Summary
폐는 전신 기관지 동맥과 폐동맥 동맥 모두에서 perfused 있습니다. 대부분의 폐 pathologies에서는 강력한 neovascularization을 보여주는 작은 조직 vasculature입니다. 폐 혈액 흐름의 중단이 활발 기관지 혈관 신생을 촉진합니다. 우리는 기관지 neovascularization을 촉진 좌측 폐동맥의 국소 빈혈을 일으킬 외과 세부 정보를 제공합니다.
Abstract
성인 폐는 전신 기관지 동맥과 폐동맥 동맥을 통해 흐르는 전체 정맥 반환 모두에 의해 perfused 있습니다. 대부분의 폐 pathologies에서는 향상된 폐 관류에 대한 필요에 응답하고 강력한 neovascularization을 보여주는 작은 조직 vasculature입니다. 폐 동맥 방해에 의해 유도 폐 혈관 국소 빈혈은 사람의 급속한 전신 동맥 혈관 신생뿐만 아니라 여러 동물 모델에서 결과로 표시되었습니다. 쥐의 기관지 동맥 확산의 시간 코스의 histologic 평가는 신중하게 Weibel 1 설명되었지만, 새로운 혈관의 조직 성장을위한 책임이 메커니즘은 명확하지 않습니다. 우리는 기관지 neovascularization로 연결 쥐에서 좌측 폐동맥의 국소 빈혈을 일으킬 외과 세부 정보를 제공합니다. 혈관 신생의 정도의 정량화는 폐 내의 두 혈관 침대의 존재로 인해 추가 과제를 제공합니다. 방법표시 microsphere 주사에 따라 기능 혈관 신생을 결정하기 위해 제공됩니다.
Introduction
폐의 조직 혈관 신생은 잘 인식됩니다. 이러한 천식 2, 간질 폐 섬유증이 3 암 4 및 만성 폐 thromboembolism 5의 전신 vasculature과 폐 실질 폐 proliferates 주변과 침공과 같은 질병 상태에서. 그러나, 조직의 차동 활성화보다는 폐 순환을 공부하는 동물 모델은 몇 가지 있습니다. 아마도 성인 포유 동물의 폐에 조직 neovascularization의 가장 재현 모델은 만성 폐 동맥 국소 빈혈을 유도 한 후 발생하는 것입니다. 5-7 인간 좌측 폐동맥 폐쇄에 대한 반응은, 개 8, 돼지 9, 양 10, 기니 돼지 11, 쥐 1, 12, 13 및 마우스 14 기관지 동맥뿐만 아니라 갈비 사이 동맥의 급속한 확산이다. 전신 neovasculari에 대한 책임 메커니즘폐 국소 빈혈 후 폐의 zation은 대부분 알 수없는 널리 연구되지 않았습니다. 좌측 폐동맥 폐쇄 후 쥐의 기관지 혈관 신생의 시간 코스는 신중하게 Weibel 1의 histologic 작품에 설명되어 있습니다. 쥐에이 작품 확장, 저희 연구실이 과정에서 중요한 성장 요인뿐만 아니라 폐에서이 neovasculature의 physiologic 결과 모두에 초점을 맞추고있다. 결과가 CXC 케모카인의 CINC-3은 초기 국소 빈혈 후에 CXCR2에 중화 항체를 쥐를 치료 올라간다 보여, CINC-3 수용체는 혈관 신생 13 attenuates. 십사일 폐 국소 빈혈의 발병 후 새로 설립 된 기관지 vasculature 수가 크게 증가 단백질 투자율 15 이상으로 표시했습니다. 왼쪽 폐 기능은 diffusing 용량과 폐 볼륨 15 감소 감소 일반 게재되지 않았습니다. neovasculature가 공동있을 수 있습니다 있지만만성 폐 국소 빈혈 동안 폐 조직의 보존에 ntributed, 그것은 정상하고 폐 기능의 지속적인 감소에 기여할 수는 없습니다 나타납니다.
아마도이 모델의 가장 호기심 측면 중 하나는 혈관을 proliferating의 공간적 분포에 관한 것이다. 국소 빈혈로 인한 폐 실질 조직 내에서의 성장 요인의 출시에도 불구하고, neovasculature이 상대적으로 큰 업스트림 기관지 동맥에서 유래 된 것입니다. 정상적인 기관지 동맥은 대동맥에서 작은 지점으로 발생하고 카리나의기도 트리를 침공. 따라서 성장 요인 arteriogenesis의 초기 단계를 유도하는하여 메커니즘은 명확하지 않습니다. 우리는 쥐가 인간과 비슷한 혈관 해부학 적으로 폐 국소 빈혈 동안 전신 혈관 신생을 담당하는 메커니즘을 연구 할 수있는 독특한 기회를 제공하는 것이 좋습니다. 좌측 폐동맥의 완전한 방해가 인간의 과목에서 드문이지만하면,증가 기관지 vascularity는 유사 환자에서 유도 할 것으로 보인다 폐동맥 폐쇄 (16)의 어떤 사이트와 크기입니다. 따라서, 우리는 쥐의 왼쪽 폐 동맥과 혈관 신생의 정도를 수량화 할 수있는 수단을 ligate 할 수있는 수술 방법에 대한 자세한 설명을 제공합니다.
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Protocol
쥐에서 수행 모든 프로토콜은 존스 홉킨스 대학 동물 관리 및 사용위원회와 NIH의 지침에 따라 승인되었습니다. 가능하면 동물은 수술 외과 사이트의 오염을 최소화하기 위해 수술 영역에서 별도의 지역에 준비해야합니다.
1. 마취 / 무통
- 3퍼센트 isoflurane과 함께 주입 유도 챔버에서, 장소 쥐 (할렌, 인디애나 폴리스, IN Sprague Dawley 남성의 쥐, 125~150그램).
- 3퍼센트 isoflurane 마취와 코 콘과 환풍기에 연결된 수술 보드에 anesthetized 쥐를 놓습니다. 모든 절차에 대한 무균 기술을 사용합니다. 멸균 운영 필드를 보장하기 위해 쥐를 내리면 t.
2. 삽관 법
- 외과 테이프를 사용하여 부정사 위치에 부속을 고정.
- 코 콘에서 쥐를 제거 패딩 집게로 혀를 확장합니다.
- 가이드로 무딘 금속 stilet와 14 게이지 intracath을 사용합니다. 에 뒤에 슬라이드기관에 ngue.
- 기관에 흰색 플라스틱 intracath을 떠날 금속 stilet를 제거합니다. 쥐 호흡하며 공기가 튜브를 통하여 흐르는 확인하십시오.
- 카테터에 직접 어댑터 코 콘을 교체, 환풍기 (, 8 ML / kg 갯벌 볼륨, 설치류 환풍기 모델 683, 하버드 장치, Holliston, 매사추세츠 90 숨 / 분)에 쥐를 연결합니다.
- Puralube (버틀러 Schein, 더블린, OH) 눈에 수의학 연고를 적용 할 수 있습니다.
3. Thoracotomy
- 장소 쥐 오른쪽 아래, 외과 테이프를 사용하여 부속을 고정.
- 왼쪽 흉곽 영역을 면도.
- 작은 진공과 초과 털을 제거합니다.
- Povidone - 요오드 swabstick (Dynarex 공사, Orangebur, NY)에 의해 다음 알코올로 닦고하여 살균 필드를 확인합니다. 이 과정을 두 번 이상 (3 스크럽 총)을 반복합니다.
- 필드의 중앙에 메스 멸균 해부 가위 또는 멸균과 횡 방향의 절개를합니다.
- 리터를 해부 퉁명아래 갈비 (마지막 층은 갈비를 덮고 얇은 막입니다)에 조직과 지방의 에어.
- 3 늑간 공간을 결정하기 위해 갈비뼈를 계산합니다.
- 멸균 45 ° Graefe 집게를 사용하여 3, 4 번째 갈비뼈 사이의 무딘 절개를합니다.
- , 갈비뼈 구분 기호를 삽입 부드럽게 개방 유지하기 위해 봉합에 열려있는 폐의 전체 시각화와 무효, 장소 테이프를 만드는 당긴다.
4. 좌측 폐동맥의 결합
- 90 ° Graefe의 포셉으로 오른손으로 다시 왼쪽 폐를 이동합니다.
- 뒤몽 패턴을 # 5 바로 집게를 사용하여, 왼쪽 손으로 왼쪽 폐 동맥과기도를 잡아. 왼쪽 폐동맥기도 위에 누워 것입니다. 포셉은 테이블에 직접 수직 있는지 확인합니다. 또한, 그것은 가장 말초 위치 (실질에 가장 가까운)에서 좌측 폐동맥 왼쪽 / mainstem의 기관지을 수령 것이 가장 효과적입니다. 이 왼쪽 기동과 옆 환기 왼쪽 폐를 밀어 넣습니다.
- 뒤몽을 사용패턴 # 5 45 °의 자연 국경에서 왼쪽 mainstem의 기관지에서 왼쪽 폐동맥을 분리 곡선 포셉. 이 분리 라인은 두 개인 구조 사이의 얇고 흰 나타납니다.
- 혈관을하지 않고 동맥에서 바로 분리, 부드럽게 분리를 따라 함께 개최 포셉 팁을 끼 웁니다.
- 포셉의 팁이 가시적 왼쪽 폐 동맥과 왼쪽 mainstem의 기관지를 분리 할 때까지 계속합니다. 팁의 작은 점은 완전히 통해 있어야합니다. 혈액 포셉의 끝에서 시각화 할 수 있다면, 그것은을 통해 완전히되지 않고 결합을 시도하지 않아야합니다. 일단 공간을 통해 왼쪽 폐동맥 포셉의 곡선에 누워 것입니다. 이 위치에 잡아.
- 부드럽게 직선 무딘 집게 그립 (왼쪽)을 공개하고 사전 절단 봉합 (~ 2~3인치, 폴리 프로필렌 봉합사 크기 6-0, Myco 의료, 캐리, NC)의 조각을 잡아.
- 좌측 폐동맥와 g를 데리고 곡선 포셉을 엽니 다랩의 봉합. 부드럽게 포셉의 곡선에 상대적으로 상승 운동에 좌측 폐동맥과 왼쪽 mainstem의 기관지 사이의 공간을 통해 봉합사를 당겨.
- 사각형 매듭과 왼쪽 폐, 봉합의주의 싹둑 나머지 부분을 occluding 아래로 묶어주세요.
- (파란색 모노 필라멘트) 폴리 프로필렌으로 두 번 갈비뼈와 봉합을 보유하는 무딘 집게를 사용하여 닫기 갈비 크기주의하지로하는 것 19mm, hemostat에 바늘을 (Myco 의료, 캐리, NC) 절단 8분의 3 원 역에 첨부 4-0 봉합 피부 (단 갈비).
- 느슨한 광장 매듭을 완료, 긍정적 인 엔드 - 날숨 압력 (따위가 나오기 시작, 2-5 cmH 2 O)에, 장소를 폐를 부풀려, 단단히 폐 후 안전한 매듭을 hyperinflate하고, 봉합의 나머지 부분을 snipping 전에 다른 모든 매듭을합니다. 따위가 나오기 시작에서 제거하고 폐는 붕괴하지 않도록 30 초에 표시합니다. 5 물방울 Bupivicaine을 (APP 제약, Schaumbur, IL) 적용됩니다.
- 닫기 상처를 조직 접착제를 삽입하여 피부와 함께 피부를 밀어은 전용 다시 사용면 팁 작은 주걱의 D. 이후 절개의 위치 24 시간마다 8 시간이나 동물이 정상적인 활동을 다시 시작 때까지 Bupivicaine (2.0 밀리그램 / kg 피하)를 제공합니다. 이 지역의 피하 층은 매우 얇은으로, 이것 자체로는 치료해야 쉽지 않다. 조직 접착제가 적용되고 피부가 두명이 경우 또한 피하 층을 닫습니다.
- isoflurane 가스를 해제하지만, 자발적인 움직임을 반환 할 때까지 실내 공기에 1-2 분 동안 쥐를 환기하고 있습니다. 환풍기에서 tracheal 튜브를 분리하고 쥐를 제거하기 전에 자발적 호흡이되어 있는지 확인합니다.
- 면봉 및 모니터 운동 및 복구와 눈에서 Puralube을 닦아주십시오. (0.05 MG / kg intraperitoneal, 버틀러 Schein, 더블린 OH) buprenorphine 히드로 클로라이드를 삽입. 수술 후 48 시간에 대한 진통제 매 12 시간 배달을 계속합니다.
5. 왼쪽 경동맥 동맥 Cannulation
기관지 perfus의 크기를 평가하려면좌측 폐동맥의 결합 후 원하는 시간 지점에서 허혈성 왼쪽 폐의 이온은, 대동맥으로 왼쪽 경동맥을 통해 표시 마이크로를 삽입. 1-2 위와 같이 쥐를 준비합니다.
- 목을 따라 중간 선을 잘라 기관과 왼쪽 경동맥 (microsphere 분사 사이트)를 나타 내기 위해 해부 퉁명.
- 25g 바늘, 4 방향 꼭지, 1 ML의 주사기에 연결된 용기로 PE20 튜브 (Becton 디킨슨, MD를 스파크)의 heparinized 생리, 무딘 팁이 가득 카테터를 삽입합니다.
- 물 sonicator에서 30 초 동안, 마이크로 (Invitrogen, 유진, 또는 X 10 6 영역 / ML 15 μm 진홍의 폴리스티렌 형광 마이크로, 1) 장소 병.
- 병, 소용돌이를 제거하고 20g 바늘을 통해 1 ML 해밀턴 유리 주사기 (해밀턴 회사, 리노 NV)에 0.5 ML (50 마이크로을)를 그립니다.
- 4 방식 꼭지에 해밀턴 주사기를 첨부 주사기 펌프 (속도로 마이크로을 불러 일으킬 : 500 μl / 분, 지니 플러스, 켄트 과학, Torringt) 코네티컷 있습니다.
- 500 μl / 분에서 heparized 생리의 1 ML과 해밀턴 주사기와 수세식 장치를 제거합니다.
- 전체 가슴 thoracotomy을 수행하고 아래 대정맥을 severing하여 쥐를 ...에게서 피를 뽑다.
- 왼쪽 폐와 관심의 다른 조직을 제거합니다.
- 조직에서 마이크로 압축을 풀려면 일어난 과다 출혈 후 쥐의 전체 좌측 폐를 타고 2M 코 (4-6 ML)에 배치합니다. 55 ° C의 물을 욕조에 장소와 조직 소화 밤새 둡니다. , 구슬을 씻어 소용돌이 (10 초)과 원심 분리기를 (; 10 분 20 ° C 2,000 RPM) 십대 초반 80 (0.25 %)를 추가합니다. , 표면에 뜨는을 제거합니다 2 ethoxyethyl 초산 (1 ML), 소용돌이를 추가하고 1 시간에 서 보자. 소용돌이 정지 및 원심 분리기 (2,000 RPM, (20 ° C 10 분 용) 히타치 F-2500 형광 분광 광도계를 사용하여 큐벳과 방법으로 형광, 장소를 포함하는 2 ethoxyethyl 초산 수용액 층 (여기 612/emission 618를 제거합니다. , Digilab, Holliston, MA).
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Representative Results
혈관 캐스트 : 쥐의 좌측 폐동맥의 국소 빈혈의 효과의 결과는 그림 1에 설명되어 있습니다. 표시하면 기관지 vasculature의 메타 크릴 레이트 캐스트와 28일 LPAL 후 왼쪽기도 트리의 광범위한 vascularity입니다. 이 캐스트를 얻으려면 조직 vasculature는 내림차순으로 대동맥에 역행, 메타 크릴 레이트 혼합물 (빨간색)로 주입하였으며, 기관은 cannulated과 흰색 실리콘 기반 소재로 주입되었다. 이 혈관 캐스트 폐의 기관지 혈관 신생의 놀라운 시각화를 제공합니다. 특히 주목할만한 왼쪽 폐의 크고 고통스러운 상류 기관지 혈관이 있습니다. 이 이미지에 표시되지 않지만, 오른쪽 기관지가 정상, 외로운, 오른쪽 기관지 동맥을 제외하고 대형 선박의 근본적 결여입니다.
조직학 :기도 vascularization의 변화는 histologic 섹션 그림 2에 표시됩니다 왼쪽 폐에 시각화. Bronchial 혈관 LPAL가 표시됩니다 3 일 14 일 후에 관찰했다. 그림 2A 3 일이 LPAL 후 왼쪽 폐에서기도 섹션을 보여줍니다. 기도 벽 내에 위치한 유명 기관지 혈관을 확인합니다. 삽입은 PCNA (세포 핵 항원을 proliferating)에 대한 2A의 스테인드의 직렬 섹션에서입니다. 기관지 혈관을 늘어서 PCNA 긍정적 인 내피 세포를 확인합니다. 그림 2B 14 일 LPAL 후 쥐에서 왼쪽 폐 부분을 보여줍니다. 이 시점에서 기관지 혈관과 시든 폐 동맥의 증가 크기를합니다.
기능성 혈관 신생 : 기관지 동맥을 통해 왼쪽 폐의 조직 재관류의 크기를 평가하기는 형광 마이크로는 모든 마이크로은 심장 출력의 일부로 대동맥 활에 섞인 등의 occluded 왼쪽 경동맥에 주입했다. microsphere의 크기 (15 μm)에서 형광 순진의 왼쪽 폐의 거의 들키지 않고했다쥐. 그러나 쥐의 왼쪽 폐에서 측정 상당한, 중요하고 일관된 수준의 14 일 LPAL 후 공부가 발생했습니다.
그림 1. 좌측 폐동맥의 결합 (LPAL) 후 왼쪽 기관지 (흰색) 28 일 동안 관련된 고통스러운 neovasculature의 레드 메타 크릴 레이트 캐스트.
그림 2A. 삼일 좌측 폐동맥 (PA) 큰 폐동맥에 인접한 기관지 혈관을 보여주는 결합 후 왼쪽 쥐 폐에서기도 절을 참조하십시오. 삽입은 기관지 동맥의 내피 세포 (BA)를 proliferating 식별 할 수 PCNA 물들 시리얼 섹션을 보여줍니다. 거리 바는 200 μm을 나타냅니다.
<IMG SRC = "/ files/ftp_upload/50217/50217fig2B.jpg"ALT = "그림 2B"/>
그림 2B. 왼쪽 폐 부분 14 일 LPAL 후 쥐에서 촬영. 기관지 동맥의 크기에 상당한 증가합니다. 거리 바 500 μm을 나타냅니다.
그림 3 좌측 폐동맥의 결합 후 순진 쥐 (n은 = 2 쥐) 14 일의 왼쪽 폐에 박혀 형광 마이크로 분석. (LPAL, n은 = 3 쥐).
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Discussion
테스트 모든 종의 좌측 폐동맥의 결합은 허혈성 폐의 강력한 조직 neovascularization로 연결됩니다. 우리는 쥐 모델에서 수술 방법의 세부 사항을 제시하고 있습니다. 우리의 결과는 혈관 주조, 조직 병리학에서 생산 및 생체 라벨에 기관지 동맥 세포 분열 따위에 의해 번식을 명시하고 폐 실질을 perfuse. 따라서, 기관지 혈관 신생의 메커니즘은 만성 폐 thromboembolism의 인간의 상태를 패러랠 동물 모델에서 공부 할 수 있습니다. 또한이 임상 적으로 관련성이 높은 작은 동물 모델은 인간의 실험을 계속할 수있는하지 형태와 neovascularization의 기능을 연구 할 수있는 기회를 제공합니다.
나열된 수술 절차는 수술 경험이있는 동물 기술자가 신속하게 이러한 기술을 습득 할 수 있도록 충분한 세부 사항을 제공합니다. 우리의 관측 Sprague Dawley 남성에서 주로되었습니다 있지만쥐 (75~1백g)는 다른 변종은 연구 동등하게 적합합니다. 우리는 체계적으로 기관지 혈관 신생의 정도의 나이 의존도를 평가하지 않았습니다. 우리는 또한 왼쪽 경동맥 동맥의 cannulation에 대한 세부 정보를 제공합니다. 우리는 역행 왼쪽 경동맥에 주입 형광 마이크로의 측정을 사용한 적이 그 허혈성 폐의 조직 재관류 및 결과적으로, 기능 혈관 신생을위한 마커로 대동맥과 왼쪽 폐에 이후 비밀 결사에 섞는다. 이 측정 주입의 시간 동안 심장 출력의 변화로 인해 변수를받을 수 있음을 인정합니다. 그러나, 지속적으로이 측정 절차 이전과 동안 쥐의 전신 혈압의 동시 측정은 심장 혈관 상태에 변경 사항을 표시하지 않습니다. 또한, 그림 3에 제시 결과는 쥐의 그룹 내 변화의 작은 허용 범위를 보여줍니다. 흥미롭게도, 순진한 동물 minimall을 보여 주었다형광 Y 감지 수준은 정상 쥐의 매우 낮은 기관지 재관류을 제안. 작은 크기의 마이크로을 사용하면 재관류의 다른 기저 수준의 검출을 허용 할 수 있습니다.
우리의 결과는 LPAL 후 28일하여 잘 발달 vasculature을 보여줍니다. 왼쪽 기관지와 관련된 기관지 혈관의 메타 크릴 레이트 캐스트는 광범위한 고통스러운 neovasculature의 놀라운 전망을 제공 폐 국소 빈혈에 대응 양식이. 아마도 덜 드라마틱하지만, 혈관 캐스트와 일치 십사일 LPAL (그림 2B) 후 왼쪽 폐의 histologic 섹션에서 얻은 이미지입니다. 쥐가 표시 섹션을 사전에 조직의 수확에 exsanguinated했다. 삼일 LPAL (그림 2A) 이후에 얻은 왼쪽 폐의 조직 학적 섹션에 기관지 혈관의 크기를 비교할 때 그러나, 기관지 혈관의 성장은 특히 확실하다. 기관지 내피는 명확한 징후를 보여줍니다확산은 PCNA의 착색을 사용하여 평가합니다. 따라서 혈관 신생의 과정은 발병 폐 국소 빈혈 후 초기 시작됩니다.
neovasculature의 범위를 결정하기위한 방법은 기관지 선박 및 혈관 캐스팅을 관류, 완벽한 기능의 microsphere 측정에 기관지 내피를 proliferating의 조기 histologic 평가에서 원거리 있습니다. 우리의 목적은 시간이 지남에 따라 기관지 혈관 신생 과정의 관점을 제공하는 것입니다. 선박 계산을 Proliferating하면 계산의 정밀도, 적절한 샘플 크기,기도와 관련된 선박은 초기 혈관 신생의 주요 궤적 있다는 가정이 필요합니다. 폐에 마이크로 숙박의 평가는 완전히 발달 혈관 형성 vasculature, 따라서 늦은 현상을 필요로합니다. 또한, 방법은 절차를 수행하는 동안, 주입하는 동안 심장 출력에 변화를 영역의 혼합 충분한을지지 않습니다, 그리고 제기 spher의 수에 해당 변경 사항을에스는 선박이 아니라 vasoreactivity의 변화를 관류의 수의 변화를 반영합니다. 우리는 더 나은 일반적으로 두 개의 혈관 침대와 폐 네트워크 국소 빈혈 동안 특허 유지하는 것으로이있는 기관에 조직 혈관 신생의 프로세스를 정의 할 수있는 지속적인 도전을 인정합니다. 쥐의 내피 라벨 histochemically 두 vasculatures을 분리 고유 한 혈관 형성 표현형을 입증하지 않았습니다. 생체에서 이미지가 ventilatory과 심장 운동 모두에 의해 방해된다. 우리는 더 큰 정밀도와 neovascularization의 범위를 정할 추가 방법을 검색하고 있습니다. 문제는 다른 비 관류 폐 모세 혈관 네트워크 사이에 작지만 성장하는 전신 혈관 침대를 식별하기 위해 남아 있습니다.
국소 빈혈 - 유도 혈관 신생에 대한 책임 메커니즘은 완전히 이해되지 않습니다. 과거의 일이 전체 과정을 13 일부 단계에서 역할을 같이 CXC-chemokines와 관련이 있습니다. 왜냐면이 모델에서 왼쪽 폐를 ause은 허혈성하지만 완전히 환기가 있으며, hypoxia-inducible 요인이 발생한다 체계 neovascularization에서 역할을하지 않을 수 있습니다. 그것은이 상황이 국소 빈혈은 조직 hypoxia 동반 다른 기관과는 달리이 점을 강조해야한다. 따라서 폐에서 전체 기관지 혈관의 성장을 담당하는 성장 요인은 완전히 정의해야합니다. 새로운 혈관의 성장은 허혈성 조직의 보존에 필수적인 것으로 보인다 있지만, 혈관 형성 기관지 혈관은 확대 프로 염증, 그리고 hyperpermeable 15, 17로 표시되어 있습니다. 이러한 비정상적인 혈관의 만성 결과는 vasodilation과기도 부종 18에 의한 영구적 인기도 축소 등이 있습니다.
성장 인자 릴리스의 사이트와 응답 혈관와 관련이 모델에 관한 추가 질문입니다. 폐 국소 빈혈에도 불구하고,이 체계 기관지 혈관입니다 책임을폐 내의 다른 허혈성 자극에 d와하지 폐 혈관. 이 허혈성 자극이 상류 기관지 혈관에 전달하는 방법 확실하지 않습니다. 가능성이 대동맥에서 발생하는 혈관이 왼쪽 폐에 고유 세포 분열 따위에 의해 번식하도록 유도하는 방법 허혈성 parenchymal 조직에 의해 발표 성장 요인의 다양한에도 불구하고 명확하지 않습니다. 미래의 실험은 이러한 질문을 해결하기 위해 필요합니다.
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Disclosures
관심 없음 충돌이 선언 없습니다.
Acknowledgments
우리는 폐의 캐스팅에 지원 한 박사 Adlah Sukkar, MD의 작품을 인정합니다. 이 작품은 NHLBI, HL088005로 운영되었습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| buprenorphine hydrochloride, Puralube | Butler Schein | ||
| bupivicaine | APP Pharmaceuticals | ||
| Povidone-Iodine swabstick | Dynarex Corporation | ||
| polypropylene suture size 6-0, 3/8 circle reverse cutting needle | Myco Medical | ||
| PE20 tubing | Becton Dickinson | ||
| 15 μm crimson polystyrene fluorospheres | Invitrogen | ||
| 1 ml Hamilton glass syringe | Hamilton Company | ||
| Equipment: | |||
| Genie Plus syringe pump | Kent Scientific | ||
| Fluorescence Spectrophotometer | Digilab | ||
| Rodent Ventilator Model 683 | Harvard Apparatus | ||
| Table 1. Table of specific reagents and equipment. | |||
References
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