Summary
Abstract
Este video describe la fabricación y el uso de un dispositivo de microfluidos con la cultura del sistema nervioso central (SNC), las neuronas. Este dispositivo es compatible con células vivas, microscopía óptica (DIC contraste y fase), así como confocal y microscopía de dos enfoques de fotones. Este método utiliza moldeado de precisión piezas de plástico para crear miniaturas de varios compartimentos de cultivo celular con el aislamiento de fluidos. Los compartimentos están hechos de pequeños canales con dimensiones que son lo suficientemente grandes para la cultura en las neuronas bien controlados microambientes fluidos. Las neuronas pueden ser cultivadas durante 2-3 semanas en el dispositivo, tras lo cual se pueden fijar y teñir para inmunocitoquímica. Compartimentos axonal y cromosómicas se puede mantener fluidically aislados unos de otros mediante el uso de una diferencia de presión hidrostática pequeña, esta característica se puede utilizar para localizar insultos soluble a un compartimiento para un máximo de 20 horas después de cada cambio de medio. Aislamiento de fluidos permite la recolección de la fracción axonal puro y análisis bioquímico mediante PCR. El dispositivo de microfluidos ofrece una plataforma altamente adaptable para la investigación en neurociencias y puede tener aplicaciones en el modelado de una lesión del SNC y la neurodegeneración.
