Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

אימון הכחדה במהלך חלון Reconsolidation מונע שחזור של פחד

Published: August 24, 2012 doi: 10.3791/3893

Summary

פחד מיזוג יכול להיות מוקטן באמצעות תהליך הנקרא מעכבות הכחדה, אבל יכול פני שטח בתנאים כגון חלוף הזמן או חשיפה ללחץ. הפרוטוקול שלנו מציג דרך חדשנית למניעת התאוששות פחד על ידי החדרת הכחדה במהלך חלון reconsolidation (השלב ​​מחדש האחסון של זיכרון מחדש).

Abstract

פחד הוא הסתגלותי כשהיא נמשכת זמן רב לאחר שהנסיבות הפכו בטוחות. לכן חיוני לפתח גישה עקבית שמונעת את חזרתו של הפחד. פרדיגמות הפבלוביות פחד מיזוג מועסקות בדרך כלל כדי ליצור קשר מבוקר, רומן פחד במעבדה. לאחר זיווג גירוי מזיק (גירוי מותנה, CS) עם תוצאה מרתיעה (גירוי בלתי מותנה, ארה"ב) אנו יכולים לעורר תגובת פחד (תגובה מותנית, או CR) על ידי הצגה רק הגירוי לבד 1,2. ברגע שפחד הוא רכש, זה יכול להיות מופחת באמצעות אימון הכחדה, לפיה גירוי המותנה מוצג שוב ושוב ללא תוצאות מרתיעות עד שפחד כבר לא בטא 3. למידה מעכבת זה יוצר ייצוג חדש, בטוח לCS, שמתחרה על ביטוי עם 4 זכרון הפחד המקוריים. למרות ההכחדה יעילה בעיכוב פחד, זה לא קבוע. פחד יכול באופן ספונטנילהתאושש עם חלוף הזמן. חשיפה ללחץ או לחזור להקשר של למידה ראשונית יכולה גם היא לגרום לפחד וחוזר ועולים 3,4.

הפרוטוקול שלנו עוסק באופיים הזמני של הכחדה על ידי מיקוד חלון reconsolidation לשנות זיכרון רגשי באופן קבוע יותר. עדויות רבות מצביעות על כך שההפעלה מחדש של זיכרון מאוחד מחזירה אותו למצב לא יציב, שבמהלכו הוא הזיכרון שוב לסבול מהפרעות 5-9. חלון ההזדמנויות הזה מופיע לזמן קצר לאחר הפעלתו מחדש, לפתוח ולסגור כ 6hrs מאוחר 5,11,16, אם כי זה עשוי להשתנות בהתאם לכוח וגיל 15 הזיכרון. על ידי מתן מידע חדש שתוכל לשלב את עקבות הזיכרון המקוריות, זיכרון זה עשוי להיות לא מעודכן כפי שreconsolidates 10,11. מחקרים שכלל בעלי חיים שאינם בני אדם חסמו את הביטוי של זכרון פחד בהצלחה על ידי החדרת מניפולציות תרופתיות בתוך מחדשחלון איחוד, לעומת זאת, רוב הסוכנים המשמשים גם הם רעילים לבני אדם או להציג תופעות מפוקפקות כאשר נעשה שימוש במחקרים בבני אדם 12-14. הפרוטוקול שלנו נותן מענה לאתגרים אלה על ידי הצעה יעילה, אך לא פולשנית מניפולציה, התנהגות שהוא מסוכן לבני אדם.

על ידי עידוד אחזור זכרון פחד לפני ההכחדה, אנחנו בעצם להפעיל את תהליך reconsolidation, המאפשרים מידע בטיחות חדש (כלומר, הכחדה) להיות משולב תוך הזיכרון והפחד הוא לסבול מהפרעות. מחקר שנערך לאחרונה העסקת מניפולצית ההתנהגות הזה בחולדות חסם הצלחת זכרון פחד באמצעות פרמטרים אלה זמניים 11. מחקרים נוספים בבני האדם הראו כי החדרת מידע חדש לאחר שהליפה של 16 מנוע שאוחד בעבר, 17 אפיזודי, או 18 זכרונות תוכניים גורמת להפרעה לעקבות הזיכרון המקוריות 14. אנחנו נתווה להלן פרו רומןtocol משמש לחסימת התאוששות פחד בבני אדם.

Protocol

סקירה

המחקר שאנו מתארים בפרוטוקול זה מתבצע במשך שלושה ימים רצופים, עם עיצוב בין הנושא של שלוש קבוצות ניסוי. ביום 1, בכל הנושאים לעבור מיזוג פחד, שם הם לומדים להבחין בין שני אותות, אחד שמנבא הלם ואחר שלא. ביום 2 בכל נושאי הכשרת הכחדה, אבל שונים בנוגע למה שקורה מראש: שתי קבוצות תקבלנה אות תזכורת על מנת להפעיל מחדש את זכרון הפחד לפני אימון הכחדה ואילו קבוצה שלישית לא מקבלת אות כזה. קבוצה אחת מקבלת 10 דקות רמז התזכורת לפני ההכחדה, ובכך שהם עוברים בזמן הכחדת זכרון הפחד reconsolidating. הקבוצה השנייה מקבלת 6 שעתי קיו תזכורת לפני ההכחדה, ובכך הם עוברים הכחדה לאחר החלון הזה נסגר ככל הנראה. הקבוצה השלישית לא מקבלת אות תזכורת לפני שעברה הכחדה, ולכן הם עוברים הכשרת הכחדה סטנדרטית. ביום 3 ביום, בכל הנושאים rזור למפגש הכחדה אחרת. רמת הפחד כשהם רואים לראשונה את הרמז המותנה ביום 3 מציינת אם זכרון הפחד נשאר. כל שלושה הימים נערכים באותה ההגדרה ניסיונית, שהוא חדר קול נחלש, עם בקרת טמפרטורה. הגירויים הממוזגים הם ריבועים צבעוניים המוצגים על מסך מחשב. אנחנו גורמים לפחד ולמדוד בהלם חשמלי קל ומוליכות עור, בהתאמה, באמצעות מודול מערכת Biopac (ראה טבלה 1). מחשב השולחני משמש להפעלת תוכנת AcqKnowledge המאפשרת הקלטה והניטור של SCR תוך מחשב נפרד משמש להפעלה ומציג את התסריט הניסיוני לנושא. הנבדקים לעבור את כל שלושת השלבים בערך באותו הזמן של היום.

1. הערכת פחד עם תגובה של מוליכות עור (SCR) - יישום אלקטרודה והקלטה

  1. חדר הניסוי באופן אידיאלי צריך להיות כל זמן חם (אנחנו להגדיר החדרים שלנו איפשהו between 70 ו 75 מעלות), במטרה לאפשר למדידה אמין וSCR. נקו קץ אצבעות ימין או שמאל של הנושא באמצעות Q-טיפ ספוגה במים מזוקקים, אנחנו לא ממליצים cleansors שוחק כמו שהם יכולים לייבש את העור, שיבוש תגובות זיעה. ודא קץ אצבעותיו להתייבש לחלוטין לפני יישום אלקטרודה.
  2. החל ג'ל אלקטרוליט מוליך מאוד לשתי אלקטרודות (כאן אנו משתמשים "סייגו ג'ל" על ידי פרקר בע"מ מעבדות, ואלקטרודות מחוברות למערכת רכישת MP100 נתונים שנעשתה על ידי מערכות Biopac). אפשר ג'ל לעלות מעט מעל האלקטרודה SCR היטב ולוודא שאין בועות אוויר בתוך הג'ל כמו זה יכול interefere עם אות SCR.
  3. צרף האלקטרודה לאצבעות הראשונות ושנייה של היד בין הראשון והפלנגות שניות, שבו אות electrodermal בולטת יותר. ודא את הצמדן אלקטרודה מחוזקים היטב ולשאול את הנושא לדווח אם הם מרגישים כל פועם בקץ האצבעות שלהם. זה הודי פועםלשנוא את הרצועות יושמו באופן הדוק מדי, שיכול interefere עם אות SCR.
  4. ברגע אלקטרודות מוליכות עור מובטחות, להתחיל בהקלטת מדגם מוליכות עור לכ 5 דקות כדי לבחון אות electrodermal של הנושא. כאן, אנו משתמשים 3.9 תוכנת AcqKnowledge (מBiopac המערכות בע"מ) וגל SCR שיא במחשב שולחני MAC. אנו משתמשים בקצב דגימה של 200Hz, רמה מתאימה לאות איטית כמו SCR, שיעורים גבוהים יותר אך ניתן להשתמש בו. מסך ההקלטה צריך להיות נפרד מהמחשב המציג את התסריט הניסיוני ומחוץ לטווח ראייתו של נבדק. להבטיח את הנושא יש תגובות SCR חזקות ולכוונם לקחת ובלהחזיק נשימה עמוקה, זה צריך לייצר עלייה משמעותית בSCR (ראה איור 1 לדוגמה לתגובה כזו).

2. אינדוקצית פחד עם גירוי מכות חשמל חלש - יישום אלקטרודה ונוהל עבודה למעלה

  1. על פרק כף היד OPPOאתר היד עם האלקטרודות SCR, לצרף את בר הממריץ. כאן, אנו משתמשים אלקטרודה בר (קוד מוצר EL350 מBiopac המערכות בע"מ), מחוברת לSD9 כיכר דופק גירוי (שנעשה על ידי טכנולוגיות דשא, קבוצת מוצרי Atro-Med, Inc) עם חרוז של ג'ל מוליכות להחיל על כל מראשי אלקטרודות.
  2. הלם ההדק צריך להיות מנותק מתיבת הממריץ במהלך ההליך לעבוד למעלה. הנח את הבר על פרק כף היד הפנימי, בכל צד של גיד longus palmaris ולאבטח עם רצועה ולקרו ניילון כדי לשמור אותו במקום במהלך הניסוי, אבל להבטיח את הרצועה היא לא חזקה מדי.
  3. לנבדק שהם יקבלו זעזועים נמסרו באופן ידני. התחל ברמה נמוכה (מומלץ 20 V), ולעבוד עד לרמה שהם קובעים היא לא נוח אבל לא כואב. אנו ממליצים משך ההלם שיקבעו ב 200 אלפיות שניות, 50 פעימות / שניות, רמה סטנדרטית המשמשת במערך של מחקרי מיזוג הפחד האחרון 21,24, למרות שאחרים יששימוש משכים מעט שונים כדי לגרום לאותה התחושה 25,26.
  4. ידני לעורר זעזועים, החל משעת 20 וולט. להמשיך ולהפעיל את זעזועים בודדים, בהדרגה להגדיל את העוצמת במרווחי 5V, עד בנושא מצביע על כך שהזעזועים הם לא נוחים, אבל לא כואב. לא צריך להיות גדול כדי SCR הזעזועים (ראה איור 2 לדוגמה לתגובה של ההלם). רשום את רמת ההלם הסופי ולשמור על רמת המתח הזה לשארית של הניסוי.

3. יום 1 - רכישה

  1. כוון את הנושא כדי לשמור על העיניים שלהם על מסך בכל העת, למצוא תנוחה נוחה שלא דורשת תנועה ולנשום באופן טבעי מאז שינויים בדרכי נשימה פתאומיים עלולים להפריע SCR. צריכות להיות ממוקמות בשתי הידות בתנוחה נוחה עם ידות על השולחן / שולחן לפני הנושא או על משענות כיסא נוח. ספר בנושא, כי הם יראו גירויים חזותיים על המסךולקבל זעזועים מזדמנים. הדרך את הנושא כדי לפקח על היחסים בין הגירויים שהם רואים ומתי הוא קבל הלם.
  2. חבר את ההדק בחזרה לגירוי ולשנות את ההדק בהגדרת AcqKnowledge מOFF חיצוני ל. ברגע שהנושא מוכן להתחיל, הצב את המתח בחזרה עד לרמה שהוקלטה, וליזום גם את קובץ AcqKnowledge ותסריט הניסיוני. כאן, אנו משתמשים בגרסת 2.0 תוכנת E-ממשלה מכלי תוכנת פסיכולוגיה, Inc
  3. במהלך פגישת הרכישה, גירוי מותנה אחד (כאן, ריבוע צהוב) שיתוף מסתיים בתוצאה זו מרתיעה (כאן, זעזוע קל) על קבוצה (38%) של ניסויים, אנחנו מתייחסים לזה כ+ CS שלנו. הגירוי המותנה האחר (כאן, ריבוע כחול) לא זיווג עם ארה"ב, אנחנו מתייחסים לזה כCS-. אנו משתמשים בחיזוק חלקי להאט למידה מאז העבודה קודמת מצאה כי תוצאות חיזוק 100% בהכחדה מהירה פעם נושאים להבין את הקשר ביןCS + וארה"ב לא השתנו 21. הפרדיגמה חיזוק חלקית גם מאפשרת לנו להגביל את הניתוח שלנו למי שאינם מחוזקים CS + משפטים, ובכך אפסול CS + חדרי מורים נלווים, היכולים להיות מזוהם על ידי תגובות פיסיולוגיות לזעזע (ראה איור 3 דוגמאות לחדרי מורים ממוזגים ובלתי מותנים לכל סוג CS).
  4. גירויי אוויר (CSS) מוצגים ל4 שניות. יש-ניסוי מרווח בין 10-12 שניות אקראי משתנה (ITI), שבמהלכו נושאים להציג מסך שחור עם צלב קיבעון לבן במרכז. כל מפגש מתחיל במסך המציין את הניסוי עומד להתחיל (* מוכן *) ומסתיים במסך ולהתריע שהם סיימו בהצלחת חלק זה של הניסוי (* שהשלים את החלק הזה של הניסוי *). במהלך רכישה, מספר כולל של 10 unreinforced ניסויי CS + ניסויים ו10 CS-ניסויים מוצגים בנוסף ל6 CS + ניסויים המתוגברים על ידי הלם.
  5. לייצר שתי rando פסאודו מובחןהזמנות mized לכל הניסוי כזה שאף משפט מסוג (CS +, CS-CS + או ארה"ב) חוזר על יותר משתי פעמים. בתוך כל סדר, לאזן את הצבעים של CSS. זה אמור לגרום 4 פקודות משימתם היא אקראי בין פרטים בתוך כל קבוצה. אנו ממליצים כוללים מופע של CS + מחוזקים רצופים ניסויים אמריקאים אחד לפחות, כדי למנוע מנבדקים בהנחה שהם לא יקבלו זעזועי consecutives (ראה טבלה 2 לדוגמה של סדר דין).

4. יום 2 - הדרכה להפעלה מחדש והכחדה

פירוט נושא:

אקראי לחלק את כל הנושאים שהוכיחו רכישה מספקת של פחד מהיום 1 (ראה קריטריוני פסילה בהמשך) לשלוש קבוצות:

קבוצה 1 (אקטיבציה-10 דקות): מקבלת הכשרת הכחדה 10 דקות אחרי שבת בתוך חלון reconsolidation

קבוצה2 (הפעלה מחדש-6 שעות): מקבל הכשרת הכחדה 6 שעות אחרי שבת מחוץ לחלון reconsolidation

קבוצת 3 (ללא הפעלה מחדש): מקבל הכשרת הכחדה סטנדרטית ללא כל ליפה

  1. עם הגעתו, כל נושא צריך להיות מוגדר כצעדים ב1-2.2, עם אותה הקבוצה ברמת ההלם ביום 1 (לא לעבוד למעלה נדרש). אין הוראות חדשות. תגיד את הנושא לשבת בנוחות ולשים לב לגירויים המוצגים, בדיוק כמו ביום הקודם.
  2. לנבדקים בקבוצות ההפעלה מחדש (גם 10 דקות ו 6 שעות) עוברים מצגת אחת, unreinforced של CS + (לא מפתיע) ואחרי הפסקה של 10 דקות. לנבדקים בקבוצה שלא זכה מחדש עוברים את הליך הגדרה, אבל אז לעבור ישירות להפסקה ללא הפעלה מחדש. במהלך ההפסקה, לעצור את הקלטת AcqKnowledge של SCR, להפוך את מתח הממריץ לתשומת לבם של נבדקי אפס וישירים למסך נפרד שישתכנית טלביזיה שנבחרה מראש (למשל, כאן, הייתי חלק ~ 10 דקות נבחר באופן אקראי מפרק "משפחת סימפסון"). נושאים יהיו לצפות בו למשך 10 דקות ואילו כל אלקטרודות להישאר מצורפות.
  3. אחרי ההפסקה, קבוצת דקות אקטיבציה-10 תמשיך באימוני הכחדה. לנבדקים בתמורת אקטיבציה-6 שעות לאימוני קבוצת הכחדה 6 שעות מאוחר יותר. לנבדקים ללא ההפעלה מחדש, חצי לעבור מייד אימוני הכחדה, ולהחזיר את המחצית 6 שעות מאוחר יותר לאימונים. קבוצה זו שולטת על מקל התזכורת, כמו גם פערי זמן שונים בין הפעלה מחדש והכשרת הכחדה בכל קבוצת תזכורת. בנוסף, היות ופרטים בקבוצת HR מחדש-6 עלולים לעבור הכחדה או בשעתי אחר הצהריים או בשעתי הערב (כדי לאפשר מספיק זמן כדי לחלוף לאחר הפעלה מחדש), חשוב להפעיל נושאים בדקות אקטיבציה-10 וקבוצה שלא זכה מחדש בבוקר , הצהריים וערב, כדי לאפשר חלוקה שווה של נבדקים בכל שעה משעות היום.
  4. During הכחדה, מספר כולל של 10 unreinforced CS + ניסויים ומחקרי CS-11 מוצגת לכל קבוצה מחדש. מאז CS-לא הוצג במהלך הפגישה מחדש, מצגת נוספת, יש להוסיף לכך את כל מפגש הכחדת CSS מוצגים מספר שווה של פעמים במהלך יום 2. הקבוצה שלא צריכה לקבל מחדש מצגת unreinforced 11 של כל מדעי מחשב.
  5. בפגישת ההכחדה, לחדש את קובץ הקלטת AcqKnowledge ולהחזיר מתח ממריץ לרמה המוגדרת. הדרך את הנושא כדי לטפל במסך הניסיוני בי תסריט הכחדה ממתין על מסך * מוכן *. תזכורת לכיוונים של היום הקודם היא לעתים שימושית. קורות חיים עם תסריט הכחדת אימונים, לפיה הנושא מקבל מצגות חוזרות ונשנות של שניהם CSS בלי זעזוע (ראה טבלה 2).

5. יום 3 - Assay שחזור פחד הספונטני

  1. אם הנושא מדגים למידת הכחדה נאותה (ראהקריטריוני פסילה בהמשך) הם צריכים לחזור למעבדת 24 שעות לאחר פגישת הכחדתם. עם הגעתו, הם צריכים להיות מוגדרים לפי שלבי 1 ו 2.2; מתח מכוון לאותה הרמה כמו פגישת הרכישה. להזכיר נושאים של הכיוונים מהימים הקודמים.
  2. כל נושא היה עובר מפגש מחדש הכחדה, לפיה הם שוב יקבלו 10 מצגות unreinforced של שניהם CSS (ראה טבלה 2) כדי להעריך את המידה שבה תגובות פחד להתאושש עקב חלוף הזמן. המשפט הראשון ביום 3 צריך להיות תוספת CS-(ראה טבלה 3) והוא התעלם בשל תגובת orienting בתחילת הפגישה. (ניתן לעשות זאת באותו בתחילת היום 2, לעומת זאת, מאחר שרק את הנתונים מרכישה מאוחר משמש כדי להעריך את למידת הכחדה (ראה קריטריוני פסילת המשך) ובסופו של הדבר, המלצה זו אינה קריטית ליום 2.) המשפט הבא ביום 3 יש מתאזן בין CS + ו-CS. Spהתאוששות ontaneous נמדדת על ידי הפחתת SCR במהלך הראשון CS + המשפט במהלך מחדש הכחדה מהמשפט + CS האחרון במהלך הכחדה.
  3. בסיום פגישת הנושא תוחקר ושלם 40 $ לפני צאתו.

6. טרום עיבוד & ניקוד SCR נתונים

  1. לנתח את הנתונים באמצעות תוכנה מחובר AcqKnowledge. כאן, אנו קובעים שלושה פרמטרים שנמדדו מתרשים הנתונים שלנו: t (זמן), דלתא t (השהיה), וPP (שיא לשיא). מדידות אלה להקליט את זמן נקודות, מיסות ושיא האמפליטודה של SCR נבחר. בגין גרף כתב עת חדש כדי להקליט את המידות שלך. גל עובר דרך מסנן נמוך לעבור כדי לצמצם נתונים בתדירות גבוה על ידי בחירת Transform → דיגיטלי מסנן → FIR → נמוך לעבור (אנו משתמשים בהגדרות ברירת המחדל שנקבעו בהכירו מדריך לתוכנה: לחתוך תדר = 25; 32 מקדמים; מסנן כל גל). להחליק את הנתונים במטרה להפחית את הרעש על ידי selecטינג Transform → החלקה כל → גל התמרה (אנו משתמשים בהגדרות ברירת המחדל שנקבעו בהכר מדריך לתוכנה: החלקת הערך הממוצעת; גורם החלקה = 3 דגימות; כל גל מסנן, אולם עם שיעורי דגימה גבוהים יותר או רעש מוגבר, גורם ההחלקה יכול להיות גדל).
  2. בחר תגובה של מוליכות עור במהלך כל ניסוי על ידי לקיחת הבסיס לפער שיא בגל הגדול ביותר (בmicrosiemens, μs) שמתחיל בתוך 0.5-4.5 תחילת גירוי שניות החלון הבאה. תחילתה של SCR חייבת להתחיל בתוך חלון זה כדי להעפיל כתגובה לגירוי מסוימת, אך עלול להימשך זמן רב יותר לשיא. חדרי מורים עשויים להירשם עד שהם מגיעים משרעת שיא, לעומת זאת, תגובות ששיא לאחר 5 שניות אינם נחשב לגירוי ספציפי ויש להתעלם. זו בדיוק הסיבה שלא יירשמו ניסויים מחוזקים: SCR שעדיין הגיע לשיא בסוף המשפט עשוי להיות נגוע בהלם ולייצר עליות עוקבות בSCR הn ot קשור לCS עצמו.
  3. קריטריון שיא תגובה של 0.02 μs צריך להיות מנוצל; תגובות מתחת לקריטריון זה נחשבים בדרך כלל כרעש ומקודדות כ אפס. לאחר ניקוד, כל מחקרי unreinforced לכל נושא צריכים להיות מחולקים על ידי התגובה של ארה"ב אומרת כי הנושא המתאים. זה נגזר על ידי לקיחת SCR הממוצע עבור כל ניסויי ההלם ברחבי מושב הרכישה והחשבונות להבדלים אינדיבידואליים בתגובתיות ההלם של הנושא. לבסוף, כל הניסויים צריכים להיות שורש הריבועי הפך להפחתת skewness.

תזמון

יום 1

הכנה: דקות 5-7

סקריפט רכישה: ≈ 9 דקות

סה"כ: 15 דקות

יום 2

הכנה: דקות 5-7

סקריפט הפעלה מחדש: ≈ 30 שניות

הפסקה: 10 דקות

ss> סקריפט הכחדה = "jove_content": ≈ 5.5 דקות

סה"כ: 20 דקות

יום 3

הכנה: דקות 5-7

תסריט מחדש הכחדה: ≈ 6.5 דקות

סה"כ: 15 דקות

7. נציג תוצאות לכל קבוצה

בסופו של היום 1 (רכישה), נושאים צריכים להוכיח ההפרש SCR לCSS, כלומר, גבוה יותר להגיב לCS + כמו להשוות CS-(ראה איור 4, רכישה, לדוגמה מנושאים בודדים). בסוף היום 2 (הפעלה מחדש / הכחדה), תגובת ההפרש הזה צריכה להפחית, באופן שאין עוד הבדל בין CS + ו CS-(ראה איור 4, הכחדה, לדוגמה מנושאים בודדים). כאשר בוחן החלמה ספונטנית ביום 3, הייתי מצפה לראות התאוששות חוסר פחד בקבוצה מחדש-10 דקותמאז קבוצה זו קבלה הכשרת הכחדה בתוך חלון reconsolidation, ובכך מאפשר לעקבות הזיכרון המקוריות לreconsolidate עם מידע בטיחות חדש זה, ולמנוע את ההתאוששות של תגובות פחד (ראה איור 4, פנל עליון, לדוגמה מנושא פרטי). אנו מצפים לראות התאוששות משמעותית של פחד, עם זאת, לCS + (לא CS-) בקבוצה מחדש-6 השעות שקבלה הכשרת הכחדה מחוץ לחלון reconsolidation (ראה איור 4, באמצע פנל, לדוגמה מאדם נושא), כמו גם קבוצה שלא זכה מחדש שקבלה הכשרת הכחדה סטנדרטית (ראה תרשים 4, לוח תחתון, לדוגמה מנושא פרטי).

איור 1
איור 1. דוגמה לSCR במהלך האלקטרודה להגדיר. חיצים שחורים, אנכיים לציין את הנקודה שבה הנושא קבל הוראה להסירנשימה עמוקה אשר הביאה לעלייה ניכרת בSCR. לחץ כאן לצפייה בדמות גדולה.

איור 2
איור 2. דוגמה לSCR במהלך הליך לעבוד למעלה הלם. חיצים שחורים אנכיים מציינים נקודה שבה ההלם היה מנוהל. חיצים אפורים מצביעים שיא של עליית מוליכות עור בתגובה להלם. לחץ כאן לצפייה בדמות גדולה.

איור 3
איור 3 דוגמה לתגובה מותנית (CR) להופעה של CS + ואחריו תגובה בלתי מותנית גדולה יותר (UR) לאספקה ​​של הלם (ארה"ב);. המשפט הבא הוא זה של CS-. חיצים אפורים מציינים את תחילת CS וקיזוז; הודי חיצים שחוריםאכלתי את המסירה של ארה"ב. לחץ כאן לצפייה בדמות גדולה.

איור 4
איור 4 דוגמה לרכישה, הכחדה וספונטנית התאוששות בנושא היחיד מכל תנאי ניסוי (פנל עליון: אקטיבציה-10 דקות; לוח מרכזי: הפעלה מחדש-6 שעות; פנל תחתון: לא מחדש)..

טבלה 1
טבלת 1. טבלה של מוצרים וציוד רלוונטיים.

טבלה 2
טבלה 2. פרוטוקול Reconsolidation וציר זמן.

טבלה 3
לוח 3. דוגמה של סדר דין על כל שלב שלניסוי. שים לב לאחת נוסף, CS-יש להוסיף ליום 2.2 (הכחדה) בשתי קבוצות התזכורת כדי להסביר לאקטיבציה של CS +. CS-המשפט הראשון ביום 3 (מסומן ברקע אפור) הוא התעלם בשל תגובת orienting בתחילת הפגישה.

ניסויי גדר

ההתקנה כולל מחשב עם מערכת הפעלת E-ממשלה, מק פועל להכיר, מערכת Biopac MP100, ותיבת הלם. קוד בשורה מתוכן לתסריט E-הממשלה כדי לתקשר עם תוכנה אשר ותיבת ההלם. זה מאפשר לדואר כדי לשלוח אותות ממשלה להכיר onsets המציין אירוע, ומסמן לתיבת ההלם כדי לעורר ממשל הלם. הפלט מדואר הממשלה הוא נשלח דרך יציאת מדפסת למערכת Biopac, אשר בתורו שולחת את אות אירוע לפיזיולוגית הקלטת מק עם הכר דרך חיבור ה-USB שסופק עם מערכת Biopac, כמו גם לתיבת ההלם (ראה טבלה 1 לדחיפהUCT מידע).

קריטריוני פסילה

נושאים צריכים להיות מחוץ לפני ההשלמה כל ההפעלות הניסיוניות או מניתוח נתונים, אם הם מדגימים כל אחד מאלה:

  • אי גילוי או להראות אמין SCR - עת היישום ובדיקת תגובת מוליכות עור, נושאים עשויים להדגים SCR השטוח. במקרה זה, מומלץ לחכות 5 דקות נוספות כתגובות לא יכולות לצאת באופן מיידי, או לבדוק עם בועות בג'ל המוליכות (במקרה זה יש להסיר את האלקטרודות, ניקתה ומילא). נושאים שיש להם תגובת SCR שטוחה גם לאחר אסטרטגיות לפתרון בעיות אלה צריכים להשתחרר מהניסוי.
  • כישלון להפגין רכישה של תגובת הפחד (ביום 1): ההפרש SCR לCS + ו CS-בסוף פגישת הרכישה (ממוצע של מחצית השנייה של ניסויי רכישה) שהיא בכיוון הלא הנכון (כלומר CS-> CS +) או שהוא קטן מדי לconclהודה הלמידה התרחשה (כלומר, הבדל הוא פחות מ 0.1 μs).
  • כישלון להפגין הכחדה של תגובת הפחד (ביום 2): ההפרש SCR לCS + ו-CS בסוף פגישת ההכחדה (על המשפט האחרון) שהוא גדול יותר 0.1 μs.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

הפרוטוקול שהצגנו כאן מאפשר יצירת תגובת פחד מותנית פשוטה לגירוי ניטראלי מזווג עם תוצאה מרתיעה. יום לאחר מכן אנחנו מחדש את זכרון הפחד כדי לעורר reconsolidation. במהלך שלב זה אנו מושרים התערבות בצורה של אימון הכחדה. כדי לוודא שהכחדה משפיעה reconsolidation השתמשנו בשתי קבוצות ביקורת. קבוצה אחת עברה הכחדה בלי reconsolidation מפעיל משפט התזכורת, וקבוצה אחרת חוותה את משפט התזכורת אבל אז עברה הכחדה מחוץ לחלון reconsolidation. אז מדדנו, במהלך היום שלמחרת, אם הזיכרון משוחזר באופן ספונטני או האם תגובת הפחד לגירויים הממוזגים לא הצליחה להתאושש.

מיזוג הפבלובית הוא הפרדיגמה קלסית שכבר בשימוש נרחב בעשורים האחרונים ברחבי מינים רבים. מחקר בבעלי החיים תאר את המנגנונים העצביים העומדים בבסיס הקמתה של associ הפחדation והכחדתה בפירוט רב 19,20. מחקרים בבני האדם הסתגלו בהצלחה בפרוטוקול זה כדי להבהיר את הקושרת העצבית במוח האנושי 21-24. הפרוטוקול הנוכחי הוא וריאציה מעודנת של פרדיגמה זו מבוססת היטב ולכן הוא מתאים ביותר לחשוף, לאפיין ולטפל reconsolidation בבני אדם.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

Acknowledgments

אנו מודים ד ג'ונסון וק Doelling לסיוע באיסוף נתונים. אנו מודים גם לM.-H. מונפילס, ג'לדו, י ניב ומ 'מילאד לייעוץ על פרוטוקולי הניסוי. מחקר זה מומן על ידי ג'יימס ס 'מקדונל הקרן ומכונים הלאומיים לבריאות (NIH) מענק R21 MH072279 (EAP), מענקי NIH R37 MH038774, P50 MH058911, RO1 MH046516 וK05 MH067048 (Jel), מלגות דוקטורי NSERC, CIHR וAHFMR (מ-HM), ופרסי לבטניק פולברייט ו( DS).

References

  1. Pavlov, I. P. Reflexes. Anrep, G. V. , Oxford University Press. London. (1927).
  2. LeDoux, J. E. Emotion circuits in the brain. Annual Review of Neuroscience. 23, 155-184 (2000).
  3. Myers, K. M., Davis, M. Behavioral and neural analysis of extinction. Neuron. 36, 567-584 (2002).
  4. Bouton, M. E. Context, ambiguity, and unlearning : sources of relapse after behavioral extinction. Biological Psychiatry. 52, 976-986 (2002).
  5. Nader, K., Schafe, G. E., LeDoux, J. E. Fear memories require protein synthesis in the amygdala for reconsolidation after retrieval. Nature. 406, 722-726 (2000).
  6. Nader, K. Memory traces unbound. Trends in Neuroscience. 26, 65-72 (2003).
  7. Alberini, C. M. Mechanisms of memory stabilization: are consolidation and reconsolidation similar or distinct processes. Trends in Neuroscience. 28, 51-56 (2005).
  8. Sara, S. J., Hars, B. In memory of consolidation. Learning and Memory. 13, 515-521 (2006).
  9. Dudai, Y. Reconsolidation: the advantage of being refocused. Current Opinions in Neurobiology. 16, 174-178 (2006).
  10. Schiller, D., Monfils, M. -H., Raio, C. M., Johnson, D. C., LeDoux, J. E., Phelps, E. A. Nature. 463, 49-54 (2010).
  11. Monfils, M. -H., Cowansage, K. K., Klann, E., LeDoux, J. E. Extinction-reconsolidation boundaries: Key to persistent attenuation of fear memories. Science. 324, 951-955 (2009).
  12. Brunet, A. Effect of post- retrieval propranololon psychophysiologic responding during subsequent script-driven traumatic imagery in post-traumatic stress disorder. Journal of Psychiatric Research. 42, 503-506 (2008).
  13. Kindt, M., Soeter, M., Vervliet, B. Beyond extinction: erasing human fear responses and preventing the return of fear. Nature Neuroscience. 12, 256-258 (2009).
  14. Schiller, D., Phelps, E. A. Does reconsolidation occur in humans. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 5, 24 (2011).
  15. Duvarci, S., Nader, K. Characterization of fear memory reconsolidation. Journal of Neuroscience. 24, 9269-9275 (2004).
  16. Walker, M. P., Brakefield, T., Hobson, J. A., Stickgold, R. Dissociable stages of human memory consolidation and reconsolidation. Nature. 425, 616-620 (2003).
  17. Hupbach, A., Gomez, R., Hardt, O., Nadel, L. Reconsolidation of episodic memories: A subtle reminder triggers integration of new information. Learning & Memory. 14, 1-7 (2007).
  18. Forcato, Reconsolidation of declarative memory in humans. Learning & Memory. 14, 295-303 (2007).
  19. McNally, G. P., Johanses, J. P., Blair, H. T. Placing prediction into the fear circuit. Trends in Cognitive Neuroscience. 34, 283-292 (2011).
  20. Herry, C., Ferraguti, F., Singewald, N., Letzkus, J. J., Ehrlich, I., Luthi, A. Neural circuits of fear extinction. European Journal of Neuroscience. 31, 599-612 (2010).
  21. Phelps, E. A., Delgado, M. R., Nearing, K. I., LeDoux, J. E. Extinction learning in humans: Role of the amygdala and vmPFC. Neuron. 43, 897-905 (2004).
  22. Milad, M. R., Quirk, G. J. Neurons in the medial prefrontal cortex signal memory for fear extinction. Nature. 420, 70-74 (2002).
  23. Schiller, D., Levy, I., Niv, Y., LeDoux, J. E., Phelps, E. A. From Fear to Safety and Back: Reversal of Fear in the Human Brain. Journal of Neuroscience. 28, 11517-11525 (2008).
  24. Schiller, D., Delgado, M. R. Overlapping neural systems mediating extinction, reversal and regulation of fear. Trends in Cognitive Neuroscience. 14, 268-2627 (2010).
  25. Esteves, F., Parra, C., Dimberg, U., Ohman, A. Nonconscious associative learning: Pavlovian conditioning of skin conductance responses to masked fear-relevant facial stimuli. Psychophysiology. 31, 375-385 (1994).
  26. Knight, D. C., Cheng, D. T., Smith, C. N., Stein, E. A., Helmstetter, F. J. Neural Substrates Mediating Human Delay and Trace Fear Conditioning. The Journal of Neuroscience. 24, 218-228 (2004).
  27. Venables, P. H., Christie, M. J. Techniques in psychophysiology. Electrodermal activity. Martin, I., Venables, P. H. , John Wiley & Sons. Chichester, UK. 3-67 (1980).

Tags

Neuroscience גיליון 66 רפואה פסיכולוגיה פיזיולוגיה מיזוג פחד הכחדה reconsolidation זיכרון רגשי החלמה ספונטנית תגובה של מוליכות עור
אימון הכחדה במהלך חלון Reconsolidation מונע שחזור של פחד
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Schiller, D., Raio, C. M., Phelps,More

Schiller, D., Raio, C. M., Phelps, E. A. Extinction Training During the Reconsolidation Window Prevents Recovery of Fear. J. Vis. Exp. (66), e3893, doi:10.3791/3893 (2012).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter