Summary
原位补丁钳用于神经元的电生理特性的完整电路。在果蝇的遗传模型膜片钳是困难的，因为中枢神经系统，周围环绕着一个强大的护套。本文介绍的步骤，取出护套和清洁随后的膜片钳记录神经元。
Abstract
短的世代时间和轻便的基因技术使果蝇优良的遗传模型的基础神经科学的研究。离子通道是神经元兴奋性的基础上，所有的行为，因为他们调解。电压门控离子通道的克隆果蝇的电压门控钾通道振动筛1,2。对理解离子通道和细胞膜的兴奋性神经系统功能的作用，它是有用的，结合强大的遗传工具，可以在果蝇在原位膜片钳记录。多年来，这样的录音已经阻碍了果蝇的中枢神经系统的小尺寸。此外，强大的鞘的神经胶质细胞和胶原蛋白构成障碍补丁吸液管进入中央神经元。本套去除任何在成年果蝇中枢神经系统的神经元膜片钳记录的一个必要的先决条件。近年来科学家们一直在能够进行原位膜片钳记录神经元在成人大脑3,4和腹神经索的胚胎，幼虫7,8,9,10，5,6和成年果蝇 11,12,13,14。一个稳定的千兆密封是一个很好的补丁的主要的先决条件，并取决于与细胞膜，以避免漏电流的补丁移液器的清洁接触。因此，从成年果蝇神经元全细胞原位膜片钳记录，必须彻底清洗。神经节鞘在第一步骤中，将被处理酶，并机械地除去，使靶细胞可访问。在第二步骤中，细胞膜具有进行研磨，使得没有神经胶质细胞，胶原蛋白或其他材料的层，可能会扰乱千兆密封件形成。本文介绍了如何编写一个确定的中央神经元在果蝇的腹神经索，飞行运动神经元的5（MN5 15），体细胞整个C埃尔膜片钳记录。识别和知名度的神经元是通过有针对性的表达GFP MN5。我们不打算解释膜片钳技术。
Protocol
下面的描述是不特定的一个运动神经元。它可以用于与任何神经元。在这个例子中，我们使用的飞行运动神经元（MN5）支配抑制剂肌肉dorsolongitudinal翼（DLM）的的2 dorsalmost纤维。为了识别和可视化MN5我们使用UAS/GAL4系统表达GFP的飞行运动神经元（和其他一些神经元）。
1。解剖成年果蝇访问背部分的腹神经索（VNC）
- 解剖成年果蝇背侧沿其背中线在Sylgard的涂层的陪替氏培养皿（直径35毫米）中描述Ryglewski和杜赫（2009 13）。剥离的电影是在网上通过朱庇特（Boerner和Godenschwege 16。下面的夹层是一个简短的描述。
- 成年家蝇麻醉约1分钟，在冰浴冷却。这可以通过以下来实现一个空的苍蝇预冷小瓶（没有食物）在冰上飞已经冷瓶。翅膀和腿中除去具有对剪刀。
- 然后苍蝇钉扎背侧在SYLGARD涂覆的陪替氏培养皿（我们用一个35毫米的陪替氏培养皿用Sylgard填充到轮辋的盖子; 图1A，B）与一个塑料环（内径为9毫米，1.3毫米厚的）粘的Sylgard的凡士林。
- 使用一个35毫米陪替氏培养皿的盖子便于访问的VNC与补丁移液管下的可视化与水浸渍透镜。这有助于较浅不触摸的壁的盘的情况下引入吸移管。
- 塑料环可以由一个薄的（我们使用1.3毫米的厚度）的塑料片材上钻一个孔进入。我们使用一个导线切刀定义的环的外周边，以便它适合的菜。
- 淹没飞生理盐水（ 图1C，以mm为单位的生理盐水组成：氯化钠128，HEPES 5 2 4氯化镁，氯化钾， 氯化钙 1.8，蔗糖〜35 DEPEnding该溶液的重量克分子渗透压浓度;用1M NaOH将pH调节至7.25，重量克分子渗透压浓度被调整到290毫渗用蔗糖）。
- 动物解剖沿背中线，大背纵向飞行肌肉的横向延伸和牵制暴露肠，食道和VNC下。除去后的肠道和食管的VNC露出（ 图1D）。
- 任选地，苍蝇可以断头在此步骤中（ 图1E）。除去头，使酶和补丁移液器的访问更加方便，而且不会受到干扰时MN5树突清洗胞体（枝胞体后， 图2B，C）。然而，头部也被原封不动的实验设计（ 如研究降胸运动神经元的输入）如果需要的话。在这种情况下，可以引入吸移管从后或横向（横向， 图2A）。
- 对于快速在实验过程中的记录室的体积的生理盐水交换最小化周围的解剖动物和胶合它通过放置一个塑料环（内径为9毫米）的菜凡士林（ 图1A，B，录音室的体积为〜200微升） 。
- 准备安装在直立固定台荧光显微镜（我们使用的是蔡司Axioskop 2 FS加，蔡司，德国）和高NA（> 0.75），长工作距离（> 2毫米），40倍水浸泡客观看待。灌流系统（生理盐水，生理盐水，满分），接地线和酶的吸移管被插入到记录室（ 图1F - J，L）。
2。可视化MN5（见图2和图3），头关闭
- 安装在培养皿上落射荧光显微镜直立固定的阶段。
- 菜定位它的苍蝇，从而使前部朝向电极夹持器的那一侧的安装（ 图1）。
- 使用高倍率（40倍或更高），高NA水浸泡镜片（NA 0.75或更高版本）和一个GFP过滤器的照明VNC。为了获得良好的可视化的细胞在清洁过程中，我们使用40倍的水浸渍与NA或0.8（奥林巴斯LUMPlanFl 40xW），0.75（蔡司W N-Achroplan 40x/0.8 M27）或NA的透镜。为了获得良好的访问与补丁移液器的工作距离应为2毫米或更大。
- 双方MN5的位于在的的mesothoracic neuromere的背表面之间的中线附近的神经节-并可能部分地覆盖-突出气管内（ 图2和图3）上。 MN5他们的树突出现弥漫绿色区域。胞体清洗后变得更明显。然而，它们的树突不会出现尖锐的，模糊的，由于他们所覆盖的组织（ 图2A，B）。
- 在我们的设置中，我们使用了HBO 100荧光光源，我们不能国防部IFY的光输出强度。我们使用中性密度过滤器，以避免过分暴露的组织太多的荧光灯，尤其是蓝色的光。这可能会造成光损伤，并最终杀死细胞。我们使用中性密度为0.8。也没有发生脱色，应该发生过程中的清洗程序。如果漂白时，最有可能的光输出是太强大了。的细胞照片损坏。
- 如果使用LED照明的强度设置将必须确定由实验者。漂白是一个的光损伤的迹象，并必须加以避免。
3。可视化的替代方法MN5
对于我们的应用程序，它是重要的是有标记的细胞，例如，与目标的GFP表达。或者，DiI荧光，亲脂性染料，可以使用以逆行标记该神经元。在这种情况下，染料晶体使用昆虫minutien引脚插入飞行肌，和使用U将伤口闭合V固化胶水。
- 作出的DiI荧光原液由几个DiI荧光晶体（无特定量）溶解于100μl的70％乙醇。这个解决方案可以在-20℃保存，直到用完。反复冻融，是没有问题的。
- 5微升的溶液，然后用移液管到未处理的盖玻片。等待，直到乙醇蒸发。只需要几分钟。
- 放置一只苍蝇在预先冷却小瓶（贴入冰）和一个短的时间内（低于1分钟），在冰上冷却。解剖体视显微镜下，将冷麻醉苍蝇，冷却板。
- 中心的飞行，保持在该位置，以便它可以推到一边时，容易被戳与minutien引脚。
- 用两个镊子，一到举行的minutien的针，其他的人持有飞。
- ，使用粗钳子持有昆虫minutien引脚和划伤部分的DiI荧光从盖滑移，因此，有一个DiI荧光晶体的前端的minutien引脚（使用同样的盖玻片和相同点上，盖滑，每次可以得到更多的染料引脚上的每一个过程完成的时间）。该引脚不应该太指出，它可能更容易弯曲，然后是很难用。
- 然后到果蝇的背胸部中间用DiI minutien针的尖端刺穿一个洞。的两个dorsalmost肌纤维肌肉（DLM，肌肉纤维5和图6的每一侧）的dorsolongitudinal飞行通过MN5的支配。因此，放置在胸廓中部染料晶体保证这两个MN5的将被标记，因为这两个肌肉纤维6会受到伤害的DLM并得到一些染料。
- 这种染料必须直接放置在下面的角质层。如果染料插入过深，苍蝇可能被刺伤或其他神经元（ 例如 MN1-4）可以被标记为。
- 这是反复进行，直到插入的胸部足够的染料（这是一个问题的做法和经验）
- DII是不是水solub乐，因此它不会溶解在细胞质的肌肉和将要“酿”下的角质层。
- ，然后再minutien引脚浸入到液滴的UV固化胶（我们把一小滴胶水在称量船）。
- 的胶水，现在的前端的minutien引脚用于关闭伤口被插入其中的染料的结晶。
- 一些胶水的应用（只有一点点，关闭伤口，而不是整个胸部）后，一个UV枪是用来治疗的胶水。我们用10秒的时间间隔的紫外线照射。
- 处理过的苍蝇在飞瓶新鲜的食品。请确保胶点果蝇的胸部不会粘在墙上的陷阱飞的小瓶。
- 染料需要几个小时到达目标神经元。它沿该膜，而不是在细胞质中，因为它是脂溶性。我们对待动物的下午，让他们过晚。
- 膜片钳实验进行了以下。相比使用基因表达GFP的神经元将不那么明显。
4。酶活移液器]是用于清洁的制备
重要的是要确保食盐水通过源源不断的录音室。具有浴体积的上升和下降具有要避免的，因为它会导致振动和偏移在实验过程中的潜在变化。灌注和抽吸，必须进行相应的设置。这使得溶液的交换更容易，这反过来又是很重要的蛋白酶迅速洗出前的实验药理剂，在实验过程中，迅速地交换。
- 确保记录室（流量在每分钟约2毫升）的灌注。流速可以进行调节，也可以通过使用一个旋塞或通过使用特定的直径管（的直径越大，流速越高）。具有腔室的体积尽可能小，以保证快速交换的解决方案，在日Ë室。这保证快速除去从记录室的蛋白酶和阻滞剂。
- 该室的体积取决于如何生理盐水出灌注系统（ 图1）被插入到记录室（水浸物镜时被降低到浴）。
- 确保生理盐水定位的方式，在录音室的滴度不不断上升和下降（吸气，抬头，吸气，上升），但保持不变（稳定吸入）。我们确定灌注不变，从未间断声潺潺，是由不断吸盐水浴的持续稳定。
- 生理盐水和退房我们使用皮下注射针的弯曲，并连接到窄油管并放置在靠近记录室，使用橡皮泥（ 图1F）。
- 拉了一个补丁吸管和目视控制下的一个小头打破。用细洁钳。在可视化的吸管未定义r为40倍的水浸没透镜的移液管尖直径应该大约为细胞的胞体直径的40％和70％之间。非常大的提示（约泡孔直径或更大），也可以被使用，但是，剥去细胞体的可能性增加的移液管的毛细作用力。是非常小（小于10％的体直径）的吸移管，它很容易堵塞，从而导致在具有在清洁过程中使用一个或更多的新鲜的移液管（）。
- 填充的吸移管，用2％的蛋白酶，在PBS缓冲液中或生理盐水而不堵塞。
- 将酶吸管到电极支架。所施加的压力，以确保适当的控制，保持器需要被紧密地密封。
- 附加管小插座上的吸液管保持器，将它固定在揪着管件的自由端的方式，不会影响的吸移管插入吸液管保持器。在显微镜下检查是否有运动。
- 插入一个塑料p ipette尖端（使用自动移液器的那种，我们使用的蓝色1000微升的，但是这是一个优先事项。其他尺寸可以用作）到管件的自由端或注射器用旋塞是能够适用于正，负压力的酶/补丁移液器。通过吹入的移液管尖（用它作为一个口形件）或向下推注射器施加正压。由吸入（口使用口片）或通过拔出注射器施加负压。
- 的正，负压力的应用程序的目的是松开并取下下调查周围的细胞的细胞和碎片。正压力会弹出酶清洗移液管吹的中枢神经系统表面的污物。负压力是用来关闭VNC（如真空吸尘器）吸碎片。
5。清洁GFP标记MN5的（ 图3和视频）
内容“的读者请注意：前和清洗后的图像MN5难以分辨图3中，这是你在现实生活中，这将需要一些培训，学习分辨的细微差别清洗和非清洗神经元。请注意更好的运动图像中可以看出，这些细微的差别，因此，电影比静态图像（ 图3）提供了一个更好的印象。- 可视化的酶40倍的水浸泡镜片明亮的光线下充满吸管（ 图3B，白色箭头）。
- 专注于吸头。如果被堵塞，试图让应用正压或负压的污垢。如果污垢不出来，准备一种新的酶充满吸管。
- 切换到荧光灯（ 图3A）。
- 降低酶的移液管，并重新聚焦，直到电池身上可以看到。
- 当酶吸移管是接近细胞体，切换灌注。
- 应用正压向细胞体在短时间让这一切都是阻碍进入细胞的将放宽。这有许多工作要做，直到周围组织的细胞体出现松动。
- 移动的酶移液器背部，抓松遗留的碎片，可能是从神经节的鞘周围的VNC。它可能已被删除已经由解剖显微镜上安装前的准备（这是不总是如此）。
- 具有交替的正，负压力的应用，使用酶类似细胞体周围的真空吸尘器和真空吸管。这是没有必要完全松开全细胞体。清洁胞体的前部，将活动（或取决于从什么副作用的吸移管的后部或侧部接近苏摩）。
- 这种清洗过程，直到膜看起来是免费的碎片。
- 该membra时，有没有“影子”或弥漫性细胞之间的对比和周围组织时浏览荧光灯只有东北是干净的。这可以看出，最好具有高强度的蓝光。因此，增加了片刻的光强度（除去中性密度滤镜实现这一点）。需要注意的是所提供的一个普通的HBO 100水银灯泡的广泛的蓝色光照射可引起大约一分钟内的光损伤。这将导致褪色的细胞死亡的GFP信号。
- 切换到明亮的光线和去除细胞和碎片，可能无法看到的荧光。需要注意的是可视化的气管和清洁状态可以受益于在明亮的光线和荧光灯之间切换。
- 当清洁过程完成后，细胞体显得干净，灌注系统切换上（不要太多，如果清洗过程需要更长的时间超过3到5分钟，并继续稳步灌注清洗）和灯不亮。
- 冲洗细胞FOR〜15至20分钟与生理盐水或溶液，将被用于下面的应用程序。应该通过录音室不小于40毫升，以确保蛋白酶的冲了出去。否则稳定的膜片钳记录时，会导致突发性细胞死亡蛋白酶细胞表面上的残余。
6。电
- 常规原位膜片钳全细胞电压钳和电流钳模式中进行使用Axopatch 200B中放大器（Molecular Devices公司，美国）;使用Digidata 1320（Molecular Devices公司，美国），信号被数字化和分析与膜片钳pClamp 10.2软件。
- 被拉到补丁移液器从硼硅酸盐玻璃毛细管与垂直移液管拉出器（成茂，PC-10）。
- 移液器吸头的电阻值介于5.8和6.2MΩ（电流钳和钾电流的记录），在2.8和3.5MΩ（钙电流的记录）。提示电阻取决于内和细胞外的解决方案（详细内容见13，14）。
7。代表性的成果
清洁过程后两个MN5的原位全细胞膜片钳（ 图3） 在准备。以下部分显示代表的钳位电压和电流钳使用上述清洁程序后，记录从MN5 SOMA的痕迹。 MN5表达了不同的电压门控离子通道（13,14）。我们可以看到一个例子，电压门控钙通道电流（ 图4），电压门控钾电流（ 图5）和动作电位的痕迹（ 图6）。电压门控钙和钾电流诱发的类似的电压的协议，但已被使用的不同的解决方案，以允许仅离子通道在调查下通过电流（详细内容见13,14）。所有其他的主要电压门控离子通道的annels已被封锁（电压门控钠离子通道100纳米tetrototoxin - 用移液管直接进入浴缸，灌注止步不前两分钟 - 钙通道500μMcadmiumchloride的，钾通道与2毫米4 - 氨基吡啶（4-AP）和30毫tetraethylammoniumchloride 4-AP细胞外和0.5毫米，20毫米tetraethylammoniumbromide和144毫米cesiumchloride的细胞通过细胞内的补丁吸管补丁解决方案（有关详细信息，请参阅13,14）。动作电位的痕迹诱发的电流注入的MN5 SOMA（ 图6）在不使用任何离子通道阻滞剂12。
图1。清洁的设置。苍蝇被牵制在Sylgard的涂盖35毫米的培养皿中，我们瓦特粘一个塑料环（内径9毫米，1.3毫米厚）第i个凡士林（A，B）。淹没在盐水飞（C），它是沿背中线打开。胃肠道及食道中删除，暴露腹神经索（D）。对于更好地胸neuromere无障碍的头被删除（E）。一个直立的落射荧光显微镜上安装后的准备，灌注系统（F，G，生理盐水，生理盐水出的，在左边的白色箭头），以及接地线被带进位置（F，G，白色箭头在右边）。水浸物镜（40倍，NA 0.8），已降低到浴中（H）后，清洗吸移管的酶填充带入位置。为了清楚起见，我们已经表明，之前的目标已经降低（F，G，在右边的白色箭头）。酶移液器举行的1-HL-U电极夹持器（J）进入录音室时的角度是很重要的，因为移液管绝对不能碰的目标和塑料环。这个角度，从安装到设置不同。在这里它是约30°（见图示箭头J，K中）。其保持器被连接到探头中的吸移管的布置的示出在（L）。将探头连接到一个电动的微操作机器人。 点击此处查看大图 。
图2。 MN5在腹神经索。MN5可以很容易地确定其位置在果蝇的腹神经索（VNC），当绿色荧光蛋白基因表达的运动神经元特异性GAL4驱动器（A）。虚线矩形描绘胸neuromere。要了解的大小是如何相互关联的，我们展示了清洁膜片微电极接近左MN5的从左侧飞行的dorsolongitudinal肌。为了更好的可视化，补丁吸管里充满了红色染料（四甲基葡聚糖的，A）。该contralaterally突出MN5的位于上的背表面的中线的每一侧上的VNC的的mesothoracic neuromere（投影视图B中的共焦图像堆栈）。同侧突出MN1-4位于横向和前方有关的MN5的（箭头B中）。两者MN5的虚线圆示出的运动神经元中的神经纤维包括MN5的（B）的飞行的树突。增强绿色荧光蛋白（B）中的标签与针对GFP的抗体通过免疫组织化学染色。 MN5的形态详细信息可见与不可见的示踪神经生物素和随后的共聚焦图像采集（C）的神经元的细胞内（电泳）填充。染色被耦合到一个荧光团与链霉抗生物素蛋白可见。比例尺为30μm。
图3。 MN5的前和清洗后的可视化MN5由的使用UAS/GAL4的GFP表达实现（A，C，见标签）。 MN5（A，B）和（C，D）的清洁过程。表示前的每幅图片的左手侧，右手侧表示后路。带着一颗破碎的尖端蛋白酶填补补丁的移液管清洗神经元记录。酶移液器只依稀可见（A，B，看标签）。插入了细胞的酶吸管接近底部MN5扩大。 MN5可以看出，在明亮的灯光前的清洗程序（B）。气管被删除，如果他们正在调查覆盖细胞。清洁过程后，细胞和周围组织之间的对比度是更脆（C面，底面MN5）的，和，现在可以看到在明亮的光（D）中的单元格。吸头可以看得更清楚时，使用明亮的光线。扩大示出的虚线正方形与MN5的细胞体边框更好的识别用虚线包围的区域中。往往在明亮光线下的可视化有助于判断清洁。
图4。钙电流在MN5。记录全细胞钙电流记录MN5。至少两种不同的钙电流被示出，一个低电压激活瞬态钙和持续的高电压钙电流。从保持电位-90 mV的电流被诱发。从-90 mV的电压为+20 mV的应用。大多数其他的离子通道阻断剂用于阻止。文物被省略了清晰度（用于表征MN5钙电流Ryglewski 等，2012年）。
图5。钾电流的MN5。记录的全细胞钾电流的记录MN5。电流包括钙激活的钾电流的无钙通道阻滞剂。从控股诱发电流分别为潜力-90毫伏的总钾电流（A）或从保持电位为-20 mV的，以灭活短暂的钾电流，只显示了持续的钾电流（B）的。从-90 mV的电压至+20 mV，以10 mV为单位应用。离线减法钾电流如从-90毫伏（A）和-20毫伏揭示的纯瞬态钾电流（C）（B）的保持电位诱发。电压门控钠离子通道被堵死。文物被省略为清楚起见，（看到2009年Ryglewski和杜赫）的MN5电压和钙钾电流的特性。
图6。射击模式的MN5展示。发射模式引起的示例记录在MN5体电流注入（0.4 NA，0.5 NA，灰色，黑色），持续时间为200毫秒。静息膜电位为-59 mV的。无离子通道阻断剂使用。 （电流钳分析的MN5射击为模式杜赫等，2008）。
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Discussion
当可视化的细胞绿色荧光蛋白的荧光蛋白，如，重要的是不超过制剂暴露太多的光。这可能会导致光损伤。我们使用100W HBO短弧汞灯泡，照明，我们还可以使用中性密度（ND）的0.8（的色度ND过滤器0.3和0.5）。为了能够判断清洗良好的能见度的质量是至关重要的。因此，ND过滤器可以去除约20秒，多次短时间。
应用了一些积极的压力时，细胞体“襟翼”一点。这有助于判断质量的清洁。在腹神经索对比度非常低，和运动可以是非常有帮助的可视化细胞。正被使用的电极保持器的清洁程序（及也膜片钳）需要是紧密密封;否则控制压力应用将是不可能的。松动的压力会扰乱成功切除的组织和debRIS和防止千兆形成密封
应进行原位膜片钳记录的情况下，清洗后的细胞，要知道，那里不仅是的鞘包绕腹神经索作为一个整体（这需要删除任何膜片钳记录的任何中央神经元的成蝇），但细胞本身可以由一个护套包围，以及。 MN5的，例如，可以看到只有短暂的高强度照明的非蜂窝护套包围。此外，细胞可以位于下方的气管。不能被访问的情况下，细胞，气管必须被拉到一边如果不是在清洁过程（已拉到一边后）用吸管扯掉。整个清洗过程需要做太多不拉动组织。此过程将需要培训。更好的清洗，立即千兆密封件（后1秒内，接触单元和rel便越高的频率缓解正压）。
根据不同的清洗方案和突破，在下列情况下是可能的：第一，如果没有打扫好足够的细胞，一个千兆密封是不可能的，必须终止实验。第二，在某些情况下，清洗千兆密封形成足够好了，但仍然胞体周围鞘薄，几乎不可见的残余。这将导致膜破裂，并导致各种幅度的漏电流。一个不太严重后果的不足，细胞清洗鞘原因，一些残余在访问阻力增加。根据实验设计了不同的质量标准，适用的补丁。细胞的膜电位监测动作电位在电流钳模式必须是健康的（-55 mV的超极化在MN5的情况下，），但接电阻是不是一个重要的问题。然而，当通过电流注入访问重新唤起动作电位sistance成为一个问题。为了唤起起源录制现场的泄漏应该很小（MN5输入电阻必须大于80MΩ的情况下），并接电阻应不大于15MΩ的的大振幅钾电流。有关的空间钳位，是需要在电压钳位录音的小振幅的树突状钙电流这源于在相当一些距离从苏摩没有泄漏可以被引入（对MN5的输入电阻必须是高于120MΩ）和接入阻抗可以不是高于12 MΩ。在大多数的录音中，我们访问8和10MΩ（从表盘上读出放大器串联电阻和全细胞电容补偿后的Axopatch 200B中）之间的电阻测量钙电流。每种细胞类型的要被记录，这样的质量标准，必须单独确定。
使用这里描述的清洁过程中，我们可以容纳的记录稳定的近似tely90分钟。我们不遵守可观的运行（特别是测试CAV2和CAV3钙电流和振荡器，泥质和延迟整流钾电流）。然而，我们并没有尝试不再持有的补丁，因此不能说明是否将有可能不再记录。
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Disclosures
没有利益冲突的声明。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Protease type XIV | Sigma Aldrich USA | P5147 | |
| Microfil flexible injection needle | World Precision Instruments USA | MF28G-5 | |
| Borosilicate Glass Capillaries, o.d. 1.5 mm, i.d. 1.0 mm, no filament | World Precision Instruments USA | PG52151-4 | |
| DiI | Invitrogen USA | D3899 | |
| Sylgard Elastomer Kit 184 (Dow Corning) | www.ellsworth.com | 184 SIL ELAST KIT | |
| ND filter set (unmounted) | Chroma Technology Corp. | 22000b series | |
| Electrode holder 1-HL-U | Molecular Devices | 1-HL-U |
References
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