Summary
В последнее время разработаны методы визуализации использованием ближней инфракрасной флуоресценции (NIRF) может помочь выяснение роли лимфатической системы играет в раковых метастаз, иммунный ответ, заживления ран и других лимфатических-ассоциированных заболеваний.
Protocol
Все исследования на животных были проведены в соответствии со стандартами Техасского университета Научного центра здоровья (Хьюстон, Техас), кафедры сравнительной медицины и Центром молекулярной визуализации после рассмотрения и утверждения протокола их соответствующими Институциональные уходу и использованию животных комитета (IACUC) или Animal Welfare комитета (AWC).
1. Подготовка животных 24 грн До изображений
Шаги необходимо сделать (при необходимости) за день до лимфатической изображений происходит.
- Место животных в индукционной коробки и степенный изофлураном.
- Когда животное находится в состоянии глубокого наркоза (мониторинг с ног щепотку маневра), место седативные животных на пеленки / пух площадки и положение носа в носовой конус связан с изофлуран газа.
- Клип все волосы / мех (если таковые имеются) вокруг области, чтобы быть отображена.
- Нанесите средство для удаления волос агент (НАИР) в обрезанную область и оставьте Oп кожи на срок до 3 мин.
- Аккуратно протрите все для удаления волос средство с теплой, влажной марлей или бумажным полотенцем.
- Аккуратно промойте кожу теплой водой и аккуратно высушите область марлей или бумажным полотенцем.
- Разрешить животных восстановиться на грелку или под тепловой лампой, и вернуться в свою клетку.
2. День изображений
- Развести средство визуализации стерильной водой, затем разбавить использованием стерильного, нормальные (0,85%) физиологическим раствором до достижения 645 мкм (5 мкг/10 мкл) для МКГ или 200 мкм (6,8 мкг/10 мкл) в течение Абд-IRDye800. Хранить в темном решения Условия и использовать в течение 6 часов после разведения.
- Место животных в индукционной коробки и степенный изофлураном.
- Когда животное находится в состоянии глубокого наркоза (мониторинг с ног щепотку маневра), место седативные животное на бок на пеленки / пух площадки и положение носа в носовой конус связан с газом изофлурана.
- Выключите свет (так номертемный). При необходимости, небольшим светом галогенных стол может быть использован для небольшого количества света, чтобы увидеть инъекций.
- Использование инсулинового шприца с 31-го калибра иглы, вводят ID 5 мкл до 50 мкл МКГ или Абд-IRDye800 в спинной части каждой задней лапе и / или на левой и правой стороне основания хвоста, в зависимости от интересующей области (см. Обсуждение). Каждый введенной дозы может составлять от 0,083 до 1,25 мг / кг (МКГ) или 0,113 до 1,7 мг / кг (Абд-IRDye800). Инъекции объемы будут меняться в зависимости от штамма животных и месте инъекции. Для бестимусных мышей, объем впрыска может быть 5 мкл (лапы) или 10 мкл (основания хвоста). Если животное не находится под системой визуализации для инъекций (ы), поместить животное в системе формирования изображения сразу после инъекций (ы).
- Если нет красителя наблюдается в лимфатические сосуды, шаг 2,5 будет необходимо повторять по мере необходимости на одно животное протокол.
- После лимфатические видны, накройте место инъекции с черной изоляционной лентой или черные годовыхпер.
- Приобретать лимфатической изображений на срок до 1 часа использованием V + + программного обеспечения и небольших животных, NIRF системы визуализации. (Животные седативные изофлураном и дыхание контролируется в то время как изображения приобретают.) Хотя небольшое животное, NIRF тепловизоры имеются в продаже, мы используем индивидуальный, мелких животных NIRF система визуализации, состоящая из 785-нм лазерный диод (1005-9мм-78503 , Intense, North Brunswick, NJ), оснащенный асферической линзой (C24TME-B, Thorlabs, Ньютон, штат Нью-Джерси), диффузора (ED1-C20, Thorlabs) и фильтр (LD01-785/10-25, Semrock, Rochester, NY ) для создания однородного поля возбуждения, который освещает животных при скорости инцидент влиянием менее 1,4 мВт на квадратный сантиметр 10. Электронного умножения Устройство с зарядовой связью (EMCCD, PhotonMax512, Princeton Instruments, Трентон, штат Нью-Джерси) камера системы с двумя 830-нм фильтра (AND11333, Andover корпорации, Salem, NH) и 28-мм объективом Nikkor (1992, Nikon, Мелвилл, штат Нью-Йорк) используется для захвата изображений с лимфатической интеграции ТимомES 200 мс для динамической визуализации и 800 мс для статических изображений 5. См. рисунок 1 для настройки системы, таблицы для получения дополнительной информации по каждому компоненту, и обсуждение в течение краткого обсуждения ключевых свойств изображений.
- Разрешить животных восстановиться на грелку или под тепловой лампой и вернуться в свою клетку, или усыпить.
- Анализ изображений с помощью MATLAB ImageJ или программного обеспечения. См. Рисунок 6.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Пример NIRF лимфатической изображений в мышах
Когда МКГ или Абд-IRDye800 вводится ID в основании хвоста нормальной мыши, лимфатических сосудов между инъекции в основание хвоста и паховых лимфатических узлов (ЛУ) должны быть немедленно визуализируются. Вскоре после инъекции (нескольких секунд до нескольких минут), лимфатических сосудов между паховой LN и подмышечных LN должны быть визуализированы как показано на рисунке 2. Поскольку лимфатические у мышей отличаться от животного к животному, как в людях, изменения в архитектуре между животными может рассматриваться как показано на рисунке 3. Когда МКГ или NIRF-Абд вводится ID на спинной части задней лапы нормальные мыши, два лимфатические сосуды могут быть визуализированы слива до подколенной LN, как показано на рисунке 4. В некоторых случаях трудно отличить обоих судов из-за их близости друг с другом.
Время от времени, визуализация лимфатических задерживается, чаще всего из-за введения их вводят подкожно (SC) вместо ID. Когда SC инъекций, лимфатический транспорт не может быть сразу же визуализируются как показано на рисунке 5 (а) из-за дополнительного времени, необходимого для красителя для достижения и быть рассмотрен лимфатических капилляров в коже. Вот почему важно, чтобы ввести ID вместо SC. В отдельных случаях, нарушения лимфатических сосудов наблюдается, как показано на рисунке 5 (б), в области раны, такие как укус или вырезанные из волос / меха ножницы. Температура тела животного должна поддерживаться в пределах нормы, так как изменение температуры тела может привести к несогласованности функции лимфатической системы. Ограничения метода относятся затемнения люминесцентных лимфатические сосуды от пигментации кожи, неспособность изображение глубоких грудных протоков лимфатической связирассеяния света в тканях, и неизвестный эффект обезболивания на лимфатическую функции.
Как правило, это занимает ID депо МКГ или Абд-IRDye800 до 2 дней, чтобы очистить печень и мочевой пузырь, и до 3 дней, чтобы очистить место инъекции. При остаточной флуоресцентного сигнала рассеялся, протокол изображения может быть повторен, позволяющий продольных изображений лимфатических для оценки изменений в архитектуре или лимфатических функции после некоторого вмешательства.
Анализ функции лимфатической
Полученные изображения могут быть загружены в ImageJ или MATLAB для анализа данных. Постоянные зоны, круговая трансформирования выбирается или «нарисованные» по всей длине флуоресцентных лимфатический сосуд, как это сделано для человека 10 и животный 5 лимфатической изображения как показано на рисунках 6 (а) и Рис 6 (г). Трансформирования выбраны так, что их диаметр составляет примерно диаметр образ флуоресцируютNT судна. Средняя интенсивность флуоресценции в каждой ROI строится как функция визуализации время, чтобы оценить движитель скорости и частоты «пакеты» красителя Ладена лимфатических движение по лимфатическим сосудам как показано на рисунках 6 (б) и Рис 6 (е ). Для оценки скорости лимфатического распространения и частота лимфатических движения, два ROI, с четко определенными максимумов или минимумов флуоресцентные вариации интенсивности представляющих распространения пакетов лимфы, выбраны и их флуоресцентные профили интенсивности приведены как показано на рисунках 6 (с) и 6 (F). Скорость распространения вычисляется как отношение расстояния между двумя ROI и транзитное время для пакета лимфатических распространяться между ними. По оценке количества флуоресцентных импульсов или "пакеты" прибывают в одной ROI за время, сократительная частоты вычисляется. Хотя этот метод является единственным методом Asseсс частоты движения и скорость самоходных лимфатической "пакет", другие косвенно оценивать лимфатической транспорта путем измерения депо оформления изображений агента и, таким образом расчете константы скорости удаления 11. В метастазами рака 10 и ранней инфекции, мы находим потерю лимфатической движения у животных. Другие сообщают, изменения в сократительной в ответ на артрита 12. У людей, мы сообщаем увеличилось движение после лимфедема лечения, включая пневматической компрессии дренаж 13 и ручной лимфодренаж (массаж) 14.
Рисунок 1. NIRF система визуализации на заказ для небольших изображений лимфатических животных. Устройство состоит из 785-нм лазерный диод оснащены асферической линзой, diffusэ, и фильтров для создания однородного поля возбуждения, который освещает животных и EMCCD камеры, фокусирующей линзы, а также оптические фильтры для захвата изображений флуоресцентных лимфатические 10.
Рисунок 2. Когда 10 мкл МКГ или Абд-IRDye800 вводится ID у основания хвоста нормальные мыши с помощью 31-го калибра иглы, лимфатических сосудов между инъекции у основания хвоста и паховых лимфатических LN должны быть немедленно визуализируются. Динамические флуоресцентных изображений приобретаются сразу после инъекции и до 20 инъекций следующий мин. Вскоре после инъекции (нескольких секунд до нескольких минут), лимфатических сосудов между месте инъекции и паховые LN, а затем к подмышечной области Л.Н. визуализируются на вид сбоку. Изображение показано на рисунке 2 было принято 5 мин. после инъекции Wiго по 10 мкл МКГ ID в основании хвоста. Яркое пятно между паховые и подмышечные области является печень.
Рисунок 3. Поскольку лимфатические у мышей отличаться от животного к животному, как в людях, изменения в архитектуре между животными может рассматриваться и стабильными во времени. Мышь # 124 был введен с ГСИ в основании хвоста и отображаемого сразу на 1 день. Верхняя панель содержит изображение, полученное на 1 день, а также изображение, полученное через 2 дня (на день 3), используя тот же мышь и инъекции / визуализации протокола. Нижняя панель содержит изображения, полученные от другой мыши (# 127) вводится с ГСИ и сразу отображаемого 1-й день, а затем отображается на 3-й день. В то время как лимфатические архитектура (структура лимфатических сосудов) колеблется от движенияиспользовать # 124 и # 127, изображения, полученные с использованием NIRF согласуются для каждой мыши в дни 1 и 3.
Рисунок 4. Когда 5-10 мкл МКГ или NIRF-Абд вводится ID на спинной части задней лапы нормальные мыши, два лимфатические сосуды должны быть визуализированы слива до подколенной LN. Динамические флуоресцентных изображений приобретаются сразу после инъекции и до 20 инъекций следующий мин. В некоторых случаях трудно отличить обоих судов из-за их близости, как показано на увеличенном изображении штриховой окно. По мнению представителя мыши здесь показано, 10 мкл МКГ вводили в спинной части влево, задние лапы (первая месте инъекции), а в левой части основания хвоста (второе место инъекции). Это изображение было окptured примерно 2 - 3 мин после первой инъекции и около 30 сек - 1 мин после второй инъекции.
Рисунок 5. (А) Иногда визуализация лимфатических задерживается или нарушается, чаще всего из-за введения вводимого SC вместо ID. Когда 10 мкл МКГ или Абд-IRDye800 вводят SC у основания хвоста нормальные мыши с помощью 31-игла, лимфатический транспорт не будет сразу же визуализируются из-за дополнительного времени, необходимого для красителя для достижения и принимать что на лимфатические капилляры в коже. Кроме того, в связи с относительно глубоким выведения КА, не может быть никакого поглощения лимфатической и, следовательно, не визуализацию сосудов и лимфатических узлов. На рисунке 5 (), Мышей вводили 10 мкл МКГ у основания хвоста SC и изображения были приобретены через 5 минут после инъекции. Красителя в месте инъекции могут быть визуализированы и не лимфатические сосуды или лимфатические узлы могут быть визуализированы. Именно по этой причине ID инъекции важно. (Б) визуализации от брюшной стороне животного аберрантных лимфатических сосудов в результате раны встречаются на один день раньше во время удаления мех с садовыми ножницами (сайт повреждение тканей отметил на правой стороне животного). Изображение было захвачено около 5 мин после 10 мкл МКГ вводили ID у основания хвоста на каждой левой и правой стороны. На неповрежденной (животное левой) стороне, паховые LN могут быть визуализированы, а также относительно прямой эфферентной судна лимфодренажный вверх к подмышечной LNS. На правой стороне мыши, однако, нормальная сосудистая сеть лимфатических был прерван из-за ранения и появляется аберрантных за счет восстановления тканей (струпьев).
Рисунок 6. Количественный анализ лимфатической сократительная функция состоит в выборе трансформирования по лимфатическим сосудам слива из (а) паховых LN в подмышечных LN и (г) в месте инъекции на спинной части лапы до подколенной LN. Увеличенное изображение (вставка на (а)) красной пунктирной прямоугольник иллюстрирует выбор трансформирования по флуоресцентным судна. Составление средней интенсивности флуоресценции как функция времени для всех трансформирования из (а) и (г) представляет псевдо-цвет сюжет показанный в (б) и (д), соответственно. Возмущений в интенсивности флуоресценции через пиксели представляют собой лимфатический "Импульс", распространяющегося через трансформирования и арэлектронной параллельные стрелки. Средняя интенсивность флуоресценции для одной области трансформирования 22 и 45 из (б) показаны на (с) и средней интенсивности флуоресценции для одной области трансформирования 18 и 34 с (е) приведены в (е). Флуоресценция профилей интенсивности в зависимости от времени (как показано на (с) и (F)) облегчения идентификации пакетов, распространяющихся лимфы и добыча транзитное время и расстояние между двумя ROI. Два трансформирования выбраны частично основаны на их месте вдоль лимфатических сосудов и ясность, с которой максимумы и минимумы представляющих лимфатических распространения показаны. Скорость вычисляется как отношение расстояния между двумя трансформирования и транзитное время, которое принято между пиком интенсивности флуоресценции. Нажмите, чтобы увеличить рисунок
Рисунок 7. Для визуализации лимфатических отхлынула от паховой области к подмышечной области, придать левой или правой стороне основания хвоста. В общем, визуализировать левую сторону, вводят в течение 5 место, 6, 9 или 10, а для визуализации правой стороны, вводить в ячейку 7, 8, 11 или 12. Места с 1 по 4 может быть слишком уступает на хвосте для оптимального поглощения для визуализации лимфатический дренаж от паховой области к подмышечной области.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Мы используем обычай, мелких животных NIRF системы визуализации для захвата изображений меченых лимфатических сосудов у мышей. Для построения фильмов движение лимфы, 300 или более изображений собираются. Для функционального анализа лимфатические из фильмов, два или более трансформирования вручную проведенной вдоль лимфатических сосудов. Размеры трансформирования остаются постоянными для каждого судна и примерно диаметр сосуда. В то время как весь животный пространственное разрешение может изобразить флуоресцентные лимфатические сосуды 100 микрон или меньше, macrolens для более высокое разрешение изображения может быть использована 10. Белый свет изображения для анатомических ссылки также могут быть получены с использованием маломощного лампы. Следует отметить, что если агентов изображений состоят из других флуоресцентных красителей с различными возбуждение / излучение флуоресценции, то фильтры описанные выше, должны быть изменены, чтобы сохранить изображение производительность, и агент доза может нуждается в корректировке, а также. Кроме того, если длина волны возбуждения является лесс, чем 750 нм, то автофлуоресценции может привести, фонового сигнала будет увеличиваться, и изображения чувствительность будет уменьшаться. Кроме того, нестабильность агентов в растворе может помешать использованию некоторых NIRF красители, такие как цианинового 7 (Cy7).
Выбор подходящего места инъекции будет зависеть от лимфатических сосудов изучаются. Для визуализации лимфатических отхлынула от паховой области к подмышечной области, то вам нужно вводить левой или правой стороне основания хвоста, как показано на рисунке 7. Для визуализации лимфатических слива из дворцовых региона, необходимо вводить спинной части задней лапы. Важно, чтобы держать температуру тела животного в пределах нормы, так как изменение температуры тела может привести к несогласованности функции лимфатической системы. Кроме того, из-за ограниченного динамического диапазона наиболее ПЗС-матрицы, инъекции должны быть покрыты черной бумаги, чтобы заблокировать флуоресцентный свет therebУ позволяющие визуализации диммер дренаж лимфатических сосудов. Изображения должны быть выполнены в темной комнате, чтобы уменьшить нежелательные сигналы фона за счет излучения света в полосе флуоресценции из комнаты огни. Животное должно лежать на черном фоне в то время как визуализация выполняется для уменьшения обратного рассеяния света.
NIRF лимфатической изображений может позволить лучше понять лимфатические заболевания лимфатической и как архитектура и функция изменения в отношении к болезни или травмы. Например, исследовательская группа использовала NIRF изображений в мелких животных, чтобы обеспечить лимфатической фенотипирование животных и 6,15 для обнаружения изменений в функции лимфатической и архитектуры с метастазами рака 10. У людей, методика была использована для выявления ранних признаков лимфедема 2, оценки ответа на терапию лимфедемы 13,14,16, и фенотип членов семьи с наследственной патологией лимфатической системы. Тем не менее, неинвазивные Visualization глубоких лимфатических (> 3 см) у людей ограничен рассеяния света в тканях. Изображения лимфатических структур до 3 см в глубину были приобретены у свиней 9 и человеческих изображений. У людей, МРТ и динамической лимфосцинтиграфии были использованы для количественной оценки времени прохождения контрастного вещества из места инъекции в лимфатические узлы в болезнь. Тем не менее, они не имеют достаточных временным и пространственным разрешением для визуализации лимфатических двигательной события легко, полученную с NIRF. Кроме того, здоровые лимфатические не визуализируются при МРТ ввиду отсутствия контраста. NIRF изображений является неинвазивным, в отличие от конфокальной, многофотонной микроскопии и прижизненных изображений. Обычно конфокальной и многофотонной микроскопии используют частично или полностью резекции ткани. Scintographic методы требуют использования радионуклидов и иногда незначительные судно катетеризации. Другой метод для визуализации лимфатических включает прижизненные изображения в течение которого мышьэвтаназии и дермы втягивается обратно после ID инъекции голубого красителя Эванса. Однако этот метод не обеспечивает функциональные или продольные изображений 17,18. Л.Н. метастазы могут быть выявлены использованием Siemens Inveon ПЭТ / КТ, однако, этот метод не позволяет визуализировать структуру или функции лимфатической 19.
Хотя авторы не рекомендуют ни одобрить какие-либо конкретные коммерческие устройства визуализации, наш опыт показывает, что выбор источников света и оптических фильтров может быть единственным наиболее важным фактором, который определяет чувствительность прибора. Как описано Zhu и соавт., Для успешной визуализации низкой концентрации красителя, должно быть минимальным перекрытием между спектре излучения источника света и спектр пропускания оптического фильтра 20. Другим ключевым фактором является поглощение и излучение спектра NIRF красителя. В этом МКГ бумаги и Абд-IRDye800 имеют аналогичные SPECtra и так описал длины волны лазерного излучения диода и комбинации фильтров могут быть использованы для каждого, однако, если другой краситель, который будет использоваться которое не впитывает и / или флуоресцировать на этих длинах волн, длина волны источника света и оптические фильтры должны быть соответствующим образом скорректированы. МКГ может быть достаточной для многих приложений, и уже FDA утвержденных. NIRF-Абд не FDA-одобрен для использования в людях, но может быть полезно для животного изображения. МКГ не имеет химическое соединение остатков для крепления ориентации фрагментов, так что другие флуоресцентные агенты, такие как NIRF-Абд, в настоящее время разрабатываются.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего раскрывать, но некоторые авторы перечислены на патент.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана следующими грантами Еве Sevick: NIH R01 CA128919 и NIH R01 HL092923.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Indocyanine green (ICG) | Patheon Italia S.P.A. | NDC 25431-424-02 | Reconstitute to 645 μM (5 μg/10 μL) |
| Cyclic Albumin Binding Domain(cABD) | Bachem | Custom | Reconstitute to 200 μM (6.8 μg/10 μL) |
| IRDye800 | Li-COR | IRDye 800CW | Reconstitute according to manufacture's instructions; conjugate with cABD at equilmolar concentrations |
| Sterile Water | Hospira, Inc., Lake Forest, IL | NDC 0409-4887-10 | |
| NAIR | Church Dwight Co., Inc. | Local Stores | www.nairlikeneverbefore.com |
| Imaging System (components below) | Center for Molecular Imaging | N/A | Custom-built in our laboratories. |
| Electron-multiplying charge-coupled device (EMCCD) camera | Princeton Instruments, Trenton, NJ | Photon Max 512 | |
| Nikon camera lens | Nikon Inc., Melville, NY | Model No. 1992, Nikkor 28mm | |
| Optical filter | Andover Corp., Salem,NH | ANDV11333 | Two 830.0/10.0 nm bandpass filters are used in front of lens |
| 785-nm laser diode | Intense Ltd, North Brunswick, NJ | 1005-9MM-78503 | 500 mW of optical output |
| Collimating optics | Thorlabs, Newton, NJ | C240TME-B | Collimates laser output prior to cleanup filter |
| Clean-up filter | Semrock, Inc., Rochester, NY | LD01-785/10-25 | Removes laser emission in fluorescence band |
| Optical diffuser | Thorlabs, Newton, NJ | ED1-C20 | Diffuses the laser over the animal |
| V++ | Digital Optics, Browns Bay, Auckland, New Zealand | Version 5.0 | Software used to control camera system and save images to computer. http://digitaloptics.net/ |
| Analytic Software Either of the following software packages can be used for image analysis | |||
| ImageJ | National Institutes of Health, Bethesda, MD | Most current version available | Freeware available at http://rsbweb.nih.gov/ij/ |
| MATLAB | MathWorks, Natick, MA | Version 2008a or later | http://www.mathworks.com/ |
References
- Alitalo, K. The lymphatic vasculature in disease. Nat. Med. 17, 1371-1380 (2011).
- Rasmussen, J. C., Tan, I. C., Marshall, M. V., Fife, C. E., Sevick-Muraca, E. M. Lymphatic imaging in humans with near-infrared fluorescence. Curr. Opin. Biotechnol. 20, 74-82 (2009).
- Rasmussen, J. C., et al. Human Lymphatic Architecture and Dynamic Transport Imaged Using Near-infrared Fluorescence. Transl. Oncol. 3, 362-372 (2010).
- Sevick-Muraca, E. M. Translation of near-infrared fluorescence imaging technologies: emerging clinical applications. Annu. Rev. Med. 63, 217-231 (2012).
- Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. Noninvasive quantitative imaging of lymph function in mice. Lymphat. Res. Biol. 5, 219-231 (2007).
- Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. Mouse phenotyping with near-infrared fluorescence lymphatic imaging. Biomed Opt Express. 2, 1403-1411 (2011).
- Marshall, M. V., et al. Near-infrared fluorescence imaging in humans with indocyanine green: a review and update. The Open Surgical Oncology Journal. 2, 12-25 (2010).
- Davies-Venn, C. A., et al. Albumin-Binding Domain Conjugate for Near-Infrared Fluorescence Lymphatic Imaging. Mol. Imaging Biol. , (2011).
- Sharma, R. Quantitative imaging of lymph function. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292, 3109-3118 (2007).
- Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. Functional lymphatic imaging in tumor-bearing mice. J. Immunol. Methods. 360, 167-172 (2010).
- Karlsen, T. V., McCormack, E., Mujic, M., Tenstad, O., Wiig, H. Minimally invasive quantification of lymph flow in mice and rats by imaging depot clearance of near-infrared albumin. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 302, 391-401 (2012).
- Zhou, Q., Wood, R., Schwarz, E. M., Wang, Y. J., Xing, L. Near-infrared lymphatic imaging demonstrates the dynamics of lymph flow and lymphangiogenesis during the acute versus chronic phases of arthritis in mice. Arthritis Rheum. 62, 1881-1889 (2010).
- Adams, K. E., et al. Direct evidence of lymphatic function improvement after advanced pneumatic compression device treatment of lymphedema. Biomed. Opt. Express. 1, 114-125 (2010).
- Tan, I. C., et al. Assessment of lymphatic contractile function after manual lymphatic drainage using near-infrared fluorescence imaging. Arch. Phys. Med. Rehabil. 92, 756-764 (2011).
- Lapinski, P. E., et al. RASA1 maintains the lymphatic vasculature in a quiescent functional state in mice. J. Clin. Invest. 122, 733-747 (2012).
- Maus, E. A., et al. Near-infrared fluorescence imaging of lymphatics in head and neck lymphedema. Head Neck. 34, 448-453 (2012).
- Galanzha, E. I., Tuchin, V. V., Zharov, V. P. Advances in small animal mesentery models for in vivo flow cytometry, dynamic microscopy, and drug screening. World J. Gastroenterol. 13, 192-218 (2007).
- Schramm, R., et al. The cervical lymph node preparation: a novel approach to study lymphocyte homing by intravital microscopy. Inflammation research : official journal of the European Histamine Research Society. 55, 160-167 (2006).
- Hall, M. A., et al. Imaging prostate cancer lymph node metastases with a multimodality contrast agent. Prostate. 72, 129-146 (2012).
- Zhu, B., Sevick-Muraca, E. M. Minimizing excitation leakage and maximizing measurement sensitivity for molecular imaging with near-infrared fluorescence. J. Innovat. Opt. Health Sci. 4, 301-307 (2011).
