Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Bioengineering
Click here for the English version

Bioengineering

Bridging Bio-elektroniske grænseflade med Biofabrication

Published: June 6, 2012 doi: 10.3791/4231
Automatic Translation
*1, *2, *1, 3, 2, 1, 1
1Fischell Department of Bioengineering, University of Maryland, 2Institute for Bioscience and Biotechnology Research, University of Maryland, 3Department of Materials Science and Engineering, University of Maryland
* These authors contributed equally

Protocol

1. Alginat elektroaflejring

  1. Tilslut en strømforsyning til de brugerdefinerede fabrikerede elektroderne via patchkabler med krokodillenæb. En indiumtinoxid (ITO) omfattede objektglas vil fungere som anode (arbejdselektroden) og platinfolie vil tjene som katode (modelektrode). Placere elektroderne, så ITO overflade, der skal funktionaliseres imod modelektroden og er anbragt enten lodret dyppes i en opløsning eller horisontalt, således at aflejringen opløsningen indeholdt på overfladen.
  2. Fremstilling af en alginat aflejring opløsning ved blanding af 1% alginat og 0,5% CaCO 3 (efter vægt) i destilleret vand og derefter autoklavering af opløsningen. Det anbefales, at kontinuerligt omrøre opløsningen, når den ikke er i brug.
  3. Nedsænkes begge elektroder i belægningsopløsning. Den anvendte alginat kan fluorescensmærket med fluorescerende (Invitrogen), som pr Cheng et al. 14, for at tillade fluorescence billeddannelse af den resulterende film.
  4. Anvende en konstant strømtæthed (3 A / m 2) i 2 minutter; spænding vil forskyde i området af 2-3 V.
  5. Afbryde elektrode og fjerne ikke-deponeret opløsning. Forsigtigt skylles filmen med NaCl (0,145 M) for at fjerne overflødigt alginat.
  6. Inkuber filmen kortvarigt (~ 1 min) i CaCl2 (0,1 M) for at styrke gelen. Skylning med NaCl (0,145 M) og inkuber i en ønsket opløsning suppleret med CaCl2 (1 mM).
  7. Billedet med et fluorescens mikroskop (fig. 1B).

2. Samaflejring af Kommunikation Cellepopulationer i alginat

  1. Et signal-afsender cellekultur (W3110 vægt E. coli), dyrket i LB-medier, og et signal-modtager cellekultur (MDAI2 + pCT6-lsrR - ampr + pET-dsRed - KanR), dyrket i LB medium + 50 ug / ml af kanamycin og ampicillin, skal dyrkes natten over ennd re-inokuleret i vækst til en optisk densitet (ved 600 nm) af en. Justere optiske densitet af modtageren cellekulturen til 0,4-0,6 med LB før brug.
  2. Fremstilling af en aflejring opløsning af 2% alginat og 1% CaCO 3, og blandes med hver celle kultur i et forhold på 1:1 til en slutkoncentration på 1% alginat, 0,5% CaCO 3, med cellerne fortyndet til en densitet på omkring halvdelen dyrkning densitet.
  3. Anvende et objektglas mønstret med to ITO elektroder er indeholdt i en polydimethylsiloxan (PDMS) og (fremstillet ifølge Sylgard instruktioner og skæres til den ønskede størrelse) og en platin-modelektrode. Tilslut en ITO elektrode til en strømforsyning med platin som beskrevet i procedure 1 (Alginatbandager elektroaflejring).
  4. Elektroderne dyppes ned i en belægningsopløsning indeholdende modtageren celler. Indstille strømforsyningen til en konstant strøm ved en densitet på 3 A / m 2, hvor overfladearealet dimension er defineret ved en enkelt elektrode, på hvilken deposition vil forekomme.
  5. Anvender de nuværende i 2 minutter for at tillade samaflejring af cellerne i alginatmatrix.
  6. Skylles filmen som beskrevet i trin 1.5.
  7. Skifte den anodiske forbindelsen til det andet, tilgrænsende, ITO-elektrode.
  8. Gentage aflejring procedure (trin 2.4 - 2.7), men denne gang indføres opløsningen indeholdende afsender celler.
  9. Inkuber i 2-elektroden chip indeholdende samaflejrede celler og calcium-alginat natten over ved 37 ° C i phosphatbufret saltvand (PBS) suppleret med 10% LB-medier og 1 mM CaCl2.
  10. Efter inkubering billede ved hjælp af et fluorescensmikroskop (figur 2B).

3. Chitosan elektroaflejring

  1. Tilslut strømforsyningen til elektroderne via krokodillenæb. En guld belagt siliciumchip fungerer som katode (arbejdende elektrode), og en platinfolie vil tjene som anode (modelektrode). Placer guldelektroden overflade, så thpå den imod modelektroden og begge er placeret enten vertikalt at dyppes i en opløsning eller horisontalt, således at aflejringen opløsningen indeholdt på overfladen.
  2. Forbered en chitosanopløsning ved at blande chitosan flager i vandet og langsomt tilsætning af 2 M HCl til at opløse polysaccharider (endelige pH 5,6), og sørg for at følge proceduren beskrevet af Meyer et al. 15.
  3. Placere elektroderne til en chitosan-opløsning (0,8%), fuldstændigt neddyppet det ønskede område for aflejring. Chitosan anvendes, kan fluorescensmærket med 5 - (og-6)-carboxyrhodamin 6G succinimidylester (Invitrogen), som pr Wu et al 8, til at afbilde galvanisk filmen ved fluorescensmikroskopi..
  4. Anvende en konstant strømtæthed (4 A / m 2) i 2 minutter. Spændingen vil forskyde i området 2-3 V. Beregn strømtætheden som funktion af guld overfladeareal af den arbejdende elektrode udsættes for depositioN opløsning.
  5. Skyl elektroden med DI-vand for at fjerne overflødigt chitosan. Chippen kan opbevares i vand eller PBS (10 mM, pH 7,0).
  6. Billedet med et fluorescens mikroskop (fig. 3C).

4. Elektrokemisk Transduktion med en funktionaliseret chitosanfilm

  1. Codeposit chitosan og glucoseoxidase (GOx) fra en opløsning (1% chitosan, 680 U / ml GOx, pH 5,6) ved en strømtæthed på 4 A / m 2 på en mønstret elektrode ifølge Procedure 3 (Chitosan elektroaflejring). En chitosanfilm indesluttet i GOx vil blive genereret.
  2. Fastgøre den behandlede elektroden til en tre-elektrodesystem som arbejdselektroden, en platintråd som modelektrode og Ag / AgCI som referenceelektroden, som beskrevet i figur 4A.
  3. Elektroderne dyppes ned i en phosphatpufferopløsning (0,1 M, pH 7,0) indeholdende NaCl (0,1 M).
  4. Elektrokemisk konjugat proteinet til chitosanfilm ved at anvende en konstant spænding (0,9 V) til 60s hjælp kronoamperometri 10.
  5. Placere chip i phosphatpuffer (0,1 M, pH 7,0) og vaskes i 10 minutter på en orbitalryster at fjerne eventuelle uomsatte NaCI og ukonjugeret GOx.
  6. Igen fastgøre de tre-elektrode som beskrevet i trin 4.2 og nedsænkes i en opløsning af 5 mM glucose. Ved hjælp af cyklisk voltammetri, potentialet feje i en positiv retning til 0,7 V. anvendes en kontrolfilm, der ikke indeholder glucoseoxidase som en sammenligning for mængden af oxidation ses i sweep (figur 4B).
  7. Fjern elektroderne fra glucoseopløsning og skylles med phosphatpuffer (0,1 M, pH 7,0) og derefter placere elektroderne i et 10 ml bægerglas indeholdende 8 ml phosphatpuffer (0,1 M, pH 7,0). Forspænde GOx-funktionaliserede chip til 0,6 V for at tjene som arbejdselektroden (figur 4C).
  8. Tilsættes portioner af glucose til bufferen (hver alikvot forøger glucosekoncentrationen ved4 mM).
  9. Generere en standardkurve mellem steady state strøm og glucosekoncentrationen i GOx-funktionaliserede chitosanfilm.

5. Protein Funktionalisering Brug Enzymatisk Assembly

  1. Anvende et objektglas mønstret med en tilstødende guld og ITO-elektrode er indeholdt i en PDMS brønd. Forspænde guldelektrode med en katodisk potentiale til electrodeposit chitosan som vist tidligere. Skylles filmen kort i DI-vand og derefter PBS med pipette.
  2. Tilsættes en opløsning af 3 uM blå fluorescens-mærkede "AI-2 Synthase" 16 (ved hjælp af en DyLight labelling kit) + 100 U / ml Tyrosinase i PBS.
  3. Inkuberes i 1 time ved stuetemperatur, skylles filmen med PBS.
  4. Anvende en anodisk potentiale til ITO-elektrode til codeposit en alginat belægningsopløsning indeholdende modtager celler (som fremstillet i trin 2.1-2.2). Følg trin 2,3-2,6 af Metode 2 (samaflejring af cellepopulationer i alginat).
  5. For at genereredet transmitterede signal (AI-2) enzymatisk efter skylning filmene tilsættes en opløsning af 500 uM S-adenosyl homocystein (SAH) i PBS suppleret med 10% LB medium og 1 mM CaCl2. Dække elektroderne for at forhindre fordampning af opløsningen og inkuberes natten over ved 37 ° C. Dette vil muliggøre en modtager celle respons ved at generere et rødt fluorescerende protein (dsRed).
  6. Hosliggende elektroder kan afbildes med fluorescensmikroskopi ved at justere de filtre til at indfange den blå fluorescens af AI-2-syntase og rød fluorescens udtrykt ved de samaflejrede modtageren celler (figur 5B).

6. Repræsentative resultater

Pålægges elektriske signaler kan skabe lokaliserede mikromiljøer (f.eks felter og gradienter) nær en elektrodes overflade, og disse stimuli kan udløse selvsamling af polysaccharider, såsom alginat, og chitosan at deponere en hydrogel film på elektrodeoverfladen. Fordi thans sol-gel-overgang forekommer ved elektrodeoverfladen, er den resulterende film electroaddressed med dens geometri matchende elektroden mønster (figur 1B, 3C). Biokompatible film, såsom alginat og chitosan tilvejebringe overflader, kan funktionaliseres med biologiske komponenter. Ved hjælp af alginat er unikke cellepopulationer er samaflejrede på forskellige adresser. Bevis for deres electroaddressment ses på samspillet mellem afsender og modtager cellepopulation. Molekylets autoinducer-2 (AI-2) diffunderer fra afsenderen cellerne og optages af modtagerenhederne celler, hvilket resulterer i ekspression af dsRed røde fluorescerende protein (figur 2A). I figur 2B er rød fluorescens kun observeret ved elektroden, hvor modtagerne er rettet.

Amingrupperne stede på chitosan give det pH reaktionsevne kræves til elektroafsætning samt en overflade der er egnet til funktionalisering. Vianvendes disse unikke egenskaber ved elektrokemisk at konjugere biosensorer enzymet glucoseoxidase (GOx) til galvanisk chitosan film. Dette enzym derefter tilvejebringer evnen til påvisning af glucose gennem en enzymatisk reaktion (figur 4A) fremstilling hydrogenperoxid, som derefter kan elektrokemisk oxideret til frembringelse af en udgangsstrøm. På denne måde kan et kemisk signal transduceret til elektrisk. Figur 4B viser, at film, hvor GOx var elektrokemisk konjugeret frembringe en stærk anodisk signal i nærvær af glucose i modsætning til de film, der ikke indeholder GOx. Disse resultater indikerer GOx kan samles på en aflejret chitosan film og bibeholder katalytisk aktivitet. Endvidere Figur 4C viser en trinvis stigning i anodisk strøm produceret som reaktion på stigende glucosekoncentrationer. Standardkurven også til stede i Figur 4C viser, at trinnet-øges fortsatte i en næsten lineær FAShion afhængig af mængden af ​​glucose tilsat. Disse resultater viser, at enzymet bevarer også dens følsomhed over for stigende glucosekoncentrationer ved konjugation til chitosanfilm. Den nedre grænse for detektion blev ikke undersøgt her, som det tidligere er blevet karakteriseret for dette system i arbejdet Meyer et al. al.

Vi har også påvist kovalent immobilisering af et enzym af interesse, konstrueret til at indeholde en brugerdefineret penta-tyrosin tag, at chitosan med en enzymatisk kontrolleret måde. Specifikt er denne proces medieret af enzymet tyrosinase. Som afbildet i ordningen i figur 5A (øvre), et enzym, AI-2 Synthase indbefatter en penta-tyrosin tag. Tyrosinase virker på tyrosin tag, oxiderende resterne har phenolgrupper til O-quinoner, som derefter kovalent binder til chitosan har aminer. Tegn på chitosanfilm funktionalisering med AI-2 syntase af tyrosinase samling observeres i figur 5B (Figur 5A (lavere)). Rød fluorescens af modtageren celler (figur 5B) igen demonstrerer interaktion mellem adresser på grund af diffusion af AI-2 fra den ene til den anden, og yderligere viser, at enzymer immobiliseret til chitosanet bevarer aktivitet gang kovalent bundet.

Figur 1
Figur 1. Alginat elektroaflejring. (A) Mekanisme af alginat elektroafsætning: Som en elektrode anodisk er forspændt, vandelektrolyse forekommer ved overfladen, hvilket genererer en lokaliseret lavt pH. Calciumcarbonatpartikler reagere med overskudaf protoner, som frigiver calciumkationer partiklerne opløses. I nærvær af alginat polymerkæder, bliver de ioner chelateret i en "eggbox" netværk, der danner et tværbundet hydrogel ved elektroden. Efterhånden som afstanden fra elektroden forøges, har alginat en større tendens til at forblive i opløsning på grund af den reducerede tilstedeværelsen af ​​calciumioner. (B) En L-formet mønster ITO-elektrode blev anvendt til electrodeposit alginat. En PDMS brønd blev fastgjort til elektroden til at indeholde en grøn fluorescens-mærket alginat (1%) og CaCO 3 (0,5%) belægningsopløsning. Efter elektroafsætning i 2 min. ved en strømtæthed på 3A / m 2, blev electroaddressed alginat hydrogelen afbildes ved fluorescensmikroskopi.

Figur 2
Figur 2. Samaflejring af cellepopulationer. (A) reaktionsskema viser interaktionen mellem to E. coli-stammer: En population producerer autoinduceren-2 (AI-2), En signalmolekyle, og er betegnet "AI-2 afsender." Den anden befolkning, kaldet "AI-2 modtager," er en reporter af AI-2, efter modtagelsen af ​​AI-2 ved diffusion fra afsenderen, udtrykker det røde fluorescerende protein dsRed. (B) rød fluorescens billede af elektrodepar med AI-2 afsenderen population samaflejrede med alginat til venstre elektrode og AI-2 modtager population samaflejrede med alginat på højre elektrode. Forstørret billede viser dsRed udtryk for kun de AI-2 modtagere.

Figur 3
Figur 3. Chitosan elektroaflejring. (A) reaktionsskema viser pH-afhængige elektroafsætning af chitosan. Elektrolyse af vand ved en katodisk forspændt elektrode forårsager en lokal høj pH (vist ved en lokaliseret farveændring af en pH-indikatorfarvestof nær katoden i mikrografi), som stimulerer sol-gel-overgang af chitosan i denne region. (B) aminer til stede på chitosan gav it pH-reagerende egenskaber. Over en pH-værdi på 6,3 (pKa for chitosan) aminerne deprotoneret, letter en overgang fra den protonerede opløselig form til uopløselige gelform. (C) et mønstret guldelektrode blev anvendt til electrodeposit chitosan. Elektroden, der er forbundet katodisk strømforsyningen, blev nedsænket i en grøn fluorescens-mærket chitosan (0,8%) belægningsopløsning. Efter elektroafsætning i 2 min. ved en strømtæthed på 4 A / m 2 blev electroaddressed chitosanfilm afbildes ved fluorescensmikroskopi.

Figur 4
Figur 4. Elektrokemisk transduktion med en funktionaliseret chitosanfilm. (A) Skematisk viser opbygningen af ​​et tre-elektrodesystem. Funktionaliseret chitosan film tjener som arbejdselektroden, en platintråd som modelektrode og Ag / AgCI som referenceelektroden. Elektrokemisk transduktion af glucose fortsætter gennem the enzymatiske og elektrokemiske reaktioner vist, hvor produceret hydrogenperoxid kan være oxideret, og detekteres ved arbejdselektroden. (B) Cyclisk voltammagram (CV) på elektroden med en chitosan film indeholdende elektrokemisk konjugeret glucoseoxidase (GOx) udviser en stærk anodisk signal i en 5 mM glucose-opløsning. En film ikke indeholder GOx tjente som en kontrol og viste ingen signal i den samme opløsning. (C) En standardkurve mellem anodisk strøm og glucosekoncentrationen viser en næsten lineær relation (hver alikvot forøget glucosekoncentrationen ved 4 mM og øgede også den aktuelle amplitude i den indsatte grafen i en trinvis måde).

Figur 5
Figur 5. Protein funktionalisering med enzymatisk samling. (A, øvre) reaktionsskema viser tyrosin-tagged "AI-2 Synthase" er covalent bundet til en chitosan film af tyrosinase samling. De tyrosinrester bliver oxidteriseret til O-quinoner med tyrosinase virkning, og kan reagere med amingrupper på chitosan filmen under dannelse af en kovalent binding. (A, lavere) AI-2 Synthase genererer AI-2 fra et substrat (SAH); modtageren cellerne rapporterer den genererede AI-2 ved dsRed fluorescens ekspression. (B) fluorescensbilleder, der udviser en chitosan film på guld, funktionaliseret med blå-mærket AI-2-syntase. Hosliggende er AI-2 modtager celler samaflejrede med alginat på ITO. Efter tilsætning af den enzymatiske substrat til brønden og inkubationen udtrykke AI-2 modtager celler dsRed.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Power Supply Keithley SourceMeter 2400
Three electrode potentiostat CH Instruments Potentiostat/Galvanostat 600D
RE-5B Ag/AgCl Reference Electrode with Flexible Connector BASi MF-2052
Gold coated silicon wafer, 500um Si, 12nM Cr, 120nM Au, SiO2 for insulation custom fabricated
Indium Tin oxide coated glass slide, rectangular, 8-12 ohm resist Sigma-Aldrich 578274
Platinum sheet/foil (0.002 in) Surepure Chemetals 1897
Slim Line 2" Alligator Clips RadioShack 270-346
Multi-Stacking Banana Plug Patch Cord TSElectronic B-36-02 B-24-02
SYLGARD 184 silicone elastomer kit Dow Corning NC9020938 From Fischer
Fluorescecence stereomicroscope Olympus Corporation MVX10 MacroView
cellSens Standard Olympus Corporation version 1.3
Table 1. Electrodeposition and fluorescence visualization equipment.
Chitosan, medium molecular weight Sigma-Aldrich 448877
Hydrochloric Acid, ARISTAR. ACS, NF, FCC Grade VWR international BDH3030
Sodium Hydroxide, Solution. 10.00N VWR international VW3247
Alginic acid, sodium salt Sigma-Aldrich 180947
Multifex-MM Precipitated Calcium Carbonate, 70nm particles Speciality Minerals Inc. 100-3630-3
Table 2. Chitosan and alginate solution reagents.
Calcium chloride, dihydrate J.T. Baker 0504
Sodium Chloride, Certified ACS crystalline Fischer Scientific S271
Potassium Phosphate Monobasic, anhydrous Sigma-Aldrich P9791
Potassium Phosphate Dibasic, anhydrous Sigma- Aldrich P3786
Phosphate Buffered Saline Sigma- Aldrich P4417
Table 3. Other solution components and buffer reagents.
Glucose oxidase from aspergillus niger Sigma-Aldrich G2133
Tyrosinase from mushroom Sigma-Aldrich T3824
LB broth, Miller (granulated) Fischer Scientific BP9723-2
"AI2-Synthase" (HGLPT) Lab stock 16
W3110 wildtype cells Lab stock 30
MDAI2 + pCT6-lsrR-ampr + pET-dsRed-kanr cells Lab stock 30
FluoroSpheres: 1μm diameter, Ex/Em: 505/515 Invitrogen F8765
5-(and-6)-carboxyrhodamine 6G succinimidyl ester, Ex/Em: 525/560 Invitrogen C-6157
DyLight antibody labeling kit, 405 Thermo Fisher Scientific, Inc. PI-53020
Table 4. Enzymes, cells, and other functionalization reagents.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Luo, X. In situ generation of pH gradients in microfluidic devices for biofabrication of freestanding, semi-permeable chitosan membranes. Lab Chip. 10, 59-65 (2010).
  2. Javvaji, V., Baradwaj, A. G., Payne, G. F., Raghavan, S. R. Light-Activated Ionic Gelation of Common Biopolymers. Langmuir. 27, 12591-12596 (2011).
  3. Dowling, M. B., Javvaji, V., Payne, G. F., Raghavan, S. R. Vesicle capture on patterned surfaces coated with amphiphilic biopolymers. Soft Matter. 7, 1219-1226 (2011).
  4. Liu, Y. Biofabrication to build the biology-device interface. Biofabrication. 2, 022002-022002 (2010).
  5. Yang, X., Shi, X. -W., Liu, Y., Bentley, W. E., Payne, G. F. Orthogonal Enzymatic Reactions for the Assembly of Proteins at Electrode Addresses. Langmuir. 25, 338-344 (2008).
  6. Cheng, Y. In situ quantitative visualization and characterization of chitosan electrodeposition with paired sidewall electrodes. Soft Matter. 6, 3177-3183 (2010).
  7. Cheng, Y. Mechanism of anodic electrodeposition of calcium alginate. Soft Matter. 7, 5677-5684 (2011).
  8. Wu, L. -Q. Spatially Selective Deposition of a Reactive Polysaccharide Layer onto a Patterned Template. Langmuir. 19, 519-524 (2003).
  9. Wu, H. C. Biofabrication of antibodies and antigens via IgG-binding domain engineered with activatable pentatyrosine pro-tag. Biotechnol. bioeng. , 103-231 (2009).
  10. Shi, X. -W. Reagentless Protein Assembly Triggered by Localized Electrical Signals. Adv. Mater. 21, 984-988 (2009).
  11. Shi, X. -W. Electroaddressing of Cell Populations by Co-Deposition with Calcium Alginate Hydrogels. Adv. Funct. Mater. 19, 2074-2080 (2009).
  12. de Vos, P., Faas, M. M., Strand, B., Calafiore, R. Alginate based microcapsules for immunoisolation of islet cells. Biomaterials. 27, 5603-5617 (2006).
  13. Jayakumar, R., Prabaharan, M., Sudheesh Kumar, P. T., Nair, S. V., Tamura, H. Novel chitin and chitosan nanofibers and their biomedical applications. Biotechnol. Adv. 29, 322-337 (2011).
  14. Cheng, Y. Electroaddressing Functionalized Polysaccharides as Model Biofilms for Interrogating Cell Signaling. Adv. Funct. Mater. 22, 519-528 (2012).
  15. Meyer, W. L. Chitosan-coated wires: conferring electrical properties to chitosan fibers. Biomacromolecules. 10, 858-864 (2009).
  16. Fernandes, R., Roy, V., Wu, H. -C., Bentley, W. E. Engineered biological nanofactories trigger quorum sensing response in targeted bacteria. Nat. Nanotechnol. 5, 213-217 (2010).
  17. Yi, H. Biofabrication with chitosan. Biomacromolecules. 6, 2881-2894 (2005).
  18. Liba Benjamin, D., Aranha India, V., Kim, E., Payne Gregory, F. ACS Symposium Series Ch. 4. Renewable and Sustainable Polymers. 1063, American Chemical Society. 61-71 (2011).
  19. Koev, S. T. Chitosan: an integrative biomaterial for lab-on-a-chip devices. Lab Chip. 10, 3026-3042 (2010).
  20. Luo, X. Programmable assembly of a metabolic pathway enzyme in a pre-packaged reusable bioMEMS device. Lab Chip. 8, 420-430 (2008).
  21. Spinks, G. M. A novel "dual mode" actuation in chitosan/polyaniline/carbon nanotube fibers. Sensor Actuat B-Chem. 121, 616-621 (2007).
  22. Yi, H. Patterned assembly of genetically modified viral nanotemplates via nucleic acid hybridization. Nano letters. 5, 1931-1936 (2005).
  23. Kim, E. Redox-cycling and H2O2 generation by fabricated catecholic films in the absence of enzymes. Biomacromolecules. 12, 880-888 (2011).
  24. Xie, Y., Xu, B., Gao, Y. Controlled transdermal delivery of model drug compounds by MEMS microneedle array. Nanomedicine. 1, 184-190 (2005).
  25. Odaci, D., Timur, S., Telefoncu, A. A microbial biosensor based on bacterial cells immobilized on chitosan matrix. Bioelectrochemistry. 75, 77-82 (2009).
  26. Selimoglu, S. M., Elibol, M. Alginate as an immobilization material for MAb production via encapsulated hybridoma cells. Crit Rev Biotechnol. 30, 145-159 (2010).
  27. Braschler, T., Johann, R., Heule, M., Metref, L., Renaud, P. Gentle cell trapping and release on a microfluidic chip by in situ alginate hydrogel formation. Lab Chip. 5, 553-559 (2005).
  28. Yang, X. In-Film Bioprocessing and Immunoanalysis with Electroaddressable Stimuli-Responsive Polysaccharides. Adv. Funct. Mater. 20, 1645-1652 (2010).
  29. Cheong, M., Zhitomirsky, I. Electrodeposition of alginic acid and composite films. Colloid Surface A. 328, 73-78 (2008).
  30. Tsao, C. Y., Hooshangi, S., Wu, H. C., Valdes, J. J., Bentley, W. E. Autonomous induction of recombinant proteins by minimally rewiring native quorum sensing regulon of E. coli. Metab. Eng. 12, 291-297 (2010).
Bridging Bio-elektroniske grænseflade med Biofabrication
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Gordonov, T., Liba, B., Terrell, J.… More

Gordonov, T., Liba, B., Terrell, J. L., Cheng, Y., Luo, X., Payne, G. F., Bentley, W. E. Bridging the Bio-Electronic Interface with Biofabrication. J. Vis. Exp. (64), e4231, doi:10.3791/4231 (2012).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter