Summary
Wir beschreiben das Design des "Quick-Linker" Gerät zur leichteren orthotopen Lebertransplantation Ratte.
Abstract
Orthotopen Lebertransplantation Ratte ist ein beliebtes Modell, das vor kurzem in einem JoVE Papier wurde mit dem Einsatz der "Quick-Linker" Gerät gezeigt. Diese Technik ermöglicht eine leichtere venösen Manschette-anatomoses nach einer angemessenen Einarbeitungszeit. Das Gerät besteht aus zwei Griffe, die aus Skalpell Klingen sind geschnitzt, eine Approximator, die durch Modifizieren Kocher Pinzette erhalten wird, und Manschetten aus feinen Bohrung Polyethylenschlauch entworfen zusammen. Der gesamte Prozess kann in einem Low-Cost-mit gemeinsamen Labor Material durchgeführt werden. Der vorliegende Bericht enthält eine Schritt-für-Schritt-Protokoll für die Gestaltung der benötigten Teile und umfasst Schablonen.
Introduction
Eine Technik der orthotopen Lebertransplantation Ratte hat in einer aktuellen Journal of Visualisierte Experimente Papier 1 gezeigt. Pfortader und infra-Leber Hohlvene Anastomosen wurden mit dem Quick-Linker assisted Manschette Technik. Diese Technik wurde unter anderem Änderungen des ursprünglichen Kamadas Technik 2-4 gewählt, da es einfacher und schneller für Anastomosen, führt zu einer besseren hämodynamischen erlaubt und kann mit einer kürzeren Lernkurve 1,5 umgesetzt werden.
Der Quick-Linker Technik erfordert die Verwendung eines Griffs, ein Approximator und Manschetten, können alle davon aus gemeinsamen Labor gemäß der Technik im vorliegenden Bericht beschrieben gestaltet werden.
Protocol
1. Griff: Konzeption und Gestaltung
- Sichern einer Nr. 10 C-Skalpell auf einem Holzbrett mit einem Band.
- Schild am Zentrum des Rings unter dem Mikroskop. Es sollte 1,2 cm direkt aus dem Hain des Skalpell entfernt werden.
- Bohren Sie ein Loch 2 mm mit einer sphärischen Diamant-Bit, montiert auf einem High-Speed-Bohrer.
- Widen das Loch mit fusiform oder konischen Diamant-Bits. Der Enddurchmesser variiert je nach Rattengewicht wie in Tabelle 1 gezeigt.
- Entwerfen Sie die Form des Griffes mit einem Permanent-Marker. Abbildungen 1 und 2 können als Schablonen verwendet werden.
- Rechnen Sie den Bohrer in einen Mini Schleifbock und entfernen Sie den Teil der Klinge außerhalb der Form.
- Runden Sie das Stück mit einer niedrigen Geschwindigkeit rotierende Bürste.
2. Approximator: Konzeption und Gestaltung
- Die Approximator wird durch Modifizieren gerade chirurgischen Klemmer oder Kocher forcep erhaltens.
- Schneiden Sie die Hälfte von einem Zweig unter dem Mikroskop mit dem High-Speed Mini Schleifbock.
- Als symmetrische Nuten auf beiden Seiten für den Griff zu rutschen in vollständig zu ermöglichen.
- Schneiden Sie einen Längsschlitz in dem langen Arm und überprüfen, dass die Mitte des langen Arms und ein gut aufgestelltes Griff auf der gleichen Achse sind.
- Entwerfen Sie eine Kerbe auf dem langen Arm vor der Mitte des Griffs.
- Machen Sie den Zweig so dünn wie möglich und runden das Stück mit der niedrigen Drehzahl rotierende Bürste.
3. Manschetten: Konzeption und Gestaltung
- Stulpe Bremssättel je nach Gewicht der Ratte und Dehnung. Im Gegensatz dazu sollte deren Länge etwa 4 mm gehalten werden.
- Nehmen feinen Bohrung Polyethylenschlauch und runden eine Kante mit einem Skalpell Nr. 10.
- Entwerfen Sie einen Hain 0,5 mm von der Kante, und sorgfältig ausgeschnitten eine Steigung hinunter zum Hain.
- Schneiden Sie ein oder zwei Full-Dicke nicks in den Schlauch. Diese werdenhelfen, die Manipulation der Manschette während Transplantat Vorbereitung und Transplantation.
- Schneiden Sie die Manschette bei 4 mm von der Kante.
Representative Results
Fünf Kits, darunter fünf Approximatoren und 11 Griffe hergestellt wurden. Ein Griff brach während der letzten Bürsten. Dieses Problem resultiert aus der Tatsache, dass der Ring von dem Griff zu klein war, und es wurde durch Einstellen der engsten Stelle der Griffring bei 0,5 mm gelöst. Keine Probleme traten während der Gestaltung der Approximatoren.
| Ratte Gewicht (g) | Porta Griff (Innen-Ø) (mm) | Porta Manschette (Außen-Ø) (mm) | IVC Griff (Innen-Ø) (mm) | IVC Manschette (Außen-Ø) (mm) |
| 120-180 | 2.2 | 1.7 | 2.6 | 2,08 |
| 180-270 | 2.6 | 2,08 | 3,4-3,7 | 3,0-3,25 |
| > 270 | 2.9 | 2,42 | 4.2 | 3.7 |
Tabelle 1.
Abbildung 1. Porta Griff Schablone. Wird mit einem 1:1 verwendet, um den Griff der Gestaltung führen kann ausgedruckt werden. Klicke hier, um eine größere Abbildung anzuzeigen .
Abbildung 2. IVC Griff Schablone. Wird mit einem 1:1 verwendet, um den Griff der Gestaltung führen kann ausgedruckt werden. Klicke hier, um eine größere Abbildung anzuzeigen .
Abbildung 3. Porta und IVC Manschetten Seitenansicht. Graft V.Porta sollte der zentrale Nut gesichert werden, während Empfängers Schiff in den seitlichen eins. Diese Maßnahme ermöglicht eine optimale Intima-to-Intima Kontakt.
Abbildung 4. Porta und IVC Manschetten Vorderansicht. Bremssättel geeignet für Ratten mit einem Gewicht von 180 bis 270 g vertreten sind.
Discussion
Der vorliegende Bericht beschreibt den Entwurf und Bau der Schnell-Linker-System zum leichteren Ratte Lebertransplantation.
Rat Lebertransplantation ist ein beliebtes Modell mit 125-180 verwandten Papieren jährlich seit den frühen 1990er Jahren (veröffentlicht www.pubmed.com ). Es ermöglicht eine breite Palette von Experimenten einschließlich der Erforschung von immunologischen und Transplantat Erhaltung Fragen. Die Verwendung des "Quick-Linker"-Kit ermöglicht eine einfachere und schnellere Anastomosen mit garantierten Intima-to-Intima Kontakt. Eine detaillierte Beschreibung und Diskussion der technischen Schritte einer Ratte Lebertransplantation wurden bereits 1 beschrieben.
Der Quick-Linker Kit kann bei niedrigen Preis von gemeinsamen Labor Material gebaut werden. Die größte Herausforderung begegnet wurde den Abbau von einem Griff in der letzten Bürsten zusammenhängen und dass Problem ist, indem Sie den schmalsten par gelöstt des Griffs Ring bei 0,5 mm (Abbildungen 1 und 2 zeigen entsprechende Größen). In Bezug auf die Qualität Klinge sollte nur Edelstahl in Betracht gezogen werden. Obwohl etwas weniger flexibel, um die durchschnittliche Klinge aus Kohlenstoffstahl Vergleich haben Klingen aus rostfreiem Stahl Rost nicht entwickeln, so dass eine lebenslange Nutzung der Griffe.
Zu beachten ist, ist das Design der aktuellen Griffen und Manschetten das Ergebnis eines Prozesses, der auf die vorgeschlagenen Größen geführt hat, so dass für den effizientesten Anastomosen. Manschette Durchmesser variieren entsprechend der Ratte Gewichte (Tabelle 1). Minimale Variationen in der Länge toleriert werden, mit einer üblichen Länge von etwa 4 mm (Abbildungen 3 und 4).
In Bezug auf die Approximator sollte der ausgewählten Kocher forcep haben Griffe mindestens 4 cm vom Drehpunkt. Dies ermöglicht einen sicheren Verschluss der Zahnstange außerhalb des Tieres Bauch.
InsgesamtDie vorgeschlagene Vorrichtung kann einfacher Vene Anastomosen für die Transplantation von Leber und andere Arten von Transplantaten bei Ratten zu ermöglichen.
Disclosures
Die Autoren haben nichts zu offenbaren.
Acknowledgments
Die Studie wurde von der Artères Stiftung, der Astellas Foundation Europe und der Boninchi Foundation unterstützt. CT wurde von der Swiss National Science Foundation (SCORE Zuschuss 3.232.230-126.233) unterstützt.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Porta cuff | altecweb or smiths-medical | Coil 01-96-1729 800/100/420 |
Bore : variable Wall : 0.30 mm Length: 3.8-4.2 mm altecweb.com or smiths-medical.com |
| IVC cuff | altecweb or smiths-medical | Coil 01-96-1733 800/100/540 |
Bore : variable Wall : 0.30 mm Length: 3.8-4.2 mm altecweb.com or smiths-medical.com |
| Mini-drill | Dremel | 100 series | 35,000 rpm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7103 | 2 mm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7105 | 4.4 mm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7144 | 2.4 mm dremel.com |
| Cut-off wheels | Dremel | 420 | dia: 23.8 mm thickness: 0.5 mm dremel.com |
| Quick-linker handles | dltchiropody (DLT) | PAR 10 | modified scalpel blades dltchriopdy |
| Quick-linker approximator | pharmap | UD-04-275 | modified Kocher's forceps pharmap.ch |
References
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic Liver Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (65), e4143 (2012).
- Hori, T., et al. Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide. World Journal of Gastroenterology., WJG. 16, 3120 (2010).
- Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation Proceedings. 37 (1), 185-188 (2005).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47 (1979).
- Oldani, G., et al. A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result. Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).
