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Medicine

Restenosis के अध्ययन के लिए कैरोटिड धमनी में स्टेंट आरोपण के एक murine मॉडल

Published: May 14, 2013 doi: 10.3791/50233

Summary

माउस कैरोटिड धमनी में स्टेंट आरोपण के एक मॉडल का वर्णन किया है. इसी तरह के अन्य तरीकों की तुलना में, इस प्रक्रिया का एक सुविधाजनक तरीका अलग दवा eluting stents और restenosis के आणविक तंत्र को संवहनी दीवार प्रतिक्रिया में अध्ययन करने की संभावना की पेशकश, बहुत तेजी से, आसान और सुलभ है.

Abstract

पिछले दशकों में स्टेंट विकास में किए गए उल्लेखनीय प्रगति के बावजूद, हृदय रोगों पश्चिमी देशों में मौत का मुख्य कारण बने हुए हैं. विभिन्न दवा eluting stents के विकास से लाभ की पेशकश के अलावा, कोरोनरी revascularization भी में स्टेंट घनास्त्रता और restenosis के जीवन के लिए खतरा जोखिम भालू. नई चिकित्सकीय रणनीतियों पर रिसर्च स्टेंट आरोपण और restenosis प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए उपयुक्त तरीकों की कमी से प्रभावित है. यहाँ, हम पोत remodeling और विभिन्न दवा कोटिंग्स के प्रभाव के आणविक तंत्र एक सुविधाजनक तरीके से अध्ययन करने के लिए संभावना प्रदान करता है जो माउस कैरोटिड धमनी में स्टेंट आरोपण की एक तेजी से और सुलभ प्रक्रिया का वर्णन.

Introduction

Atherosclerosis की प्रगति के कारण हृदय रोगों औद्योगिक देशों में मौत का प्रमुख कारण हैं. Atherosclerosis कोरोनरी धमनियों के माध्यम से रक्त के प्रवाह को प्रभावित करने वाले पोत के लुमेन में एक विस्तारित पट्टिका के गठन में जिसके परिणामस्वरूप endothelial चोट 1 से संवहनी दीवार का एक केंद्र, भड़काऊ fibro-proliferative प्रतिक्रिया,, है. सूजन पट्टिका 2 की पतली तंतुमय टोपी का टूटना से दौरे infarctions परिणाम के 75% से अधिक. इस जटिलता घातक हो सकता है, स्टेंट आरोपण के साथ एक percutaneous transluminal (कोरोनरी) एंजियोप्लास्टी (पीटीसीए) वर्तमान चिकित्सा पद्धति में पहली पसंद चिकित्सा बन गया. विधि संकुचित कोरोनरी धमनी के फैलने और इस प्रकार रक्त प्रवाह की बहाली की अनुमति देता है. इसके साथ ही, यह endothelium और पोत दीवार 3 करने के लिए एक हद तक चोट का कारण बनता है. हालांकि, इस थेरेपी के दीर्घकालिक प्रभाव एक अत्यधिक धमनी remode द्वारा सीमित हैलिंग और restenosis 4.

स्टंट्स का रोजगार करके, पीटीसीए एक तीव्र पोत बंद 5 के बाद revascularization के लिए अनुमति देता है, जटिल घावों के उपचार में अधिक प्रभावी हो गया. यह विधि कम से कम 10% 6 से में स्टेंट restenosis की घटना घट जाती है. इन लाभों के अलावा, कोरोनरी revascularization के लिए यह पहली पसंद थेरेपी भी में स्टेंट घनास्त्रता और restenosis के जीवन के लिए खतरा जोखिम भालू.

में स्टेंट घनास्त्रता प्लेटलेट्स और घायल साइट के लिए आतंच के एक बड़े पैमाने पर आसंजन द्वारा पीछा पोत के एक de-endothelialization, के कारण होता है. रोगियों के 26% में स्टेंट घनास्त्रता और रोधगलन 7 की 63% मरने से पीड़ित हैं. Restenosis neointimal hyperplasia (माइग्रेशन और प्रसार संवहनी चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं की (VSMC), बाह्य मैट्रिक्स (ईसीएम) का जमाव, और remodeling शामिल पोत दीवार को यांत्रिक चोट के बाद घाव भरने की प्रक्रिया को दर्शाता हैपोत की. अक्सर, एक आक्रामक फिर से हस्तक्षेप में स्टेंट घनास्त्रता और restenosis के कारण गंभीर रूप से संकुचित अथेरोस्लेरोटिक वाहिकाओं dilatate करने के लिए आवश्यक हो जाता है.

में स्टेंट घनास्त्रता को रोकने के लिए, विरोधी thrombotic दवाओं के साथ एक लंबे समय तक इलाज 8 आवश्यक है. Restenosis रोकने के लिए, दवा eluting stents की नई पीढ़ी के ऐसे कई महीनों 9,10 के लिए एक बहुलक कोटिंग से immunosuppressive दवाओं (जैसे sirolimus, everolimus, zotarolimus) और कैंसर रोधी दवाओं (जैसे Paclitaxel के) के रूप में विरोधी proliferative एजेंटों elute. इन दवाओं neointima गठन और restenosis कमी है, वे बाधा फिर endothelialization द्वारा में स्टेंट घनास्त्रता के एक उच्च जोखिम बनाए रखें.

धमनियों की चोट के बाद, endothelial डिब्बे के रखरखाव thrombotic जटिलताओं को रोकने के लिए आवश्यक है. शारीरिक शर्तों के तहत, मानव अन्तःचूचुक एक छोटा सा कारोबार दर 11 से पता चलता है. Pathol तहतogical की स्थिति, तथापि, endothelial अखंडता परिपक्व endothelial कोशिकाओं के आसपास और endothelial पूर्वज कोशिकाओं (निर्यात संवर्धन परिषदों) घूम द्वारा एक तेजी से वसूली 12,13 आवश्यक है, जिससे कि बिगड़ा हुआ है.

बड़े जानवरों 14-16 या माउस महाधमनी धमनी में में इन जटिल आणविक तंत्र का अध्ययन सीमित डेटा 17-19 पेशकश, एक बहुत मुश्किल प्रक्रिया है. में स्टेंट घनास्त्रता और restenosis नए मॉडल कम करने के लिए उपन्यास स्टेंट कोटिंग्स की दक्षता का परीक्षण करने के लिए आवश्यक हैं.

Nitinol क्योंकि सफलतापूर्वक नैदानिक ​​प्रयोग में बेयर मेटल स्टेंट के रूप में इस्तेमाल किया जा रहा है 'अपनी उच्च लोच, आकार स्मृति प्रभाव और रोगियों में अच्छा सहिष्णुता, के स्टंट्स के लिए आदर्श मंच का प्रतिनिधित्व करता है. यह मिश्र धातु 20 लेपित और चूहों के मन्या धमनी में प्रत्यारोपित किया जा सकता है, जो 500 मीटर, के एक बाहरी व्यास के साथ एक छोटी स्टेंट बनाने के लिए यह संभव बना दिया. माउस ग के लिए एक छोटी nitinol स्टेंट का विकासarotid धमनी, स्टेंट आरोपण से प्रेरित सटीक आणविक तंत्र के अध्ययन की अनुमति देता है और restenosis को रोकने के लिए जल्दी से और कुशलता से अलग दवा कोटिंग्स के प्रभाव का परीक्षण करने की संभावना प्रदान करता है. इसके अलावा, विभिन्न दस्तक बाहर चूहों उपभेदों के अस्तित्व neointima विकास और में स्टेंट घनास्त्रता में शामिल विभिन्न अणुओं की भूमिका को स्पष्ट करने में एक बहुत बड़ा लाभ का प्रतिनिधित्व करता है.

Protocol

1. स्टेंट तैयारी और आरोपण

  1. स्टेंट struts (फोर्ट वेन धातु, Castlebar, आयरलैंड) लट में थे और फिर वस्त्र प्रौद्योगिकी और मैकेनिकल इंजीनियरिंग, जर्मनी में RWTH आकिन विश्वविद्यालय (चित्रा 1 ए) के लिए संस्थान में वांछित आकार में कटौती.
  2. आरोपण से पहले, स्टंट्स संदंश का उपयोग, एक 2 सेमी सिलिकॉन ट्यूब में स्थानांतरित किया जाना चाहिए, और (चित्रा 1 ए) के सामने अंत भेजा, एक टर्मिनल अंत में 2 मिमी रखा.
  3. सामने के छोर आरोपण के लिए एक तेज टिप सुनिश्चित करने के लिए, फेर से कटौती की जानी चाहिए.
  4. आरोपण से पहले, स्टेंट slippage को सुनिश्चित करने के लिए, बहुतायत से पानी पिलाया जाना चाहिए.

2. स्टेंट आरोपण

  1. 10-12 सप्ताह पुरानी पुरुष C57BL / 6 जंगली प्रकार चूहों, 25-27 ग्राम 100 मिलीग्राम / किग्रा ketamine और 10 मिलीग्राम / किलो xylazine की intraperitoneal इंजेक्शन का उपयोग anesthetized हैं. उचित anesthetization सजगता के अभाव के कारण सर्जरी से पहले की पुष्टि की और हैदाढ़ी आंदोलन. संज्ञाहरण के तहत, माउस आँखों bepanthene क्रीम की एक फिल्म से कवर कर रहे हैं, जबकि सूखापन को रोकने के लिए.
  2. शेविंग और उदर गर्दन क्षेत्र के समुचित कीटाणुशोधन के बाद, 1 सेमी का एक छोटा सा बीच का चीरा कैंची का उपयोग कर, एक stereomicroscope के तहत किया जाता है. बाँझ घुमावदार संदंश के साथ 2 फैटी निकायों को अलग करने के बाद, बाएं आम मन्या धमनी श्वासनली के साथ स्पंदन देखा जा सकता है.
  3. 1 बाएं आम मन्या धमनी के सेमी और विभाजन मुक्त तैयार होना चाहिए. एक 5/0 रेशम धागे का उपयोग 1 गाँठ बाएं आम मन्या धमनी के आसपास बाध्य होंगे, 7/0 रेशम धागे का उपयोग करते हुए 2 समुद्री मील बाएं बाह्य मन्या धमनी आसपास ही हो जाएगा, और एक 7/0 रेशम धागे का उपयोग 1 गाँठ बाध्य होंगे आंतरिक मन्या धमनी के आसपास (चित्रा 1 बी).
  4. रक्त प्रवाह तो मजबूती है, साथ ही परिणय सूत्र में चारों ओर खींच कर आंतरिक मन्या धमनी और समीपस्थ बाह्य मन्या धमनी पर गांठ के बंधन से बाधित हैआम मन्या धमनी आईएनजी. पोत आम और बाह्य मन्या धमनी एक सीधी रेखा में होते हैं कि एक तरह से तय की जानी चाहिए.
  5. बाहरी मन्या धमनी में एक छोटा सा चीरा एक Vannas कैंची का उपयोग करते हुए, समीपस्थ गाँठ के पास किया जाता है. स्टेंट युक्त सिलिकॉन ट्यूब एक गाइड तार का उपयोग करते हुए, सामने तेज अंत के साथ, बाह्य मन्या धमनी में शुरू की है. स्टेंट इच्छित स्थान पर पहुँच जाए, सिलिकॉन ट्यूब गाइड तार पर वापस खींच लिया और स्टेंट (चित्रा 1 बी) के आकार स्मृति विस्तार की अनुमति देता है.
  6. बाहरी मन्या धमनी पर बाहर का गाँठ जिससे रक्त प्रवाह को बहाल करने, चीरा और आंतरिक और आम मन्या धमनी में समुद्री मील की साइट को हटा रहे हैं बंद करने के लिए कसकर बाँध है.
  7. त्वचा चीरा 3-4 मिशेल सिवनी क्लिप और एक मिशेल forcep का उपयोग कर बंद कर दिया है. माउस पूरी वसूली तक लाल बत्ती के तहत रखा गया है. एक एनाल्जेसिक उपचार आवश्यक नहीं है.
  8. पट्टिका 1-3 सप्ताह के बाद विश्लेषण किया जा सकता है. फिर endothelialization का अध्ययन करने के लिए, एक पहले अंत समय बिंदु आवश्यक है (3-4 दिन). हम 4 सप्ताह इस शल्य चिकित्सा के हस्तक्षेप के बाद, विशेष रूप से छोटी स्टंट्स biofunctionalize के लिए विशिष्ट कोटिंग्स के उपयोग के द्वारा, neoangiogenesis पता नमूना का लगभग 30% में होता है कि स्टेंट आरोपण के हमारे मॉडल में मनाया. यह अलग तंत्र और एक अन्य रोग की समस्या का प्रतिनिधित्व करने के साथ, remodeling और पुनर्योजी प्रक्रियाओं के लिए एक हिंद है. स्टेंट आरोपण के बाद 3 सप्ताह के एक अंत समय बिंदु neoangiogenesis पता की शुरुआत से प्रेरित पुनर्योजी प्रभाव के साथ मिश्रण करने के लिए फायदेमंद नहीं होगा इन दुष्प्रभाव अंतर्निहित तंत्र की neointima गठन में स्टेंट एक प्रकार का रोग और / या विश्लेषण पर ध्यान केंद्रित करने के लिए.

3. पट्टिका गठन का विश्लेषण

  1. अंत समय बिंदु पर, पशुओं के लिए 100 मिलीग्राम / किग्रा ketamine और 10 मिलीग्राम / किलो xylazine की intraperitoneal इंजेक्शन का उपयोग anesthetized हैं.उचित anesthetization सजगता और दाढ़ी आंदोलन की कमी से सर्जरी करने से पहले इसकी पुष्टि की है.
  2. जानवरों intracardial Exsanguination द्वारा मारे गए हैं. सीरम रक्त आगे के विश्लेषण के लिए एकत्र किया जाता है.
  3. वक्ष गुहा खोलने और पीबीएस में 4% paraformaldehyde (पीएफए) के समाधान के साथ intracardial punction, एक शरीर के छिड़काव के माध्यम से धोने के बाद 5 मिनट के लिए किया जाता है. स्टेंट युक्त बाईं मन्या धमनी, विच्छेदित सीधे एक 4% पीएफए ​​समाधान में रखा गया है और कम से कम 16 घंटे बाद प्लास्टिक में embbeded है.
  4. 50 माइक्रोन मोटी वर्गों देखा एक हीरा बैंड का उपयोग प्लास्टिक एम्बेडेड नमूनों से प्रदर्शन कर रहे हैं.
  5. पट्टिका आकार को मापने के लिए, Giemsa धुंधला किया जाता है.
  6. पोत के stented क्षेत्र के भीतर फिर से endothelialization की दर का विश्लेषण करने के लिए, वॉन Willebrand कारक (vWF) के लिए immunohistochemistry के किया जाता है.

Representative Results

  1. चूहों के बाएं कैरोटिड धमनी में एक छोटी nitinol स्टेंट का आरोपण 25-30 मिनट लगते हैं और हस्तक्षेप के दौरान पोत की क्षति के कारण 10% की मृत्यु दर को दर्शाता है. एक बेहतर जीवित रहने की दर स्टेंट आरोपण का समय (5% की मृत्यु दर) पर एक वजन से अधिक 25 ग्राम होने चूहों में मनाया जाता है. इसलिए, हम 25-27 ग्राम के बीच वजन के साथ आरोपण चूहों के लिए चुना है. सर्जरी के बाद, चूहों, 2-5 मिनट और जैसे लकवा जैसी कोई शारीरिक अपंगता, भीतर संज्ञाहरण से उबरने में मनाया जाता है. स्टेंट आरोपण स्टंट्स रक्त प्रवाह (चित्रा 1C) से उखड़ नहीं कर रहे हैं पता चला है कि बाद माइक्रो कंप्यूटर टोमोग्राफी (माइक्रो सीटी) इमेजिंग एक सप्ताह प्रदर्शन किया. दुर्भाग्य से, इन छवियों में neointima गठन का विश्लेषण धातु व्युत्पन्न कलाकृतियों (चित्रा -1, 1E) की वजह से संभव नहीं है.
  2. हम तुरंत स्टेंट नीचे, पोत की unstented क्षेत्र के किसी भी पोत या endothelial नुकसान का पालन नहीं किया, (2A चित्रा) ऊतकीय द्वारा और endothelium के लिए विशिष्ट धुंधला (चित्रा 2B, विरोधी माउस CD31 एंटीबॉडी) द्वारा के रूप में detectable. एक बेहतर अवलोकन के लिए, खंड एक दो photon लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी (चित्रा 2 बी, 2 सी) का उपयोग कर स्कैन किया गया था.
  3. 25-27 ग्राम के बीच वजन के साथ चूहों द्वारा: stented पोत में, 15% की एक स्थायी फैलने (धमनी, 1,15:1 अनुपात स्टेंट) का पता चला है. Neointima गठन और थक्का गठन शास्त्रीय ऊतकीय stainings (जैसे Hematoxilin-eosin, Giemsa, Movat, Toluidin ब्लू, मेसन-Trichrom-Goldner, चित्रा 3 ए, 3 बी) द्वारा विश्लेषण किया जा सकता है. लामिना बाह्य और अंतरराष्ट्रीय अब दिखाई नहीं देते हैं, पट्टिका आकार बाहरी का अंतर और luminal क्षेत्रों (: 234566 ± 3315 माइक्रोन 2, luminal क्षेत्र मतलब: 12,036 ± 2662 माइक्रोन 2 पट्टिका क्षेत्र मतलब है) के रूप में गणना की गई. बाहरी परिधि भी (: 1799 ± 14 माइक्रोन मतलब) मापा गया था. के विश्लेषण के लिएसेलुलर संरचना, वर्गों विशिष्ट मार्कर के साथ deplastified और दाग होने की जरूरत है. फिर endothelialization के लिए, हम एक Cy3 संयुग्मित विरोधी CD31 एंटीबॉडी का इस्तेमाल किया और चिकनी पेशी सेल प्रसार एक FITC संयुग्मित विरोधी एसएमए एंटीबॉडी (चित्रा -3 सी) के लिए. स्टेंट आरोपण के बाद एक सप्ताह: पुनः endothelialization कुल luminal सतह (23.07 ± 3.14% मतलब) को सीडी 31 सकारात्मक दाग के प्रतिशत के रूप में गणना की गई.

बेशक, विशिष्ट धुंधला के एक असीमित संख्या प्रत्येक प्रयोगशालाओं के अनुभव के आधार पर, संभव है. मायोसिन भारी एसएमसी की एक बेहतर लक्षण वर्णन के लिए श्रृंखला,, लेकिन यह भी घुसपैठ कोशिकाओं का विश्लेषण (monocytes, लिम्फोसाइटों), या अलग भड़काऊ साइटोकिन्स के लिए stainings का विश्लेषण भी अध्ययन का उद्देश्य पर निर्भर करता है, किया जा सकता है.

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शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया की चित्रा 1. योजनाबद्ध सिंहावलोकन (ए). रक्त के प्रवाह में मजबूती है, साथ ही आम मन्या धमनी आसपास गाँठ खींच द्वारा आंतरिक मन्या धमनी और समीपस्थ बाह्य मन्या धमनी पर गांठ के बंधन से बाधित है. स्टेंट युक्त सिलिकॉन ट्यूब बाह्य मन्या धमनी में एक छोटा सा चीरा के माध्यम से बाहरी मन्या धमनी में शुरू की है. स्टेंट इच्छित स्थान पर पहुँच जाए, सिलिकॉन ट्यूब गाइड तार पर वापस खींच लिया और स्टेंट का आकार स्मृति विस्तार की अनुमति देता है. शल्य आरोपण (बी) के बाद एक सप्ताह के स्टेंट स्थिति दिखा सूक्ष्म सीटी छवियों. सामग्री व्युत्पन्न कलाकृतियों के कारण, neointima विकास के एक विश्लेषण (सी, डी) संभव नहीं है.

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चित्रा 2. पोत के Unstented क्षेत्र Toluidin ब्लू (ए) और endothelial विशेष CD31 धुंधला (बी, सी) द्वारा दिखाया गया है, के रूप में शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया से प्रभावित नहीं है.

चित्रा 3
चित्रा 3. पट्टिका का विश्लेषण शास्त्रीय ऊतकीय stainings (जैसे मेसन-Trichrom-Goldner) (ए) के द्वारा प्रदर्शन किया जा सकता है. संगठित थक्का कुछ मामलों में पोत की एक पूरी रोड़ा (बी) मनाया जाता है, neointima अंदर काले दाग आतंच बयानों से पता लगाया जा सकता है. पुनः endothelialization (Cy3, लाल) या चिकनी पेशी सेल प्रसार (FITC, हरा) विशिष्ट मार्कर का उपयोग डबल immunofluorescence धुंधला द्वारा खोजा गया था.Counterstaining 4 ',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI, नीला) (सी) के साथ प्रदर्शन किया गया था. हम (सही, एक तीर) फिर से endothelialization एक incompleted luminal की तुलना में स्टेंट struts का एक पूरा पुनः endothelialization (बाएं, डबल तीर) देखा.

Discussion

में स्टेंट घनास्त्रता और restenosis के खतरे को कम करने और दवा eluting stents, एक पशु मॉडल में स्टेंट आरोपण का एक आसान, सरल और सुलभ विधि के लिए नए कोटिंग्स के विकास को बनाए रखने के लिए आवश्यक है. चूहे स्टेंट आरोपण और ऐसी दवाओं की दक्षता के बाद धमनियों remodeling के जटिल तंत्र का अध्ययन करने के लिए आदर्श प्रणाली उद्धार. माउस में में स्टेंट restenosis के लिए मौजूदा मॉडल के लिए मुश्किल हैं, उच्च शल्य कौशल की आवश्यकता होती है और खून बह रहा है या पक्षाघात 17-19 के रूप में जटिलताओं के उच्च जोखिम का संकेत है. उदाहरण के लिए, पोत का गुब्बारा फैलाव और फिर एक प्राप्तकर्ता माउस 17 से कैरोटिड धमनी में stented खंड के प्रत्यारोपण के बाद एक दाता माउस के वक्ष महाधमनी में स्टेंट आरोपण के मॉडल में, patho-तंत्र का अध्ययन नहीं है केवल दाता सामग्री के लिए प्राप्तकर्ता प्रतिक्रिया से, लेकिन यह भी वासा vasorum और बाह्यकंचुक का भारी नुकसान पहुँचाए से प्रभावित. एक स्टेनलेस stee का आरोपणगुब्बारा फैलाव 19 के बाद सीधे पेट महाधमनी में एल स्टेंट क्योंकि धमनीछेदन की साइट पर उदर महाधमनी से घनास्त्रता या रक्तस्राव के बाद हिंद पैर पक्षाघात की एक उच्च मृत्यु दर (35%) द्वारा पीछा किया जाता है. एक सर्पिल के आकार ऊरु धमनी 18 के माध्यम से पेट महाधमनी में nitinol स्टेंट आत्म - विस्तार का आरोपण आँख बंद करके सही स्थिति में स्टेंट के लिए जगह महाधमनी को ऊरु धमनी से शाखाओं में बंटी के साथ स्टेंट निर्देशन के कारण उच्च शल्य कौशल की जरूरत है. यह प्रक्रिया हिंद पैर की एक उच्च और्विक तंत्रिका हानिकारक के जोखिम, इसलिए पक्षाघात के बाद है. इन प्रक्रियाओं के साथ तुलना में, माउस में स्टेंट आरोपण के हमारे मॉडल उच्च शल्य कौशल की जरूरत नहीं है.

हमारे मॉडल धमनी remodeling पर विभिन्न दवा कोटिंग्स के प्रभावों का विश्लेषण करने के लिए एक सरल, आसान और कारगर तरीका प्रदान करता है, स्टेंट के रखने की दृष्टि के तहत बनाया, और हानिकारक नसों या अन्य संरचनाओं का कोई जोखिम भी हैं. कॉमपरिसर आणविक तंत्र पोत की प्रत्यक्ष पहुंच से न केवल माउस मन्या धमनी stenting के हमारे मॉडल में आसान की जांच की, लेकिन यह भी अलग दस्तक बाहर चूहों उपभेदों के अस्तित्व की वजह से किया जा सकता है.

एक सीमा के रूप में, नैदानिक ​​प्रक्रिया के साथ तुलना, हमारे मॉडल स्वस्थ चूहों / धमनियों का उपयोग करता है और (नहीं में स्टेंट restenosis, लेकिन में स्टेंट एक प्रकार का रोग) पूर्व मौजूदा सजीले टुकड़े पर stenting प्रदर्शन नहीं करता है. हम भी स्टेंट दाखिल करने से पहले गुब्बारा फैलाव प्रदर्शन नहीं करते. हालांकि, दोनों मॉडलों में पोत दीवार की भारी क्षति के कारण, reparatory प्रक्रियाओं समान हैं. दुर्भाग्य से, धातु व्युत्पन्न कलाकृतियों को, neointimal विकास के vivo निगरानी में एक अल्ट्रासाउंड या कंप्यूटर टोमोग्राफी के रूप में मौजूदा इमेजिंग तरीकों से संभव नहीं है. एक अन्य कारक सीमित धातु प्रसंस्करण में कुछ विशेषज्ञता की आवश्यकता है जो धातु आधारित stents की पतली सेक्शनिंग है.

इस पद्धति का उपयोग करके, हम थेन्युट्रोफिल-निर्देश डालूँगा -37 हस्तक्षेप चिकित्सा 21 के बाद नाड़ी चिकित्सा को बढ़ावा देने के लिए एक उपन्यास अवधारणा को उपलब्ध कराने, restenosis स्टेंट में कम के साथ लेपित nitinol-स्टंट्स छोटी biofunctionalized कि, दिखाने के लिए सक्षम.

इन सीमाओं के बावजूद, इस मॉडल,,, अब तक सबसे उपयुक्त प्रणाली है जिससे पैसे और समय की बचत, धमनी remodeling के दौरान आणविक घटनाओं पर स्टंट्स और उनके प्रभावों के लिए नई दवा कोटिंग्स जांच करने के लिए लगता है. इसके अलावा, इस मॉडल को आसानी से हर चिकित्सा संबंधी परिकल्पना बड़े जानवरों या अप्रिय और अप्रत्याशित प्रभाव से बचने के लिए मानव को लागू करने से पहले सत्यापित किया जा सकता है, ताकि मानव के समान है जो हम्सटर, के लिए अनुकूलित किया जा सकता है.

Disclosures

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

Acknowledgments

हम प्लास्टिक एम्बेडेड स्टंट्स सेक्शनिंग में उत्कृष्ट तकनीकी सहायता के लिए श्रीमती एंजेला Freund धन्यवाद. हम immunohistochemistry के धुंधला के साथ पेशेवर मदद के लिए भी श्रीमती रोया Soltan और श्रीमती एंजेला Freund धन्यवाद.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
nitinol-stents (self-made from nitinol-struts) Fort Wayne Metals, Castlebar, Ireland NiTi#1, superelastic, straight annealed, light oxide, diameter 500 μm custom-made product Institute for Textile Technology and Mechanical Engineering
silicon tube IFK Isofluor, Germany custom-made product diameter 500 μm, section thickness 100 μm, polytetrafluorethylene catheter
stereomicroscope Olympus SZ/X9
forceps FST, Germany 91197-00 standard tip curved 0.17 mm
Ketamine 10% CEVA, Germany
Xylazine 2% Medistar, Germany
Bepanthene Bayer, Germany
Scissors FST, Germany 91460-11 Straight
Vannas scissor Aesculap, Germany OC 498 R
5/0 Silk Seraflex IC 108000
7/0 Silk Seraflex IC 1005171Z
guide-wire Abbott Vascular 1001782-HC 0.014-inch angioplastie guide-wire
Michel suture clips Aesculap, Germany BN507R 7.5 x 1.75 mm
Michel Forcep Aesculap, Germany BN730R

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References

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चिकित्सा अंक 75 एनाटॉमी फिजियोलॉजी बायोमेडिकल इंजीनियरिंग मैकेनिकल इंजीनियरिंग कार्डियोलोजी सर्जरी microsurgery पशु प्रयोगों मॉडल पशु हृदय रोगों स्टेंट आरोपण atherosclerosis restenosis में स्टेंट घनास्त्रता स्टेंट माउस मन्या धमनी धमनियों रक्त वाहिकाओं माउस पशु मॉडल सर्जिकल तकनीक
Restenosis के अध्ययन के लिए कैरोटिड धमनी में स्टेंट आरोपण के एक murine मॉडल
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Simsekyilmaz, S., Schreiber, F.,More

Simsekyilmaz, S., Schreiber, F., Weinandy, S., Gremse, F., Sönmez, T. T., Liehn, E. A. A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis. J. Vis. Exp. (75), e50233, doi:10.3791/50233 (2013).

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