Summary
Abstract
Denna video beskriver tillverkning och användning av en mikroflödessystem enhet till kultur centrala nervsystemet (CNS) nervceller. Denna enhet är kompatibel med live-cell optisk mikroskopi (DIC och fas kontrast), samt konfokala och två photon metoder mikroskopi. Denna metod använder precisions-gjutna plastdelar för att skapa miniatyr flera brandceller cellodling med fluidic isolering. De fack är tillverkade av små kanaler med dimensioner som är stora nog till kultur nervceller i väl kontrollerade fluidic mikromiljöer. Nervceller kan odlas i 2-3 veckor inom enheten, varefter de kan vara fast och färgas för immuncytokemi. Axonal och somal fack kan upprätthållas fluidically isoleras från varandra med hjälp av en liten skillnad hydrostatiska trycket, denna funktion kan användas för att lokalisera lösliga förolämpningar till ett fack för upp till 20 h efter varje medium förändring. Fluidic isolering möjliggör insamlingen av ren axonal fraktion och biokemisk analys med PCR. Den mikroflödessystem enhet ger en mycket anpassningsbar plattform för neurovetenskaplig forskning och kan finna tillämpningar inom modellering CNS skada och neurodegeneration.
