Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

Stereotaktisk kirurgi för excitotoxisk skada av specifika områden i hjärnan i vuxen råtta

Published: July 19, 2012 doi: 10.3791/4079

Summary

Riktad ablation av specifik hjärnan region (er) genom infusion av en excitotoxin användning stereotaktiska koordinater beskrivs. Denna teknik kan också anpassas för infusion av andra kemikalier in i råtthjärnan.

Abstract

Många beteendemässiga funktioner hos däggdjur, inklusive gnagare och människor, medieras huvudsakligen av diskreta hjärnområden. En vanlig metod för att urskilja funktion av olika hjärnregioner för beteende eller andra experimentella resultat är att genomföra en lokal ablation av funktion. Hos människor är patientpopulationer med lokaliserade hjärnskador ofta studerat för underskott i hopp om att avslöja den underliggande funktion skadade området. Hos gnagare, kan man framkalla experimentellt skador på specifika delar av hjärnan.

Lesion kan åstadkommas på flera sätt. Elektrolytiska skador kan orsaka lokala skador, men kommer att skada en mängd olika celltyper, samt trafikerar fibrer från andra områden i hjärnan som råkar vara nära lesionsstället. Inducerbara genetiska tekniker med användning av celltyp promotorer kan också möjliggöra sätesspecifik inriktning. Dessa tekniker är komplex och inte alltid praktisk beroende på målet hjärnområdet. Excitotoxiska lesion med stereotaktisk kirurgi, däremot, är en av de mest tillförlitliga och praktiska metoder för lesion excitatoriska nervceller utan att skada lokala gliaceller eller korsa fibrer.

Här presenterar vi ett protokoll för stereotaxisk infusion av excitotoxin, N-metyl-D-aspartat (NMDA), i det basolaterala amygdala komplex. Med anatomiska indikationer tillämpar vi stereotaktiska koordinater för att bestämma platsen för vårt mål hjärna region och sänka en injektionsnål på plats strax ovanför målet. Vi ingjuta då vår excitotoxin in i hjärnan, vilket resulterar i excitotoxiska död av närliggande nervceller. Medan vårt experimentella föremål för val är en råtta, kan samma metoder tillämpas på andra däggdjur, med lämpliga justeringar i utrustning och koordinater.

Denna metod kan användas på en mängd olika hjärnregioner, inklusive den basolaterala amygdala 1-6, andra amygdala kärnor 6, 7, 8 hippocampus, entorhinal kortex 9 och prefrontala cortex 10. Den kan också användas för att infundera biologiska föreningar såsom virala vektorer 1, 11. Den grundläggande stereotaxisk tekniken kan också anpassas för implantering av mer permanenta osmotiska pumpar, vilket tillåter mer utdragen exponering för en förening av intresse.

Protocol

Anestesi och smärtlindring: Trettio minuter före anestesi, injicera råttan med 0,05 mg / kg subkutan buprenorfin för analgesi. Initiera anestesi med 30-40 mg / kg intraperitonealt natrium pentobarbital. Vid denna punkt även injicera atropin för att förhindra andningsinsufficiens (0,4 mg / kg, subkutant) och meloxikam som ytterligare analgetisk (2 mg / kg subkutant). Om efter 5 minuter är råttan fortfarande är mobila eller svarar till tå nypa, ge påföljande doser av natrium pentobarbital vid 5 mg / kg (intraperitoneal) tills råttan inte svarar på smärta. Vid utförande av den första snitt, injicera lidokain (5 mg / kg, intra-dermal) vid incisionsstället för lokalbedövning. Sex till åtta timmar efter den första injektionen, injicera råttan med 0,05 mg / kg subkutan buprenorfin för analgesi. Buprenorfin kan injiceras var 6-8 timmar därefter vid behov, men detta är vanligtvis inte nödvändig.

Det är viktigt att notera att andra former av anestesi Cen störa excitotoxiska lesioner. Till exempel, även ketamin är en allmänt använd form av anestesi i gnagare, kan den interferera med lesioner inducerade med NMDA för att det är en NMDA-receptorantagonist. Det är viktigt att välja en metod för inducering anestesi som inte minskar lesionsstorleken. Om gas anestesi önskas, kan de flesta stereotaktiska enheter, inklusive de som beskrivs här rymma adaptrar gasmask.

Notera: material beskrivs ytterligare i tabell av specifika reagens och utrustning nedan.

1. Framställning av pumpen och Stereotax

  1. Fylla en 10 | il Hamilton-spruta med sterilt vatten och montera den i hållarens av en 6 spruta programmerbar pump. Fästa änden av sprutkolven i det klämda hållaren på pumpen.
  2. Förfyllningsventil gas-steriliserades PE20 rör med sterilt vatten med användning av en nål och 1 ml spruta. Glida i den öppna änden av röret till den Hamilton-spruta, varvid det är viktigtFul för att undvika att eventuella luftbubblor i röret.
  3. Kläm fast 30ga, platt-cut, 1 tum slutet infusionsnål av slangen på armen av en stereotaktisk enhet med hjälp av en trumma-stil elektrod manipulator. Sätt i infusionsnål mellan klämman och den spårförsedda cylindern. Fästa klämman över en del av slangen som innehåller metallen nålen inuti den för att undvika att platta till slangarna och begränsa fluidflödet.
  4. Justera pumphastigheten till> 5 | il / min och aktivera pumpen. En sträng av vatten bör visas på spetsen av den infusionsnål. Kontrollera längden på slangen och dess fogar för att se till att det inte finns några läckor.
  5. Torka bort vattnet pärla med en steril kompress och ställ in pumpen att dra sig tillbaka. Dra en 2 pl luftbubbla. Den övre delen av bubblan skall vara synliga i slangen.
  6. Sänk spetsen infusionen nålen i en 20 mg / ml lösning av NMDA i sterilt 0,1 M PBS och dra 4-5 pl. En luftbubbla bör vara synlig mellan det sterila vattnet och NMDA-lösningi spetsen. Det är viktigt att notera att NMDA är en potent nervgift och försiktighet bör användas vid beredning och hantering av denna lösning. Handskar och skyddsglasögon rekommenderas vid alla tillfällen.

2. Montera Råtta i stereotaxisk anordning

  1. Figur 1 visar de grundläggande delarna av stereotaktisk anordning. Efter rakning råttans huvud från linjen i ögonen till öronen, ladda råttans framtänder över bettet bar, med råttan kropp vilar på en värmedyna inställd på medium. Tungan ska hänga nedanför bettet bar, med underkäken. Om det finns skulle en temperaturåterkoppling värmedyna vara att föredra. Övervakning rektal temperatur skulle också vara perfekt.
  2. Håll råttans hals med tumme och pekfinger, flytta höger horisontella hörselgången på höger öra baren. Baren ska kännas som det vilar på en fast plats, inte som det sjunker långt in i huvudet. Håll den högra sidan av huvudet stadigt, skjut vänster öraspärra i råttans vänstra horisontella hörselgången. Det ska kännas som att det vilar på en fast plats. Den ytteröronen ska se symmetrisk och bör finnas med för att ligga plant på örat barer. Uppåt fackling av ytteröronen indikerar felaktig placering av örat barer. Huvudet ska inte vackla som svar på tryck vid halsen.
  3. Skruva ner näsan baren. Var försiktig. Benen i näsan är känsliga och den främre staven inte behöver vara tight. Kontrollera att råttan fortfarande är bedövad innan du fortsätter.

3. Förbereda råtta för kirurgi

  1. Använd en steril kompress, försiktigt placera en liten mängd av den veterinära oftalmisk smörjande salva i vardera råtta ögon för att skydda dem från uttorkning och skräp.
  2. Koncentriskt från den planerade snittstället till kanten av den rakade området, torka råttans hårbotten med 2% klorhexidin lösning följt 70% etanol tre gånger. Klorhexidin skrubb kan också användas om mer effektivt desinfektionsmedel önskas.Avsluta genom att torka med 10% povidonjod lösning. Den beredda hårbotten är nu steril och bör endast rört med sterila material.
  3. Don sterila handskar för ytterligare steg eftersom du kommer att nästa affär med det färdiga operationsområdet.
  4. Placera en steril duk, så att fönsterdelen exponerar det kirurgiska stället.

4. Skapa Kirurgisk fönstret

  1. Användning av en # 10 skalpell, göra ett snitt (ungefär 2 cm i längd) längs den längsgående mittlinjen på hårbotten. Snittet bör börja posteriort om raden av ögonen. Med tummen och pekfingret på den icke-dominanta handen tag i hårbotten under spänning vinkelrätt mot riktningen för snittet.
  2. Dra fascia som ligger över skallen ytan till kanterna av det kirurgiska stället med användning av sterila bomullsinnehållande spetsar. Det kommer att ta viss kraft för att rensa skallen så att den kan visas.
  3. Använd fyra böjda, sterila peanger för att skapa en kirurgisk fönster. Clamp fascia (INTE huden) på EAch sidan av främre och bakre delar av snittet och sedan lägger klämmorna vid sidan av djuret, och därmed drar snittet öppna och fullt exponera skallen.

5. Utjämning skallen och skapa pilothålet

  1. Lokalisera bregma, den främre punkt där de tre huvudsakliga plattorna av skallen möter, såsom visas i figur 2. Flytta infusionsnål så att nålspetsen precis vidrör skallen på bregma. Observera dorsal-ventrala koordinat. Figur 3 visar hur man läser koordinater på en Stoelting stereotaktisk enhet. Observera vid denna punkt, handskar inte längre sterila och får inte röra den sterila operationsstället direkt. OBS: Efter att vidröra icke-sterila stereotaktisk enheten är kirurgen inte längre steril och får inte röra operationsområdet eller delar av utrustning som kommer att beröra operationsområdet.
  2. Leta lambda, den bakre punkt där de tre viktigaste plattorna i skallen möts, så depicted i figur 2. Höj infusionsnål något och flytta den direkt tillbaka till lambda. Sänk nålen tills den precis vidrör skallen på lambda. Läs dorsal-ventrala koordinat. Om skallen är plan, kommer det att vara inom 0,1 mm från bregma läsning. Om det är längre bort än så, flytta nålen upp (ur vägen), lossa den främre staven, antingen höja eller sänka plattformen bettet bar, beroende på vilken ände av huvudet är för hög, och sedan åter åtgärd.
  3. Flytta infusionsnål över bregma och registrera de anteriora-posteriora och medial-lateral-koordinater. Beräkna där nålen måste förflyttas baserat på koordinatema i hjärnan området av intresse i enlighet med en hjärna atlas 12. För BLA, subtrahera 2,8 mm från främre-bakre koordinat och antingen lägga till eller dra ifrån 5,1 mm till / från den mediala-laterala koordinat beroende på om du vill rikta vänster eller höger. Flytta infusionsnål att den beräknade positionen.
  4. Sväng needle ur vägen, noga med att hålla reda på var den lokaliserad och sedan borra ett hål med ca 2 mm i diameter på den platsen med hjälp av en Dremel Moto-verktyg med en steril dental fäst borr. Borra försiktigt som när borren bryter igenom skallen, kommer det en tendens att dra ner, möjligen skada dura och hjärnvävnad under. Brotscha hålet för att förstora den.
  5. Absorbera allt blod med en steril bomullstopp.

6. Infusion av Neurotoxin

  1. Sväng nålen tillbaka på plats. Sänk nålen tills den rör vid ytan av hjärnan. Anteckna dorsal-ventrala koordinat. Detta är den nivå av dura. Subtrahera det lämpliga värdet för att nå hjärnan regionen av intresse. För det basolaterala amygdala, subtrahera 6,7 ​​mm.
  2. Sänk infusionsnål till den beräknade nivån långsamt. Sedan höja tillbaka upp, långt över skallen. Använd en Hamilton kabel spruta rengöring för att rensa spetsen av infusionen nålen försiktigt så att inte taj änden av tråden som kommer i kontakt med infusionsnål med icke-sterila handskar.
  3. Kör pumpen på> 5 pl / min och se till att du ser en sträng av vätska komma ut av infusionen nålen. Om inte, rensa med tråd och försök igen.
  4. Sänk infusionsnål till önskad rygg / ventrala nivå sakta.
  5. Ställ in räntan på infusionspumpen till 0,1 pl / min och starta infusionen. Infundera under 2 min.
  6. När infusionen har startat, markerar de två ändarna av luftbubbla i slangen med en svart markering. Om båda ändarna inte rör sig, är din nål igensatt. Stoppa infusionen, höja nålen, rensa med tråd, kontrollera flöde med ett högt flöde, åter sänka nålen och försök igen.
  7. När infusionen är klar, stanna pumpen och vänta 5 min för NMDA att sprida bort från nålspetsen.
  8. Höj nålen 0,5 mm, och infusera igen under 1 min. Vänta 2,5 min för NMDA att diffundera bort från nålspetsen. Denna extra infusion hanLPS se all BLA omfattas av infusion. Om detta är nödvändigt för andra hjärnregioner måste bestämmas experimentellt.
  9. Höj nålen ut ur hjärnan långsamt och svinga stereotaxiska armen ur vägen.

7. Stänga Incision

  1. Don nya sterila handskar för att stänga snittet.
  2. Torka bort överflödig blod på skallen med sterila bomull-tips och ta bort klämmorna från fascia.
  3. Med London pincett, tryck två sidor av snittet tillsammans. De inre kanterna av huden bör uppfylla och den yttre kanten av huden bör inte tillåtas att rulla in i snittet. Samtidigt som du trycker snittet stängt gäller sårklämmor att stänga den utskjutande delen ordentligt. Att fortsätta att trycka ihop huden och häfta längs längden av snittet. Det tar vanligtvis 3-5 sårklämmor.
  4. Efter att alla sårklämmor, använd pincett för att klämma klamrar igen, vilket gör att de är säkra. Den säkrare tHan klipp, desto mindre sannolikt en råtta dra ut dem innan snittet har läkt.
  5. Tvätta häftade snittet med 10% povidonjod lösning och tillbaka råttan till sitt hem bur och bildskärmen tills rörligheten är återställd (vanligtvis 1-2 timmar efter anestesi, total operation tid från induktion till nedläggning vara 30-45 min). Vid denna punkt kan råttan återförs till kolonin rum. Efter en vecka bort klammer med en klammerborttagare verktyg i isoflurananestesi.
  6. Använd en varm pärla autoklav för att sterilisera spetsen ytor alla instrument före användning på nästa råtta. Instrument bör nedsänkt i pärlorna under en längre tid än 15 sekunder, eller de kan bli för varmt att hantera. Instrument bör svalnat innan används på ett annat djur.

8. Återvinning

  1. Det är möjligt att råttor kommer att uppvisa kramper under dagarna efter skadan. Beroende på hjärnan regionen skadade, andra beteenden såsom mat konsumtion eller GROoming kan påverkas. Det är viktigt att djur skall övervakas på daglig basis för att säkerställa att de förblir friska under återhämtning. Stödjande vård, såsom flytande livsmedel, högt kaloriinnehåll livsmedel, eller ytterligare analgesi kan krävas. Mortalitet på grund av anestesi förekommer i en låg procent av råttor, vanligen mindre än 5%. Dödlighet på grund av andra orsaker (infektion, blödning) är extremt sällsynt. Varje tecken på lidande efter återvinning av anestesi kan anledning till uteslutning från framtida studier, men är ytterst sällsynt. Figur 4 visar viktminskning under de första dagarna efter operationen som det ska förväntas. Kroppsvikt bör öka inom 1 vecka.

9. Representativa resultat

En vecka eller mer efter NMDA infusion, kan skada visualiseras med hjälp av en kresyl-violett motfärg och brightfield mikroskopi. Hjärnorna bör perfuserades med iskall 4% paraformaldehyd, ekvilibrerad i 30% sackaros i 0,1 M PBS och frozsv. De bör sedan skivas på 30-60 | im, i en serie av 1:06 till 1:12 och är monterad på till gelatinbelagda objektglas innan de undergår en vanlig kresylviolett motfärg. Lesionen bör motsvara en "kal fläck" eller ett område med minskad kresylviolett bets på grund av celldöd efter skada. Figur 5A och B visar en representant skada för BLA och CEA. Denna bild erhölls med hjälp av en flatbäddsscanner med en hög upplösning skanning (1200 dpi). Att visualisera lesionen, hjälper det att Motfärga en serie av sektioner genom en stor del av den vävnad som omger målområdet så en felplacerad lesionen kan lokaliseras.

Figur 1
Figur 1. Stereotaktisk inställning. Bilden visar råttan stereotaxiska med relevanta märkta delar.

Figur 2
Figur 2. Bregma och lambda på råtta SKUll. Denna illustration visar placeringen av bregma och lambda. Alla Koordinatema mäts i förhållande till bregma. Lambda används för att säkerställa att skallen är nivån.

Figur 3
Figur 3. Läsa stereotaktiska koordinater. Denna ritning visar en vanlig stereotaktisk behandling. För att erhålla de siffror till vänster om decimalen, använda markörerna på den högra sidan. Den märkta siffran motsvarar tiotals plats (dvs. 1 = 10, 2 = 20). De hash märken mellan de märkta siffrorna motsvarar de enskilda enheterna (1-9). Nollinjen indikerar på vad integer stereotax är inställd. Här är den noll-linjen mellan 10 och 11 markörer, vilket indikerar att behandlingen är mellan 10 och 11. För att bestämma siffrorna till höger om decimalen, använd markörerna på vänster sida. De hash märken på vänster är numrerade från 0 till 10, där varje omärkt hash representerar en enhet skillnad fråndem bredvid. Oavsett vilken av de hash märken på vänster ställer upp bäst med hash märken på höger visar den första decimal i koordinatsystemet läsning. Här hash märke på vänster motsvarar antalet 9 rader upp bäst med den högra hash märken så decimal är 9. Den slutliga behandlingen är 10,9 mm.

Figur 4
Figur 4. Viktförändring efter operation. Denna graf visar den genomsnittliga (± SEM) vikt hos råttor som genomgick stereotaktisk kirurgi (n = 17) eller inte genomgå en operation (n = 6). Dag 0 är dagen för kirurgi. Efter kirurgi, vikten av råttor minskade under 2-3 dagar efter operation och därefter ökas runt dag 5-6.

Figur 5
Figur 5. Excitotoxiska lesion exempel. A) Denna bild visar en kresylviolett Motfärga på en 30 m koronal slice med "kalafläck "från NMDA lesion av den basolaterala amygdala. De vita pilar beskriva lesionen. Det kan jämföras med den kontralaterala sidan av hjärnan skiva som inte har någon lesion. B) Ett liknande lesion av den centrala kärnan amygdala.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De stereotaktiska metod som presenteras här möjliggör excitotoxisk skada i specifika områden i hjärnan via infusion av NMDA. De grundläggande stereotaktiska metoderna kan anpassas för att ingjuta en mängd olika farmakologiska och biologiska medel i ett platsspecifikt sätt. Det kan också anpassas för att rikta en rad olika områden i hjärnan, som definieras genom sina stereotaktiska koordinater i en hjärna atlas 12. Anpassning till andra arter såsom möss kan göras med samma utrustning byggts för mindre djur. De nuvarande förfarandena är optimerade för 3 mån gamla vuxna råttor, men de skulle kunna användas för en mängd olika åldrar från ungdomar till äldre vuxna. Om man arbetar med yngre djur som inte kan representeras i en vanlig hjärna atlas, kan förberedande operationer infusing en färgglad färg att avgöra den rätta nålen placeringen empiriskt.

För utredare som kräver långvarig implantation av en kanyl med stereotaktisk kirurgi, Geiger et al. 13 pogillar en alternativt protokoll med lämplig snitt stängning och eftervård instruktioner. Om rikta mindre hjärnregioner önskas, bör det dock noteras att det nuvarande protokollet erbjuder mer precisa metoder för huvudet placering och utjämning i stereotaktisk enheten. Det nuvarande protokollet erbjuder också snittet fastspänning metoder som möjliggör en bredare kirurgiskt fönster, ofta nödvändigt när de riktar sidled strukturer såsom BLA.

Efter operationen, jämfört viktminskning för att kontrollera djur är normalt och förväntat. Figur 4 visar förändringen i vikt hos vuxna hanråttor som genomgick operation jämfört med obehandlade kontroller från samma kohort. Råttor kan förväntas visa viktminskning under de första 2-3 dagarna efter operation och sedan börja gå upp i vikt igen efter 5-6 dagar. Mer utdragen viktminskning kan indikera infektion eller andra problem.

Ibland kommer en råtta bort sina sår klipp. Om snittet hsom läkt, inte medför detta inte ett problem. Om snittet inte har läkt och är öppen, måste den lindade klämman ersättas antingen med en annan klämma eller med suturer, vilka båda kan utföras under isoflurananestesi. Inklusive antibiotika (80-96 mg trimetoprim sulfa / kg / dag, 240 mg / 5 ml vatten) i dricksvattnet för de kommande 5 dagarna kan också vara lämpligt att förhindra infektion om såret var öppen för miljön.

Kanske den mest utmanande aspekten av detta protokoll är placeringen av örat barer. Experimentella operationer med färgen infusion följt av omedelbar offer rekommenderas att kontrollera riktigheten av både öron bar placering och de valda stereotaktiska koordinater. Om hjärnan regionen riktas är i mittlinjen, rekommenderar vi att du använder en vinklad strategi från båda sidor av hjärnan som stora blodkärlen i mittlinjen kan förhindra en direkt mittlinjen strategi.

Även när lika bra som möjligt, stereotaktisk surrationer medför fortfarande stora exponering för smärtstillande medel och bedövningsmedel, vävnadsskada och immunsvar. Alla dessa faktorer kan påverka experimentella resultat, särskilt nära tidpunkten för operation. Biverkningar av kirurgi kan minimeras genom att man tillåter gott återhämtningstid (minst en vecka) innan experimentella procedurer. Alternativa metoder såsom riktade genetiska knockouts kan vara möjligt i möss men kan vara mycket mer komplicerat än stereotaktisk kirurgi.

Sammanfattningsvis tillåter den beskrivna metoden för lokaliserad lesion av hjärnområden utan att skada passerar fibrer. Den kan anpassas för många ändamål och är mycket tillförlitlig och verifierbar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Inga intressekonflikter deklareras.

Acknowledgments

Detta arbete stöddes ya CIRM predoctoral gemenskap (EDK), NARSAD Young Investigator Award (DK) och NIMH BRAINS priset (R01MH087495) (DK).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
N-Methyl-D-aspartic Acid 98% Fisher Scientific AC32919-0500
Dual Lab Standard Stereotaxic w/45 deg. Ear Bars Stoelting 51653 Alternative vendor: Kopf *note of caution: assure compatibility of stereotaxic accessories if purchasing from multiple vendors
10μl SYR SPECIAL (*/*/*) Hamilton 701SN
Dremel Moto-Tool Stoelting 58600 Alternative vendor: Kopf
Carbide burs, handpiece HP, size 2 Schein Dental 2284578
St–lting 6 Syringe Programmable Pump Stoelting 53140 Alternative vendor: Kopf
Stainless Steel 316 Hypodermic Regular Wall Tubing 30 Gauge .0123" OD x .00625" ID x .003" Wall (infusion needle) Small Parts HTXX-30R-06-05
Intramedic PE 20 tubing (infusion tubing) VWR 63019-025
Reflex Clips, 9mm, non-sterile Kent Scientific Corp. INS500346 Alternative vendor: Fine Science Tools
Reflex Clip Applier for 9mm clips Kent Scientific Corp. 12031-09 Alternative vendor: Fine Science Tools
Curved Hartman hemostat Fine Science Tools 13003-10
London forceps Fine Sceince Tools 11080-02
2% chlorhexidine solution Allivet 30159 Alternative vendor: PetSolutions
10% povidone iodine solution CVS SKU #739575
Hot bead sterilizer Harvard Apparatus 610183

Table 1. Table of specific reagents and equipment.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kirby, E. D. Basolateral amygdala regulation of adult hippocampal neurogenesis and fear-related activation of newborn neurons. Mol. Psychiatry. , Forthcoming (2011).
  2. Goosens, K. A., Maren, S. Contextual and auditory fear conditioning are mediated by the lateral, basal, and central amygdaloid nuclei in rats. Learn Mem. 8, 148-155 (2001).
  3. Korz, V., Frey, J. U. Bidirectional modulation of hippocampal long-term potentiation under stress and no-stress conditions in basolateral amygdala-lesioned and intact rats. J. Neurosci. 25, 7393-7400 (2005).
  4. Bhatnagar, S., Vining, C., Denski, K. Regulation of chronic stress-induced changes in hypothalamic-pituitary-adrenal activity by basolateral amygdala. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1032, 315-319 (2004).
  5. Ikegaya, Y., Saito, H., Abe, K. Attenuated hippocampal long-term potentiation in basolateral amygdala-lesioned rats. Brain Res. 656, 157-164 (1994).
  6. Ikegaya, Y., Saito, H., Abe, K. The basomedial and basolateral amygdaloid nuclei contribute to the induction of long-term potentiation in the dentate gyrus in vivo. Eur. J. Neurosci. 8, 1833-1839 (1996).
  7. Carter, R. N., Pinnock, S. B., Herbert, J. Does the amygdala modulate adaptation to repeated stress. Neurosciene. 126, 9-19 (2004).
  8. Roozendaal, B., McGaugh, J. L. Basolateral amygdala lesions block the memory-enhancing effects of glucocorticoid administration in the dorsal hippocampus of rats. Eur. J. Neurosci. 9, 76-83 (1997).
  9. Roesler, R., Roozendaal, B., McGaugh, J. L. Basolateral amgdala lesions block the memory-enhancing effect of 8-Br-cAMP infused into the entorhinal cortex of rats after training. Eur. J. Neurosci. 15, 905-910 (2002).
  10. Roozendaal, B. Glucocorticoid effects on memory consolidation depend on functional interactions between the medial prefrontal cortex and basolateral amygdala. J. Neurosci. 29, 14299-14308 (2009).
  11. Kaufer, D. Restructuring the neuronal stress response with anti-glucocorticoid gene delivery. Nat. Neurosci. 7, 947-953 (2004).
  12. Paxinos, G., Watson, C. The rat brain: in stereotaxic coordinates-the new coronal set. , Elsevier Academic Press. Burlington, MA. (2004).
  13. Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents. J. Vis. Exp. (20), e880 (2008).

Tags

Neuroscience Medicin Fysiologi stereotaktisk hjärna excitotoxisk skada NMDA stereotaktisk råtta kirurgi
Stereotaktisk kirurgi för excitotoxisk skada av specifika områden i hjärnan i vuxen råtta
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Kirby, E. D., Jensen, K., Goosens,More

Kirby, E. D., Jensen, K., Goosens, K. A., Kaufer, D. Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat. J. Vis. Exp. (65), e4079, doi:10.3791/4079 (2012).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter