Summary
Toprak yolla bulaşan helmint (STHS) ile oluşan kronik enfeksiyon Bodurluk ve büyüyen çocukta harcıyorsun, malabsorpsiyon neden olur. Bu nedenle, bu enfeksiyonlar aynı zamanda çocukların fiziksel uygunluk azaltmak kaçınılmazdır. Burada, STHS ve çocukların fiziksel uygunluk değerlendirilmesi için 20 metrelik mekik koşusu testi tanı için iki teknik görselleştirmek.
Abstract
Toprak bulaşan helmint (STH) enfeksiyonları sık görülür. Nitekim, 1 milyardan fazla kişi başta yoksulluğun hakim ve hijyen davranışları, su temini ve sanitasyon çoğu zaman yetersiz 1,2 vardır. Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura ve iki kancalı kurt türlerinin Ancylostoma duodenale ve Necator gelişmekte olan dünyada, etkilenen americanus, en yaygın STHS 3 vardır. Kancalı kurt hastalığı, Askariasise ve trichuriasis nedeniyle tahmini global yükü, 10.5 22.1, ve sırasıyla 6.4 milyon sakatlığa ayarlanmış yaşam yılı (DALY), 4. Ayrıca, yaklaşık 30-100000000 kişi belki de önemli bir halk sağlığı etkisi 5,6 sebep Strongyloides stercoralis, küresel öneme sahip en ihmal edilen STH türleri ile enfekte olmaktadır. Çoklu-tür enfeksiyonlar (yani, tek bir bireyde barındıran farklı STHS) yaygındır, ve enfeksiyonlar lin olmuştur düşük verimlilik ve gelişmekte olan ülkelerde 1,3 böylece ekonomik görünümüne KED.
Ortak STHS tanısı için Dünya Sağlık Örgütü (WHO) gibi enfeksiyonların sıklığını ve yoğunluğunu belirlemek için oldukça basit bir yöntemdir Kato-Katz tekniği 7,8, önerir. Bu enfekte konularda onların dışkısının geçmesi parazit yumurtaları tespitini kolaylaştırır.
S.stercoralis tanısı ile ilgili olarak, bulunmamaktadır basit ve doğru bir araç bulunmuyor. Baermann tekniğin teşhis için en yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Baermann tekniğin ardındaki prensip larvalar phototactic 9 gibi, aktif S.stercoralis larvaları bir ışıklı taze dışkı örneği dışına göç olduğunu. Bu az gelişmiş laboratuar malzemeleri gerektirir ve kültür ve immunolojik yöntemler 5 daha az zaman alıcı olduğunu.
t "gibi karın ağrısı, ishal ve kaşıntı, anemi gibi kronik semptomlar için, altında ve yetersiz beslenme, bilişsel 10 olarak akut ancak ortak belirtiler. gelen STH enfeksiyonları aralığı ile ilişkili> morbidite belirtileri genellikle belirsiz olduğundan ve ince, genellikle fark edilmeden gitmek, etkilenen bireyler tarafından normal bir durum olarak kabul edilir, ya da belirli bir ortamda daha sık olabilir diğer hastalıkların belirtileri olarak kabul edilir. Dolayısıyla, STH enfeksiyonların gerçek yükünün değerlendirmesi tarafından hafife alınmaktadır düşünülebilir genellikle nüfus tabanlı anketlerinde olduğu gibi araçları kendi kendine ilan ettiği belirtileri dayanarak.1980'lerin sonu ve 1990'ların başında, Stephenson ve arkadaşları 6-12 yaş 11,12 yaş erkek çocukların fiziksel uygunluk düşürücü STH enfeksiyonlarının olasılığı vurgulanır. Bilimsel araştırma Bu satır yakın 13,14,15 yeni bir ivme kazanmıştır. 20-metre (m) mekik koşusu testi geliştirildid Leger et al. 16 tarafından doğrulanır ve çocuk 17 aerobik ölçmek için dünya çapında kullanılır. Testi standardize etmek kolaydır ve 20 m uzunluğunda ve düz koşu sahası ve bir ses kaynağı mevcuttur her yerde yapılabilir, kaynak kısıtlı ayarları 13 kullanımı cazip hale. STH enfeksiyonlar okul çağındaki çocukların fiziksel uygunluk üzerinde bir etkiye sahip olup olmadığının değerlendirilmesi girişimleri kolaylaştırmak ve standardize etmek için, biz yürütmek ve henüz, doğru ve tekrarlanabilir sonuçlar sağlamak için basit STH enfeksiyonlar veya tedbir kondisyon teşhis yöntemleri sunuyoruz. Bu STH enfeksiyonların sağlık etkileri ile ilgili yeni kanıtlar oluşturmak için yardımcı olacaktır.
Protocol
1. Kato-Katz Tekniği
- Bir mikroskop lamı üzerine dışkı 41.7 miligram (mg) tutmak için bir deliği olan bir standart Kato-Katz şablonu yerleştirin.
- Gazete ya da alüminyum folyo bir parça üzerine taze bir dışkı örneği 2-3 gram (g) Scoop ve elek buna üstüne tel veya plastik örgü bir parça basın.
- Küçük plastik bir spatula kullanarak, kafes kapalı elenmiş malzeme kazıyın ve tamamen onunla Kato-Katz şablon boşluğu doldurmak. Aşırı dışkı materyali kaldırmak için, spatula ile deliğin içeriği yıkacağız.
- Dikey Şimdi mikroskop lamı bağlı kalarak fekal madde bozmadan şablonu kaldırın. Şablon ve spatula deterjanla suda temizlenir ve tekrar kullanılabilir.
- Selofan bir parça koyun, mikroskop lamı üzerine dışkı örneği üzerinden, en az 24 saat (sa) için gliserin-malakit yeşil çözüm önceden ıslatılır.
- Kalın bir smear içine fekal madde yaymak için, hafifçe bir temiz mikro basınÖrnek slayt karşı kapsamında slayt, eşit mikroskop slayt genişliği biraz daha küçük çaplı bir daire içinde malzeme dağıtmak.
- Slayt slaytlar doğrudan güneş ışığından uzak tutulmalıdır sırasında 30-60 dakika (dk) için temizlemek için izin ver. Sonra, sistematik bir ışık mikroskobu (40-100x büyütme) altında kalın yayma inceleyin. STH yumurta sayısını ve türler (yani, A.lumbricoides, T.trichiura ve kancalı kurt) bunları tabakalandırmak. Not, diğer parazit yumurtaları (örneğin, Schistosoma mansoni) da bu yöntem ile tespit edilebilir ve sayılmış ve ayrı ayrı kaydedilmelidir.
- Enfeksiyonun şiddeti standardize edilmiş bir tahminini elde etmek için, geleneksel olarak dışkı (EPG) gram başına yumurta sayısı olarak ifade edilen, 24 (24 x 41.7 mg ≈ 1 g) ile yumurta sayısı çarpın.
2. Baermann Tekniği
- Zekâ kapalı, cam huni ve lastik bir boru eklemek tutabilecek bir stand kurmahuni altına ha klibi.
- Tıbbi gazlı bez parçası ile huni ve katman, bir elek veya bir koni şeklinde tel ekran bir parça yerleştirin.
- Musluk suyu ile huni doldurun ve set-up tüm sızıntı olmadığından emin olmak.
- Tıbbi gazlı bez ortasında üzerine taze dışkı 20-30 g boşaltınız ve tamamen su altında olduğundan emin olun. Gerekirse daha fazla su ekleyin. Örneklem üzerinde tıbbi gazlı bez katlayın.
- Aşağıda itibaren, 2 saat süreyle huni de yapay ışık parlayacak.
- Nazikçe lastik boru üzerinde küçük serbest bırakarak bir santrifüj tüpü içine huni içindeki suyun alt bölümünün 50 mililitre (mL) boşaltılır.
- 5 dakika boyunca 600 xg'de (göreli merkezkaç kuvveti) de toplanan su santrifüjleyin ve dikkatli sediman bozmadan süpernatant dökmek. Tüp içinde son birkaç damla saklayın.
- Bir mikroskop lamı üzerine çözüm sediment ve pipet 2 damla yeniden askıya ve slayt incelemekışık mikroskobunda (türler onay için algılama ve 100-400x büyütme 40x büyütme). S. Birinci evre larvaları (L1) stercoralis canlı ve aktif mikroskop altında hareket ettirin.
3. 20 m Mekik Koşu Testi
- 20 m Yassı ve düz koşu kurs ölçün ve koniler ile işaretleyin.
- Test katılımcının göğüs yaklaşık 18 bilek ve ilgili verici bir kalp hızı monitörü giymek Yardım. Bu ekipman katılımcının kalp hızı test öncesi ve sonrası ölçülen izin verir ve böylece katılımcının maksimal efor sarf olup olmadığını izler.
- 20-m tur sınırlayan önceden kaydedilmiş ses sinyallerinin hızını izleyerek ders ileri geri çalıştırmak için katılımcı söyleyin. Saatte 8,5 kilometre (km / saat) çalışan bir hız, bir 0.5 km eşdeğeri / her dakika HR 20 m aralıklarla artar gösteren sinyallerin frekans ile başlayarak.
- Inci olunde katılımcı yeni bir 20-m aralıklarla bir sinyal sesi duyulur her saati ve bir sonraki sinyal gelmeden önce onu bitirir.
- Katılımcı durdur o / o iki ardışık 20 m aralıklarla hızını takip etmek başarısız olursa.
- Katılımcının katılımcının yaş ve cinsiyet ile birlikte, tamamen tamamlanmış son aralığı için belirtilen en yüksek çalışma hızı kaydedin.
- Testin sonunda elde kalp hızı çocuğun maksimal kalp hızı 19 olduğunu doğrulayın. Bu kalp hızı ulaşılamaması halinde, çocuğun maksimal efor sarf olmayabilir ve bu nedenle test tekrar edilmelidir.
- 3.248 * Yaş (yıl) + - VO 2 max = 31.025 + 3.238 * hız (km / saat): Léger ve arkadaşları tarafından ileri sürülen bir denklem kullanarak katılımcının maksimum aerobik kapasitesi (VO2max), tahmin 0,1536 * hız (km / saat) * Yaş (yıl olarak).
4. Temsilcisi Sonuçlar
AçısındanKato-Katz tekniği ile STH teşhis, farklı parazit yumurtaları benzersiz özellikleri çoğu türün 20 tanımlanması için izin verir. A.lumbricoides ve yumurta (Şekil 1, yaklaşık 45-75 mikrometre (mikron) uzun ve 35-50 mikron geniş) T.trichiura (Şekil 2) ve kancalı kurt (Şekil 3) yumurtaları daha kalın kabuk duvarlara sahiptir. Olmayan bir döllenmiş yumurta bu dış ceket yoksun ve genel biraz uzun ve daha büyük iken A.lumbricoides bir döllenmiş yumurta (Şekil 1), bu altın kahverengi görünmesini sağlar bir dış albüminli ceket vardır. T.trichiura (Şekil 2, yaklaşık 50 mikron uzunluğunda ve 22 mikron genişliğinde) yumurtaları uzun ve ayrı kutup fişleri var. Kancalı kurt yumurta (Şekil 3, yaklaşık olarak 64-76 um uzunluğunda ve 36-40 mikron genişliğinde), diğer yandan da, hücreler yoğun bir küme etrafında bir açık halka, ardından bir çok ince bir duvar vardıryumurta merkezinde.
S.stercoralis L 1 larvaları (Şekil 4), yaklaşık 180-380 mikron uzun ve çok kısa bir ağız boşluğu var. Bir farklı genital primordium'un (Şekil 4 mavi ok ile işaretli) gözlenen ve larvaları (Şekil 4 kırmızı ok ile işaretli) ve kuyruk keskin bir uca sahiptir edilebilir.
Çocukların fiziksel uygunluk üzerindeki STH enfeksiyonların gerçek etkisi hala 13,14,15 tartışılıyor edilirken, bu noktada onların etkisini hiçbir temsili bir sonuç var. 20-m mekik tarafından işletilen deney Sonuçların yorumlanması çeşitli yollarla gerçekleştirilebilir. Çocukların fiziksel uygunluk yaş ve cinsiyet, diğer potansiyel olarak ilgili sağlık koşulları, sosyoekonomik ve kültürel alışkanlıkları açısından benzer enfekte ve enfekte olmayan denekler arasında mukayese edilebilir. Bu, bir kesitsel 13,14,15 yapılabilir neredeSTH bulaşma durumu ve enfekte ve enfekte olmayan çocukların spor fiziksel belli bir zaman noktasında değerlendirilir. Okul çağındaki çocukların fiziksel uygunluk anthelminthic / plasebo tedavi öncesi ve sonrası değerlendirilir randomize kontrollü bir çalışma tasarımı takip ederken kanıtların gücü hem kısa hem de uzun vadeli değerlendirilmesi için izin daha yüksek olacaktır. Bir başka STH enfeksiyonlar ve fiziksel uygunluk yoğunluğu arasında olası bir doz-yanıt ilişkisi tespit ve fiziksel fitness multiparasitism 1 farklı düzeylerde karşılaştırmak için deneyebilirsiniz. Yapı ve arkadaşları 15 tarafından sunulan çalışmada, gibi VO 2 max tasvir fiziksel uygunluk, anlamlı T.trichiura ile enfekte olmayan çocuklarda (Şekil 5) ile karşılaştırıldığında T.trichiura ile enfekte çocuklarda azalmış olduğu tespit edildi .
Figu . A.lumbricoides yumurta yeniden 1 mikroskobik görüntüleri: döllenmiş (A) ve (B) 500x büyütme altında olmayan döllenmiş. Ölçek bar = 50 mikron.
Şekil 2. 500x büyütme altında bir T.trichiura yumurta mikroskobik görüntüsü. Ölçek bar = 50 mikron.
Şekil 3. 500x büyütme altında bir kancalı kurt yumurta mikroskobik görüntüsü. Ölçek bar = 50 mikron.
Şekil 4. 250x büyütme altında bir S.stercoralis L 1 larva mikroskobik görüntüsü. Oklar kuyruk (kırmızı) ve genital primordium'un (mavi) gösterir. Ölçek bar = 100 mikron.
d/3966/3966fig5.jpg "/>
Şekil 5. T. ile enfekte olmayan çocukların fiziksel uygunluk seviyesine göre T.trichiura ile enfekte çocukların fiziksel uygunluk düzeyini gösteren grafiği trichiura.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu yazıda anlatılan üç protokol Yunnan eyaletinin Bulang etnik azınlık 21 üyeleri arasında ve Afrika 6,13,14 farklı yerlerinde Çin Halk Cumhuriyeti'nin güney-batı kısmında test ve idam edilmiştir.
Kato-Katz tekniği için çeşitli şablonlar vardır. Delik boyutu ayrı her fekal madde ayrı bir miktarda teslim edecek. EPGs hesaplanması için, EPG tahmine ulaşmak için doğru faktörü ile yumurta sayısı sayılır çarpmak için, böylece bu nedenle şablonun birim bilmek gereklidir. Ayrıca, kancalı kurt inceleme altında topluluk içinde mevcut olduğunda, (30 dakikalık bir süre temizledikten sonra, ancak 60 dakikalık bir süre içinde maksimum açıklığa) kısa bir süre sonra hazırlık slaytlar okumak için gereklidir. Temel nedeni yüksek sıcaklıklarda, kancalı kurt yumurtaları hızla 22 parçalanır olmasıdır. Çalışmanın par fekal üretim arasındaki süregörüşmeci ve numunelerin incelenmesi de 3 saat ya da daha fazla tanı hookworm 23 Kato-Katz tekniğinin duyarlılığı% 50 azalmaya yol açabilir bir aralık kadar önemlidir. Son olarak, özellikle düşük yoğunluklu STH enfeksiyonları, birden fazla dışkı örnekleri Gönüllülerden elde edilmeli ve çift ya da üç nüsha Kato-Katz kalın yayma ile alanlarda, Kato-Katz tekniğinin tanısal duyarlılığını artırmak için her dışkı numunesinden hazırlanmış olmalıdır 7,24.
Infektif larvaların mevcut ve bu nedenle, eldiven takılmalıdır olabilir gibi deney yapılırken Baermann tekniği ile ilgili olarak, dikkat alınması gerekir. Baermann tekniği diğer toplama teknikleri oranla önemli ölçüde yüksek hassasiyet gösterir ve kültür yöntemlerine göre daha az zahmetli olsa da, önemli eksiklikler bulunmaktadır. Örneğin, yeni dışkı maddesinin büyük bir miktarı hastanın küçük dışkı numuneleri bir sorun olan, gereklidir.Öte yandan, büyük bir dışkı örneği düşük yoğunluklu enfeksiyonları 9 larva algılama şansını artırabilir. Buna ek olarak, bu tür kancalı kurt ya da Trichostrongylus türleri gibi diğer nematodlar, larvaları., Mevcut olabilir riski vardır, bu nedenle dikkatli bir mikroskopik inceleme garanti edilir.
Aerobik fitness değerlendirmeler için VO2max ölçüm doğrudan ve dolaylı yolu vardır. Doğrudan protokolleri ekshale hava hacmi ve gaz konsantrasyonlarını ölçebilir koşu bandı, bisiklet ergometresi, ve diğer özel ve hantal ekipman gerektirir. Böyle bir yaklaşım, gelişmekte olan dünyada bir kaynak kısıtlı kırsal ortamda mümkün değildir. Bu tür ayarlar için, örneğin 20 metrelik mekik koşusu testi gibi dolaylı yollardan, tercih edilen yöntemlerdir. Dolaylı yöntemler doğrudan yöntemler kadar doğru asla rağmen, Leger ve arkadaşları tarafından kurulan 20 metrelik mekik koşusu testi yüksek tekrarlanabilirlik (r = 0.89) ve validit göstermiştirbir koşu bandı 16 maksimal oksijen alımı karşı y. Ayrıca, araştırmacı ve katılımcı oranı daha düşük olabilir ve birden fazla katılımcı insan kaynakları ve zaman tasarrufu, aynı zamanda da test gerçekleştirebilir. Kalp hızı monitörleri genellikle bu tür testler 13,16 kullanılmaz. Ancak, bunların kullanımı araştırmacı katılımcı testinde maksimal efor sarf olup olmadığına ilişkin ek bilgi elde etmesini sağlar. Sonunda, onlar çalışan hız ve tabii aşina böylece katılımcıların ilk birkaç aralıklarla bir deneme yapalım önerilir.
Sonuç olarak, biz standart protokoller sonrasında yukarıda bahsedilen yöntemleri bir arada, STH enfeksiyonlar ve henüz bir bilimsel okul çağındaki çocukların, yönetilebilir ve ekonomik bir şekilde fiziksel uygunluk yaygınlığı ve yoğunluğu değerlendirmesi için izin inanıyoruz.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Çıkar çatışması ilan etti.
Acknowledgments
Yazarlar yukarıda anlatılan çalışmalarda katıldıkları için Yunnan eyaleti, Çin Halk Cumhuriyeti ve Agboville, Fildişi Sahili, toplumların minnettarız. Biz protokollerin test ve yürütülmesine yardımcı olmuştur yerel saha ekipleri borçluyuz. Video çekimi sırasında ona yardım için mikroskobik görüntüleri, laboratuar desteği ve Stefanie Krauth için Hanspeter Marti ve ekibi sağlamak için Yvette Endriss: Biz İsviçre Tropikal ve Halk Sağlığı Enstitüsü şu meslektaşlarına özellikle minnettarız. Son olarak, yararlı görüş bir dizi için iki anonim hakeme teşekkür ederim.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
Note: Materials in this list are generic and can be obtained from different sources. |
|||
| Kato-Katz kit [400 plastic templates with a hole of 6 millimeter (mm) (diameter) in a 1.5 mm thick template; 400 plastic spatula; a 20-m role of nylon screen of 80 mesh size; a 20-m role of hydrophilic cellophane, 34 μm thick.] |
Vestergaard Frandsen | Please note that the glycerin-malachite green solution is not included in this kit but can be bought from any chemical supplier. | |
| Glass funnel [about 8 centimeter (cm) wide and 6 cm deep] | The glass funnel for the Baermann technique should be able to hold about 60 mL of water. The size of the rubber hose and gauze is dependent on the type of glass funnel used. | ||
| Biological microscope | Olympus | CX21LED/CX21 | |
| Centrifuge | Shanghai Medical Instruments Group | 80 - 2T | |
| Pre-recorded signals | Bitworks Design | Team Bleep Test Version 1.3.1 | iPhone application |
| Heart rate monitor | POLAR | FT1 | Watch and transmitter |
References
- Steinmann, P., Utzinger, J., Du, Z. W., Zhou, X. N. Multiparasitism: a neglected reality on global, regional and local scale. Advances in Parasitology. 73, 21-50 (2010).
- Bethony, J., Brooker, S., Albonico, M., Geiger, S., Loukas, A., Diemert, D., Hotez, P. J. The soil-transmitted helminth infections: ascariasis, trichuriasis, and hookworm. Lancet. 367, 1521-1532 (2006).
- Hotez, P. J., Molyneux, D. H., Fenwick, A., Kumaresan, J., Ehrlich Sachs, S., Sachs, J. D., Savioli, L. Control of neglected tropical diseases. New England Journal of Medicine. 357, 1018-1027 (2007).
- Chan, M. S. The global burden of intestinal nematode infections-fifty years on. Parasitology Today. 13, 438-443 (1997).
- Olsen, A., van Lieshout, L., Marti, H., Polderman, T., Polman, K., Steinmann, P., Stothard, R., Thybo, S., Verweij, J. J., Magnussen, P. Strongyloidiases - the most neglected of the neglected tropical diseases. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 103, 967-972 (2009).
- Becker, S. L., Sieto, B., Silue, K. D., Adjossan, L., Kone, S., Hatz, C., Kern, W. V., N'Goran, E. K., Utzinger, J. Diagnosis, clinical features, and self-reported morbidity of Strongyloides stercoralis and hookworm infection in a co-endemic setting. PLoS Neglected Tropical Diseases. 5, e1292 (2011).
- World Health Organization. Action against worms. WHO Newsletter. (11), Geneva. (2008).
- Montresor, A., Crompton, D. W. T., Hall, A., Bundy, D. A. P., Savioli, L. Guidelines for the evaluation of soil-transmitted helminthiasis and schistosomiasis at community level. World Health Organization. , (1998).
- García, L. S., Bruckner, D. A. Diagnostic medical parasitology. , American Society for Microbiology. Washington D.C. (2001).
- Brooker, S. Estimating the global distribution and disease burden of intestinal nematode infection: adding up the numbers - a review. International Journal for Parasitology. 40, 1137-1144 (2010).
- Stephenson, L. S., Latham, M. C., Kinoti, S. N., Kurz, K. M., Brigham, H. Improvements in physical fitness of Kenyan schoolboys infected with hookworm, Trichuris trichiura and Ascaris lumbricoides following a single dose of albendazole. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 84, 277-282 (1990).
- Stephenson, L. S., Latham, M. C., Adams, E. J., Kinoti, S. N., Pertet, A. Physical fitness, growth and appetite of Kenyan school boys with hookworm, Trichuris trichiura and Ascaris lumbricoides infections are improved four months after a single dose of albendazole. Journal of Nutrition. 123, 1036-1046 (1993).
- Bustinduy, A. L., Thomas, C. L., Fiutem, J. J., Parraga, I. M., Mungai, P. L., Muchiri, E. M., Mutuku, F., Kitron, U., King, C. H. Measuring fitness of Kenyan children with polyparasitic infections using the 20-meter shuttle run test as a morbidity metric. PLoS Neglected Tropical Diseases. 5, e1213 (2011).
- Müller, I., Coulibaly, J. T., Fürst, T., Knopp, S., Hattendorf, J., Krauth, S. J., Stete, K., Righetti, A. A., Glinz, D., Yao, A. K., Pühse, U., N'Goran, E. K., Utzinger, J. Effect of schistosomiasis and soil-transmitted helminth infections on physical fitness of school children in Côte d'Ivoire. PLoS Neglected Tropical Diseases. 5, e1239 (2011).
- Yap, P., Du, Z. W., Chen, R., Zhang, L. P., Wu, F. W., Wang, J., Wang, X. Z., Zhou, H., Zhou, X. N., Utzinger, J., Steinmann, P. Soil-transmitted helminth infections and physical fitness in school-aged Bulang children of southwest China: results from a cross-sectional survey. Parasites and Vectors. 5, 50 (2012).
- Léger, L. A., Mercier, D., Gadoury, C., Lambert, J. The multistage 20 metre shuttle run test for aerobic fitness. Journal of Sports Sciences. 6, 93-101 (1988).
- Tomkinson, G. R., Léger, L. A., Olds, T. S., Cazorla, G. Secular trends in the performance of children and adolescents (1980-2000): an analysis of 55 studies of the 20 m shuttle run test in 11 countries. Sports Medicine. 33, 285-300 (2003).
- POLAR Electro, User Manual for POLAR FT1/FT2 in English. , Available from: http://www.polar.fi/en/support/manuals/User_Manual_for_Polar_FT1_FT2_in_English?product_id=26180&category=manuals (2011).
- Mahon, A. D., Marjerrison, A. D., Lee, J. D., Woodruff, M. E., Hanna, L. E. Evaluating the prediction of maximal heart rate in children and adolescents. Research Quarterly for Exercise and Sport. 81, 466-471 (2010).
- Bogitsh, B. J., Carter, C. E., Oeltmann, T. N. Human Parasitology. , third edition, Elsevier Academic Press. (2011).
- Steinmann, P., Zhou, X. N., Du, Z. W., Jiang, J. Y., Wang, L. B., Wang, X. Z., Li, L. H., Marti, H., Utzinger, J. Occurence of Strongyloides stercoralis in Yunnan province, China, and comparison of diagnostic methods. PLoS Neglected Tropical Diseases. 1, e75 (2007).
- Martin, L. K., Beaver, P. C. Evaluation of Kato thick-smear technique for quantitative diagnosis of helminth infections. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. 17, 382-391 (1968).
- Dacombe, R. J., Crampin, A. C., Floyd, S., Randall, A., Ndhlovu, R., Bickle, Q., Fine, P. E. Time delays between patient and laboratory selectively affect accuracy of helminth diagnosis. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 101, 140-145 (2007).
- Knopp, S., Mgeni, A. F., Khamis, I. S., Steinmann, P., Stothard, J. R., Rollinson, D., Marti, H., Utzinger, J. Diagnosis of soil-transmitted helminths in the era of preventive chemotherapy: effect of multiple stool sampling and use of different diagnostic techniques. PloS Neglected Tropical Diseases. 2, e331 (2008).
