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Neuroscience

동시 Electroencephalography, 설치류 대뇌 피질의 젖산 농도와 Neuronal 활동 Optogenetic 조작의 실시간 측정

Published: December 19, 2012 doi: 10.3791/4328

Summary

절차는 뇌파, electromyogram, 그리고 뇌성 젖산 농도를 모니터링하는 동안 optogenetically 뇌성 대뇌 피질의 피라미드 뉴런의 활동을 조작하기위한 설명되어 있습니다. 사람들이 자연 수면 / 웨이크주기를 받아야 동안 실험 녹음 케이블 테 더링 마우스에 수행됩니다. Optogenetic 장비는 우리의 실험실에서 조립, 녹화 장비는 상업적으로 사용할 수 있습니다.

Abstract

뇌는 질량에 의해 신체의 5 % 이하를 나타냅니다이지만, 나머지 1에서 몸에서 사용하는 포도당의 약 분기 활용합니다. 비 급속 안구 운동 수면 (NREMS), 시간의 수면의 가장 큰 부분의 기능은 불확실합니다. 그러나, NREMS 중 하나를 분출하는 기능은 잠이 오지 않음 2-4를 기준으로 뇌성 포도당 이용의 속도에 상당한 감소이다. 해당 제품 및 기타 연구 결과는 수면 뇌성 신진 대사에 관련된 기능을 제공하는 널리 통용되고 있던 신념으로 이어 왔습니다. 그러나 NREMS 동안 뇌성 포도당 신진 대사의 감소 근간이 메커니즘은 elucidated 할 수 남아 있습니다.

뇌성 신진 대사 속도에 영향을 미칠 수 있습니다 NREMS과 관련된 하나의 현상이 뇌파 5,6에서 속도가 느린 파도, 4 Hz에서보다 주파수에서 진동의 발생입니다. 두개골 또는 대뇌 피질 표면의 수준에서 감지 이러한 느린 파도가를 반영depolarized / 최대 상태 hyperpolarized / 아래 상태 7 사이의 기본 뉴런의 진동. 다운 상태 동안, 세포는 수백 밀리 초까지 간격에 대한 작업 잠재력을 받아야하지 않습니다. 작업 잠재력에 대한 후속 이온 농도 그라디언트의 복원은 세포 팔에 큰 신진 대사 하중을 나타냅니다 NREMS과 관련된 아래 주 동안 활동 전위의 부재가 깨어날 상대적으로 감소 신진 대사에 참여할 수 있습니다.

두 기술 도전은 테스트하려면이 가상 관​​계를 위해 해결해야했습니다. 첫째, 대뇌 EEG의 역학을 반영한 시간적 해상도로 뇌성 glycolytic 신진 대사를 측정 할 필요 (그​​ 대신 분 초 동안입니다.) 이렇게하려면 우리는 젖산의 농도, 에어로빅 작용의 제품, 따라서 쥐의 뇌에 포도당 신진 대사의 속도의 기록을 측정. 락트산였다전두엽 피질에 포함 된 젖산 산화 효소 기반의 실시간 센서를 사용하여 측정. 감지 메커니즘은 락트산 산화 효소 분자의 층으로 둘러싸인 백금 - 이리듐 전극으로 구성되어 있습니다. 락트산 산화 효소에 의해 젖산의 대사는 백금 - 이리듐 전극에 전류를 생산 과산화수소를 생산하고 있습니다. 그래서 대뇌 작용들로 ramping는 감지 전극에 증가 현재에 반영되어 락트산 산화 효소에 대한 기판의 농도 증가를 제공합니다. 이 NREMS의 다른 측면에서이 변수를 분리하기 위해 대뇌 피질의 흥분을 조작하는 동안이 변수를 측정하기 위해 추가로 필요했습니다.

우리는 Pyra의 optogenetic 활성화를 통해 뇌성 대뇌 피질의 neuronal 활동의 elecetroencephalogram, 락트산 바이오 센서를 통해 glycolytic 유량의 측정 및 조작을 통해 neuronal 활동의 동시 측정을위한 실험 시스템을 고안midal 뉴런. 우리는 수면 관련 electroencephalographic 파형과 대뇌 피질의 젖산 농도의 순간 - 투 - 순간 역학 사이의 관계를 문서화하는이 시스템을 활용하고 있습니다. 프로토콜 자유롭게 동물을 행동에 공부에 관심이있는 개인을 위해 유용 할 수 있습니다, 뇌 내의 electroencephalographic 수준과 세포 에너지 론에서 측정 neuronal 활동 사이의 관계.

Protocol

1. 동물의 외과 준비

1. 실험 과목

대뇌 피질 뉴런에있는 파란색 빛에 민감한 양이온 채널, Channelrhodopsin-2를 표현 잭스 스트레인 # 7612) 또는 기타 마우스, B6.Cg-TG (Thy1-COP4/eYFP) 18Gfng / J 유전자 변형 라인 9 마우스를 사용합니다. B6.Cg-TG (Thy1-COP4/eYFP) 18Gfng / J 유전자 변형 라인의 대뇌 피질에 푸른 빛의 응용 가능성 9,10를 depolarize하고 조치를 받아야 할 Channelrhodopsin-2을 표현 피라미드 뉴런이 발생합니다. 피라미드 세포 활성화의 결과로서, 지역 interneurons가 활성화되며, 잠재적의 변화는 자극 (10)의 사이트 이외의 뉴런에 전달됩니다. , 핫 구슬은 모든 열 저항성 주입 금속 장치 (cannulas, 나사와 와이어) 소독 압력솥 수술 도구와 softpacks (수술 필드 거즈 패드) : 해당 규제 가이드 라인을 준수의 무균 조건 하에서 수술을 수행30 초에, 에탄올에서 10 초 수영과 열 차별적 인 implantable 장치 (광섬유 케이블, 플라스틱 커넥터) 소독, 통조림 공기의 응용 프로그램이 타격을 에탄올 담궈 둔 항목 건조합니다.

2. 마취 Stereotaxic 위치와 해골의 통관

마우스를 마취하는 IMPAC 6 통합 멀티 환자 (뇌려 장비 주식회사) 시스템을 사용합니다. 5%에게 유도를위한 Isoflurane/95 %의 산소와 수술 동안 유지 보수 3 % Isoflurane/97 %의 산소를 사용합니다. 그것은 이불이 온도에서 보관하는 경우 체온을 모니터링 할 필요가 없습니다 37 C.로 설정 순환 물 담요에 동물을 놓으십시오.

3. 주입을 위해 두개골을 준비

두개골의 상단에서 모든 털을 면도를하여 절개 사이트를 준비합니다. 면도 면적은 귀에서 눈에서 두개골의 뒤쪽 끝으로 귀하고 앞 - 뒤로 옆으로 확장해야합니다. 세 consecutiv로 노출 된 피부를 소독betadine의 전자 면봉은 에탄올이 나타납니다. 눈 사이에서 두개골의 뒷면에, 두개골의 상단에 안쪽 절개를합니다. 과산화수소와 멸균 생리 (0.9 % NaCl)으로 두개골을 청소합니다. cauterizing 도구를 사용하여 피를 흘리고을 관리 할 수​​ 있습니다. stereotaxic 좌표를 결정하기위한 bregma와 람다을 찾아 표시합니다. 우리가 사용했던 전극 / optogenetic 자극 구성을위한 Stereotaxic 좌표는 표 1에서 제시하고 그림 1A에 개략적으로 표시됩니다.

4. 해골에 주입 사이트의 작성

두개골의 각 주입 사이트를 구축하기 위해 0.5mm 볼 버 비트와 고속 치과 드릴을 사용합니다. 나사 삽입을 용이하게하기 위해 0.7 mm 볼 버 비트를 사용하여 각 구멍의 외부 여백을 챔퍼.

5. 삽입 및 Cannulas 확보, EMG는 리드 (lead)와 EEG 리드

EEG 나사를 (길이 0.8mm, 코팅 3 2cm로 삽입0-게이지 주석 도금 - 구리 버스는 구멍에) 머리를 망칠 때와 슬롯 손으로에서 그들을 몰아 사전 납땜 와이어 원하는 깊이를 얻기 위해 약 4-5 회전을 드라이버. 다음 stereotaxic 캐뉼라 홀더 및 부착 그들 아크릴 시멘트로 두개골 및 앵커에와 장소에 안내 cannulas을 잡아. 각 가이​​드 캐뉼라는 명백을 유지하기 위해 실험의 시간 (10~14일)에 수술의 시간에서 더미 캐뉼라 / 탐침을 (플라스틱, 하나, 일부 # C312 DC \ 1)를 포함해야합니다.

6. 외과 사이트를 닫기

일단 EEGs 및 가이드 cannulas는 본드는 치과 아크릴 시멘트 (- 오르토 - 제트 시멘트 랑 치과)와 함께 두개골에 위치하고 있습니다. 시멘트 세트 후, 건조 시멘트 마운드 위의 플라스틱 커넥터 (피나클 기술 부분 # 8402)를 배치. 솔더 EEG 리드에서 플라스틱 커넥터의 주소록에 나오는 와이어의 끝. 와이어가 시멘트에 연결 싸는. 그런 다음 nuchal 근육을 통해 EMG 와이어를 그리s은 (는) 21ga 바늘의 통에 넣어 슬라이드하여 근육을 관통. 그들은 근육을 종료 곳으로 단지 말초이 전선 주위에 5-0 나일론 봉합사의 두 외과 의사의 매듭을 묶게. P-3 바늘과 5-0 나일론 봉합사를 절단 역을 사용하여, 다시 하나의 중단 의사 옹이와 근육 조직을 액세스 할 수 후퇴 한 피부를 봉합 해.

7. 수술 진통제 및 복구

즉시 수술 후 항 염증 등 (0.1 밀리그램 / kg, 피하) 진통제와 flunixin meglumine (0.1 밀리그램 / kg, 피하)로 buprenorphine를 관리하고, 매일 일 1-2 수술에. 동물 실험 전에 최소한 7 일 동안 표준 식민지 주택 조건에서 복구 할 수 있습니다. 표준 식민지 주택 이외의 추가주의, cannulas는 장소에 고정 내재 stylets과 적어도 2 주 동안 특허를 유지 할 것으로 예상 할 수 있습니다. EEG와 EMG 센서는 유지 될 것으로 예상 할 수 있습니다이 기간 동안 기능.

2. 특정 시간 빛 펄스의 생성

1. MC의 자극 단위의 프로그래밍

데스크톱 컴퓨터에 USB 연결을 통해 MC-자극 단위 (멀티 채널 시스템)에 연결합니다. 사용 스프레드 시트와 같은 MC 자극 장치를 프로그램 할 MC-자극 사용자 인터페이스를 제공합니다.주세요 의 기간 동안 원하는 TTL (트랜지스터 - 트랜지스터 논리) 전압을 입력 기간 켜고 자극의 기간, 원하는 초당 사이클, 그리고 전체 자극 세션에 대한 반복 사이클의 총 수. 자세한 내용은 내용은 MC-자극 기술 설명서를 참조하십시오 :

3. 광섬유 저얼의 제조 / 조립대뇌 피질에 빛 제공을위한 obes

  1. 필요한 용품 및 장비에서 발견된다 : http://www.thorlabs.com/Thorcat/1100/1166-D02.pdf
  2. 절단 및 광섬유 케이블로 연마. http://www.thorlabs.com/Thorcat/1100/1166-D02.pdf은

4. 쥐 Optogenetic의 자극 시스템의 조립

1. MC-자극 장치와 레이저의 인터페이스

MC-자극 단위가 프로그램되면, 신호 ON / OFF 5 만 볼트의 이진의 독립 실행 형 신호 생성기로 실행합니다. BNC 커넥터가있는 레이저의 TTL 사용 전원 장치에 MC-자극 장치를 연결합니다.

2. 광섬유 케이블을 통해 레이저 출력을 생산

수동으로 레이저 전원 장치의 디지털 디스플레이 및 가변 전원 출력 다이얼을 사용하여통증은 레이저의 전원 출력을 조정합니다. 리본 케이블을 통해 레이저로 레이저 전원 장치를 연결합니다. 여성 FC (페럴 커넥터) 광섬유 패치 케이블 (200 μm 직경 유리 전도 섬유는 아크릴 레이트 폴리머 cladding을 반영 빛으로 감싼 3m 길이)에있는 남성 FC 커넥터에 레이저 광섬유 어댑터를 연결합니다.

3. 로터리 정류자 : 동물에 레이저를 전달

이 collimating 렌즈 (도리스 식 렌즈)를 encasing 광 회전 이음의 끝을 반대에 발생하는 광섬유 케이블 (길이 3m)와 배달 광섬유 케이블 (길이 45 ㎝)에 연결합니다. 광섬유 로터리 조인트는 정류자 역할 : 동물의 케이지에 대해 이동으로 회전 조인트는 광섬유 케이블의 파손을 방지하기 위해 회전합니다. 금속에 부착 정류자에 플라스틱 케이블 타이를 사용하는 동물이 자리되는 원통형 케이지 위에 배치하라.

4. 배달 광섬유 부착머리를 케이블

cupped 손바닥 아래에 마우스를 핀 한 손을 사용하여 마우스를 구속. 실험의 검지와 중지 사이에 동양의 머리. 광섬유 캐뉼라에 배치 가이드 캐뉼라에서 더미 캐뉼라를 제거합니다. 멸균 25ga 바늘을 사용하여 쓰레기의 가이드 캐뉼라를 삭제합니다. 손으로 광섬유 케이블을 삽입하고 더미 캐뉼라에서인양 나사 캡과 광섬유 가이드 캐뉼라에 고정. 평면 흘리고 끝에서 고정 된 거리에서 광섬유 케이블에 연결된 봉합 매듭으로 뇌의 광섬유 케이블의 삽입의 깊이를 조절합니다. 전체 실험 장치는 그림 1B에 표시됩니다.

5. Optogenetic을 자극하는 동안 EEG 정의 된 절전 모드 및 젖산 농도의 측정

1. 락트산 센서의 Precalibration

락트산 센서의 사전 보정 체외에서 함께 수행됩니다키트 (피나클 기술 부분 # 7000-K1-T). 센서가 인산염의 equilibrated 것은 제조업체 프로토콜 당 stepwise 방식으로 L-락트산의 세 농도에 노출 후, (산도 7.4) 염분 버퍼.

2. 락트산 센서와 EEG 케이블의 삽입

광섬유 케이블 삽입 절차 (섹션 4.4)에 동일한 방식으로 두개골 마운트 락트산 가이드 캐뉼라로 미리 보정 된 센서를 삽입합니다. 양극성 플러그 커넥터가있는 피나클 8400 바이오 센서의 전치 증폭기에 젖산 센서를 연결합니다. 수술 - 주입 headmount에있는 8 핀 커넥터에이 전치 증폭기를 연결합니다.

3. Optogenetic의 자극 강도를 구축

데이터를 수집하기 전에 optogenetic의 자극의 강도를 조정하는 레이저 강도 조절 노브를 사용합니다. EEG 응답의 진폭은, 체계적으로 연구되지 ​​않은 요인으로 인해, 동물에서 다릅니다 D는 자극의 발병에 육안 검사에 의해 확인해야합니다. 실제로, 80-120 μWatts의 강도는 일반적으로 자극의 주파수에서 약 50 %의 EEG 진폭 증가를 생산합니다. 후 임시 고속 푸리에 변환 분석 (섹션 5.5 참조) 응답의 절대 크기를 정할 필요가 있습니다.

4. 데이터 수집

: 피나클 8400 시스템 사용하여 데이터 수집 http://pinnaclet.com/pal-8400.html를 .

5. Neuroscore과 데이터 처리

: Neuroscore 인터페이스 (DataSciences, 국제와 EEG와 EMG의 데이터를 시각적으로 검사하여 상태를 잘 분류 http://www.datasci.com/products/software/NeuroScore_CNS_Software.asp 또는 Sirenia 인터페이스 (피나클 기술) :F = "http://www.pinnaclet.com/sirenia.html"대상 = "_blank"> http://www.pinnaclet.com/sirenia.html). 웨이크, 비 급속 안구 운동 수면, 또는 EEG와 EMG에 따라 빠른 안구 운동 수면과 같은 10 초 epochs에서 프로세스 데이터입니다. 추가 분석 및 통계 테스트를 위해 Microsoft Excel 스프레드 시트로 데이터를 저장합니다.

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Representative Results

으로, 그림 2에 표시된 EEG, EMG 및 뇌성 젖산 농도가 지속적으로 모니터링하는 동안 optogenetic의 자극과 EEG / 락 테이트 / EMG 데이터 수집을위한 시설을 갖추고 쥐가 자연 슬립 / 웨이크 상태 전환을 받았습니다. 락트산 센서의 전류는 EEG 낮은 진폭의 기간 동안 증가하고 EEG 높은 진폭의 기간 동안 감소. 그림 3에 도시 된 바와 같이, EEG의 두 채널은 전두엽 피질에 전달 optogenetic의 자극에 민감하게 반응합니다.

그림 1
그림 1. 수술 - 성형 한 EEG 전극, 젖산 센서와 optogenetic의 자극에 캐뉼라의 A) 도식 표현입니다. 전체 실험 시스템의 B) 도식 표현입니다. 1, EEG 리드 1. 2, EEG 리드 2. GND, EEG 접지 나사. 심판, EEG 참조 나사.TP :/ / www.jove.com/files/ftp_upload/4328/4328fig1large.jpg "대상 ="_blank "> 큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오.

그림 2
그림 2. 예를 들어 데이터 컬렉션은 레코딩을위한 계측은 그림 1A에서 볼 수 optogenetic / 바이오 센서 부양 구성을 사용하는 동안 동물에 들어갔다 수면 전환하는 보여줍니다. Optogenetic의 자극은 여기에 표시 간격 동안 적용되지 않았습니다. 웨이크 (W)과 수면, 빠른 안구 운동 수면 (R) 및 비 급속 안구 운동 수면의 두 하위 유형은 (N) 뇌파 (EEG)와 electromyogram (EMG)를 기준으로 정의됩니다. 높은 진폭 EMG이 깨어나을 정의 EEG 낮은 진폭과 함께. 낮은 진폭 EMG는 빠른 안구 운동 수면을 정의 EEG 낮은 진폭과 함께. 낮은 진폭 EMG는 EEG가 아닌 빠른 안구 운동 수면을 정의 높은 진폭과 함께. 락트산바이오 센서 전류 (예., 라디오 및 빠른 안구 운동 수면 모두 동안) EEG 낮은 진폭의 함수로 상승하고 EEG 높은 진폭 (예., 비 급속 안구 운동 수면시)의 함수로 떨어진다.

그림 3
그림 3. 그림 1A에서 볼 수 optogenetic / 바이오 센서 부양 구성을 사용 하나 Hz에서 (A) 또는 10 Hz에서 (B)에 optogenetic의 자극을 받게 동물에서 대표 데이터입니다. 흔적이 60 초 녹음을 나타냅니다. 자극 30 초 간격의 타이밍은 각 패널의 상단에 표시됩니다. 큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오 .

Bregma에 정면 자극 - 상대 (mm)
개미 / POST 위도 D / V
EEG1 2.2 1.6 -
EEG2 2.2 -1.6 -
참고 -3.5 -1.5 -
바닥 -3.5 1.5 -
락트산 정맥 1.0 1.6 -0.5
Optogenetic 정맥 1.0 -1.6 -0.5

표 1. Stereotaxic가 외과 이식 장치를 조정합니다.

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Discussion

방법은 하나 이전에 불가능 시간 규모 glycolytic 중간 락트산의 두뇌 농도의 수면과 변화 사이의 관계를 측정 할 수 있도록 여기에 소개했다. 동물이 깨어나, NREMS와 REMS 사이의 자발적인 전환을 받고있다. 동물이 전환을 받다 동안 또한, 우리는 optogenetic 자극을 적용 할 수 있습니다. 데이터 락트산 산화 효소 기반 바이오 센서의 판독에 그 자연과 유도 모두 파도에 미치는 영향을 설명 데이트를 모았습니다.

하나는 다른 출처의 장비 및 소프트웨어와 함께 여기에 설명 된 것과 유사한 실험 시스템을 구성 수 있습니다. 설치류에 적합한 polysomnographic 시스템의 대체 소스는 데이터 과학 국제 11과 Embla 12 등이 있습니다. 슬립 상태 분류를위한 소프트웨어가 Somnologica 12 이용이 가능하며, 13 로그인 Icelus 14 자. 젖산의 측정을위한 Amperometric 바이오 센서Quanteon 15 일부터 이용 가능합니다. 우리의 지식, 피나클 기술 EEG와 EMG 바이오 센서가 하나의 소프트웨어 인터페이스를 동시에 측정 할 수있는 유일한 시스템을 제공합니다.

우리는 젖산 농도와 optogenetic의 자극의 사이트에 EEG 말초 모두에 변화를 측정했습니다. 이러한 말초 사이트에서 optogenetic 자극의 효과는 optogenetically 유발 가능성이 변경 사항은 자극의 사이트를 넘어 전파하는지 확인합니다. 하나는 빛에 노출 피질의 영역에서 직접 이러한 매개 변수를 측정하지만, 다른 곳을 측정하면 응답이 같은 빛 노출합니다 (16 설명)에 바이오 센서의 artifactual 대응에 반대하는 파 전파에 의한 것으로 보장 수 있습니다. Optogenetically 유도 1-Hz에서의 파도가들이 subcortical 돌출 뉴런에 의해 동기화되지 않은 속에서 잠 속도가 느린 파도 다르다. 따라서, 그들은 다른 수면 관련이있는 틀에 박힌 시간적 관계에서 발생하지 않습니다이러한 스핀들과 K-단지 17과 같은 현상. optogenetic의 자극은 자연 느린 파도 (예 : 신경 힘 18 EEG 속도가 느린 웨이브 활동을 11 homoeostatic의 변화와 같이) 다른 효과를 모방이든 불확실합니다. 여기에 설명 된 방법은 향후 연구에서이 질문을 해결하는 데 사용할 수 있습니다.

동물 동물에서 컴퓨터와 대뇌 피질에 푸른 빛을 전달 광섬유 케이블에 biopotentials을 전하는 전선 모두에 의해 묶여있다. 모두 무선 bioanalyte / EEG 기록 시스템 (http://pinnaclet.com/biosensor-recording-sys/fixed-frequency.html) 및 무선 optogenetic의 자극 장치 19보고되었습니다. 그러나 두 사람은 우리의 지식에 대한 단일 작업 시스템에 통합되지 않았습니다. 테 더링 케이블과 관련된 규제에도 불구하고, 동물은 자주 케이지 주위를 움직이고, 볼, 그리고 잠 보낸 시간의 양이들에서 공부 마우스의 전형적인 아르imilar 실험 상황. 이 시스템과 호환 센서는 포도당과 glutamate 등 다른 bioanalytes의 측정이 가능합니다. 이 시스템은 따라서 EEG와 bioanalyte 농도가 분석되는 행동을 다른 실험 상황에서 유용 할 가능성이 높습니다.

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Disclosures

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

Acknowledgments

국방부 (국방 고급 연구 프로젝트 기관, 젊은 교수 상, 그랜트 번호 N66001-09-1-2117)과 NINDS (R15NS070734)의 지원을받는 연구.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
BASi Mouse Guide Cannula Pinnacle Technology/BASi Inc 7032
Lactate Biosensor Pinnacle Technology 7004
Head Mount Pinnacle Technology 8402
Sleep/Biosensor Recording system Pinnacle Technology 8400-K1-SL 2 EEG channels, 1 EMG channel, & 1 biosensor
Tethered Mouse in-vitro Calibration kit Pinnacle Technology 7000-K1-T
Fiber Optic Guide Cannula Plastics One C312G 21 Gauge Guide Cannula
Dummy Cannula Plastics One C312DC 21 Gauge Dummy
Diamond Fiber Scribe Thorlabs S90W
Fiber Connector Crimp Tool Thorlabs CT042
Furcation Tubing Thorlabs FT030 03.0 mm
Thorlabs T10S13 Max Dia. 0.012
Furcation Tube Stripper Thorlabs FTS3
Bare Hard Cladding Multimode Fiber Thorlabs BFL37-200 200 μm Core, 0.37 NA
Wire Snips/Kevlar Shears Thorlabs T865
Fiber Optic Epoxy Thorlabs F112
Fiber Stripper Tool Thorlabs
Glass Polishing Plate Thorlabs CTG913
Rubber Polishing Pad Thorlabs NRS913
Eye Loupe Thorlabs JEL10
Kim Wipes Thorlabs KW32
Compressed Air Thorlabs CA3
Polishing Puck Thorlabs D50-xx
Fiber Inspection scope Thorlabs CL-200
Polishing Films Thorlabs LFG5P, LFG3P, LFG1P, LFG03P
FC/PC connector end Thorlabs 30126G2-240 240 μm Bore, SS Ferrule
MC Stimulus Unit Multi-Channel Systems STG-4002
MC Stimulus Software Multi-Channel Systems MC-Stimulus V 2.1.5
Blue Laser CrystaLaser CL473-050-0
Laser Power supply CrystaLaser CL2005
Fiber Optic Rotary Joint Doric Lenses FRJ-v4
Table 2. Supplies and equipment.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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동시 Electroencephalography, 설치류 대뇌 피질의 젖산 농도와 Neuronal 활동 Optogenetic 조작의 실시간 측정
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Clegern, W. C., Moore, M. E.,More

Clegern, W. C., Moore, M. E., Schmidt, M. A., Wisor, J. Simultaneous Electroencephalography, Real-time Measurement of Lactate Concentration and Optogenetic Manipulation of Neuronal Activity in the Rodent Cerebral Cortex. J. Vis. Exp. (70), e4328, doi:10.3791/4328 (2012).

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