहे हैं और एक भी बिजली घटना के रूप में मापा के लिए कच्चे सेल गिनती के एक महत्वपूर्ण क्षेत्र में सुधार है. "संयोग घटनाओं" त्रुटि है जो सेल आकार और क्लस्टरिंग की डिग्री (डेविस एट अल 1967) 6 सहित कारकों की एक संख्या पर निर्भर करता है के लिए योगदान एक परिणाम के रूप में, किसी भी नमूने के लिए आवश्यक संयोग सुधार किया जा भविष्यवाणी नहीं की सेल / कण प्रकार के बीच व्यापक रूप से और भी समान सेल प्रकार के अलग अलग संस्कृतियों के बीच अलग कर सकते हैं. सिद्धांत, कल्टर द्वारा प्रारंभिक प्रकाशनों में निहित की स्थापना की, कच्चे मनाया घटनाओं और एक अनुभव से निर्धारित कण विशेष सुधार कारक, Z की संख्या के आधार पर गिनती के एक लघुगणक समायोजन के आवेदन शामिल है. जबकि सही मायने रखता है ठीक से टी के साथ हासिल की जा सकता हैउसके सुधार एल्गोरिथ्म है, यह इसके व्यावहारिक प्रयोज्यता कोशिका प्रकार और सही रूप में इसके मूल्य की भविष्यवाणी में इसी कठिनाई के बीच z के मूल्यों में बड़े बदलाव के कारण में सीमित है. यहाँ, "सच" सेल Moxi Z वक्र ढाले संयोग सुधार एल्गोरिथ्म के साथ संयोजन के रूप में पहचान की गिनती का उपयोग कर, Moxi Z गतिशील संयोग सच सांद्रता को प्राप्त करने के लिए सही है. 500,000 कोशिकाओं / मिलीलीटर (प्रकार एम कैसेट) और 3,000 - 2 - 2.5e 6 कोशिकाओं / एमएल (एस प्रकार कैसेट) जब उच्च अंत कल्टर Z2 का उपयोग कर परिणाम प्राप्त की तुलना में, Moxi जेड 0 के एक एकाग्रता रेंज भर में तुलनीय मायने रखता है का उत्पादन . इसके अलावा, Moxi Z भिन्नता के मायने में एक समान कम गुणांक और कण आकार में एक सटीक है कि सोने के मानक, सेल गिनती में कल्टर तकनीक की विशेषता है के साथ इस गणना सटीकता प्राप्त होता है.
इसके अलावा, यहाँ प्रस्तुत आंकड़ों से संकेत मिलता है कि Moxi Z बहुमूल्य जानकारी प्रदान कर सकते हैंसेल संस्कृतियों के समग्र स्वास्थ्य के बारे में Moxi Z एक मालिकाना सॉफ्टवेयर इस संस्कृति स्वास्थ्य मूल्यांकन निर्धारित एल्गोरिथ्म के साथ वक्र ढाले दृष्टिकोण का लाभ उठाता है. Morphological कोशिका मृत्यु के साथ जुड़े blebbing के रूप में, परिवर्तन, अलग तोड़ने, और बड़ा विकृतियों (Kataoka और Tsuruo 1996, Liegler एट अल, 1995 Sheridan एट अल 1981) 12-14, यह संभव Moxi-Z impedimetric मतभेद के बीच भेद करने के लिए बनाने के लिए आबादी और मृत सेल / मलबे आबादी रहते हैं. MVI आकार / संस्कृति कण वितरण का विश्लेषण लिए कण मलबे के रिश्तेदार योगदान, सिकुड़ा हुआ परिगलित कोशिकाओं, और वक्र सज्जित ब्याज की सेल की आबादी की पहचान के द्वारा उत्पन्न होता है. MVI मूल्य जिससे आबादी या समग्र कण जनसंख्या प्रोफ़ाइल के लिए सम्मान के साथ monodisperse जनसंख्या की गिनती के ratiometric उपाय सूचकांक दर्शाता है. यह मान तो है algorithmically समायोजित आधारित जनसंख्या के आँकड़े और अनुभवजन्य टिप्पणियों. Becausई MVI पारंपरिक धुंधला दृष्टिकोण से अन्य मानकों पर दिखता है, यह करने के लिए इन तकनीकों दर्पण की उम्मीद नहीं है लेकिन बजाय एक सेल संस्कृति के स्वास्थ्य में एक मूल्यवान विकल्प देखने के मलबे और सूक्ष्म contaminants के सम्मान के साथ विशेष रूप से प्रदान करता है.
सारांश में, सेल Moxi जेड काउंटर एक अति लघु benchtop साधन है कि सटीक, सेल गिनती की प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य, assays सेल आकार, और सेल स्वास्थ्य कल्टर सिद्धांत और वक्र ढाले सॉफ्टवेयर एल्गोरिदम एक पेटेंट सेंसर पतली फिल्म प्रौद्योगिकी के साथ संयुक्त का उपयोग प्रदान करता है . आठ सेकंड में, व्यास में 25 microns (34 माइक्रोन 2 की गतिशील रेंज -) प्रकार एम कैसेट के साथ यह 4 से लेकर कणों गिनती करने में सक्षम है. 15 सेकंड में, व्यास में 20 microns (26 माइक्रोन 2 की गतिशील रेंज) एस प्रकार के कैसेट के साथ यह 3 से लेकर कणों गिनती करने में सक्षम है. इसके अलावा, Moxi Z अभिकर्मकों के उपयोग के बिना स्वास्थ्य आकलन करता है. यह बहुत कम श्रम क ¥nsive और मैनुअल गिनती से व्यक्तिपरक है. मानक कल्टर गिनती तुलना में, Moxi तेजी है, काफी छोटे, अधिक सूचना प्रदान करता है, काफी कम रखरखाव की आवश्यकता है, आसान है का उपयोग करने, और लागत का एक अंश
Disclosures
ग्रेगरी से एम. Dittami और महामहिम Ayliffe Orflo प्रौद्योगिकी, कंपनी है कि डिजाइन, निर्माण और बेचता Moxi जेड रिचर्ड डी Rabbitt अंशकालिक प्रदान करता है, Orflo टेक्नोलॉजीज भुगतान परामर्श विशेषज्ञता के कर्मचारी हैं.
उत्पादन और इस लेख के लिए नि: शुल्क प्रवेश Orflo टेक्नोलॉजीज द्वारा प्रायोजित है.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ORFLO Diluent |  ORFLO |
MXA006 | |
| Cassette Dispenser | ORFLO | Stores up to 25 cassettes for convenient dispensing | |
| USB Cable | ORFLO | Connects instrument to PC/Mac or power adapter | |
| Power Adapter (US and EU models only) | ORFLO | Connects USB cable to an AC outlet | |
| USB Flash Drive | ORFLO | Stores Moxi Z software and user manual | |
| Calibration Check Beads | ORFLO | ||
| Electronic Calibration Cassette | ORFLO |
Electronic cassette for verifying proper system operation and calibration |
References
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