Summary
In de pathogenese van bot metastase, angiogenese is een cruciaal proces en vormt derhalve een doel voor beeldvorming en therapie. Hier presenteren we een rat model van site-specifieke borstkanker botmetastase en beschrijven strategieën om niet-invasieve beeld angiogenese
Abstract
Angiogenese is een essentieel kenmerk van de groei van kanker en metastase vorming. In bot metastase, angiogene factoren zijn cruciaal voor tumorcelproliferatie in het beenmerg holte, alsmede voor de interactie van de tumor en botcellen resulteert in lokale botafbraak. Ons doel was om een model van experimentele botmetastase die het mogelijk maakt in vivo evaluatie van de angiogenese in het skelet laesies met behulp van niet-invasieve beeldvormende technieken te ontwikkelen.
Voor dit doel hebben we 10 5 MDA-MB-231 menselijke borstkankercellen geïnjecteerd in de oppervlakkige epigastrische slagader, die de groei van uitzaaiingen in het lichaam van andere gebieden dan de betreffende achterpoot 1 uitsluit. Na 25-30 dagen na de tumorcel inoculatie, site-specifieke botmetastasen te ontwikkelen, beperkt tot de distale femur, proximale tibia en proximale fibula 1. Morfologische en functionele aspecten van angiogenese kan lengterichting worden onderzocht in het bot metastases met behulp van magnetische resonantie beeldvorming (MRI), volumetrische computertomografie (VCT) en echografie (US).
MRI geeft morfologische informatie over het zachte weefsel van botmetastasen die in eerste instantie beperkt is tot het beenmerg holte en vervolgens meer dan corticaal bot, terwijl vordert. Het gebruik van dynamische contrast-enhanced MRI (DCE-MRI) functionele gegevens met inbegrip van regionale bloedvolume, perfusie en schip permeabiliteit kan worden verkregen en gekwantificeerd 2-4. Botafbraak wordt gevangen in een hoge resolutie met behulp van morfologische VCT beeldvorming. Als aanvulling op MRI-bevindingen, kan osteolytische laesies grenzend aan sites van intramedullaire groei van de tumor worden geplaatst. Na het contrastmiddel toepassing, VCT angiografie onthult de macrovessel architectuur in botmetastasen in hoge resolutie, en DCE-VCT in staat stelt inzicht in de microcirculatie van deze laesies 5,6. VS is van toepassing op morfologische en functionele kenmerken te beoordelen van het skelet letsels als gevolg vanlokale osteolyse van corticale bot. Met behulp van B-mode en Doppler-technieken, kan de structuur en de doorbloeding van het zachte weefsel metastasen worden geëvalueerd, respectievelijk. DCE-US zorgt voor real-time beeldvorming van vascularisatie in botmetastasen na injectie van microbellen 7.
Tot slot, in een model van site-specifieke borstkanker botmetastasen multimodale beeldvorming technieken, waaronder MRI, VCT en de Verenigde Staten bieden aanvullende informatie over de morfologie en functionele parameters van angiogenese in deze skelet laesies.
Protocol
1. Cel Cultuur
- Culture MDA MB-231-menselijke borstkankercellen (American Type Culture Collection) in RPMI-1640 (Invitrogen, Duitsland), aangevuld met 10% FCS (Sigma, Duitsland). Houd alle culturen onder normale omstandigheden (37 ° C, vochtige atmosfeer, 5% CO 2) en passage van de cellen 2-3 keer per week te houden in de logaritmische groei. Voor het diermodel hieronder beschreven, is er geen behoefte voor het gebruik van botspecifiek sublijnen van MDA MB-231-cellen de tumor overname bedraagt dan 90% 1.
- Oogst sub-confluente tumorcellen na met 2 mM EDTA in PBS-(fosfaatgebufferde zoutoplossing zonder Ca2 + en Mg2 +) en 0,25% trypsine (Sigma, Taufkirchen, Duitsland). Count MDA-MB-231 cellen in de kamer van een Neubauer en hang ze in RPMI-1640 (5x10 5 cellen in 1 ml).
2. Naakt Rat Model van botmetastasen
- Alle experimenten werden goedgekeurd door de verantwoordelijke overheid animal ethische commissie.
- Gebruik naakt ratten op een leeftijd van 6-8 weken en houdt ze op SPF-omstandigheden in een geschikte kleine dieren (bijv. mini-barrière systeem). Houd dieren onder gecontroleerde omstandigheden (21 + / - 2 ° C kamertemperatuur, 60% luchtvochtigheid en 12 uur licht-donker ritme) en bieden geautoclaveerd voeder en water ad libitum aan de ratten.
- Voor het dier chirurgie, injecteert een pijnstillend medicijn (bijv. Carprofen 4 mg / kg sc, als gevolg van de eenmalige toediening en korte halfwaardetijd (ca. 8 uur), moet carprofen geen invloed op de groei van tumoren). Verdoof ratten met een mengsel van zuurstof (0,5 l / min) en isofluraan (1-1,5 vol.%) En zorg ervoor dat de rat is goed verdoofd en ademt regelmatig voor het begin van de volgende procedure.
- Plaats de verdoofde dier onder een geschikte binoculaire operatiemicroscoop (bijv. Leica) en werken met een vergroting van 16-voudig.
- Begin de chirurgische ingreep door het snijden van de huid en het onderhuidse weefsel in de ingunele gebied bij een lengte van 2-3 cm met een schaar (BC060r Iris schaar 108 mm). Alle slagaders vertakken uit de liesslagader (FA) moeten worden ontleed met inbegrip van de oppervlakkige epigastrische slagader (SEA), dalende genicular slagader (DGA), a. poplitea (PA) en oppervlakkige slagader (SA).
- Zet clips op de liesslagader proximale van herkomst van de zee en op de DGA, aan PA en SA tijdelijk af te sluiten lokale doorbloeding. Ligeren van de SEA op zijn distale deel voor het openen van dit schip mogelijk te maken zonder bloeding (figuur 1a).
- Snijd de SEA met een schaar (Vannas Micro-SCRS-groef STR 85 mm) proximaal van de ligatie (Figuur 1B) en het beheer van een 1% papaverin oplossing op de zee, de latere invoeging van een naald te vergemakkelijken door versoepeling van het schip ( Figuur 1C).
- Snijd ongeveer de helft van de diameter van de zee met een schaar en steek een naald (0,3 mm diameter en 42 mm lengte) in het lumen van de zee, terwijl holding het afgesneden einde van het vat met een pincet (figuur 1D, E). Indien beschikbaar, bevestig de naald in een extern apparaat op onregelmatige bewegingen die kunnen leiden tot perforatie van de vaatwand te verminderen. Sluit een spuit aan de naald. Verwijder de clip van de distale FA en plaats het op de oppervlakkige slagader (Figuur 1F).
- Spuit de MDA-MB-231 cellen gesuspendeerd in 0,2 ml media langzaam in de zee. Op grond van de clips MDA-MB-231 cellen zijn gericht op de DGA en de PA. Verwijder de naald en ligeren van de SEA om het bloeden te voorkomen dat voor het uittrekken van de slagader clips. Sluit de wond met behulp van chirurgische clips en het beëindigen van inhalatie-anesthesie.
- Voor na de procedure monitoring, zijn ratten meestal gedood 7-8 weken na de tumorcel inoculatie tot ernstige skelet complicaties te voorkomen. Gedurende deze tijd, moeten de dieren worden gecontroleerd dagelijks naar grootte van de tumor en eventuele bewijzen van pijn (bijvoorbeeld gedrags afwijkingen, gewichtsverlies, motorische defecten) te beoordelen. Als dieren tonen een tumorgroter dan de ethische toegestane limiet of het bewijs van pijn tijdens de groei van de tumor, moeten ze worden gedood.
- Immuno-deficiënte (naakt) ratten werden gebruikt voor xenogenous transplantatie van menselijke MDA-MB-231 borstkankercellen. Naakt ratten werden niet gekozen om beter te visualiseren de groeiende tumor.
3. Magnetic Resonance Imaging (MRI)
- Na de tumorcel inoculatie, laat ongeveer 25-30 dagen van de groei van tumoren Voordat u begint met de beeldvorming. Voor MRI gebruik maken van een speciale experimentele scanner of een menselijke MR-systeem met een geschikte dier spoel. We gebruikten een menselijke MR-systeem (Symphony, Siemens, Duitsland) en een zelfgebouwde spoel voor radiofrequentie-excitatie en detectie, ontworpen als een cilindrisch volume resonator met een binnendiameter van 83 mm en een nuttige lengte van 120 mm (figuur 2A).
- Verdoof de rat met zuurstof en isofluraan zoals hierboven gegeven. Plaats een katheter in de staartader en plaats deze op de staart met behulp van een kraan e. Sluit een spuit met het contrastmiddel (bv 0,1 mmol / kg Gd-DTPA in ongeveer 0,5 ml; Magnevist, Bayer-Schering, Duitsland).
- Plaats de rat in het MR-systeem handhaven van de inhalatie-anesthesie. Begin met een morfologische MR-sequentie tot op het bot metastase te vinden (bijv. T2 gewogen: turbo spin-echo sequentie, TR 3240 ms, TE 81 ms, matrix 152 x 256, FOV 90 x 53,4 mm 2, slice dikte van 1,5 mm, 3 gemiddelden, scan tijd 3:40 min).
- Bepaal een stukje van het bot metastase met de grootste diameter en start de volgorde voor DCE-MRI (bijv. verzadiging herstel turbo knippersignalen, TR 373 ms, TE 1,86 ms, matrix 192 x 144, FOV 130 x 97,5 mm 2, slice dikte 5 mm, afmetingen 512, gemiddelden 1, scantijd 6:55 min). Na ongeveer 30 sec, beginnen de contrastmiddel injecteren over een periode van 10 sec. De totale tijd voor de hierboven genoemde procedures om een MRI-onderzoek uit te voeren is ongeveer 15-20 minuten per dier.
- Kies een geschikte CT systeem hetzij een humane of een experimenteel scanner. Hier hebben we gebruik gemaakt van een prototype van een flat-panel voorzien van volumetrisch berekende tomograaf (Figuur 2B, Volume CT, Siemens, Duitsland).
- Verdoof de rat met zuurstof en isofluraan zoals hierboven gegeven. Plaats een katheter in de staartader en plaats deze op de staart met een tape. Sluit een spuit met het contrastmiddel (bijvoorbeeld 1 g jodium per kg in ongeveer 0,5 ml; Imeron 400, Bracco, Duitsland).
- Plaats de rat op de scanner onder inhalatie-anesthesie. Gebruik de volgende scan parameters voor VCT: buisspanning 80 kV, buisstroom 50 mA-, scan-tijd 51 sec, rotatiesnelheid 10 seconden, frames per seconde 120, matrix 512 x 512 en slice dikte van 0,2 mm. Injecteer het contrastmiddel in de tweede rotatie van de flat-panel systeem. De totale tijd voor de hierboven genoemde procedures om een onderzoek uit te voeren VCT is ongeveer 5-10 minuten per Animal.
- Reconstrueer beelden met een gemodificeerde FDK (Feldkamp-Davis-Kress) cone-beam reconstructie-algoritme (kernel H80a, Afra, Duitsland).
5. Echografie (US)
- Experimentele en klinische Amerikaanse systemen zijn beschikbaar voor dit doel. We gebruikten de klinische systeem Acuson Sequoia 512 ultrasound systeem met een 15L8 lineaire transducer (figuur 2C; Siemens-Acuson, Mountain View, CA).
- Verdoof de rat met zuurstof en isofluraan zoals hierboven gegeven. Plaats een katheter in de staartader en plaats deze op de staart met een tape. Sluit een spuit met een microbellen contrastmiddel (bijv. 1,6 ml / kg in ongeveer 0,5 ml; SonoVue, Bracco, Italië). Bevestig de VS transducer op de betreffende achterbeen gebruik van een statief en toe te passen VS gel tussen de transducer en de achterpoot.
- Voer B-modus beeldvorming (zendfrequentie: 17 MHz; mechanische index: 0,51) tot de grootste diameter van het bot metastase te bepalen en vaststellen van de transducer in tzijn positie. Voeg Doppler-signaal op B-modus beelden voor informatie over weefselperfusie. Houd er rekening mee dat alleen laesies die corticale bot verstoren zijn toegankelijk voor de VS golven.
- Voor dynamische contrast-enhanced VS (DCE-US) zet de Amerikaanse toestel in cadans contrast puls sequencing (CPS) modus (zendfrequentie: 7 MHz; mechanische index: 0,18), injecteer de microbellen en het opnemen van een cine lus van 90 sec lengte. De totale tijd voor de bovengenoemde procedures om een Amerikaans onderzoek uit te voeren is ongeveer 10-15 minuten per dier.
6. Nabewerking van beeldgegevens
- Gebruik de morfologische gegevens van MRI, VCT en de VS om de weke delen tumor (MRI, VS) en het skelet vernietiging (VCT) van botmetastasen te karakteriseren en de locatie, laesie grootte en het volume van de letsels met een DICOM-viewer (bv. Osirix Dicom te bepalen Viewer).
- Om de vertakking patroon van de schepen in botmetastasen (angiografie) te verkrijgen, kan de VCT gegevens worden gebruikt. Rebouw 2D-of 3D-afbeeldingen met behulp van de informatie van de arteriële fase met of zonder aftrekken technieken (bijvoorbeeld Osirix Dicom Viewer).
- Om de parameters van vascularisatie kwantificeren van DCE-MRI, DCE-VCT en DCE-US, gebruik maken van software specifiek voor de modaliteiten. Voor DCE-MRI, bepalen de vasculaire parameters amplitude A (geassocieerd met het bloedvolume) en wisselkoers k ep (in verband met perfusie en schip permeabiliteit) in botmetastasen met Dyna Lab (Mevis Research, Bremen, Duitsland) op basis van de twee- compartiment model van Brix 8,9. Alternatieve farmacokinetische modellen voor de evaluatie beschikbaar zijn, zoals bijvoorbeeld de Tofts model 10.
- Om DCE-VCT gegevens te kwantificeren, het uitvoeren van een beschrijvende analyse van gegevens aan parameters, zoals oppervlakte te berekenen onder de curve (AUC) of piekverhogingsfactor (PE) met Dyna Lab (Mevis Research, Bremen, Duitsland).
- Kwantificeer informatie van real-time DCE-met ons op via kwantitatieve analyse software (bijv. Qontrast, Bracco, Italië) door het analyseren van cine-loops op basis van de geïmplementeerde bolusinjectie model. Plaats de regio van belang (ROI) op het bot metastase, te bepalen of beschrijvende factoren, zoals de oppervlakte onder de curve of kwantitatieve parameters van kleur-gecodeerde kaarten, bijvoorbeeld regionale bloedvolume, de regionale doorbloeding en het vullen van de tijd.
7. Representatieve resultaten
Na intra-arteriële injectie van MDA-MB-231 cellen in de zee (Figuur 1), site-specifieke uitzaaiingen in de botten te ontwikkelen in de betreffende achterpoot van het naakt rat. Osteolytische laesies beperkt tot het dijbeen, het scheenbeen en kuitbeen kan een niet-invasieve worden afgebeeld door middel van MRI, VCT en de Verenigde Staten (figuur 2) begint ongeveer 25-30 dagen na de injectie en de follow-up gedurende enkele weken. Bij het combineren van MRI, VCT en de Verenigde Staten met inbegrip van inheemse en contrast-enhanced technieken, kan aanvullende informatie worden beoordeeld botmetastasen die zijn samengesteld uit een weke delentumor (tumor cellen en stroma) en de respectieve osteolytische laesie (botafbraak). Voor vergelijking van de gegevens tussen de techniek, kunnen alle drie beeldvorming sequentieel in dezelfde rat. MRI toont morfologie van de botten uitgezaaide zachte weefsel dat in eerste instantie wordt beperkt tot het beenmerg holte en vervolgens meer dan corticale bot in de loop van de ontwikkeling. Functionele parameters zoals regionale bloedvolume, perfusie en schip permeabiliteit kan worden verkregen bij DCE-MRI en gekwantificeerd (figuur 3). Botstructuur, in het bijzonder osteolytische veranderingen in de metastasen beoordeeld hoge resolutie door VCT. Als aanvulling op MRI-bevindingen, zijn osteolytische laesies gelegen naast de groei van tumoren intramedullaire. VCT angiografie toont de gewijzigde macrovessel architectuur van botmetastasen, en DCE-VCT geeft respectieve aspecten van de microcirculatie (figuur 4). Door lokale vernietiging van corticale bot in metastatic laesies, VS voor morfologische en functionele eigenschappen van het zachte weefsel beoordeling tumor door het gebruik van B-modus en Doppler technieken. Na toepassing van microbellen, DCE en de VS zorgt voor real-time beeldvorming van vascularisatie in botmetastasen (figuur 5).
Figuur 1. Achterpoot van een rat naakt bereid tumorcel inoculatie als afgebeeld door een operatie microscoop. A, vertakking patroon van de arteria femoralis (FA) met inbegrip van de oppervlakkige epigastrische slagader (SEA), dalende genicular slagader (DGA), a. poplitea (PA) en oppervlakkige slagader (SA). Arteriële clips op de SA, PA en proximale FA evenals ligatie van SEA, B, SEA werd gesneden proximaal van de ligatie, C-, spier-relaxatie van de zee na toevoeging van papaverine, D, insnijding van de zee (in beslag genomen door een pincet), E, het inbrengen van de naald in de zee, F, gefixeerd naald in de zee (externe fi xating apparaat) en de injectie van MDA-MB-231 tumorcellen via de zee, naar de DGA en de PA op grond van de clips.
Figuur 2 A, menselijke MR-systeem (Symphony, Siemens, Duitsland) en een zelfgebouwde spoel voor radiofrequentie-excitatie en detectie geplaatst in de scanner;. B, flat-panel voorzien van volumetrisch berekende tomograaf (Volume CT, Siemens, Duitsland), C, klinische ultrasound systeem Acuson Sequioa 512 (Siemens-Acuson, Mountain View, CA).
Figuur 3. Axiaal MR secties. Linker paneel, T2w MRI, middenpaneel, amplitude A (DCE-MRI), rechts paneel, wisselkoers k ep (DCE-MRI). Pijlen wijzen op botmetastasen. De kleur kaart voor DCE-MRI data varieert van rood (hoge waarden) naar blauw (lage waarden).
78/4178fig4.jpg "/>
Figuur 4. 3D-VCT reconstructies van de osteolytische botmetastasen (linker paneel) en een angiografie (middelste paneel) en een DCE-VCT sectie in axiale richting van de parameter piekverhogingsfactor (rechter paneel). De kleur kaart voor DCE-VCT data varieert van rood (hoge waarden) naar blauw (lage waarden).
Figuur 5. Amerikaanse beelden van B-mode (morfologie, linker paneel), Doppler (perfusie, middelste paneel) en CEUs (rechter paneel, piekverhogingsfactor na injectie van microbellen van real-time beeldvorming van vascularisatie) van een bot metastase.
Aanvullende film 1. Klik hier om extra film te bekijken .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
De werkwijze voor het induceren experimentele botmetastasen hier in combinatie met de beeldvorming mogelijk te vervolg osteolytische laesies naakt ratten lengterichting. In ons model worden de MDA-MB-231 menselijke borstkankercellen geïnjecteerd in de zee, die een anastomose tussen de bekkenslagader via de pudendoepigastric stam en de liesslagader. Hierdoor wordt de bloedstroom in de meegeleverde gebied van het kniegewricht behouden na ligatie van de zee. De voordelen van dit model ten opzichte bestaande modellen van botmetastase de plaatsspecifieke uiterlijk van botmetastasen ten opzichte van de intracardiale injectie model 11 en het opnemen van de pathogène processen tumorcellen extravasatie en migratie naar het doel weefsel ten opzichte van het scheenbeen injectie model 12. Verder is in dit model een systemische tumor lasten, met name visceraal verspreiding, wordt weggelaten die het mogelijk maakt voor longitudinale studies over sebasisonder weken waardoor aldus de vermindering van de benodigde dieren 1,13.
De rol van angiogenese als essentieel proces om tumorcelproliferatie te bevorderen en leiden tot botafbraak bij de pathogenese van bot metastase werd eerder aangetoond in ex vivo studies 14,15. Hier presenteren we in vivo beeldvorming technieken om niet-invasieve angiogenese te beoordelen in deze laesies toepassing van MRI, VCT en de VS. Met behulp van een naakt rat model, aanvullende informatie van de vascularisatie met inbegrip van functionele informatie over het bloedvolume en schip permeabiliteit / perfusie (DCE-MRI, DCE-VCT), vaatmorfologie in hoge resolutie (VCT angiografie), perfusie (VS Doppler) en real-time beeldvorming van vascularisatie (DCE-US) kan worden verkregen 1-7,16.
Imaging van angiogene parameters met behulp van MRI, VCT en de Verenigde Staten kan de opheldering van de pathogene rol van angiogenese in het skelet metastase niet-invasieve en in vivo 3,4,6. Een andere toepassing van de hierboven genoemde beeldvorming is het onderzoek van therapeutische effecten bij longitudinaal onderzoek op angiogene of standaard therapieën voor skeletmetastasen. Voor het aantonen van farmacologische reactie, longitudinale studies tot 70 dagen na de tumorcel inoculatie met groepsgrootte tussen de 8 en 17 ratten werden uitgevoerd om aan te tonen anti-tumor, anti-angiogene en anti-resorptief effecten 2-7,17. Door de toepassing van de beeldvormende methoden op scanners voor menselijk gebruik in een klinisch relevant diermodel, de voorgestelde procedures zijn van hoge translationele waarde voor de beoordeling van de respons op de behandeling bij patiënten met botmetastasen 16.
Tot slot kan het gebruik van deze site-specifieke diermodel van borstkanker botmetastasen, morfologische en functionele aspecten van angiogenese worden afgebeeld niet-invasieve en in vivo
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Geen belangenconflicten verklaard.
Acknowledgments
Dit werk werd ondersteund door de Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB-TR 23 en SFB-TR 79, TB en DK). De auteurs willen graag Renate Bangert bedanken, Karin Leotta en Lisa Seyler voor een uitstekende technische ondersteuning.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| MDA-MB-231 human breast cancer cells | American Type Culture Collection | HTB-26 | |
| RPMI-1640 | Invitrogen | 61870 | |
| FCS | Invitrogen | 10270 | |
| Trypsin-EDTA | Invitrogen | 25300 | |
| Carprofen Rimadyl | Pfizer Pharma GmbH | PZN 110208 | |
| Magnevist | Bayer-Schering | PZN 6961516 | |
| Imeron 400 MCT | Bracco | PZN 228654 | |
| SonoVue | Bracco | PZN 1567358 | |
| Papaverin | Alfa Aesar | L 04152 | |
| Isofluran | Baxter Internationl Inc. | HDG 9623 | |
| Symphony (Magnetic resonance imaging) | Siemens AG | ||
| Volume CT (Volumetric computed tomography) | Siemens AG | ||
| Acuson Sequioa 512 (Ultrasound) | Siemens-Acuson |
References
- Bäuerle, T. Characterization of a rat model with site-specific bone metastasis induced by MDA-MB-231 breast cancer cells and its application to the effects of an antibody against bone sialoprotein. Int. J. Cancer. 115, 177-186 (2005).
- Merz, M., Komljenovic, D., Zwick, S., Semmler, W., Bäuerle, T. Sorafenib tosylate and paclitaxel induce anti-angiogenic, anti-tumor and anti-resorptive effects in experimental breast cancer bone metastases. Eur. J. Cancer. 47, 277-286 (2010).
- Bäuerle, T. Cilengitide inhibits progression of experimental breast cancer bone metastases as imaged noninvasively using VCT, MRI and DCE-MRI in a longitudinal in vivo study. Int. J. Cancer. 128, 2453-2462 (2011).
- Bäuerle, T., Merz, M., Komljenovic, D., Zwick, S., Semmler, W. Drug-induced vessel remodeling in bone metastases as assessed by dynamic contrast enhanced magnetic resonance imaging and vessel size imaging: a longitudinal in vivo study. Clin. Cancer Res. 16, 3215-3225 (2010).
- Bäuerle, T. Imaging anti-angiogenic treatment response with DCE-VCT, DCE-MRI and DWI in an animal model of breast cancer bone metastasis. Eur. J. Radiol. 73, 280-287 (2010).
- Bäuerle, T. Bevacizumab inhibits breast cancer-induced osteolysis, surrounding soft tissue metastasis, and angiogenesis in rats as visualized by VCT and MRI. Neoplasia. 10, 511-520 (2008).
- Merz, M., Komljenovic, D., Semmler, W., Bäuerle, T. Quantitative contrast-enhanced ultrasound for imaging anti-angiogenic treatment response in experimental osteolytic breast cancer bone metastases. , Forthcoming (2012).
- Brix, G. Pharmacokinetic parameters in CNS Gd-DTPA enhanced MR imaging. J. Comput. Assist. Tomogr. 15, 621-628 (1991).
- Brix, G. Microcirculation and microvasculature in breast tumors: pharmacokinetic analysis of dynamic MR image series. Magn. Reson. Med. 52, 420-429 (2004).
- Tofts, P. S. Estimating kinetic parameters from dynamic contrast-enhanced T(1)-weighted MRI of a diffusable tracer: standardized quantities and symbols. J. Magn. Reson. Imaging. 10, 223-232 (1999).
- Arguello, F., Baggs, R. B., Frantz, C. N. A murine model of experimental metastasis to bone and bone marrow. Cancer Res. 48, 6876-6881 (1988).
- Kjonniksen, I., Winderen, M., Bruland, O., Fodstad, O. Validity and usefulness of human tumor models established by intratibial cell inoculation in nude rats. Cancer Res. 54, 1715-1719 (1994).
- Bäuerle, T. Treatment of bone metastasis induced by MDA-MB-231 breast cancer cells with an antibody against bone sialoprotein. Int. J. Oncol. 28, 573-583 (2006).
- Andersen, T. L. A physical mechanism for coupling bone resorption and formation in adult human bone. Am. J. Pathol. 174, 239-247 (2009).
- Nyangoga, H., Mercier, P., Libouban, H., Basle, M. F., Chappard, D. Three-dimensional characterization of the vascular bed in bone metastasis of the rat by microcomputed tomography (MicroCT). PLoS One. 6, e17336 (2011).
- Bäuerle, T., Semmler, W. Imaging response to systemic therapy for bone metastases. European Radiol. 19, 2495-2507 (2009).
- Bretschi, M. Cilengitide inhibits metastastic bone colonization in a nude rat model. Oncol. Rep. 26, 843-851 (2001).
