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Medicine

मूत्र पथ की जांच के आधार Confocal लेजर Endomicroscopy: तकनीक

Published: January 10, 2013 doi: 10.3791/4409

Summary

जांच के आधार confocal लेजर endomicroscopy मूत्राशयदर्शन के दौरान मानव मूत्र पथ के वास्तविक समय माइक्रोस्कोपी सक्षम बनाता है, गतिशील, सेलुलर संकल्प के साथ मूत्राशय कैंसर जैसे रोग राज्यों के intravital इमेजिंग प्रदान. Endomicroscopy मानक सफेद प्रकाश एंडोस्कोपी के निदान सटीकता बढ़ाने और intraoperative छवि मार्गदर्शन प्रदान करने के लिए शल्य लकीर में सुधार हो सकता है.

Protocol

1. रोगी तैयारी

  1. सहमति रोगी नैदानिक ​​मूत्राशयदर्शन और मूत्राशय ट्यूमर के transurethral लकीर के लिए CLE (TURBT) जैसे अन्य endourological प्रक्रियाओं के लिए निर्धारित है. और / या नसों intravesical fluorescein की विपरीत एजेंट के रूप में उपयोग के एक वर्णन सहमति में शामिल करें. Hypersensitivity fluorescein प्रतिक्रिया के इतिहास में पूछें.
  2. रोगी मूत्राशयदर्शन (लिफ़ोटोमी स्थिति में आम तौर पर) के लिए तैनात है और एक बाँझ फैशन में तैयार.
  3. मूत्रमार्ग के माध्यम से एक कठोर या लचीला मूत्राशयदर्शी साथ मानक सफेद प्रकाश मूत्राशयदर्शन (WLC) के साथ आगे बढ़ें.
  4. सफेद प्रकाश (चित्रा 1) के तहत मूत्राशय के सभी क्षेत्रों का सर्वेक्षण और CLE जांच के लिए हित के क्षेत्रों को नोट करें.
  5. WLC के अलावा, मूत्राशय अन्य macroscopic प्रतिदीप्ति मूत्राशयदर्शन (2A चित्रा) या संकीर्ण बैंड आईडी के लिए इमेजिंग (चित्रा 2B) सहित ऑप्टिकल इमेजिंग रूपात्मकता के साथ imaged किया जा सकता हैCLE साथ लक्षण के बाद संदेह के अतिरिक्त क्षेत्रों entify.
  6. एक दाग़ना इलेक्ट्रोड या लकीर पाश के लिए एक छोटे से दाग़ना हित के क्षेत्रों में है कि दोनों और imaged रोग की पुष्टि के लिए biopsied जा निकट निशान जगह का उपयोग करें. दाग़ना निशान बाद CLE इमेजिंग और बायोप्सी के लिए फिर स्थानीयकरण की सुविधा है.

2. इसके विपरीत एजेंट

  1. इसके विपरीत एजेंट के intravesical टपकाना
    1. वांछित एकाग्रता के लिए नैदानिक ​​ग्रेड 10% बाँझ सामान्य नमक में सोडियम fluorescein (0.9% NaCl) कमजोर द्वारा तैयार. उदाहरण के लिए, सामान्य नमक के 396 मिलीलीटर में 10% fluorescein के 4 मिलीलीटर गिराए द्वारा 0.1% fluorescein के 400 मिलीलीटर तैयार.
    2. मूत्राशय में एक बाँझ मूत्र कैथेटर डालें और एक 60 मिलीलीटर कैथेटर की नोक सिरिंज का उपयोग गुरुत्वाकर्षण द्वारा पतला विपरीत एजेंट टपकाना.
    3. 5 मिनट के लिए पकड़ विपरीत एजेंट निबाह मूत्र कैथेटर क्लैंप करें.
    4. मूत्राशय से नाली विपरीत एजेंट. 60 मिलीलीटर ca का प्रयोग करेंtheter की नोक सिरिंज सामान्य नमक का उपयोग कर मूत्राशय से 240-300 मिलीलीटर के बारे में अवशिष्ट विपरीत, धोने.
    5. CLE इमेजिंग के लिए आगे बढ़ें.
  2. Fluorescein की नसों में इंजेक्शन
    1. सिरिंज में 1.0 मिलीलीटर की fluorescein ड्रा. नसों में उपयोग करने के लिए सिरिंज देते हैं और 0.5 इंजेक्षन - एक सांस के रूप में fluorescein की 1.0 मिलीलीटर नसों के द्वारा. सामान्य नमक के साथ लाइन फ्लश. यह आम तौर पर ऑपरेटिंग कमरे में संज्ञाहरण टीम के द्वारा किया जाता है.
    2. CLE इमेजिंग के लिए आगे बढ़ें.

3. CLE इमेजिंग

  1. इसकी पैकेजिंग से निष्फल CLE जांच इमेजिंग (Cellvizio) निकालें और यह लेजर स्कैनिंग इकाई (मौना टेक्नोलॉजीज, पेरिस, फ्रांस) से कनेक्ट
  2. वार्म अप और निर्माता के निर्देशों का पालन करते हुए जांच इमेजिंग जांच.
  3. या मूत्राशय में मूत्राशयदर्शी resectoscope फिर से डालें. कठोर मूत्राशयदर्शी साथ 0 डिग्री लेंस का प्रयोग करें.
  4. Wo के साथ CLE जांच इमेजिंग अग्रिममूत्राशयदर्शी परे सिर्फ टिप साथ मूत्राशयदर्शी की चैनल rking.
  5. सफेद प्रकाश के तहत, ब्याज की पिछले चिह्नित क्षेत्रों का पता लगाने. अतिरिक्त सामान्य खारा सिंचाई का उपयोग mucosa के दृश्य के लिए जरूरत के रूप में और मूत्राशय के उदारवादी बढ़ाव को बनाए रखने.
  6. हित के क्षेत्रों के प्रत्यक्ष एन चेहरा संपर्क के लिए ऑपरेटर के हाथ के साथ CLE जांच इमेजिंग हेरफेर. हित के क्षेत्रों के ऑप्टिकल Sectioning के लिए, धीरे से बढ़ाने के लिए और इमेजिंग जांच करने के लिए दबाव कम करते हुए सीधे संपर्क बनाए रखने.
    1. पूर्वकाल मूत्राशय में स्थित ट्यूमर तक पहुँचने के लिए, एक मानक Albarran पुल ब्याज के क्षेत्र (चित्रा 2C) के साथ सीधे संपर्क के लिए इमेजिंग जांच के विक्षेपन को सुविधाजनक बनाने में मदद कर सकते हैं.
  7. ब्याज की आम क्षेत्रों इल्लों से भरा हुआ ट्यूमर, गैर इल्लों ट्यूमर, सामान्य दिखने mucosa और ट्यूमर के बीच संक्रमण, और erythematous पैच, जो सभी या तो intrave का उपयोग imaged किया जा सकतासिसल या नसों fluorescein प्रशासन. अंतःशिरा fluorescein लकीर बिस्तर की इमेजिंग, prostatic मूत्रमार्ग, और penile मूत्रमार्ग के लिए आवश्यक है.
  8. इमेजिंग जांच के रूप में भविष्य के विश्लेषण के लिए ब्याज, रिकॉर्ड छवियों के क्षेत्र स्कैन. समग्र सेलुलर आकारिकी, सीमा, संगठन, और नव angiogenesis की उपस्थिति पर ध्यान दें.
  9. इमेजिंग के पूरा होने पर, CLE जांच इमेजिंग चैनल में काम करने से हटा दें.
  10. अगर वांछित, कि CLE द्वारा स्कैन किया गया ब्याज की इसी क्षेत्रों से ठंड कप बायोप्सी प्राप्त करते हैं. Imaged क्षेत्रों कि biopsied के सह पंजीकरण के लिए स्थलों के रूप में प्रदाहान चिह्नों का उपयोग करें.
  11. दिनचर्या के प्रति TURBT पूरा करें. रोगियों जो नसों में fluorescein प्राप्त में सतत प्रवाह resectoscopes का उपयोग करने के लिए लकीर के दौरान दृश्य में सुधार, के रूप में fluorescein मूत्राशय में गुर्दे द्वारा उत्सर्जित होता है नसों में प्रशासन के बाद लगभग 5 मिनट पर विचार करें.
  12. Confocal प्रोसेसर और condu से बचाया छवि रिकॉर्डिंग को पुनः प्राप्तसीटी छवि विश्लेषण.

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Representative Results

CLE छवियों के रूप में प्रति सेकंड 12 तख्ते पर स्केल वीडियो अनुक्रम फ़ाइलें बच रहे हैं. छवि व्याख्या वास्तविक समय में किया जाता है और नैदानिक ​​एक investigational प्रोटोकॉल के तहत निर्णय लेने को प्रभावित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. ऑफ़लाइन विश्लेषण, जो वीडियो अनुक्रम का, mosaicing, 7 और मानक विकृति के साथ तुलना के रूप में अतिरिक्त छवि प्रसंस्करण की समीक्षा भी शामिल है, सीखने की अवस्था चरण के दौरान प्रौद्योगिकी के साथ जुड़े महत्वपूर्ण हैं. आंकड़े 1B और 1C प्रतिनिधि CLE दो अलग अलग मूत्राशय intravesical और नसों में fluorescein का उपयोग ट्यूमर, क्रमशः से प्राप्त छवियों हैं. ट्यूमर मूत्राशय, सेलुलर सुविधाओं (जैसे आकारिकी cohesiveness और सीमाओं) और microarchitectural सुविधाओं (जैसे फ्लैट बनाम इल्लों ट्यूमर ऊतक संगठन और संवहनी सुविधाओं) के लिए सौम्य और घातक घावों और निम्न और उच्च ग्रेड के कैंसर के बीच अंतर करने के लिए विख्यात हैं. इमेजिंग जांच को देखते हुए अलग typ के बीच interchanged हो सकता हैके es cystoscopes, CLE प्रतिदीप्ति मूत्राशयदर्शन (2A चित्रा) और संकीर्ण बैंड इमेजिंग (चित्रा 2B) है, जो अपने आप या तो प्रौद्योगिकी के निदान सटीकता में सुधार हो सकता है सहित अन्य उभरते इमेजिंग रूपात्मकता के साथ जोड़ा जा सकता है.

चित्रा 1
चित्रा 1 WLC और CLE से प्रतिनिधि छवियों fluorescein की intravesical बनाम नसों में प्रशासन पर निर्भर है. ए WLC intravesically दाग इल्लों ट्यूमर के साथ. 2.6 मिमी इमेजिंग जांच छवि के नीचे दिखाई देता है. बी CLE intravesically दाग इल्लों ट्यूमर. नसों के दाग इल्लों ट्यूमर के सी. CLE. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .


चित्रा 2 adjunctive macroscopic इमेजिंग रूपात्मकता और अतिरिक्त उपकरण. ए CLE इमेजिंग प्रतिदीप्ति मूत्राशयदर्शन (hexaminolevulinate हाइड्रोक्लोराइड के प्रशासन के साथ) के साथ संयोजन के रूप में. CLE इमेजिंग जांच छवि के बाईं ओर दिख रहा है. बी CLE इमेजिंग संकीर्ण बैंड इमेजिंग के साथ संयोजन के रूप में. CLE इमेजिंग जांच छवि के बाईं ओर दिख रहा है.

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Discussion

बनना और इमेजिंग जांच और मूत्राशय mucosa के बीच ठोस एन चेहरा संपर्क बनाए रखने के इष्टतम छवि गुणवत्ता प्राप्त करने में सबसे महत्वपूर्ण कदम है. वहाँ लगभग एक 3-5 रोगी सीखने के लिए निपुणता विकसित करने के लिए जांच इमेजिंग में हेरफेर करने के लिए और जांच छवि अधिग्रहण के दौरान स्थिर रखने की अवस्था है. इसके अतिरिक्त, इस प्रक्रिया के रूप में vivo में आयोजित किया जाता है, रोगी (यानी श्वसन) आंदोलनों और संवहनी pulsations मूत्राशय के साथ जांच इमेजिंग संपर्क को प्रभावित कर सकता है. interobserver विचरण और छवि व्याख्या है, जो मूत्राशय विकृति विज्ञान के व्यापक स्पेक्ट्रम के साथ अनुभव की आवश्यकता के सीखने की अवस्था, जांच के अंतर्गत वर्तमान में हैं. छवि गुणवत्ता में रूपांतर ऊतक परिवर्तनशीलता और अंतर्निहित विकृति के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है. सामान्य क्षेत्रों की इमेजिंग, संदिग्ध प्रदर्शित होने के क्षेत्रों के अलावा, छवि गुणवत्ता और धुंधला हो fluorescein का आकलन करने के लिए उपयोगी है.

दाग़ना माब्याज की प्रत्येक क्षेत्र के rking पुनः imaged और excised ऊतकों के स्थानीयकरण को सुविधाजनक बनाने में मददगार है, के रूप में मूत्राशय और खाली कर दिया है छवि अधिग्रहण और लकीर के बीच बार - बार refilled. यह कदम, सह पंजीकरण कहा जाता है, तुलनात्मक विश्लेषण के लिए ऊतक विज्ञान के साथ CLE द्वारा प्राप्त छवियों सहसंबंधी करने के लिए महत्वपूर्ण है. Fluorescein की intravesical और नसों में प्रशासन के लिए दोनों प्रक्रियाओं ऊपर वर्णित हैं, नसों में उपयोग करने के लिए और समय की आवश्यकता के संबंध में कुछ मतभेदों के साथ 8.

शारीरिक स्थान और सूक्ष्म imaged किया जा सुविधाओं, इष्टतम विधा fluorescein प्रशासन के समय के आधार पर प्रयोगात्मक निर्धारित करने की आवश्यकता होगी. रोगियों जो intravesical fluorescein प्राप्त में, अतिरिक्त अंतःशिरा fluorescein प्रशासन क्षेत्रों है कि दाग नहीं थे (जैसे ट्यूमर बिस्तर, मूत्रमार्ग) की छवि के लिए दिया जा सकता है.

एक 2.6 मिमी इमेजिंग जांच इस dem में इस्तेमाल किया गया थाonstration. हालांकि, जांच के आधार पर प्रौद्योगिकी के साथ मूत्राशय तक पहुँचने के सिद्धांत इमेजिंग जांच के भविष्य की पीढ़ियों कि छोटे और अधिक maneuverable जांच में छवि गुणवत्ता बढ़ाने में उपयोग किया जा सकता है. हाल ही में 1 मिमी व्यास में इमेजिंग जांच है. वर्णित किया गया है 13 इन छोटे इमेजिंग जांच ureteroscopy दौरान ऊपरी मूत्र पथ के vivo confocal इमेजिंग में अच्छी तरह के रूप में के रूप में आउट पेशेंट मूत्राशयदर्शन में CLE इमेजिंग की अनुमति दे सकता है.

अंत में, उपन्यास विपरीत मूत्राशय के कैंसर के लिए विशेष एजेंट को विकसित किया जा सकता है कि छवि गुणवत्ता में सुधार हो सकता है. instilling एजेंटों के विपरीत प्रदर्शन तकनीक intravesically महत्वपूर्ण वादा धारण के बाद मरीज को नसों में इंजेक्शन की तुलना में प्रणालीगत जोखिम की कम जोखिम है.

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Disclosures

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

Acknowledgments

लेखकों के लिए तकनीकी सहायता के लिए Mauna Kea टेक्नोलॉजीज का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं. लेखकों को भी तकनीकी सहायता और कैथलीन ई. मच के लिए महत्वपूर्ण समीक्षा के लिए शैली Hsiao धन्यवाद. NIH द्वारा R01CA160986 भाग में यह काम JCL समर्थित किया गया

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cellvizio 100 Series Mauna Kea Technologies 100 Series Includes confocal processor and LSU: F400-v2 at 488 nm
Cellvizio Confocal Miniprobe Mauna Kea Technologies Gastroflex UHD
AK-FLUOR 10% Akorn, Inc. NDC 17478-253-10

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References

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Chang, T. C., Liu, J. J., Liao, J.More

Chang, T. C., Liu, J. J., Liao, J. C. Probe-based Confocal Laser Endomicroscopy of the Urinary Tract: The Technique. J. Vis. Exp. (71), e4409, doi:10.3791/4409 (2013).

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