Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

Solubilization og Bio-konjugering av kvanteprikker og Bakterielle Toxicity analyser av vekst Curve og kimtall

Published: July 11, 2012 doi: 10.3791/3969

Summary

Nanopartikler som halvleder kvanteprikker (QDs) kan brukes til å lage photoactivatable agenter for anti-mikrobielle eller anti-kreft-applikasjoner. Denne teknikken viser hvordan vann-solubilize kadmium Telluride (CdTe) QDs, konjugat dem til et antibiotikum, og utføre en bakteriell hemming analysen basert på vekstkurver og kimtall.

Abstract

Kvanteprikker (QDs) er fluorescerende halvledere nanopartikler med størrelse avhengig av utslipp spektre som kan bli opphisset av et bredt utvalg av bølgelengder. QDs har tiltrukket seg mye oppmerksomhet for bildebehandling, diagnostikk og terapi på grunn av sin lyse, stabile fluorescens 1,2 3,4,5. QDs kan være konjugert til en rekke biologisk aktive molekyler for å binde seg til bakterier og pattedyrceller 6.

QDs blir også mye etterforskes som cytostatika for målrettet drap av bakterier. Fremveksten av formere-resistente bakteriestammer er raskt blitt en offentlig helsekrise, særlig i tilfelle av gramnegative patogener 7. På grunn av den velkjente antimikrobiell effekt av visse nanomaterialer, spesielt Ag, er det hundrevis av studier som undersøker toksisitet av nanopartikler til bakterier åtte. Bakterielle utført studier med andre typer halvledere nanopartikler også, especially TiO 2 9,10-11, men også ZnO 12 og andre, inkludert CuO 13. Noen sammenligninger av bakteriestammer har blitt utført i disse studiene, vanligvis sammenligner en Gram negativ belastning med en Gram positiv. Med alle disse partiklene, er mekanismene for toksisitet skyldes oksidasjon: enten photogeneration av reaktive oksygenforbindelser (ROS) av partikler eller direkte utslipp av metallioner som kan forårsake oksidativt toksisitet. Selv med disse materialene, resultater fra ulike studier varierer sterkt. I noen studier er Gram positive testen belastning er angivelig mer følsom enn den Gram-negative 10, i andre er det motsatt 14. Disse studiene har blitt godt anmeldt 15.

I alle nanopartikkel studier, kan partikkelsammensetning, størrelse, overflatekjemi, prøve aldring / sammenbrudd, og bølgelengde, kraft og varighet av lyseksponering alle dramatisk påvirke resultatene. I tillegg synthesis biprodukter og løsemidler må vurderes 16 17. High-throughput screening teknikker for å kunne utvikle effektive nye nanomedisin agenter.

CdTe QDs har anti-mikrobielle effekter alene 18 eller i kombinasjon med antibiotika. I en tidligere studie, viste vi at kobling av antibiotika til CdTe kan øke toksisiteten til bakterier, men redusere toksisitet til pattedyrceller, på grunn av redusert produksjon av reaktive oksygenforbindelser fra konjugater 19. Selv om det er usannsynlig at kadmium-holdige forbindelser vil bli godkjent for bruk i mennesker, kan slike preparater brukes til desinfeksjon av overflater eller sterilisering av vann.

I denne protokollen, gir vi en grei tilnærming til solubilizing CdTe QDs med mercaptopropionic syre (MPA). De QDs er klar til bruk innen en time. Vi så demonstrere kopling til et antimikrobielt middel.

Den andre delen av protokollendemonstrerer en 96-brønns bakteriell hemming analysen ved hjelp av konjugert og ukonjugert QDs. Den optiske tettheten avleses over mange timer, tillater virkningene av QD tillegg og lys eksponering skal vurderes umiddelbart og etter en restitusjonsperiode. Vi illustrerer også en kimtall for å kvantifisere overlevelse av bakterier.

Protocol

1. QD solubilization

Dette er en metode som passer for CdTe. Lignende metoder kan brukes med andre typer QDs som INP / ZnS 20 og CdSe / ZnS 21.

  1. Forbered en løsning av CdTe QDs i toluen ved 15 mM (optisk tetthet = 2,5 ved første exciton peak).
  2. Overføring 200 mL av denne bestanden i et hetteglass. Ikke bruk plast!
  3. Legg 800 mL toluen, 1 mL 200 mm borate buffer (pH 9) og 2 mL av 11,5 M mercaptopropionic syre (MPA).
  4. Cap hetteglasset og rist det kraftig i 30-60 sekunder.
  5. De vannholdige og organisk løsemiddel faser vil skille spontant. Den vandige fasen blir fargen på QDs. For å unngå toluen laget, fjerne den og kast den. Deretter overføre den vandige fasen i en ren flaske.
  6. Renser solubilisert QDs ved å vaske / filtrering fire ganger med en 500 mL, 10000 molekylvekt cutoff sentrifuge filter. Filtrene skal væresentrifugert ved 3000 xg i 13 minutter. For minst de to siste vaskes med ønsket endelige buffer.
  7. Etter den siste vask, suspendere den avdankede QDs i 50 mM borate buffer på ønsket pH og oppbevar ved 4 ° C. De vil være stabil i 1-2 uker.
  8. Mål absorbansen og utslipp spektra å estimere konsentrasjonen basert på publiserte formler 22.

Representative resultater: Figur 1 viser et bilde av CdTe QDs under UV lampe belysning, og utslipp spektra før og etter vann solubilization, viser ubetydelig endring fra hetten utveksling. De størrelse verdiene er kjernen diameter målt ved elektronmikroskopi.

2. QD Bøyning til antibiotika

Denne delen av protokollen gjelder til enhver negativt ladede vann-solubilisert nanopartikler, inkludert de fleste kommersielle QDs, metall partikler, og mer 19.

  1. Enhver molekyl vil fungere som eithER selv setter sammen til de negativt ladede solubilisert QDs, eller som har en reaktiv gruppe som kan være konjugert, for eksempel en primær amin. I dette eksempelet bruker vi polymyxin B (PMB), som er positivt ladet og selv setter sammen uten behov for konjugering reagenser. Løs opp PMB i H 2 O på 60 mikrometer. (Hvis antibiotika valgt er ikke løselig i H 2 O, oppløses i DMSO eller etanol i en konsentrasjon på 0,1 til 1 mm). Dette vil være en 10x løsning (i H 2 O), eller en 100x løsning (i løsemiddel).
  2. Beregn hvor mye QD løsningen du trenger for de bakterielle toksisitet eksperimenter. For en 96-brønns plate med 0,3 ml per brønn i quadruplicates, er 0,5 mL av 200 nM konjugat nødvendig. Forbered to rør som inneholder 100 mL av 1 mikrometer kvanteprikker i 50 mM borate buffer.
  3. Hvis kobling til en primær amin, forberede en 19 mg / ml (100 mm) løsning av 1-Ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl] carbodiimide hydroklorid (EDC) i H 2 O. EDC i løsningen ikke er stabil, Bruk umiddelbart og kaste resten bort.
  4. Tilsett 50 mL av 10x antibiotika løsningen (i H 2 O) eller 5 mL av 100x løsning (i løsemiddel) til konjugat røret. For PMB: CdTe konjugasjon på molare forholdet 30:1, tilsett 50 mL av 60 mM PMB. Legg H 2 O eller løsemiddel til QD eneste kontrollen tube.
  5. Hvis nødvendig, tilsett 1 mL av EDC stamløsning til konjugat røret.
  6. Ta opp konjugat volumet til 0,5 ml med riktig buffer (borate buffer eller PBS, ingen amin-holdige buffere som Tris, ettersom de vil hemme EDC).
  7. Shield rør fra lys med aluminiumsfolie, og legg på en nutator eller rocker for en time. Hvis aggregering oppstår, gjenta konjugering med lavere konsentrasjoner av antibiotika. Titrere konsentrasjon oppover til partiklene gjør ikke samlet.
  8. Vask konjugater ved å passere gjennom en passende filter. 10000 molekylvekt cutoff fungerer for de fleste antibiotika, men ikke for proteiner eller antistoffer. Avhengig av molekylet, kan ulike metoder brukes for å estimere antall antibiotika molekyler per QD: absorbans eller fluorescens spektroskopi, gel elektroforese, eller Fourier transform infrarød spektroskopi (FTIR).

Representative resultater. I dette eksemplet er PMB konjugering preget av endringer i QD utslipp spektrum. Figur 2 viser spektra av CdTe QDs med PMB tillegg.

3. Utarbeidelse av bakterier for 96-brønnen Screen; Fastsettelse av antibiotika IC 50

Dette gjelder for nesten alle bakteriestamme vokst i riktig medium 18. Den nøyaktige tiden opptakene bør fortsette avhenger av bakteriell vekst. I vårt eksempel bruker vi Escherichia coli dyrket i lysogeny buljong (LB) medium.

  1. For å velge de riktige QD konjugerte konsentrasjoner, er det viktig å vite detIC 50 av antibiotika for å være konjugert og hvis QDs alene er giftig. Dette bør begynt 2 dager før konjugering eksperimentet. På kvelden frø 10 ml bakterievekst medium fra en fersk koloni, med riktig steril og biosikkerhet teknikk.
  2. Den neste dagen, 1-2 timer før forsøket, fylle hver av brønnene til en klar bunn 96-brønnen plate med en nesten-maksimal mengde vekst medium. Ved hjelp av en flerkanals pipette, frø hver brønn med 1-50 mL av bakteriekultur (konsentrasjonen vil avhenge hvor fort den aktuelle belastning vokser og må kalibreres ved ditt laboratorium).
  3. Sett platen på plateavleseren og sette den til å lese hvert 10. minutt til 2 timer ved en bestemt bølgelengde (vanligvis 600 nm). Overvåk plate slik at bakteriene ikke blir for tett for fort.
  4. Når cellene alle nå OD = 0,1 til 0,15, fjerne platen fra plateavleseren og stoppe opptaket.
  5. Legg stoffet alene og QDs alene vedulike konsentrasjoner i minst triplicates. Bruk den ene siden av platen som en "mørk" kontroll og en halv som skal belyses. En foreslått layout er gitt i figur 3. Konsentrasjonene bør spenner over et bredt nok utvalg til å omfatte en konsentrasjon som hemmer bakteriene svært lite, og en som dreper dem alle.
  6. Skjerme "mørke" siden av tallerkenen med aluminiumsfolie. Avslør den andre siden til en lampe på ønsket bølgelengde. Vi bruker en tilpasset 96-brønn, 440 nm-lampe laget fra 2,4 mW lysdioder (figur 4) og strålebehandling for 30-60 min. De sorte plater med klare bunner hjelpe skjerme ueksponerte bakterier fra strølys. En tom kolonne kan også benyttes mellom de synlige og un-eksponerte sider.
  7. Etter lyseksponering, sette platen inn i plateavleseren og rekord OD 600 hvert 10. minutt for 5-12 timer avhengig av vekst. Hold temperaturen <32 ° C hvis mulig å unngå uttørking av kulturer.
  8. Plotte vekstkurverpå et valgt tidspunkt vs log [konsentrasjonen] og bestemme IC 50 av antibiotika ved hjelp av Hill ligningen:

Formel 1
der H er Hill koeffisienten, er y max det høyeste punktet i vekst (helst på et platå), og y min er null-punktet, også ideelt på et platå. Det er usannsynlig at QDs alene vil vise mye toksisitet til cellene ved de konsentrasjonene som brukes, så en verdi vil ikke bli bestemt.

Representative resultater. På slutten av opptaket perioden, vil klare brønner indikere komplett celledød, og en stigning på celle tetthet skal vises langs økende konsentrasjoner av stoffet. Bakteriene skal vise S-formede vekstkurver (figur 5 A); plasseringen av maksimalt platået vil variere sterkt fra belastning til press og også avhengig av temperatur. En gitt tidspunkt kan værevalgt som representant og de ​​verdier plottes vs Log [antibiotika] for å gi IC 50 (figur 5 B). For å evaluere QD toksisitet, overlevelse vs Log [QD] kan også plottet, men å oppnå betydelig bakteriell drap med QDs alene er sjelden (Figur 5 C).

4. Utarbeidelse av bakterier for 96-brønnen Screen med antibiotika / QDs

  1. Dagen før forsøket, frø 10 ml kultur fra en fersk koloni i riktig rike medium, med riktig steril og biosikkerhet teknikk. Den QD-antibiotiske konjugat bør utarbeides på denne dagen, med mindre det er svært ustabil.
  2. 1-2 timer før forsøket, fylle hver av brønnene til en klar bunn 96-brønnen plate med en nesten-maksimal mengde vekst medium. Ved hjelp av en flerkanals pipette, frø hver brønn med 1-50 mL av bakteriekultur.
  3. Sett platen på plateavleseren og sette den til å lese hvert 10. minutt i 2 timer på samme bølgelengde som i del tre.
  4. Når cellene alle nå OD = 0,1 til 0,15, fjerne platen fra plateavleseren og stoppe opptaket.
  5. Legg QD konjugater ved ulike konsentrasjoner i minst fire eksemplarer. Bruk den ene siden av platen som en "mørk" kontroll og en halv som skal belyses. En foreslått layout er gitt i Figur 6. En bakterier bare kontroll stripe skal alltid være inkludert i tilfelle problemer med kulturen, temperatur, etc. påvirke vekstforhold. En enkelt stripe av narkotika bare og QD bare bør også inngå for å sikre at de samsvarer med kontroll plate gjort tidligere. Resten av brønnene er dedikert til konjugater for å muliggjøre god statistikk.
  6. Skjerme "mørke" siden av tallerkenen med aluminiumsfolie. Avslør den andre siden til en lampe på ønsket bølgelengde.
  7. Etter lyseksponering, sette platen inn i plateavleseren og rekord OD 600 hvert 10. minutt for 5-12 timer. Hold temperaturen <32 ° C hvis mulig å unngå drying av kulturer.

Representative resultater. Kombinasjonen av QDs og antibiotika kan være mindre giftig enn antibiotika alene, like giftig, eller mer giftig. Dette kan kvantifiseres ved hjelp av vekstkurver og IC 50 målinger. Figur 7 viser et eksempel på konjugater som like giftig som antibiotika alene, og et eksempel på konjugater som er mer giftig.

5. Plate Count

  1. Velg en eller flere brønner i det behandlede 96-brønnen plate som skal brukes for serielle fortynninger og kolonien teller.
  2. Lag en seriell fortynning av hver av de utvalgte bakterielle prøvene med PBS eller saltvannsoppløsning (0,9% NaCl). Overføring 20 mL av bakteriell løsningen og fortynn den med 180 mL saltvannsoppløsning, endre pipettespissen, mix og overføre 20 mL fortynnet bakteriell løsning til 180 mL saltvannsoppløsning. Gjenta 6 ganger.
  3. Ta 10 mL fra hver fortynning og plate på en hensiktsmessig solid media plate. Alle 8 konsentrasjoner av en prøve kan være belagt med en 10 cm rund petriskål, men rektangulære retter foretrekkes som det er lettere å stille ting opp.
  4. La det tørke på benken i 15 min. Deretter inkuber ved passende temperatur for dine bakterier i 16 timer.
  5. Tell koloniene og beregne koloni dannende enheter (CFU) i henhold til (# av kolonier x fortynningsfaktoren) / volum belagt = CFU / ml.

Figur 8 viser et eksempel CFU plate.

6. Representative Resultater

Figur 1
Figur 1. CdTe QDs. (A) Åtte preparater av CdTe QDs belyst med en UV tryllestav (365 nm). (B) Absorbance og utslipp spektra av fem utvalgte størrelser før og etter vann-solubilization. Er de stiplede linjene spektra i toluen, de heltrukne linjene er i vann.

files/ftp_upload/3969/3969fig2.jpg "/>
Figur 2. Spectral og gel analyse av QD-PMB konjugater. Orange-emitting CdTe QDs ble brukt for dette eksemplet, virkningene på andre typer QDs må vurderes for hvert forsøk. (A) Typisk absorbans (grå linje) og emisjons spektra (svart linje) av QDs før konjugering av PMB og utslipp (stiplet linje) etter tilsetning av 160 molar ekvivalenter av PMB. (B) Forholdet mellom forholdet mellom PMB og QD utslippsintensiteten (ruter) og topp bølgelengde sted (trekanter).

Figur 3
Figur 3. Forslag plate layout for kontroll vekst plate. Et bredt spekter av PMB og QD konsentrasjoner er representert. Den ene halvdelen av tallerkenen bestråles (uthevet blå), og en identisk omgang er beskyttet mot lys. Klikk herfor å se større figur.

Figur 4
Figur 4. Custom 96-LED lampe for uniform plate bestråling, som viser utseende av og på. En typisk håndholdt UV lampe kan også brukes, men vil ikke dekke hele platen jevnt.

Figur 5
Figur 5. Eksempel resultater for kontroll vekst plate. (A) Representant bakterielle vekstkurver med ulike narkotika konsentrasjoner, fra 0 fullføre celledød. De åpne symboler er PMB bare med konsentrasjoner gitt, de solide symbolene er CdTe-PMB uten bestråling, og halvfullt symboler er CdTe-PMB med bestråling. Bestråling hadde ingen effekt på PMB som bare prøver, så disse kurvene ble utelatt for klarhet. Alle PMB-CdTe konjugater er 30:1 PMB: QD forholdstall. (B) tomter vekstkurve verdier på 200 min vs Log [PMB] og passer til Eq. (1). Til fortsrol for effekten av lys, er en kurve ferdig med antibiotika bare med 30 min av lyseksponering. (C) Bakteriell overlevelse på 200 min vs QD konsentrasjon, bruke CdTe QDs. Noen toksisitet er sett med lys, men altfor lite til å fastslå en IC 50-verdi. Klikk her for å se større figur .

Figur 6
Figur 6. Forslag layout for konjugat test plate. Den blå-markert halvparten av tallerkenen bør utsettes for lys, og det unhighlighted halvdel er beskyttet. Klikk her for å se større figur .

Figur 7
Figur 7. Eksempel resultater for konjugat test plate. Vekstkurve verdier ved 200 min var plotted og passform til Eq. (1). (A) CdTe-PMB konjugater viser økt toksisitet enn PMB alene. (B) Gull nanopartikler Au-PMB konjugater viser ingen økt toksisitet enn PMB alene.

Figur 8
Figur 8. Eksempel på en CFU plate. E. coli seeded i en 96-brønns plate ble behandlet med QD-PMB med eller uten strålebehandling i 30 min. deretter inkubert ved 32 ° C i 4 timer. Serielle fortynninger av hver bakteriell utvalget ble gjort med saltvannsoppløsning, og 10 mL av 100 X 10 7 x fortynninger ble belagt på agar plater. Platene ble inkubert ved 37 ° C og kolonier ble regnet etter 16 timer. Platen viser fortynninger langs radene som indikerte, søylene er: (A) 0,06 mM PMB + 2 nM CdTe, (B) 0.12 mM PMB + 4 nM CdTe (C) 0,2 mM PMB + 6,7 nM CdTe, (D) 0,06 mikrometer PMB + 2 nM CdTe bestrålt, (E) 0.12 mM PMB + 4 nM CdTe bestrålt, (F) 0,2 mM PMB + 6,7 nM CdTe irradiated.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Nanopartikler representerer en lovende tilnærming til etablering av nye anti-mikrobielle midler. Vekstkurve analyse er en måte å overvåke bakteriell celle tetthet som skiller aktivt-voksende celler fra vekst-hemmet celler. Når dette kombineres med plate teller, gir det mulighet for en grundig analyse av antibiotika potensialet for en konjugat. Den 96-brønnen format tillater relativt high-throughput variasjoner av konsentrasjonen og andre forhold som lys eksponering, sistnevnte er avgjørende for lysaktivert agenter som kvanteprikker. Mange varianter av denne grunnleggende tilnærming er mulig, gjør det til en allsidig metode for nanotoxicology.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Ingen interessekonflikter erklært.

Acknowledgments

Dette arbeidet ble finansiert av NSERC Individuell Discovery program, NSERC / CIHR Collaborative Health Research Program (CHRP), og den NSERC CREATE kanadiske astrobiologi Training Program (CATP).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Borate Buffer Component #1 Fisher Boric acid A-74-1
Borate Buffer Component #2 Sigma-Aldrich Sodium Tetraborate B9876
MPA Sigma-Aldrich M5801
Vivaspin 500 GE Healthcare 28-9322 Various MWCO available
Glass vials Fisher 03-338C
EDC Sigma-Aldrich E6383
Polymyxin B Sigma-Aldrich P1004
Bacterial growth medium (LB) Component #1 Fisher NaCl S271
Bacterial growth medium (LB) Component #2 BD Tryptone 211705
Bacterial growth medium (LB) Component #3 BD Yeast Extract 211929
Lamp for light exposure Custom
Clear-bottom 96-well plates Fisher 07-200-567 or 07-200-730
Fluorescence spectrometer Molecular Devices
Absorbance plate reader Molecular Devices
BactoAgar for solid media Bioshop AGR001.1
Petri dishes round Fisher 08-75-12
Petri dishes rectangular Fisher 08-757-11A

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Michalet, X. Quantum dots for live cells, in vivo imaging, and diagnostics. Science. 307, 538-544 (2005).
  2. Jamieson, T. Biological applications of quantum dots. Biomaterials. 28, 4717-4732 (2007).
  3. Asokan, S. The use of heat transfer fluids in the synthesis of high-quality CdSe quantum dots, core/shell quantum dots, and quantum rods. Nanotechnology. 16, 2000-2011 (2005).
  4. Chan, W. C. W. Luminescent quantum dots for multiplexed biological detection and imaging. Curr. Opin. Biotechnol. 13, 40-46 (2002).
  5. Chan, W. C. W., Nie, S. M. Quantum dot bioconjugates for ultrasensitive nonisotopic detection. Science. 281, 2016-2018 (1998).
  6. Biju, V., Itoh, T., Ishikawa, M. Delivering quantum dots to cells: bioconjugated quantum dots for targeted and nonspecific extracellular and intracellular imaging. Chem. Soc. Rev. 39, 3031-3056 (2010).
  7. Boucher, H. W. Bad bugs, no drugs: no ESKAPE! An update from the Infectious Diseases Society of America. Clin. Infect. Dis. 48, 1-12 (2009).
  8. Morones, J. R. The bactericidal effect of silver nanoparticles. Nanotechnology. 16, 2346-2353 (2005).
  9. Mitoraj, D. Visible light inactivation of bacteria and fungi by modified titanium dioxide. Photochemical & Photobiological Sciences. 6, 642-648 (2007).
  10. Fu, G., Vary, P. S., Lin, C. T. Anatase TiO2 nanocomposites for antimicrobial coatings. J. Phys. Chem. B. 109, 8889-8898 (2005).
  11. Chung, C. J., Lin, H. I., Tsou, H. K., Shi, Z. Y., He, J. L. An antimicrobial TiO2 coating for reducing hospital-acquired infection. J. Biomed. Mater. Res. B. Appl. Biomater. 85, 220-224 (2008).
  12. Nair, S. Role of size scale of ZnO nanoparticles and microparticles on toxicity toward bacteria and osteoblast cancer cells. J. Mater. Sci. Mater. Med. 20, Suppl . 1. S235-S241 (2009).
  13. Heinlaan, M., Ivask, A., Blinova, I., Dubourguier, H. C., Kahru, A. Toxicity of nanosized and bulk ZnO, CuO and TiO2 to bacteria Vibrio fischeri and crustaceans Daphnia magna and Thamnocephalus platyurus. Chemosphere. 71, 1308-1316 (2008).
  14. Rincon, A. G., Pulgarin, C. Use of coaxial photocatalytic reactor (CAPHORE) in the TiO2 photo-assisted treatment of mixed Escherichia coli and Bacillus subtilis and the bacterial community present in wastewater. Catal. Today. 101, 331-344 (2005).
  15. Neal, A. L. What can be inferred from bacterium-nanoparticle interactions about the potential consequences of environmental exposure to nanoparticles. Ecotoxicology. 17, 362-371 (2008).
  16. Kovochich, M. Comparative toxicity of C60 aggregates toward mammalian cells: role of tetrahydrofuran (THF) decomposition. Environ. Sci. Technol. 43, 6378-6384 (2009).
  17. Hoshino, A. Physicochemical properties and cellular toxicity of nanocrystal quantum dots depend on their surface modification. Nano Letters. 4, 2163-2169 (2004).
  18. Dumas, E. M., Ozenne, V., Mielke, R. E., Nadeau, J. L. Toxicity of CdTe Quantum Dots in Bacterial Strains. IEEE Trans. NanoBiosci. 8, 58-64 (2009).
  19. Park, S., Chibli, H., Wong, J., Nadeau, J. L. Antimicrobial activity and cellular toxicity of nanoparticle-polymyxin B conjugates. Nanotechnology. 22, 185101 (2011).
  20. Cooper, D. R., Dimitrijevic, N. M., Nadeau, J. L. Photosensitization of CdSe/ZnS QDs and reliability of assays for reactive oxygen species production. Nanoscale. 2, 114-121 (2010).
  21. Pong, B. K., Trout, B. L., Lee, J. Y. Modified ligand-exchange for efficient solubilization of CdSe/ZnS quantum dots in water: A procedure guided by computational studies. Langmuir. 24, 5270-5276 (2008).
  22. Narayanaswamy, A., Feiner, L. F., Meijerink, A., Zaag, P. J. vander The effect of temperature and dot size on the spectral properties of colloidal InP/ZnS core-shell quantum dots. Acs Nano. 3, 2539-2546 (2009).

Tags

Biomedical Engineering bioteknologi molekylær biologi quantum dots solubilization konjugering cytotoksisitet fototoksisitet vekstkurve kimtall
Solubilization og Bio-konjugering av kvanteprikker og Bakterielle Toxicity analyser av vekst Curve og kimtall
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Park, S., Chibli, H., Nadeau, J.More

Park, S., Chibli, H., Nadeau, J. Solubilization and Bio-conjugation of Quantum Dots and Bacterial Toxicity Assays by Growth Curve and Plate Count. J. Vis. Exp. (65), e3969, doi:10.3791/3969 (2012).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter