Summary
Abstract
Este vídeo descreve a fabricação e uso de um dispositivo micro para o sistema de cultura nervoso central (SNC) neurônios. Este dispositivo é compatível com o live-célula de microscopia óptica (DIC contraste e fase), bem como confocal e microscopia de duas abordagens fóton. Este método usa peças de precisão-moldadas de polímeros para criar cultura de células em miniatura de vários compartimentos com isolamento fluídico. Os compartimentos são feitos de pequenos canais com dimensões que são grandes o suficiente para os neurônios em cultura bem controlados microambientes fluídico. Neurônios podem ser cultivadas por 2-3 semanas dentro do dispositivo, após o qual eles podem ser fixados e corados para imunocitoquímica. Compartimentos axonal e Somal pode ser mantida fluidically isolados uns dos outros através de uma diferença de pressão hidrostática pequena, este recurso pode ser usado para localizar insultos solúvel para um compartimento para até 20 h após cada troca de meio. Isolamento fluídico permite a coleta da fração axonal pura e análise bioquímica pela PCR. O dispositivo de microfluídica fornece uma plataforma altamente adaptável para pesquisa em neurociência e pode encontrar aplicações na modelagem de lesão do SNC e neurodegeneração.
