Summary
Vi beskriver utformningen av "quick-linker" enhet för enklare orthotopic råtta levertransplantation.
Abstract
Orthotopic råtta levertransplantation är en populär modell, som har visats i en nyligen JUPITER papper med användning av "quick-linker" enhet. Denna teknik möjliggör enklare venös manschettknappar anatomoses efter en rimlig inlärningskurva. Enheten består av två handtag, som är huggna ur skalpellblad, en approximeringsanordning, som erhålls genom att modifiera Kochers pincett, och muddar designade av fin-borrning polyetenslang. Hela processen kan utföras vid en låg kostnad med hjälp av vanlig laboratorieutrustning material. Denna rapport ger en steg-för-steg-protokoll för utformningen av nödvändiga delar och inkluderar schabloner.
Introduction
En teknik som orthotopic råtta levertransplantation har visat i en färsk tidning Visualized Experiments papper 1. Portal vein och infra-hepatiska hålvenen anastomoser utfördes med hjälp av snabb-linker assisterad manschetten teknik. Denna teknik valdes bland annat revideringar av den ursprungliga Kamadas teknik 2-4, eftersom det gör det enklare och snabbare anastomoser, resulterar i en bättre hemodynamisk, och kan genomföras med en kortare inlärningskurva 1,5.
Den snabba-linker teknik kräver användning av ett handtag, en approximeringsanordning och manschetter kan alla vara utformad från gemensamt laboratorium materialet enligt den teknik som beskrivs i denna rapport.
Protocol
Ett. Handtag: Design och Forma
- Säkra en Nr 10 kol skalpell blad på en planka med en tejp.
- Tag centrum av ringen under mikroskop. Den bör placeras 1,2 cm rakt från lund av skalpell blad.
- Borra ett 2 mm hål med en sfärisk diamant bit, monterad på en snabb borrmaskin.
- Vidga hålet med spolformade eller koniska bitar diamant. Den slutliga diametern varierar beroende på råttvikt såsom visas i tabell 1.
- Utforma formen på handtaget med en permanent markör. Figurerna 1 och 2 kan användas som schabloner.
- Konvertera borren till en mini bänkslipmaskin och ta bort den del av bladet utanför formen.
- Avrunda stycke med en låg hastighet roterande borste.
2. Approximeringsanordning: Design och Forma
- Den approximeringsanordning erhålls genom modifiering rakt kirurgiskt Klemmer s eller Kochers forceps.
- Skär av hälften av en gren under mikroskop med hög hastighet Mini bänkslipmaskin.
- Gör symmetriska spår på båda sidor för att handtaget glider in helt.
- Skär en längsgående skåra i den långa armen och kontrollera att mitt långa arm och ett väl positionerat handtag är på ett samma axel.
- Utforma en skåra på den långa armen som vetter mot centrum av handtaget.
- Gör grenen så tunn som möjligt och avrundar stycke med låg hastighet roterande borste.
Tre. Manschetter: Design och Forma
- Cuff bromsok varierar beroende på råttvikt och stam. Däremot bör deras längd hållas omkring 4 mm.
- Ta fina hål polyetenslang och avrunda en kant med en Nr 10 skalpell.
- Designa en lund 0,5 mm från kanten, och försiktigt skära ut en sluttning ned till dungen.
- Klipp ut en eller två full tjocklek hack i slangen. Dessa kommerhjälpa manipulera manschetten under transplantat förberedelse och transplantation.
- Skär manschetten vid 4 mm från dess kant.
Representative Results
Fem satser, inklusive fem approximators och 11 handtag har tillverkats. Ett handtag bröt under den slutliga borstning. Detta problem beror på det faktum att ringen av handtaget var för smal, och det har lösts genom att ställa den smalaste delen av handtaget ringen vid 0,5 mm. Inga problem uppstod under utformningen av de approximators.
| Råtta vikt (g) | Porta handtag (inre diameter) (mm) | Porta manschetten (yttre diameter) (mm) | IVC handtag (inre diameter) (mm) | IVC manschetten (yttre diameter) (mm) |
| 120-180 | 2,2 | 1,7 | 2,6 | 2,08 |
| 180-270 | 2,6 | 2,08 | 3,4-3,7 | 3,0-3,25 |
| > 270 | 2,9 | 2,42 | 4,2 | 3,7 |
Tabell 1.
Figur 1. Porta handtag stencil. Om tryckt med en skala 1:01 kan användas för att styra handtaget forma. Klicka här för att visa en större bild .
Figur 2. IVC handtag stencil. Om tryckt med en skala 1:01 kan användas för att styra handtaget forma. Klicka här för att visa en större bild .
Figur 3. Porta och IVC muddar lateral vy. Graft s v.porta bör fästas vid centrala spåret, medan mottagarens fartyg till den laterala en. Detta ändamålsenlig möjliggör optimal intima-till-intima kontakten.
Figur 4. Porta och IVC manschetter framifrån. Skjutmått lämpliga för råttor som väger 180-270 g är representerade.
Discussion
Den här rapporten beskriver utformningen och byggandet av den snabba-länksystemet för enklare råtta levertransplantation.
Rat levertransplantation är en populär modell med 125-180 relaterade artiklar publicerats varje år sedan början av 1990-talet ( www.pubmed.com ). Den tillåter en mängd olika experiment inklusive utforskandet av immunologiska och transplantat bevarande frågor. Användningen av "quick-linker" kit gör det enklare och snabbare anastomoser med garanterad intima-till-intima kontakten. En detaljerad beskrivning och diskussion av de tekniska stegen i en råttlever transplantation har beskrivits tidigare 1.
Den snabba-linker kit kan byggas till lågt pris från gemensamt laboratorium material. Den främsta utmaningen mötte har relaterats fördelningen av ett handtag under sista borstning, och att problemet har lösts genom att ställa den smalaste part av handtaget ringen vid 0,5 mm (fig 1 och 2 visar lämpliga storlekar). Beträffande bladet kvalitet, bör endast rostfritt stål övervägas. Även något mindre flexibel jämfört med den genomsnittliga blad av kolstål, framkallar rostfria blad inte rost, så en livstid användning av handtagen.
Att notera är att utformningen av de nuvarande handtag och manschetter resultatet av en process, vilket har lett till att de föreslagna storlekarna, som tillåter de mest effektiva anastomoser. Cuff diametrar varierar beroende på råtta vikterna (tabell 1). Minimala variationer kan tolereras i fråga om längd, med en vanlig längd av ca 4 mm (fig 3 och 4).
Beträffande approximeringsanordning, bör den valda Kochers forcep ha handtag på minst 4 cm från balanspunkt. Detta möjliggör för säker stängning av kuggstången utanför djurets buk.
Sammantagetden föreslagna anordningen kan tillåta enklare vein anastomoser för transplantation av levern och andra typer av transplantat i råttor.
Disclosures
Författarna har ingenting att lämna ut.
Acknowledgments
Studien har finansierats av Artères Foundation, Astellas Foundation Europe och Boninchi Foundation. CT stöddes av Swiss National Science Foundation (SCORE bidrag 3.232.230-126.233).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Porta cuff | altecweb or smiths-medical | Coil 01-96-1729 800/100/420 |
Bore : variable Wall : 0.30 mm Length: 3.8-4.2 mm altecweb.com or smiths-medical.com |
| IVC cuff | altecweb or smiths-medical | Coil 01-96-1733 800/100/540 |
Bore : variable Wall : 0.30 mm Length: 3.8-4.2 mm altecweb.com or smiths-medical.com |
| Mini-drill | Dremel | 100 series | 35,000 rpm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7103 | 2 mm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7105 | 4.4 mm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7144 | 2.4 mm dremel.com |
| Cut-off wheels | Dremel | 420 | dia: 23.8 mm thickness: 0.5 mm dremel.com |
| Quick-linker handles | dltchiropody (DLT) | PAR 10 | modified scalpel blades dltchriopdy |
| Quick-linker approximator | pharmap | UD-04-275 | modified Kocher's forceps pharmap.ch |
References
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic Liver Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (65), e4143 (2012).
- Hori, T., et al. Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide. World Journal of Gastroenterology., WJG. 16, 3120 (2010).
- Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation Proceedings. 37 (1), 185-188 (2005).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47 (1979).
- Oldani, G., et al. A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result. Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).
