Summary
optogenetics के विकास अब ठीक आनुवंशिक रूप से परिभाषित न्यूरॉन्स और सर्किट को प्रोत्साहित करने का मतलब है, दोनों प्रदान करता है
Protocol
* संबंधित निर्माताओं और / या विक्रेताओं के साथ साथ सभी सामग्री प्रोटोकॉल नीचे सूचीबद्ध हैं.
1. प्रत्यारोपण की सभा
- राल की 1 ग्राम hardener के 100 मिलीग्राम जोड़कर गर्मी का इलाज फाइबर ऑप्टिक epoxy का एक मिश्रण तैयार करें.
- उपाय और 125 सुक्ष्ममापी यह एक कील की नोक कार्बाइड के मुंशी के साथ स्कोरिंग द्वारा 100 सुक्ष्ममापी कोर के साथ फाइबर ऑप्टिक के लगभग 35 मिमी में कटौती. एक एकल, यूनिडायरेक्शनल गति में ऑप्टिक फाइबर और स्कोर मुंशी सीधा स्थिति. फाइबर काटना पूरी तरह से फाइबर कोर नुकसान होगा.
- एक LC चीनी मिट्टी डालें उपाध्यक्ष में एक 127 बोर सुक्ष्ममापी के साथ सामी, उत्तल नीचे की ओर बताया.
- सामी में ऑप्टिक फाइबर डालें. फाइबर ऑप्टिक आसानी से स्लाइड और सामी (चित्रा 1a) उत्तल अंत से परे मामूली बहर चाहिए.
- फ्लैट अंत और गर्मी के लिए गर्मी बंदूक के साथ गर्मी का इलाज फाइबर ऑप्टिक epoxy की एक बूंद लागू जब तक epoxy काला हो जाता है. epoxy चाहिएसामी के रूप में यह गर्म और इससे पहले के इलाज के भरने के लिए. epoxy ~ लगातार गर्मी आवेदन के एक मिनट के भीतर इलाज करना चाहिए.
- सामी के पक्ष के साथ किसी भी epoxy साफ है, के रूप में यह युग्मक साथ interfacing में बाधा डालती है.
- एल्यूमीनियम चमकाने पैड पर ऑक्साइड चमकाने शीट (चित्रा 1b) पर एक LC फाइबर ऑप्टिक पॉलिश डिस्क (FOPD) का उपयोग सामी की उत्तल अंत पोलिश. परिपत्र रोटेशन पैटर्न बनाने और पॉलिश पर निम्नलिखित क्रम में चार ग्रेड: 5, 3, 1 0.3 सुक्ष्ममापी धैर्य.
- ऐसी है कि यह ब्याज के क्षेत्र लक्ष्य उचित लंबाई के लिए फ्लैट अंत में ऑप्टिक फाइबर कट. लंबाई stereotaxic एटलस का उपयोग निर्धारित किया जा सकता है.
- लेजर युग्मक कॉर्ड नीचे वर्णित के माध्यम से जोड़ने के द्वारा प्रत्यारोपण टेस्ट. प्रत्यारोपण की पॉलिश अंत युग्मक की आस्तीन में डाला जाता है और विरोध सामी के साथ सीधे संपर्क करना चाहिए. प्रत्यारोपण के लिए 10 मेगावाट उत्पादन के प्रकाश को बनाए रखने, वीं की नोक पर मापा करने में सक्षम होना चाहिएई प्रत्यारोपण फाइबर. एक बुरा प्रत्यारोपण फाइबर ऑप्टिक की नोक के पास एक कमजोर केन्द्र बिन्दु होगा.
- स्टोर फोम में समाप्त (चित्रा -1 सी) का उपयोग करें जब तक प्रत्यारोपण.
2. फाइबर ऑप्टिक युग्मक गर्भनाल की सभा
- गर्मी का इलाज ऊपर के रूप में फाइबर ऑप्टिक epoxy का एक मिश्रण तैयार है.
- मापने के लिए और 220 सुक्ष्ममापी 200 सुक्ष्ममापी कोर के साथ यह एक कील की नोक कार्बाइड के मुंशी के साथ स्कोरिंग द्वारा ऑप्टिक फाइबर का एक उचित लंबाई में कटौती. फाइबर की लंबाई माउस आवास के चारों ओर आसानी से स्थानांतरित करने की अनुमति है, लेकिन फाइबर के माध्यम से जुगल करने के लिए माउस की अनुमति नहीं होना चाहिए.
- विशाखन टयूबिंग की लंबाई में फाइबर ऑप्टिक फाइबर ऑप्टिक लंबाई से थोड़ा लंबा डालें. टयूबिंग एक आंतरिक व्यास ऑप्टिक फाइबर से थोड़ा बड़ा होना चाहिए.
- ~ पट्टी 25mm ऑप्टिक फाइबर के एक छोर पर और 230 सुक्ष्ममापी बोर जब तक यह बंद हो जाता है यह एक बहुपद्वति एफसी एम.एम. की धातु के अंत में डालने के साथ विधानसभा सामी. फाइबर ऑप्टिक बाहर ferru के माध्यम से रहना चाहिएle अंत (2a चित्रा).
- धातु अंत में cyanoacrylate (सुपर गोंद) के साथ कनेक्शन सुरक्षित. कवर एक कनेक्टर बूट के साथ संबंध और एक एफसी FOPD के साथ सामी अंत पॉलिश. 5, 3, 1, 0.3 सुक्ष्ममापी धैर्य (चित्रा 2b): परिपत्र रोटेशन पैटर्न और निम्नलिखित क्रम में चार ग्रेड पर पॉलिश.
- पट्टी और उत्तल बाहर का अंत के साथ एक LC सिरेमिक सामी (230 सुक्ष्ममापी आईडी बोर) में ऑप्टिक फाइबर के दूसरे छोर डालने. Epoxy के एक फ्लैट अंत और गर्मी के लिए ड्रॉप लागू जब तक ठीक हो.
- एल्यूमीनियम ऑक्साइड चमकाने शीट पर एक एफसी FOPD का उपयोग कर के रूप में ऊपर वर्णित सामी के उत्तल अंत पोलिश.
- आस्तीन के मध्य तक सामी के उत्तल छोर पर एक नियंत्रण रेखा सामी आस्तीन स्लाइड.
- गर्मी हटना विशाखन टयूबिंग और आस्तीन और गर्मी के लिए सुरक्षित और (चित्रा 2c) कनेक्शन की रक्षा पर टयूबिंग.
- यह लेजर स्रोत जोड़ने और प्रकाश outp को मापने के द्वारा युग्मक टेस्टut युग्मक के माध्यम से एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के साथ. लेजर उत्पादन और मापा युग्मक उत्पादन के बीच प्रकाश नुकसान 30 प्रतिशत से अधिक नहीं होनी चाहिए.
3. सर्जिकल आरोपण
* इस सुझावों केवल एक प्रक्रिया है. उपकरण बाँझ कर रहे हैं लेकिन दस्ताने उपकरणों और उपकरणों के बीच लगातार हेरफेर के कारण होने की जरूरत नहीं है.
- एक intraperitoneal इंजेक्शन / Ketamine Xylazine 100 मिश्रण है और 10 मिलीग्राम / किग्रा क्रमशः 30 गेज सुई का उपयोग करने के साथ माउस anesthetize.
- कतरनी के साथ खोपड़ी दाढ़ी. 70% isopropyl शराब (4% chlorhexidine समाधान) Betasept दो मिनट के लिए मिटा, एक बार दोहरा द्वारा पीछा के साथ खोपड़ी को अच्छे से साफ करें.
- Sterotaxic रिग में माउस रखें और सिर को सुरक्षित, सुनिश्चित करना है कि खोपड़ी स्तर है. आँखों नेत्र मरहम लागू करने के लिए सूखापन और पश्चात दर्द को रोकने के लिए. Volatized isoflurane (1-3% ऑक्सीजन एमओयू की शारीरिक स्थिति पर निर्भर करता है के साथ पतला का उपयोग संज्ञाहरण बनाए रखेंसे), जो लगातार एक पूंछ चुटकी प्रतिक्रिया द्वारा निगरानी की जानी चाहिए.
- खोपड़ी के midline के माध्यम से एक चीरा, आंख कक्षाओं से लैम्ब्डा कपाल को उजागर. आवश्यक के रूप में अलग संयोजी ऊतक पुश.
- Serafin clamps का उपयोग करने के लिए वापस त्वचा पकड़ और बनाए रखने के कपाल (चित्रा 3a) के लिए एक का उपयोग.
- नक़्क़ाशी एक दंत चिकित्सा लेने के साथ कपाल की सतह भर में एक चेकर पैटर्न. मलबे दूर धोने बाँझ खारा के साथ. अच्छी तरह से सूखे.
- ~ 2-3 सेकंड के लिए एक कपास झाड़ू micropores बनाने के साथ उजागर कपाल हाइड्रोजन पेरोक्साइड (3%) लागू करें. कई बार धोएं और अच्छी तरह से सूखे. वैकल्पिक रूप से, एंकर कपाल में खराब हो सकता है, के रूप में स्पार्टा एट अल में वर्णित है. (2012).
- फिर, एक दंत चिकित्सा लेने के साथ कपाल भर खोदना एक चेकर पैटर्न और नमक के साथ मलबे धो लो. अच्छी तरह से सूखे.
- एक रोटरी उपकरण का उपयोग, एक बाँझ ड्रिल बिट के साथ एक छोटे से गड़गड़ाहट छेद craniotomy (<1 मिमी व्यास में)(Autoclaved) से ऊपर ब्याज के क्षेत्र, stereotaxic शीर्षस्थान और लैम्ब्डा calibrated एटलस द्वारा निर्धारित है. ड्यूरा नहीं तोड़ने के लिए या किसी भी ऊतकों को नुकसान सावधान रहो. दूर मलबे धो और अच्छी तरह से सूखे.
- जांच धारक में फाइबर ऑप्टिक सामी (प्रत्यारोपण) डालें और stereotaxic हाथ करने के लिए कनेक्ट.
- स्थिति stereotaxic हाथ (चित्रा 3b) का उपयोग करते हुए हित के क्षेत्र के ऊपर सीधे जगह में प्रत्यारोपण. यदि मस्तिष्क के ऊतकों में ऑप्टिकल फाइबर डालने, फाइबर ~ 2 मिमी / मिनट की दर में धीरे धीरे उन्नत करना चाहिए. सामी शेष कपाल पर आराम करना चाहिए.
- दंत सीमेंट का एक मिश्रण तैयार है. मिश्रण एक काफी कम करने के लिए आसानी से चिपचिपापन कपाल भर में लागू होना चाहिए. मिश्रण 2-4 मिनट के लिए प्रयोग करने योग्य हो जाएगा.
- एक बाँझ दंर्तखोदनी का प्रयोग, कपाल के पार और प्रत्यारोपण के निचले हिस्से पर एक पतली, दंत सीमेंट की परत भी लागू होते हैं. दंत सीमेंट के आधार परत कपाल पर सतह के रूप में ज्यादा क्षेत्र को कवर के रूप में करना चाहिएसंभव है. दंत माउस की त्वचा के साथ संपर्क में आने सीमेंट नहीं करते हैं. यह suturing में वृद्धि हुई कठिनाई के रूप में के रूप में अच्छी तरह से माउस को जलन के लिए नेतृत्व करेंगे. यदि दंत सीमेंट त्वचा के संपर्क में आता है, यह आंशिक रूप से कुछ इस तरह है कि सीमेंट की पूरी परत सेटिंग पहले से खुली कर सकते हैं शुष्क करने की अनुमति देते हैं.
- यह पूरी तरह से सूखे की अनुमति दें.
- भी दंत सीमेंट की परतों को लागू करने के लिए कपाल और प्रत्यारोपण के आसपास एक छोटा सा टीला फार्म, प्रत्येक परत पूरी तरह से सूखे के लिए अनुमति देता है (चित्रा 3c). एक चिकनी, unobstructed कनेक्शन के लिए अनुमति देने के लिए सीमेंट की साफ सामी की उत्तल अंत की ~ 3-5 मिमी छोड़ दें.
- दंत सीमेंट का टीला पर खोपड़ी और बाँझ एक C22 सुई के साथ एकल उपयोग रेशम लट sutures (6-0) का उपयोग इम्प्लांट के आसपास सीवन. 7 दिनों के बाद निकालें. वैकल्पिक: suturing बाद अतिरिक्त बंधन के लिए प्रयोग डॉक्टर बॉण्ड. के लिए कम से कम डॉक्टर बॉण्ड का उपयोग करने के लिए सुनिश्चित करें. अतिरिक्त गंभीर त्वचा scratching के कारण नुकसान हो सकता है.
- Immediately सर्जरी के बाद, माउस subcutaneously Ketprophen (5 मिलीग्राम / किग्रा) के साथ अंतःक्षिप्त किया जाना चाहिए पश्चात दर्द को कम करने. यह 24 घंटे बाद दोहराया जाना चाहिए. Sutured त्वचा और आसपास प्रत्यारोपण के आधार सामयिक (Bupivicaine) दर्दनाशक दवाओं और एंटीबायोटिक दवाओं (Neosporin) लागू करें.
- एक पिंजरे में एक गर्म कंबल पर संज्ञाहरण से वसूली के लिए माउस प्लेस. एक बाँझ, पश्चात की वसूली पिंजरे में माउस रखें. वसूली पिंजरे में कोई बिस्तर नहीं क्रम में तापमान को बनाए रखने के लिए और asphyxiation से बचने चाहिए. माउस मूल पिंजरे या एक नया एक बार जाग पिंजरे को लौट जा सकता है.
फाइबर ऑप्टिक और प्रकाश स्रोत और हित के क्षेत्र में ऑप्टिक फाइबर के अंत के बीच न्यूनतम फोटॉन नुकसान में समाविष्ट युग्मक परिणाम का समुचित विधानसभा. अच्छी तरह से पॉलिश फाइबर ऑप्टिक्स, गाढ़ा चक्र (चित्रा 2d) की वर्दी में प्रकाश संचारित करना चाहिए. सावधान आरोपण और suturing, प्रत्यारोपण के लिए नहीं दिखाई जलन का कारण बनता हैमाउस और लंबे समय तक अध्ययन (चित्रा 3 डी,> 1 महीने, अप्रकाशित टिप्पणियों) के लिए जगह में फाइबर ऑप्टिक या प्रेषित प्रकाश की राशि का कोई महत्वपूर्ण गिरावट के बिना रह सकते हैं. अनुचित आरोपण या suturing जलन पैदा कर सकता है और अपने खोपड़ी के माध्यम से scratching माउस में परिणाम कर सकते हैं, लगातार हेरफेर करने के लिए कारण दंत सीमेंट, या दंत सीमेंट से सामी का टूटना को उजागर कर सकते हैं. इकट्ठे प्रणाली के एक योजनाबद्ध आरेख चित्रा 4 में देखा जा सकता है.
चित्रा 1 implantable फाइबर ऑप्टिक्स की सभा. (एक) फाइबर ऑप्टिक सामी में डाला जाता है, मामूली उत्तल arrowhead द्वारा संकेत दिया अंत से परे फैला हुआ है. (ख) सामी की उत्तल अंत चमकाने चादरों की उत्तरोत्तर महीन ग्रेड पर एक FOPD का उपयोग कर पॉलिश है. (ग) समाप्त implantable फाइबर ऑप्टआईसी. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
2 चित्रा विधानसभा फाइबर ऑप्टिक युग्मक के प्रत्यारोपण के लिए फाइबर ऑप्टिक रोटरी संयुक्त पगहा के लिए प्रयोग किया जाता है. (क) सामी विधानसभा के माध्यम से फाइबर ऑप्टिक चिपके. (ख) विधानसभा के सामी की ओर चमकाने कागज के FOPD और पॉलिश का उपयोग उत्तरोत्तर महीन ग्रेड में डाला जाता है. (ग) सामी आस्तीन सामी पर फिट है और गर्मी हटना टयूबिंग के साथ सुरक्षित है. (घ) समाप्त हो फाइबर ऑप्टिक युग्मक न्यूनतम फोटॉन हानि के साथ एक गाढ़ा प्रकाश का उत्पादन करना चाहिए.
चित्रा 3 सर्जिकल आरोपण फाइबर ऑप्टिक्स. (एक) craniu की पूरी सतहमीटर खुल रहा है और संयोजी ऊतक को मंजूरी दे दी है. (ख) फाइबर ऑप्टिक प्रत्यारोपण stereotaxic भुजा के साथ स्थिति में आयोजित किया जाता है. (ग) चिकित्सकीय सीमेंट कपाल के लिए फाइबर ऑप्टिक प्रत्यारोपण फिक्सिंग लागू किया जाता है. (घ)> 1 महीने आरोपण के बाद, त्वचा प्रत्यारोपण के आसपास चंगा किया है और वहाँ जलन के कोई संकेत नहीं हैं.
चित्रा 4 कार्यात्मक प्रणाली के योजनाबद्ध आरेख.
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Discussion
Optogenetics एक शक्तिशाली नई तकनीक है कि विशिष्ट neuronal उपप्रकारों में अभूतपूर्व नियंत्रण की अनुमति देता है. यह शारीरिक और अस्थायी परिशुद्धता के साथ तंत्रिका सर्किट व्यवस्थित शोषण किया जा सकता है, जबकि एक इलेक्ट्रोड के माध्यम से सेल प्रकार के अंधाधुंध और बिजली की उत्तेजना के आक्रामक प्रभाव से परहेज. फाइबर ऑप्टिक्स के आरोपण जाग में लगातार कई सत्रों में तंत्रिका सर्किट के पुराने उत्तेजना के लिए अनुमति देता है, ऊतकों को कम से कम नुकसान के साथ चूहों बर्ताव. इस प्रणाली है, मूल रूप से स्पार्टा एट अल द्वारा बीड़ा उठाया 8 और हमारे उद्देश्यों को फिट करने के लिए संशोधित, प्रत्यारोपित प्रवेशनी एक कदम आगे चला जाता है और ब्याज के क्षेत्र में जगह में फाइबर ऑप्टिक को हल करता है सुनिश्चित करने के लिए लंबे समय तक अध्ययन में सत्र के बीच लगातार लक्ष्यीकरण. प्रत्यारोपण के लिए मस्तिष्क के विभिन्न क्षेत्रों को प्रोत्साहित करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है.
इस विधि के भीतर विभिन्न कदम सटीक और विस्तार करने के लिए ध्यान देने की आवश्यकता होती है. फाइबर ऑप्टिक युग्मन के प्रत्येक जंक्शनजरूरी न्यूनतम प्रकाश नुकसान सुनिश्चित पॉलिश है. चमकाने के बाद, छोर को सत्यापित करें कि फाइबर कोर को कोई नुकसान नहीं है के लिए एक खुर्दबीन के नीचे जांच की जानी चाहिए. यदि स्रोत और मापा उत्पादन के बीच प्रकाश नुकसान 30% से अधिक है, प्रत्येक भाग के लिए अधिकतम फोटॉन प्रवाह या भाग खारिज किया जाना चाहिए की अनुमति और repolished पुनर्निर्माण किया जाना चाहिए. यदि सामी आस्तीन में स्लाइड नहीं करता है, वहाँ सामी निरोधक आस्तीन के अंदर होने की संभावना मलबे है. जब संलग्न और प्रत्यारोपण युग्मक कॉर्ड को हटाने, बल सीधे प्रत्यारोपण के अक्ष के समानांतर लागू किया जाना चाहिए. तथ्य यह है कि स्तनधारी ऊतक scatters भारी प्रकाश और नीले प्रकाश की अपेक्षाकृत कम ऊर्जा, प्रत्यारोपण है कि इस तरह के फाइबर की नोक ब्याज के क्षेत्र के 500 मीटर के भीतर तैनात किया जाना चाहिए कारण जहां> प्रारंभिक प्रकाश शक्ति घनत्व के 10% 6 बनी हुई है. आरोपण के दौरान, दंत सीमेंट के आधार परत महत्वपूर्ण कदम है, के रूप में यह इस परत है कि क्रैन प्रत्यारोपण को हल करता है हैium. बाद परतों आधार परत प्रत्यारोपण सुरक्षित और सुरक्षा प्रदान करते हैं. आधार परत अच्छी तरह से पालन नहीं अगर कपाल पूरी तरह से सूखा नहीं है, अगर किसी भी खंड में अच्छी तरह से पालन नहीं किया है, यह संभावना है कि माउस से हेरफेर पूरे प्रत्यारोपण हटाना होगा. वैकल्पिक रूप से, दंत सीमेंट के लिए एंकर cranium में एक अधिक सुरक्षित स्थिरता के लिए दबाव डाला जा सकता है.
व्यवहार के अध्ययन में, बाहरी प्रकाश रिसाव माउस को एक अनपेक्षित क्यू प्रदान कर सकता है. बाहरी प्रकाश रिसाव और माउस पर सीधे युग्मक कॉर्ड प्रत्यारोपण के बीच संबंध होने की संभावना है. आदेश में प्रकाश रिसाव को कम करने के लिए, गर्मी हटना टयूबिंग आगे ऐसी है कि यह पूरी तरह से सामी आस्तीन कवर अतिरिक्त प्रदान रिसाव के खिलाफ परिरक्षण बढ़ाया जा सकता है. यदि यह विकल्प अपनाई है, टयूबिंग गर्मी हटना आस्तीन में खिड़की है कि ferrules और संपर्क के बीच सीधे संपर्क के लिए दृश्य प्रतिक्रिया प्रदान करता है को कवर किया जाएगा स्पर्श शुल्क के साथ निर्धारित किया जाना चाहिएdback.
इस तकनीक के विकास की दिशा में आगे, यह संभव है कि एक एकल अतिरिक्त stereotaxic हथियार, रूप में स्पार्टा एट अल 8 में वर्णित का उपयोग माउस पर कई फाइबर ऑप्टिक्स प्रत्यारोपण. यह एक ही क्षेत्र में एक अस्थायी विशिष्ट तरीके से या विभिन्न क्षेत्रों के साथ उत्तेजना में अंतर तरंगदैर्ध्य उत्तेजना के माध्यम से और अधिक जटिल अध्ययन सक्षम होगा. इसके अतिरिक्त, फाइबर ऑप्टिक्स स्थानीय उत्तेजना और लिए vivo इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी में रिकॉर्डिंग के लिए इलेक्ट्रोड (optrode) के साथ मिलकर किया जा सकता है.
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Acknowledgments
हम स्वीकार करते हैं कि इस तकनीक का मूल Sparta एट अल., 2012 द्वारा वर्णित किया गया था और आसानी से हमारी प्रयोगशाला में प्रयोग के लिए अनुकूलित किया गया है के लिए करना चाहते हैं.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
LC Ferrule Sleeve | Precision Fiber Products (PFP) | SM-CS125S | 1.25 mm ID |
FC MM Pre-Assembled Connector | PFP | MM-CON2004-2300 | 230 μm Ferrule |
FC MM Pre-Assembled Connector | PFP | MM-CON2004-2300 | 230 μm Ferrule |
Miller FOPD-LC Disc | PFP | M1-80754 | For LC ferrules |
Furcation tubing | PFP | FF9-250 | 900 μm o.d., 250 μm i.d. |
MM LC Stick Ferrule 1.25 mm | PFP | MM-FER2007C-1270 | 127 μm ID Bore |
MM LC Stick Ferrule 1.25 mm | PFP | MM-FER2007C-2300 | 230 μm ID Bore |
Heat-curable epoxy, hardener and resin | PFP | ET-353ND-16OZ | |
FC/PC and SC/PC Connector Polishing Disk | ThorLabs | D50-FC | For FC ferrules |
Digital optical power and Energy Meter | ThorLabs | PM100D | Spectrophotometer |
Polishing Pad | ThorLabs | NRS913 | 9" x 13" 50 Durometer |
Aluminum oxide Lapping (Polishing) Sheets: 0.3, 1, 3, 5 μm grits | ThorLabs | LFG03P, LFG1P, LFG3P, LFG5P | |
Standard Hard Cladding Multimode Fiber | ThorLabs | BFL37-200 | Low OH, 200 μm Core, 0.37 NA |
Fiber Stripping Tool | ThorLabs | T10S13 | Clad/Coat: 200 μm / 300 μm |
SILICA/SILICA Optical Fiber | Polymicro Technologies | FVP100110125 | High -OH, UV Enhanced, 0.22 NA |
1x1 Fiberoptic Rotary Joint | doric lenses | FRJ_FC-FC | |
Mono Fiberoptic Patchcord | doric lenses | MFP_200/230/900-0.37_2m_FC-FC | |
Heat shrink tubing, 1/8 inch | Allied Electronics | 689-0267 | |
Heat gun | Allied Electronics | 972-6966 | 250 W; 750-800 °F |
Cotton tipped applicators | Puritan Medical Products Company | 806-WC | |
VetBond tissue adhesive | Fischer Scientific | 19-027136 | |
Flash denture base acrylic | Yates Motloid | ColdPourPowder+Liq | |
BONN Miniature Iris Scissors | Integra Miltex | 18-1392 | 3-1/2"(8.9cm), straight, 15 mm blades |
Johns Hopkins Bulldog Clamp | Integra Miltex | 7-290 | 1-1/2"(3.8 cm), curved |
MEGA-Torque Electric Lab Motor | Vector | EL-S | |
Panther Burs-Ball #1 | Clarkson Laboratory | 77.1006 | |
Violet Blue Laser System | CrystaLaser | CK473-050-O | Wavelength: 473 nm |
Laser Power Supply | CrystaLaser | CL-2005 | |
Dumont #2 Laminectomy Forceps | Fine Science Tools | 11223-20 | |
Probe | Fine Science Tools | 10140-02 | |
5"Straight Hemostat | Excelta | 35-PH | |
Vise with weighted base | Altex Electronics | PAN381 |
References
- Boyden, E. S., Zhang, F., Bamberg, E., Nagel, G., Deisseroth, K. Millisecond-timescale, genetically targeted optical control of neuronal activity. Nat Neurosci. 8, 1263-1268 (2005).
- Arenkiel, B. R. In Vivo Light-Induced Activation of Neural Circuitry in Trangenic Mice Expressing Channelrhodopsin-2. Neuron. 54, 205-218 (2007).
- Gradinaru, V. Molecular and cellular approaches for diversifying and extending optogenetics. Cell. 141, 165-16 (2010).
- Luo, L., Callaway, E. M., Svoboda, K. Genetic dissection of neural circuits. Neuron. 57, 634-660 (2008).
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- Zhang, F. Optogenetic interrogation of neural circuits: technology for probing mammalian brain structures. Nat. Protoc. 5, 439-456 (2010).
- Adamantidis, A. R., Zhang, F., Aravanis, A. M., Deisseroth, K., de Lecea, L. Neural substrates of awakening probed with optogenetic control of hypocretin neurons. Nature. 450, 420-424 (2007).
- Sparta, D. R. Construction of implantable optical fibers for long-term optogenetic manipulation of neural circuits. Nature Protocols. 7, 12-23 (2012).
- Stuber, G. D. Excitatory transmission from the amygdala to nucleus accumbens facilitates reward seeking. Nature. 475, 377-380 (2011).
- Liu, X. Optogenetic stimulation of a hippocampal engram activates fear memory recall. Nature. 484, 381-385 (2012).