Summary
यहाँ वर्णित एक तकनीक है जिसमें lipopolysaccharide lactating माउस स्तन ग्रंथि में स्तन की सूजन अनुकरण निपल, एक सामान्यतः जीवाणु संक्रमण के कारण हालत के माध्यम से इंजेक्ट किया जाता है. Lipopolysaccharide बढ़ा परमाणु कारक रूई बी (NF-κB) संकेतन, में इंजेक्शन का परिणाम एक NF-κB luciferase रिपोर्टर माउस के bioluminescent इमेजिंग के माध्यम से visualized.
Abstract
मानव रोग के पशु मॉडल क्रम में रोग प्रगति और जुड़े तंत्र के चरणों के लिए कड़ाई से अध्ययन करने के लिए, और अंत में, के रूप में पूर्व नैदानिक मॉडल उपायों को परीक्षण करने के लिए आवश्यक हैं. इन तरीकों में, हम एक तकनीक है जिसमें lipopolysaccharide (LPS) lactating माउस स्तन ग्रंथि में निपल, प्रभावी ढंग से मॉडलिंग स्तन की सूजन, या ग्रंथि की सूजन, के माध्यम से इंजेक्ट किया जाता है का वर्णन. बढ़ा परमाणु कारक रूई बी (NF-κB) संकेतन, में इस नकली संक्रमण के परिणाम के रूप में एक NF-κB luciferase रिपोर्टर 1 माउस के bioluminescent इमेजिंग के माध्यम से visualized.
इन तरीकों को विकसित करने में हमारा अंतिम लक्ष्य को स्तनपान कराने वाली ग्रंथि, जो अक्सर लालिमा, सूजन और प्रतिरक्षा सेल घुसपैठ 2,3 में स्तन की सूजन के साथ जुड़े सूजन का अध्ययन किया गया था. इसलिए, हम गौर से अवगत थे कि चीरा या त्वचा, निपल, या ग्रंथि के घायल हो गए के क्रम में किसी भी प्रकार के LPS सकता है शुरू करने के लिएहमारे तरीकों में उपयोग नहीं किया है क्योंकि दृष्टिकोण संभावना सूजन के पढ़ने के लिए बाहर उलझाना चाहते हैं. हम सीधे आगे यह भी एक तरीका है कि विशेष रूप से बनाया हाथ खींचा pipettes या micromanipulators का उपयोग करने के लिए जगह में इन विशेष उपकरणों पकड़ आवश्यकता नहीं किया था वांछित. इस प्रकार, हम एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध इंसुलिन सिरिंज का उपयोग करने के लिए और एक अक्षुण्ण चूसनी के स्तन वाहिनी में एजेंट इंजेक्षन निर्धारित. इस विधि सफल रहा था और हमें बिना किसी अतिरिक्त इंजेक्शन की प्रक्रिया से मढ़ा प्रभाव LPS इंजेक्शन के साथ जुड़े सूजन का अध्ययन करने की अनुमति दी. इसके अलावा, इस पद्धति का भी एक NF-κB luciferase रिपोर्टर ट्रांसजेनिक माउस और bioluminescent इमेजिंग तकनीक का उपयोग करने के लिए नेत्रहीन और मात्रात्मक वृद्धि NF-κB LPS इंजेक्शन 4 ग्रंथि के भीतर संकेत दिखा.
इन तरीकों में कई विषयों जो स्तनपान कराने वाली स्तन ग्रंथि के भीतर मॉडल रोग के लिए करना चाहते हैं, अंततः के रूप में, तकनीक के शोधकर्ताओं के लिए ब्याज की हैंयहाँ वर्णित पदार्थों के एक नंबर के इंजेक्शन के लिए उपयोग किया जा सकता है, और केवल LPS तक ही सीमित नहीं है.
Protocol
सभी पशु प्रयोगों Vanderbilt विश्वविद्यालय संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया.
1. ट्रांसजेनिक चूहों की तैयारी
- मादा चूहों, NGL (N F-κB-G uciferase FP-एल) संवाददाता transgene (1 पहले वर्णित) के लिए सकारात्मक इस प्रक्रिया के लिए किया जाता है. जब महिलाओं की उम्र के कम से कम 6 सप्ताह के हैं, उन्हें एक FVB जंगली प्रकार के पुरुष के साथ संभोग. प्रजनन Harem (एक पुरुष के साथ एक पिंजरे में 4 महिलाओं) का उपयोग किया जा सकता है. (कृपया ध्यान दें: FVB तनाव चूहों वर्तमान अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया गया C57BL6 के रूप में इस तरह के गहरे तनाव चूहों को भी इस्तेमाल किया जा सकता है, लेकिन इन चूहों इमेजिंग पहले मुंडा किया जाना चाहिए.).
- 15 दिनों के बाद संभोग में शुरू, महिलाओं की जांच नियमित रूप से गर्भावस्था के लक्षण (बड़ी उभड़नेवाला परिधि) के लिए. प्रत्येक महिला एक बार गर्भवती अलग किया जाना चाहिए और पुरुष प्रजनन पिंजरे से निकाल दिया एक बार अंतिम महिला गर्भवती हो जाती है.
- देखो अलग महिलाओं के एकजन्म तिथि जब एक कूड़े प्रकट होता है ध्यान दें. कम से कम 6 पिल्ले की एक कूड़े पर्याप्त दुद्ध निकालना के लिए आवश्यक है. कूड़े के जन्म के बाद आठ दिन, प्रोटोकॉल (एक समय योजनाबद्ध के लिए चित्रा 1 देखें) के साथ आगे बढ़ना है.
2. इंजेक्शन के लिए तैयार
- ई. भंग पीबीएस में 0.1 ग्राम / μl के अंतिम एकाग्रता कोलाई LPS. इस समाधान है, या 5 ग्राम के एक कुल का 50 μl, स्तन ग्रंथि में अंतःक्षिप्त किया जाएगा. पीबीएस अकेले का एक दूसरा ट्यूब नियंत्रण इंजेक्शन के लिए इस्तेमाल किया जा तैयार.
- एक विदारक गुंजाइश और isoflurane संज्ञाहरण उपकरण सेट अप. एक नाक शंकु उपकरण विदारक गुंजाइश है जहां माउस रखा जाएगा के चरण के लिए सुरक्षित किया जाना चाहिए. एक अच्छा प्रकाश स्रोत, चाहे गुंजाइश से ही या अतिरिक्त spotlights से भी तैयार किया जाना चाहिए.
- एक बार सेट अप पूरा हो गया है, isoflurane मशीन और हवा का प्रवाह शुरू करते हैं.
3. LPS के intraductal इंजेक्शन
- LPS समाधान के 50 μl के साथ लोड कम सुई सिरिंज. यह अलग सेट.
- 1 एक isoflurane भरा बॉक्स में महिला रखने और फिर एक बार श्वास धीमा है इंजेक्शन जा माउस anesthetize, उसे मंच पर ले जाने के लिए और नाक शंकु के भीतर उसकी नाक जगह. एक पैर की अंगुली चुटकी का उपयोग करने की पुष्टि के लिए माउस को पूरी तरह anesthetized है. प्रक्रिया के दौरान माउस मॉनिटर साँस ले और isoflurane के स्तर के अनुसार समायोजित. पिल्ले कि महिला से लिया गया है कूड़े वाले पिंजरे ध्यान से अलग किया जाना चाहिए जब तक बांध की प्रक्रिया के बाद लौटा जा सकता है.
- 70% इथेनॉल की एक छोटी सी बूंद का उपयोग करने के लिए कोट फ्लैट करना और मदद करने के लिए माउस के पेट के निचले हिस्से पर सही # 4 वंक्षण स्तन ग्रंथि जुड़ी निपल कल्पना.
- निपल के एक इष्टतम देखने के लिए विदारक गुंजाइश ध्यान दें. सावधानी से ठीक करने के लिए आगे निपल त्वचा से दूर आकर्षित संदंश का एक सेट का उपयोग करें, लेकिन पंचर नहीं है या किसी भी तरह से निपल चोट पहुंचाना.संदंश कसकर एक साथ कभी नहीं clamped चाहिए जब ऊतक जोड़ तोड़, लेकिन एक प्रकाश पकड़ जो निप्पल पर तनाव की न्यूनतम राशि की आवश्यकता के साथ प्रयोग किया.
- बाएं हाथ में संदंश का प्रयोग धीरे जगह में निपल पकड़. धीरे धीरे देखने के दाहिने हाथ का उपयोग क्षेत्र में preloaded सिरिंज लाने. सिरिंज आयोजित किया इतना है कि कोई repositioning क्रम में सामग्री इंजेक्षन हो गया है चाहिए.
- बार सिरिंज दृश्य में है, निपल के केंद्र के भीतर छोटे ductal उद्घाटन के अवसर पर ध्यान उद्देश्य, और सिरिंज डालने के.
- बिना हाथ repositioning, सिरिंज की सामग्री इंजेक्षन और निपल से सुई को हटा दें.
- लोड नियंत्रण इंजेक्शन के लिए 50 μl पीबीएस के साथ एक 2 सिरिंज. मंच पर माउस और छोड़ दिया # 4 वंक्षण माउस के पेट के निचले हिस्से के दूसरे पक्ष पर स्तन ग्रंथि निपल का सबसे अच्छा दृश्य के लिए स्थान. 3.4-3.7 कदम पीबीएस - लोड सिरिंज का उपयोग दोहराएँ.
- एक बार दोनों इंजेक्शन compl हैंEte, संज्ञाहरण बंद करने और एक वसूली के पिंजरे के लिए माउस हिलना. महिला मॉनिटर करने के लिए बीमा है कि वह 5 मिनट के भीतर मोबाइल हो जाता है. माउस वसूली पिंजरे में 1 घंटे के लिए रहने के लिए अनुमति दें. वसूली के 1 घंटे के बाद, पिल्ले के पिंजरे में उसे कूड़े के साथ महिला वापस जगह. चूहे 6 घंटा पोस्ट इंजेक्शन के लिए समय - समय पर निगरानी की जानी चाहिए इमेजिंग के लिए आगे बढ़ने से पहले. हमारे अनुभव में, कोई प्रतिकूल परिणाम इंजेक्शन और इमेजिंग के बीच की अवधि के दौरान या तो महिला या पिल्ले में नोट किया गया. हालांकि, अगर संकट के लक्षण महिला में मनाया जाता है (जैसे hunched आसन, काटने या इंजेक्शन साइट, सामान्य सुस्ती की रखवाली) या पिल्ले (कोई आंदोलन, त्वचा की नीले रंग) प्रयोग बंद किया जाना चाहिए.
4. Bioluminescent इमेजिंग कल्पना NF-κB गतिविधि
- एक बार चूहों इमेजिंग की सुविधा के लिए ले जाया गया है, सॉफ्टवेयर खोलने और आरंभ करने के दौरान मशीन द्वारा इमेजिंग प्रक्रिया शुरू करते हैं. है पर चालूoflurane मशीन और प्रवाह हवा, यह सुनिश्चित करना है कि संज्ञाहरण दोनों बॉक्स और इमेजिंग चैम्बर के लिए बह रही है.
- स्पष्ट संज्ञाहरण बॉक्स में isoflurane संज्ञाहरण के तहत माउस रखें. एक बार श्वास धीमी कर दी है, एक पैर की अंगुली चुटकी उपयोग करने की पुष्टि के लिए माउस को पूरी तरह anesthetized है. फिर, माउस में रेट्रो कक्षीय 5 इंजेक्शन एक बाँझ सिरिंज का उपयोग कर Luciferin सब्सट्रेट के 100 μl इंजेक्षन.
- तुरंत इमेजिंग चैम्बर के लिए माउस हस्तांतरण और isoflurane वहाँ स्थित नाक शंकु के तहत उसकी नाक जगह. माउस लापरवाह होना चाहिए. टेप के साथ मंच पर प्रत्येक पैर सुरक्षित.
- इनपुट IVIS सॉफ्टवेयर उपयुक्त सेटिंग्स दोनों एक सफेद प्रकाश फ़ोटो छवि और bioluminescent गतिविधि की एक छवि ले. जोखिम समय 10 सेकंड का होना चाहिए. छवि मोल.
- एक बार छवियों का अधिग्रहण किया गया है, माउस ठीक करने की अनुमति और फिर पिंजरे में उसके पिल्ले के साथ उसे वापस जगह और समय - समय पर नजर रखने के.
- फोटो और luminescentछवियों को स्वचालित रूप से मढ़ा चित्रा 2 में स्क्रीन पर प्रदर्शित कर रहे हैं. माउस के पेट के निचले हिस्से के प्रत्येक पक्ष (पीबीएस इंजेक्शन ग्रंथि पर एक और एक ग्रंथि LPS इंजेक्शन पर) पर ब्याज की क्षेत्र या बराबर आकार की आरओआई "हलकों रखने के द्वारा अधिग्रहीत छवियों का विश्लेषण. फोटॉनों को पढ़ने के लिए बाहर सेट. संख्या प्रत्येक आरओआई भीतर पाया (चित्रा 2B देखें) luminescence संकेत प्रदर्शित किया जाना चाहिए. सांख्यिकीय विश्लेषण में इस नंबर का उपयोग करें.
- इष्टतम छवि को प्रदर्शित करने के लिए, आगे प्रदर्शित संकेत की दहलीज समायोजित. कुल luminescence को बदल नहीं पढ़ने के बाहर लेकिन आप पृष्ठभूमि संकेत को दूर करने के लिए और नियंत्रण और LPS का इलाज ग्रंथि के बीच मतभेद कल्पना की अनुमति देगा. घटाएँ luminescence की राशि दिखाया गया है जब तक पीबीएस इंजेक्शन ग्रंथि पृष्ठभूमि संकेत से मुक्त है. यह LPS का इलाज अभी भी स्पष्ट छवि, के रूप में चित्रा 2 में देखा ग्रंथि में वृद्धि का संकेत छोड़ देना चाहिए.
- Additionaमैं प्रोटीन और आरएनए assays सहित विश्लेषण,, पोस्टमार्टम के महिला 6 से एकत्रित स्तन ऊतक के साथ पूरा किया जा सकता है.
5. प्रतिनिधि परिणाम
इन तरीकों से व्याख्या परिणाम प्राप्त करने के लिए, LPS (या पीबीएस) स्तन नलिकाओं में केवल संचार किया जाना चाहिए, आसन्न ऊतकों undisturbed छोड़ने. चमड़े के नीचे निपल आसपास के ऊतकों में इंजेक्शन नकली संक्रमण बजाय चोट के कारण सूजन में परिणाम देगा. पीबीएस में पतला trypan नीले डाई इंजेक्शन उपयोगी है जब तकनीक सीखने चित्रा 3A एक सफलतापूर्वक इंजेक्शन पीबीएस में trypan नीले के 100 μl के साथ संचार ग्रंथि से पता चलता है. के रूप में दिखाया गया है, केवल ductal पेड़ इंजेक्शन समाधान के साथ भरा होना चाहिए, और वहाँ कोई सांस में इंजेक्शन स्थल पर होना चाहिए. इस संदर्भ में एक "सांस" इंजेक्शन तरल के निपल या ductal पेड़ में अर्क के बिना निपल आसपास के ऊतकों में निर्माण. इस श हैचित्रा 3B में ही है. कृपया ध्यान दें कि 3 चित्र में दिखाया अभ्यास इंजेक्शन एक महिला में दुद्ध निकालना के 21 दिन में पूरा किया गया. दुद्ध निकालना (8-10 दिन, जो मंच पर LPS वर्तमान प्रोटोकॉल का उपयोग इंजेक्ट किया जाता है) की ऊंचाई के दौरान, दूध प्रचुर मात्रा में है और यह नलिकाओं कल्पना और निर्धारित अगर इंजेक्शन सही ढंग से पूरा किया गया है के लिए मुश्किल है. इसलिए, दुद्ध निकालना में बाद में समय अंक अभ्यास इंजेक्शन के लिए बेहतर हैं.
में स्तन नलिकाओं परिणामों में LPS के सफल इंजेक्शन ग्रंथि के भीतर NF-κB गतिविधि में वृद्धि हुई है. IVIS इमेजिंग पर संवाददाता माउस में यह स्पष्ट हो सकता है, करना चाहिए और LPS इंजेक्शन ग्रंथि पीबीएस इंजेक्शन ग्रंथि की तुलना में काफी अधिक luciferase गतिविधि (फोटॉन गिनती द्वारा मापा) है, के रूप में चित्रा 2 में दिखाया जाना चाहिए (औसतन, LPS ग्रंथि पढ़ता पीबीएस नियंत्रण संकेत की 200%). COMP के रूप में LPS का इलाज ग्रंथियों के भीतर एक luminescence में सांख्यिकीय महत्वपूर्ण वृद्धिहालांकि 4 4 चूहों के एक समूह के पूरा होने contralateral नियंत्रण ared हासिल की थी. एक अतिरिक्त अध्ययन में यह भी या तो ई की intraductal स्तन इंजेक्शन का उपयोग किया गया है कोलाई या LPS NF-κB संवाददाता ट्रांसजेनिक्स में. हमारे अपने काम करने के लिए भी इसी तरह, इन लेखकों ई. के बाद एक संवाददाता गतिविधि 6 घंटा में उल्लेखनीय वृद्धि देखा 2 इंजेक्शन कोलाई.
कृपया ध्यान दें, मस्तिष्क और अन्य उदर अंगों में विधान NF-κB गतिविधि के कारण, हमारे संवाददाता चूहों के सिर और पेट में लगातार एक संकेत दिखा जब भी आधारभूत पर imaged, किसी भी हेरफेर करने के लिए पहले. इस प्रकार, यह संकेत इस प्रयोग के संबंध में अनदेखा किया जाना चाहिए. एक स्पष्ट संकेत LPS इंजेक्शन स्तन ग्रंथि के भीतर छवि पढ़ने के बाहर पृष्ठभूमि luminescence PBS ग्रंथि में कम से कम करने के लिए निकाला जाता है रहने के बाद चित्रा 2 पृष्ठभूमि कम के साथ छवियों को दिखाता है. चाहिए.
ग्रंथि के असफल इंजेक्शननिपल को नुकसान में सबसे अधिक संभावना परिणाम. इस ओर इशारा किया, सूजन त्वचा स्तर है कि इमेजिंग पर स्पष्ट हो जाएगा कारण होगा. घायल हो गए संकेत के इस प्रकार के बहुत मजबूत है और निपल क्षेत्र है जहां क्षति हुई ही सीमित हो, ग्रंथि भर नहीं निकलती है, के रूप में नलिकाओं में एक सफल LPS इंजेक्शन के बाद देखा जाएगा.
चित्रा 1. प्रक्रिया के योजनाबद्ध.
चित्रा 2. IVIS bioluminescent इमेजिंग से प्रतिनिधि परिणाम (ए) छवि एक्वायर्ड साथ पृष्ठभूमि में कमी, वृद्धि में इंजेक्शन ग्रंथि LPS luciferase गतिविधि का खुलासा. (बी) से छवि के साथ ब्याज quantifications का क्षेत्र है. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
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चित्रा 3 अभ्यास इंजेक्शन: स्तन ग्रंथि intraductal इंजेक्शन के माध्यम से रंग के साथ इंजेक्शन निपल के माध्यम से वितरण की सटीकता का परीक्षण करने के लिए, दुद्ध निकालना के 21 दिन में एक माउस पीबीएस में पतला trypan नीले डाई की 100 μl इंजेक्शन के साथ किया गया था. बलिदान के बाद, ग्रंथि दृश्य के लिए अवगत कराया गया था. (ए) सफल इंजेक्शन और निपल (बी) डाई की सांस.
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Discussion
यहाँ हम एक ट्रांसजेनिक पत्रकार NF-κB माउस और एक अनुकूलित इंजेक्शन मॉडल स्तन की सूजन के लिए तकनीक का उपयोग, स्तन के ऊतकों की सूजन सबसे अधिक जीवाणु संक्रमण के कारण होता है. इस प्रक्रिया में सबसे महत्वपूर्ण कदम intraductal इंजेक्शन ही है.
व्यवहार में, यह आम तौर पर स्पष्ट है कि intraductal इंजेक्शन सफल रहा है. एजेंटों के इंजेक्शन (LPS या पीबीएस) द्रव लग रहा है और वहाँ कोई प्रतिरोध करने के लिए कम हो सकता है के रूप में सिरिंज खाली कर दिया है चाहिए चाहिए. सबसे आम ख़तरा ग्रंथि में बाधित पारित करने के लिए अग्रणी निपल को नुकसान है. विदारक गुंजाइश के माध्यम से निपल को देख कर यह कल्पना की जा सकती है. नुकसान का पर्याप्त अभ्यास, विनम्रता जब निपल जोड़ तोड़, यह सुनिश्चित करना है कि केवल छोटी सुई के (31G या अधिक) के लिए प्रक्रिया का प्रदर्शन करने के लिए प्रयोग किया जाता है और से बचा जा सकता है. इसके अतिरिक्त, अगर सुई सही है, या यदि स्थिति में नहीं है यह मध्य इंजेक्शन, एक निर्माण फिसल जाता हैLPS या पीबीएस के ऊपर इंजेक्शन स्थल पर फार्म और तरल नलिकाओं व्याप्त नहीं जाएगा कर सकते हैं. यदि ऐसा होता है, तो आप या तो नेत्रहीन निपल के आसपास त्वचा में तरल के संचय देख सकते हैं, या इंजेक्शन द्रव महसूस नहीं होगा. हालांकि यह पूरी तरह से ख़तरा नहीं समाप्त किया जा सकता है, घटनाओं और उचित साधनों के प्रयोग के माध्यम से अभ्यास द्वारा सबसे अधिक भाग के लिए टाला जा सकता है.
यहाँ इंजेक्शन के लिए तकनीक का इस्तेमाल किया इस विशेष प्रयोग के लिए महत्वपूर्ण था. कुछ स्तन ग्रंथि में intraductal इंजेक्शन के लिए प्रकाशित तरीकों काटने / निपल और / 7,8 त्वचा के माध्यम से या चीरा के हटाने की आवश्यकता है. इस मामले में, अध्ययन के प्राथमिक अंत बिंदु के रूप में NF-κB ग्रंथि के भीतर संबंधित सूजन निर्धारित किया गया था, किसी भी त्वचा या निपल के चीरों या गड़बड़ी अवांछनीय थे और एक भड़काऊ संकेत ऊतक चोट है कि उलझाना चाहते हैं के कारण उत्पन्न करेगा LPS प्रेरित संकेत.
इसके अलावा, हमारेइंजेक्शन एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध इंसुलिन सिरिंज के साथ और एक तैयार micropipette या micromanipulators के उपयोग के बिना इंजेक्शन है कि निपल हटाने 9, 10 का उपयोग नहीं करते के लिए कई अन्य तरीके में पूरा किया गया. हम मानते हैं कि यह केवल संभव था क्योंकि स्तनपान कराने वाली निपल थोड़ा बढ़ा है और कुछ हद तक एक युवा, कुंवारी माउस निपल से इंजेक्षन करने के लिए आसान है. कुंवारी चूहों इंजेक्षन, और अधिक कठोर उपकरण की आवश्यकता हो सकती है.
यह चित्रा 2 से स्पष्ट है कि अगर सही ढंग से प्रदर्शन किया, LPS माउस स्तन ग्रंथि की नलिकाओं में इंजेक्शन NF-κB luciferase रिपोर्टर गतिविधि में वृद्धि हुई द्वारा visualized के रूप में स्थानीय सूजन का कारण बनता है. दूसरों को और अधिक बड़े पैमाने पर विश्लेषण किया है तीव्र स्तन की सूजन के इस मॉडल के माध्यम से या तो ई, स्तन ग्रंथि और 2-3 ऊतक, 8, 10-14 के बाद के विश्लेषण में या इंजेक्शन LPS कोलाई. कई निष्कर्ष में, इन अध्ययनों वर्णन है कि भड़काऊ प्रतिक्रिया मैंCD14 के साथ बातचीत के द्वारा modulated है, और है कि यह एक न्युट्रोफिल स्तन वायुकोशीय मैक्रोफेज द्वारा विनियमित बाढ़ में परिणाम है. जैसा कि हमारे दोनों पहले प्रकाशित 4 काम करते हैं, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से है कि दूसरों के दो स्तन की सूजन के इस मॉडल आगे तंत्र और मानव, में चिकित्सा विज्ञान प्रासंगिक अध्ययन जहां स्तनपान महिलाओं के रूप में कई के रूप में 3-33% इस दर्दनाक संक्रमण से ग्रस्त इस्तेमाल किया जा सकता है में सुझाव दिया (प्रतिशत अध्ययन पद्धति के आधार पर भिन्न होता है) 15. यह भी डेयरी उद्योग में उन लोगों के लिए, जहां स्तन की सूजन एक महंगा दूध उत्पादन में महत्वपूर्ण नुकसान के लिए प्रत्येक 16 वर्ष के प्रमुख रोग है के लिए एक उपयोगी अनुसंधान उपकरण साबित हो सकता है.
अंत में, NGL ट्रांसजेनिक संवाददाता यहाँ और इसी तरह कार्य एचएलएल रिपोर्टर 17 चूहों का इस्तेमाल चूहों के कई अध्ययनों में इस्तेमाल किया गया है सत्यापित करने के लिए है, जिसका अंदाजा है, और रोग और तीव्र सहित विकास मॉडल की एक किस्म के भीतर NF-κB गतिविधि के ऊपर या नीचे विनियमन ट्रैक फेफड़ाचोट, फेफड़ों के कैंसर, airway शाखाओं morphogenesis, इंसुलिन प्रतिरोध, मोटापा, और myocardial रोधगलन 1, 17-21. इस मॉडल को इन संवाददाता ट्रांसजेनिक्स की उपयोगिता के एक अतिरिक्त उदाहरण प्रदान करता है.
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Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Acknowledgments
यह काम NIH अनुदान एफ Yull और दिग्गजों मामलों के विभाग (टीएस ब्लैकवेल) के लिए सम्मानित किया गया CA113734 द्वारा वित्त पोषित किया गया था.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Lipopolysaccharide from Escherichia coli (LPS) |
Sigma | L 2880 | serotype 055:B5 |
| PBS | Mediatech, Inc. | 46-013-CM | |
| 31 Gauge insulin syringe | Becton Dickinson | 328438 | Short needle |
| Forceps | World Precision Instruments | 15908 | |
| Dissecting scope | Leica | M3Z | |
| Terrell Isoflurane, USP | MINRAD INC. for Rx Elite | NDC 66794-011-25 | |
| IVIS 200 imaging system | Caliper (formerly Xenogen) | N/A | |
| Syringe for luciferin injection | Becton Dickinson | 309597 | 1cc; 26G5/8 |
| D-Luciferin Firefly, sodium salt monohydrate (Luciferin substrate) |
Biosynth Chemistry and Biology | L-8240 | Dilute to 10 mg/ml |
References
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