Endotel Keratoplasti için Kornea Donör doku hazırlanması

Summary

Endotel kornea nakli posterior kornea hastalıklarının tedavisi için cerrahi bir tekniktir. Daha az endotel hücre kaybı ve daha iyi sonuçlar ile ince ve daha simetrik greft doku sonuçları hazırlamak için Mekanik mikrokeratom diseksiyon. Diseksiyonlarında kornea nakli ameliyatı öncesinde göz bankada yapılabilir.

Abstract

Son on yıl içinde, kornea nakli cerrahi teknikler devrimci değişiklikleri ^1,2 uğramıştır. Kuruluşundan bu yana, geleneksel tam kat kornea nakli kornea hastalığı olanlarla sınırlı olan görme geri tedavi olmuştur. Bu yaklaşımın bazı sakıncaları yüksek bir ameliyat sonrası astigmatizma derecesi, öngörülebilir refraktif sonucu eksikliği ve oküler yüzey rahatsız içerir. Sadece arka korneal stromada, Descemet membranı ve endotel nakli Descemet sıyırma endotelyal keratoplasti (DSEK), gelişimi önemli ölçüde kornea endotel hastalığının tedavisinde değişti. DSEK daha küçük bir kesiden yapılır, bu tekniği, kanama veya ihraç onun riski ile 'açık gökyüzü' cerrahi önler ameliyat sonrası yara açılması sıklığını azaltmakta, öngörülemeyen refraktif sonuçlar azaltır ve transplant reddinin ^3-6 oranını azaltabilir.

ove_content "> Başlangıçta, DSEK için kornea donör arka lameller disseksiyon elle yapıldı ¹ değişken greft kalınlığı ve doku işleme sırasında hassas kornea endotel doku hasar görebilir. Otomatik lameller diseksiyon (Descemet sıyırma otomatik endotelyal keratoplasti, DSAEK) oldu bu gidermek için geliştirilmiştir konular. Otomatik diseksiyonu doku işleme minimal kornea endotel hücre kaybı ile DSAEK cerrahisi için düzgün ve ince doku greftleri oluşturmak için yardımcı olan mekanik mikrokeratom bıçak ile LASIK korneal flep oluşturulması gibi aynı teknolojiyi kullanmaktadır.

Göz bankaları yıllar boyunca cerrahi transplantasyon için tam kat kornea vermekteyiz. 2006 yılında, göz bankaları endotelyal keratoplasti için hazır kesilmiş kornea dokusu temin için yöntemler geliştirmeye başladı. Kornea cerrahların girişi ile, göz bankaları güvenli ve etkili bir arka lameller doku f hazırlamak için kapsamlı protokolleri geliştirmiştirya DSAEK cerrahi. Bu göz bankasında ameliyat öncesi gerçekleştirilebilir. Araştırma DSAEK ameliyat için göz bankasına hazır kesilmiş doku karşı cerrah hazırlanmış doku kullanılarak doku ⁷ veya hasta sonuçlarını ^8,9 kalitesi açısından anlamlı bir farklılık göstermektedir. Çoğu kornea cerrahları için, önceden kesilmiş DSAEK kornea dokusunun durumu zaman ve para ¹⁰ kaydeder ve ameliyathanede donör kornea diseksiyon yapılması stresi azaltır. Çünkü zamanında kaliteli arka lameller kornea sağlamak için göz bankaların yeteneği bölümünde, DSAEK kornea endotel hastalığın cerrahi yönetimi için standart tedavi haline gelmiştir.

Tanımlamakta olduğu prosedürü DSAEK cerrahi transplantasyon (Şekil 1) göz bankada arka lameller kornea hazırlıktır.

Protocol

1. Kurulum: Aseptik Teknik ¹¹

1. Laminar Flow Hood (LFH) açın.
2. Azot gazı kontrol ünitesi açın. Bu hortum konsol ünitesi ve Azot tank arasında bağlandığından emin olun. Üzerine gaz açın. Gaz ayar regülatörü tank 50-60 PSI olarak ayarlanması gerekir. Ünitede Türbin basıncı 3,3-3,4 Barlar okumalısınız.
3. Test düğmesine basın. Atmosfer basıncı altındaki 200 olmalıdır 700S ve pompalar 1 ve 2 'de okur. Test tamamlandığında ünite bipler. Göz koruma, uygulanabilir ve kapaklı Don maske. Elleri ve don non-steril eldiven yıkayın. Steril alanı oluşturmaya LFH ve açık giydirmeleri içinde steril kitleri yerleştirin.
4. Bir steril tıp bardak ve köklü steril alanın yanındaki steril gazlı bez ile tek steril plastik havzası yerleştirin. Tıp kabına steril izopropil alkol dökün. Ilaç kabına, aşağı ucu alkollü bez / ped ve yeri prob ile pakimetri probu silin. Prob ucu 10 m için izopropil alkol yıkanmalıdırinutes. Pakimetri probu 10 dakika ıslatılır sonra, plastik havzasında alkol ve yer prob kaldırmak için önceden doldurulmuş şırınga ile steril su ile prob ucu durulayın.
5. Aseptik teknik kullanarak, önceden hazırlanmış paket zaten bir parçasıdır sürece steril bölgeye steril öğeleri (bıçak, steril eldiven ve korneal görüntüleme odaları) açın ve bırakın.
6. Korunması medya ve LFH içinde yer (Şekil 2) kornea dokusu elde edilir.
7. Flakon (ler) açın ve uygun bir biohazard yuvasına kapak (lar) atmayın. Non-steril eldiven atın.
8. Steril eldiven giyilmesini. Pakimetre bulunur alanın tarafına önceden paketlenmiş olan plastik bir lavabo yerleştirin. Kaput reentering ve steril alan dokunmaktan kaput dışında hat önlemek için böyle bir şekilde çizgi güvence kaput dışında musluk ve infüzyon hattı yerine başak sonuna infüzyon hattı bağlayın.
9. Kornea doku transferi gerçekleştirin. Nazikçe si, doku ve orta dökünMevcut tüpten steril bir görüş odasına ngle hareket. Endotel tarafı yukarı tutmak için emin olun. Odasının kapağını yerleştirin. Steril alanda doku ve medya içeren odaları tutun. LFH gelen flakon (ler) çıkarın. Çıkarın ve steril eldiven atın.
10. Spike dengeli tuz solüsyonu (BSS) infüzyonu hattı ile şişe. Çalışma alanı yüzeyinden steril BSS yaklaşık dört ayak şişe asın.
11. Steril eldiven ve havlu ile steril elbisesi iki çift açın.
12. Altı dakikalık cerrahi fırçalayın ve kuru elleri gerçekleştirin.
13. Her iki çift steril eldiven, sonra steril önlük giyin.
14. Steril bölgeye alet kutuları ve yer içindekileri açın.
15. Metal lavabo veya ilaç kabına BSS çözümü 10-20 cc dağıtın. BSS solüsyonu ile steril pipet doldurun. Stopcock ve ön kamara infüzyonu portuna infüzyon hattı bağlayın ve küçük bir miktar pistonun üstünde görünecek şekilde BSS ile yıkayın.
16. Üzerine LFH pozisyon suni kamaragazlı bez top. Greft sıkma halkası tersine çevirerek Alt piston.

2. Prosedür

1. Forseps kullanarak hafifçe skleral rim tarafından kornea kavramak. Dikkatle aşağı endotel tarafı pistonun üstüne kornea merkezleme ederken BSS sistemi temizlemek için musluk açın. Baloncuklar kornea altında görünmüyorsa, BSS ile beslerken ve biraz bunları kaldırmak için kornea hareket devam ediyor. Hava kabarcıkları kaldırılır kez infüzyon durdurun. Kornea pistonlu (Şekil 3a) üzerinde ortalanmış olduğundan emin olun.
2. Baz kilitleme halkası üzerinde pozisyon ön kamara kapağını böylece baz açık alanlar haline kapağı uyum sekmeleri söyledi. Kapağı 15 ° saat yönünde çevirerek üssü haline kapağı kilitleyin. Piston yukarı kaldırın ve (Şekil 3b) tamamen sıkın.
3. Steril eldivenli parmak ile, yordamı gerçekleştirmek için yeterli basınç var olmasını sağlamak için korneanın en üst dokunun.
4. Yüzey o on probu yerleştirilerek pakimetri kontrol edinkalınlığı okuma elde etmek f kornea (Şekil 4). Standart sapması 10 daha az olmalıdır. Eğer yoksa, ölçüm geri almak. Pakimetri gerçekleştirmek için kullanılan değildi steril eldivenli eli ile, pakimetri yapılan el türbin hortum geçmek ve kontrol ünitesi içine türbin hortumu vidalayın. Yardımcı teknisyen rekor pakimetri okuma var.
5. Kontamine eldiven çıkarın.
6. Steril bir işaretleme kalemi kullanarak, korneanın merkezi (veya cerrah hiçbir işaretleme tercih ederse işareti yok) doğru limbus bir 4mm çizgi çizin. Kornea üstünde BSS beş damla yerleştirmek için pipet kullanın.
7. Özel talimatlar cerrah tarafından sağlanan sürece önceden kesilmiş pakimetri ölçümü en az 600 mikron ise, 300 mikron kafanın kullanılacaktır. 600 mikron üzerinde, 350 mikron kesici kafa kullanılacaksa.
8. Konu siz ve yukarı bakacak şekilde sayısına doğru bakacak şekilde, mikrokeratom kafasının sağ tarafına doğru bıçak yüklemek ilk sonuna işaret, iletişim wi kaçınarakbıçak th.
9. Her tarafında başı dik, türbin üzerine kafa vidalayın. Yapay odası parmaklarla sıkın.
10. Türbini hortum üzerine türbin vidalayın.
11. 5 saniye süreyle steril su ve nabız türbin kesme kafası daldırarak, bir kez vakum pedalına basarak bıçak salınım test edin.
12. Piston sıkın.
13. 05:00 de montaj sonrası ve konumu ile tabanı üzerine Yeri mikrokeratom. Basın ve bıçak (Şekil 5a) salınacaktır türbin pedalı basılı tutun.
14. Işaret parmağı ve başparmak kullanarak, taban ve türbin üst arasındaki mikrokeratom yarıda tutun. Pürüzsüz, hatta yoluyla ve kornea kesen yapmak bilek çevirin. Yayın türbin pedal ve düz ünitesi kapalı mikrokeratom kaldırın. Vakum (Şekil 5b) kapatmak için vakum pedalına basın.
15. Steril eldiven ve kornea kapağı sonra yeniden kontrol pakimetri okuma Don olmanın ikinci kalınlığı okuma elde etmek için kornea yüzeyinde probu yerleştirilerek kaldırılırdoku çok ince ve kolayca zarar olduğunu dikkatli. Kontamine eldiveni çıkarın. Teknisyeni rekor ikinci pakimetri okuma yardım var.
16. İstenirse steril işaretleme kalemi kullanarak, suni odasında rezidüel stromal yatağın orta periferal kenarında, cerrah tarafından bir işareti koyun. Rezidüel stromal yatağa steril BSS birkaç damla koyun.
17. Mikrokeratom gelen anterior kornea kapağı (Şekil 6) çıkarın ve yapay ön kamara gelen kornea çıkarmadan önce korneanın üzerine değiştirin. Cap doğru varsa kap hizalamak için işaretleme periferik kullanılarak korneanın merkezli olmalıdır. Yavaşça kornea üzerine kapağı yeniden konumlandırmak için sürüntü mızrak kullanın. Ön kapak altında herhangi bir BSS emmek için taze mızrak kullanın.
18. Açık musluk, ters odası açmak ve alt piston deforme gelen kornea önlemek için yeterince yavaş. Taban kilidini ve tabanından yapay odasına fincan itmek BSS akışı baskısı sağlar. Forseps ile yavaşça çekint 9 kornea jant, fincan gevşetmek için 12 ve 03:00 pozisyon. Bir kez gevşetilmiş, kornea kaldırmak için 12 saat pozisyon forseps kullanabilir. Izleme odası, endotel tarafı yukarı (Şekil 7) kornea yerleştirin. Izleme odası kapağı yerleştirin. Steril eldiven çıkarın.
19. Haznesi kapağı incelemekte sıkın.
20. Kesme sonrası biomikroskop değerlendirme ve kornea ve kayıt bulguların speküler mikroskopi gerçekleştirin.
21. Buzdolabının uygun bölümünde yer kamara (lar).
22. Cerrah nakil için Paketi (Şekil 8).

3. Temsilcisi Sonuçlar

Pürüzsüz, düzgün lameller kornea donör doku verici kornea sonuçları doğru mekanik mikrokeratom diseksiyonu. Bu kesitte korneanın optik koherens tomografi (OCT) görüntü (Şekil 9) ile gösterilir. Pachymet ile ölçülen nihai posterior kornea dokusu yeterli kalınlıkta olması gerekirry. Michigan Göz Bankası son 6 ay içinde, ortalama işlem öncesi kornea kalınlığı 558 mikron idi ve posterior kornea dokusunun post-processing kalınlığı 158 mikron idi. Seksen yedi 100-200 mikron,% 10.9 ölçülen> 200 mikron ve% 2.1 ölçülen <100 mikron arasında ölçülen mikrokeratom-disseke verici bir doku yüzde.

Posterior kornea dokusu nakli alıcıya geliştirilmiş endotel fonksiyonu sağlamak için yüksek endotel hücre yoğunluğu (AKD) muhafaza etmelidir. Speküler mikroskop EÇG ölçmek için kullanılır. Geçtiğimiz 6 ay içinde, Michigan Göz Bankası endotelyal keratoplasti için uygun sayılır kornea dokusunun tüm> 2200 hücre / mm ^{2 'lik} bir EÇG vardı. Önceden kesilmiş DSAEK dokusunun yüzde doksan dokuzu, bir post-processing ECD> 2400 hücre / mm ² ve% 19 bir EÇG vardı> 3000 hücre / mm ² vardı. Post-processing ECD öncesi için ortalama değişim% 1.2 (p = 0.0003, eşleştirilmiş iki yönlü t-testi) çok azdı.İşlem sırasında oluşabilecek komplikasyonlar basınç kaybı, asimetrik diseksiyon ve belirgin doku girinti (kornea endotel hücre kaybı ile sonuçlanan) içerir. Yanlış diseksiyonu da doku perforasyona neden olabilir.

Şekil 1. 1e için Endotel Keratoplasti Şekil 1a için Kornea Doku Hazırlık Genel Şema verici kornea hazırlık kesit ifadeleridir. 1i için Şekil 1f DSAEK ameliyat sırasında nakli alıcının kornea kesit ifadeleridir.

1. Donör kornea yapay bir ön kamara monte ve mikrokeratom kafası ile disseke edilir.
2. Doku diseksiyonu sonra, iki şeritli ayrıdır ama ön lamel (kap) cerrah ulaşım için kalan kornea yatağa geri konumlandırılmış.
3. Inameliyathanede, cerrah anterior ve posterior hem lamel arasında dikey santral kornea dokusu kesmek için trepan kullanır.
4. Trepan kesme sonra, periferal donör kornea alanı kaldırılır.
5. Posterior lamel yavaşça spatula ile ön lamel kaldırılır. Donör arka lamel (DSAEK doku) alıcı kornea (1i) hastalıklı kısmının yerini alır.
6. Hasta çıkarılabilir bir hastalıklı posterior kornea sahiptir.
7. Hastalıklı posterior kornea büyük çaplı bir daire içinde bir göz içi araç (ters Sinsky kanca) ile atılırsa.
8. Hastalıklı kornea gol sonrası, posterior kornea zarı kaldırılır.
9. Donör arka lamel (DSAEK doku) alıcının gözüne yerleştirilir.

Şekil 2. Medya Kornea Doku. Kornea dokusu ha sonra korunması medya olduğunudonörden rvesting.

Şekil 3. Yapay Ön Kamara üzerinde Kornea Doku.

1. Kornea dokusu yapay ön kamara önce tabanı kilitleme halkası veya doku diseksiyonu üzerine monte edilir.
2. Kornea dokusu doku üzerinde mühürlenmiş tabanı kilitleme halkası ile yapay ön kamara üzerine monte edilir.

Şekil 4. Kornea dokusu kalınlığı kontrol edin. Kornea kalınlığı kornea yüzeyinde ultrason pakimetri probu ile kontrol edilir.

Şekil 5. Kornea Doku Diseksiyon.

1. Mikrokeratom bıçak saat beşte montaj sonrası ve konumu ile kaide üzerine yerleştirilir.
2. MikrokeratomDiseksiyon lamelli yapmak için kornea geçirilir.

6 Şekil. Diseksiyon sonra Kornea anterior Cap. Anterior kornea kapağı mikrokeratom diseksiyonu sonrası ücretsiz tamamlandı.

Şekil 7. Odası görüntülenen Kornea Dissected. Diseksiyon tamamlandıktan sonra, kornea nakli için görüntüleme odasına döner.

Şekil 8. Taşıma Paketleme Kornea. Izleme odasında kornea sonra güvenli cerrah ulaşım için paketlenir.

Şekil 9. Kornea OCT Görünüm. Ve EkimNihai disseke kornea (kesitinde) kornea iki yarıya bölündü olduğunu gösterir. Arayüzü oklarla gösterildiği gibi çevre dokulara göre çok daha yoğun yansımasıdır.

Discussion

Korneanın en iç tabakası olan endotel korneal dehidratasyon koruyarak korneanın optik netlik korur. Çok sayıda hastalık durumlarında özellikle distrofiler, enfeksiyonlar, inflamatuvar süreçleri ve dejenerasyonlar gibi kornea endoteli sağlık ve canlılık etkiler. Yakın zamana kadar, hastalıklı kornea endoteli değiştirmek için kornea nakli, korneanın tam kat nakli gereklidir. Geçtiğimiz on yılda, bu tür DSAEK cerrahi olarak kısmi kalınlığı kornea nakli, korneanın arka tarafından hedeflenen yerine daha kısa bir iyileşme süresi ile aynı hedefe ulaşmak mümkün olmuştur. Ne olursa olsun teknik, nakledilen doku nakledilen korneada optik netlik korumak için sağlıklı kornea endoteli korumak gerekir; bir sonucu olarak, tüm doku işleme teknikleri kornea endoteli korumak için ek adımlar var.

Otomatik mikrokeratom diseksiyonu thendotelyal keratoplasti kornea dokusu hazırlanması için e standart. Mikrokeratom kullanımı donör doku perforasyon azaltmak ve manuel diseksiyon ⁵ ile karşılaştırıldığında görsel iyileşmeyi hızlandırdığı gösterilmiştir. DSAEK ilk tanıştıklarında, bazı cerrahlar mikrokeratom ekipmanı satın ve cerrahi başında ameliyathanede donör lameller diseksiyonu. Doku hazırlık başarısız olursa, cerrahi hasta ve cerrah neden rahatsızlık ve harcama yapılması gerekiyordu. 2006 yılında göz bankaları göz bankasına laboratuar ameliyat öncesinde ¹² günde bir, kontrollü koşullar altında "site kapatma" mikrokeratom diseksiyon yapmaya başladı. Doku hazırlanması bu ayarda başarısız olursa, taze doku ile başka bir diseksiyon gerçekleştirmek için zaman vardır.

Donör arka lameller kornea dokusunun Mikrokeratom diseksiyonu komplikasyonları en aza indirmek için nazik ve hassas tekniği gerektirir. Kornea gentl konmalıdırnarin endotel hücreleri zarar görmemesi için suni ön kamara (AAC) üzerine y. Kornea monte edilmiş ve AAC hizalandığını sonra, kilitleme halkası konumlandırılmış ve odasının içindeki yüksek basınç ve mikrokeratom diseksiyonu sırasında doku çöküşün şansını azaltmak için sıkı bir mühür için ayarlanmalıdır. Diseksiyon üniform sağlamak için, sürekli bir mikrokeratom kafası, pürüzsüz bir şekilde döndürüldüğünde olmalıdır. Diseksiyon sonra doku tekrar endotel hücre hasarı en aza indirmek için dikkatle ele alınması gerekir. Bundan başka, bu lamelli kesme posterior lamel cerrahi ¹³ içinde kullanım için uygun olmasını sağlamak üzere ortalanmış ve tam olup olmadığını teyit etmek önemlidir.

Kornea donör perforasyon bu prosedürün çok korkulan bir komplikasyon değil, tecrübe ile daha sık olur. Tekrarlanan delikler mikrokeratom geçer sırasında oluşursa, bu işlem birden fazla adım kontrol etmek önemlidir. Mısırea düzgün monte edilmiş ve AAC üzerine uyumlu hale getirilmesi gerekmektedir. Bir sızdırmazlık ve yüksek basınç mikrokeratom geçiş tarihinden önce alınmış ve işlem boyunca muhafaza edilmelidir. Vesileyle, rezidüel konjonktiva sklera kenarında var ve önce montaj off disseke edilmelidir. Mikrokeratom bıçak keskin ve çentikler olmamalıdır. Doğru mikrokeratom kafası kalınlığı tahmini kornea kalınlığı baz alınarak seçilmelidir. Mikrokeratom kafası geçiş öncesinde doğru salınan gerekir. Bu teknik ile daha fazla sorun ile tüm ekipman düzgün çalıştığını doğrulamak için mikrokeratom danışın.

Mükemmel performans sergiledi bile, bu tekniğin bazı sınırlamaları vardır. Mikrokeratom kafaları çeşitli kalınlıklarda de kornea dokusu kesmek için kullanılabilir, ancak nihai doku kalınlığına mikrokeratom kafa ilişkinin nihai bir doku geniş kalınlıkları sağlayan, aynı kafa ile kesin olmayan bir^7. Ayrıca, hazırlanmasında önemli bir öğrenme eğrisi mevcut olduğundan ve komplikasyonları, yeni kullanıcılar için daha sık görülmektedir. Göz bankasına ortamda lameller disseksiyon yapılması bu yordamı günde birçok kez gerçekleştirmek eğitimli teknisyenler böylece tecrübesizliği nedeniyle komplikasyonlar en aza indirerek, onların tekniğini optimize eder.

Var endotelyal keratoplasti mikrokeratom destekli kornea diseksiyon tekniği Değişiklikler. Bazı kornea endoteli için artırılmış koruma sağlamak amacı ile yapay ön kamara üzerindeki kornea butonu altında viskoelastik malzeme veya kornea medya depolama yerine dengeli tuz solüsyonu kullanmayı tercih eder. Mikrokeratom kesi başlanmalıdır olduğu konumu belirleme yöntemiyle değişiklikler de mevcuttur. Farklı göz bankaları ve farklı kornea cerrahın kornea belirlenmesi için işaretlenmiş olarak nasıl özel tercihleri ​​olabiliranterior kornea kap veya posterior lamellar yönelim. Bu üreticilerin bu protokolde kullanılan benzer ekipman yapmak unutulmamalıdır. Özellikle üreticinin talimatlarına kullanılır hangisi ekipman ile takip edilmelidir.

DSAEK ameliyat için disseke kornea dokusunun Güvenilir göz bankasına hazırlık Bu nispeten yeni bir cerrahi tekniğin yaygın kabulü için yararlı olmuştur. Bir kere cerrah kornea nakli "ilk adım" yerine göz bankası, kendine güvenen oldu - DSAEK, yani doku hazırlanması, birçok pratik sınırlamalar iyileşmişti. Göz bankaları güvenilir donör doku, güvenli, etkili ve zamanında temini ile işlenen doku için talep yetişmek mümkün olmuştur. Yüksek kaliteli DSAEK doku şimdi peşin ve ameliyathane zaman ve doku hazırlanması ^{komplikasyonlar, 14-15 Eylül} azalmıştır sipariş edilebilir.

Bu protokol preparati açıklarDonör kornea dokusu göz bankasına işlenmesi açısından DSAEK greft üzerinde, ancak bu teknik kendi lameller kornea donör doku hazırlama gibi ilgilenen cerrahlar için doğrudan uygulanabilir lameller kornea üzerinde laboratuar tabanlı veya klinik çalışma yapmaktadır ilgilenenler transplantasyonu.

Korneal lameller hazırlanması için gelecekteki yönler doku işleme femtosecond laser kullanımı, "ultra-ince" DSAEK kornea dokusu veya Descemet membran endotelyal keratoplasti (DMEK) ameliyatı için kornea endotel kaydıran hazırlanması oluşturma sayılabilir. Endotel keratoplasti evriminde bir cerrahi saha ve göz banka ve kornea cerrahın arasındaki simbiyotik ilişki cerrahi teknikleri optimize edilmiş olarak değişmeye devam edecektir.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Microkeratome	Moria	1021174
Artificial Anterior Chamber base	Moria	19161-562
Artificial Anterior Chamber cap	Moria	19172-220
Microkeratome Head 300	Moria	O304
Microkeratome Head 350	Moria	N791
Console	Moria	19360-3482