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Medicine

자궁 내 성장 제한의 토끼 모델에서 태아 심 초음파 및 펄스 파 도플러 초음파

Published: June 29, 2013 doi: 10.3791/50392

Summary

우리는 현대적인 기능 태아 심 초음파 검사와 토끼 자궁 내 태아 성장 제한의 수술 유발 모델에서 VisualSonics VEVO 2100 microultrasound를 사용하여 fetoplacental 도플러 초음파 태아 심장 기능의 검사를 설명합니다.

Abstract

산전 fetoplacental 도플러 초음파 및 태아 심 초음파의 발전으로 인해 분명 비정상적인 심장 기능에있는 태아의 자궁 내 성장 제한 (IUGR) 결과. 점점,이 영상 ​​방식은 그로 인하여 출생 결정의 타이밍을 유도, 심장 기능을 검사하고 자궁의 웰빙을 평가하기 위해 임상 적으로 고용되고있다. 여기, 우리는 임상 적 방법으로 심장 기능을 분석 할 수 IUGR의 토끼 모델을 사용 하였다. isoflurane을 유도 마취를 사용하여, IUGR은 수술 쌍각 자궁을 노출 개복술을 수행하여 재태 기간 하루 25 만든 다음 한 자궁 각 임신 낭을 공급 uteroplacental 선박 40 ~ 50 %가 결찰 있습니다. 토끼 쌍각 자궁의 다른 경적 내부 통제 태아 역할을합니다. 그런 다음, 재태 연령의 날 30 (전체 기간)에서 복구 후, 같은 토끼 태아 심장 기능의 검사를 거칩니다. 마취 ketam로 유도오프라인과 xylazine은 근육, 후 태아의 심장 기능에 대한 의원 영향을 최소화하기 위해 마취제와 xylazine의 연속 정맥 주입에 의해 관리. 반복 개복술은 각 임신 낭을 노출하기 위해 수행되며, 태아의 심장 기능의 microultrasound 시험 (VisualSonics VEVO 2100)이 수행됩니다. 태반 부전이 발생 박동 인덱스 또는 제대 동맥 도플러 파형의 부재 또는 역 최종 이완기 흐름으로 분명하다. 정맥관과 중뇌 동맥 도플러 후 검사합니다. 태아 심 초음파를 녹음 B 모드, M 모드 측면과 정점 뷰의 흐름 속도 파형에 의해 수행됩니다. 오프라인 계산은 표준 M-모드 심장 변수, 삼첨판과 승모판 고리 모양의 평면 수축기 소풍, 추적 반점 및 변형 분석, 수정 심근 성과 색인과 관심의 혈관 흐름 속도 파형을 결정합니다. IUGR의이 작은 동물 모델 따라서 uter에서의 검사를 준다현재 임상 사례와 일치하고 translational 연구의 설정에 따라서 유용 O 심장 기능.

Introduction

태아의 자궁 내 성장 제한 (IUGR)의 결과가 과장 될 수있는 심혈관 질환의 부담. 그것은 선천적 기형 후 사산의 주요 원인이다. 1 IUGR는 성장 잠재력에 도달하는 데 실패 태아에게 의미하며 일반적으로 태반 기능 부전의 결과입니다. 생존자 2, 심장 혈관 질병 건강은 명백한 심근 부전과 수명에 걸쳐 분명하다 . 허혈성 심장 질환 7에서 조기 사망으로 출생에서 모든 누적 심장 위험 요소 - 유아기와 아동기 3.4 및 이후 고혈압 5, 당뇨병 6 및 성인 생활에서 개발 비만

우리는 모두 더 나은 IUGR 관련 차량의 병태 생리를 이해하는 경우 IUGR 감소 기판이 가능한 경우에만 후속 태아 응답을 설정 산모 - 태아 통신의 특징을 동물 모델을 개발하는 것은 필요하다DIAC 장애와 태아 및 출생 후의 건강을 개선하기 위해 심장 - 보호 전략을 개발할 수 있습니다. 이 점에서, 다른 종에 걸쳐 다양한 모델을 설명하고 있습니다. 8 IUGR는 일반적으로 설치류에 낮은 단백질 다이어트와 영양에서 어머니에 의해 유도되고, 9 수술 절제하거나 자궁의 혈액의 흐름 결찰 설치류 기니피그 10 또는 폐색 양의 대동맥. 11 그러나 분명이없는 모델은 완전히 recapitulates 인간의 IUGR합니다. 12

이 전류 방법론 연구에서는 임상 적으로 14 초음파로 관찰 태아 심장 혈관 반응을 생산뿐만 아니라 microultrasound 기술을 사용하여 새로운 심 초음파 검사로 태아의 심장 기능의 심문을 허용하지 만 그 토끼 13-16 선택적 uteroplacental 혈관 중단의 잘 검증 된 방법을 사용 VisualSonics VEVO 2100. 반면 fetopl의 도플러 초음파acental 혈관 IUGR 태아 17 현재 산전 감시의 초석 유지 기능 초음파 검사가 점점 질병의 병태 생리에 새로운 통찰력을 제공하고, 태아의 안녕을 평가하기 위해 활용되고있다. 18 따라서, 우리가 임상 연구에서 이러한 발전을하고 동물 모델을 설명하는 이 영상 세련미뿐만 아니라 항만하지만 또한 기계적인 경로와 새로운 치료를 조사하는 실험적인 플랫폼을 제공합니다.

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Protocol

다음과 같은 실험 프로토콜은 동물 윤리위원회, Katholieke의 Universiteit 루벵, 루벵, 벨기에에 의해 승인됩니다. 우리는 특히 마취 절차의 몇 가지 방법 론적 변화 등 앞에서 설명한 수술의 13 따랐다.

1. 자궁 내 성장 제한 (IUGR)를 유도

  1. 임신 한 토끼 (하이브리드 덴 데르 몬데, 뉴질랜드 화이트) 일자 시간 임신 주수 (GA) 18 일 ~ 물과 표준 토끼 차우 광고 무제한으로에 액세스 12분의 12 시간 등 일정에 따라 개별 케이지에 보관되어 있습니다. GA 25 일 (전체 기간은 약 삼십일일로는), 토끼는 IUGR의 수술 창조를위한 운영 극장에 전송됩니다. 수술 전에 무작위 "사례"(IUGR)과 확률 소프트웨어 (GraphPad 소프트웨어, USA) 19를 사용하여 쌍각 토끼 자궁에서 "컨트롤"자궁을 할당합니다. 표본의 크기는 각각 R의 전력 계산에 의해 결정되어야한다그 자신의 질문에 대한 esearchers.
  2. 마취 절차.
    유도 마취는 케타민을 35 ㎎ / ㎏ (CEVA 산테 ANIMALE, 브뤼셀, 벨기에)와 xylazine 5 ㎎ / ㎏ (CEVA 산테 ANIMALE, 브뤼셀, 벨기에) 근육 뒷다리의 관리에 의해 달성된다. 마취 후 1-4%의 흡입 혼합물로 유지됩니다 isoflurane을 (Isoba 수의사, 애보트 래 버러 토리스 회사, Queenborough, 켄트, 영국) 2 L / 분에서 O 2인치 지속적으로 심장 박동과 동맥 O 2 포화도를 모니터링하는 어머니의 두 번째와 세 번째 발가락에 맥박 산소 농도 체 (Nellcor N-20, 코비 디엔, 아일랜드)를 놓습니다.
  3. 수술.
    1. 전 처치. 이전에 수술을 시작하기에는 예방 적 항생제 페니실린 G, 300,000 IU (Kela 제약, Hoogstraten, 벨기에), 자궁 tocolytic 메드 록시 프로게스테론 아세테이트 0.9 ㎎ / ㎏ (데포 프로 베라, 파마시아 Upjohn, Puurs, 벨기에)와 진통제 부 프레 노르 핀 0.03 ㎎ / 관리 kg (Temgesic, Schering 쟁기) 피하 하나의 2.5 ML의 주사기합니다.
    2. 토끼 준비. 수술의 기간 동안 지구 온난화 패드에 토끼를 놓습니다. 복부 수술 부위에서 머리를 제거하고 (베타 딘, 퍼듀, 코네티컷, 미국)의 7.5 % 포비돈 - 요오드 살균 적용됩니다. 완전한 무균 프로토콜은 다음 사용됩니다.
    3. 복부 개복술은. 피하 국소 마취제 (2 ㎖ 1 % 리도카인, B 브라운 의료, 벨기에)와 절개 사이트를 침투. 절개 사이트는 복부의 2 / 3 아래에있는 중간 선 길이 약 5cm,이어야한다. 피부가 열리면 직근 칼집을 노출 샤프하고 무딘 절개의 혼합물을 사용합니다. 주의 항목 (그림 1A)의 정중선의 양쪽에있는 혈관 산모의 유방 땀샘을 피하기 위해주의해야합니다. 직근 칼집 및 복막, 복부 내용의 부주의 포함을 방지하기 위해 텐트를 잡고 조심스럽게 날카로운 해부 (그림 1B)를 사용하여 입력합니다.
    4. 자궁 exteriorization는. 따뜻하게 식염수에 적신 거즈 커튼으로 수술 부위를 둘러싸고 있습니다. 조심스럽게 잡고 쌍각 자궁의 양쪽을 외면. 주의이 반갑지 출혈, 통증 및 자궁 수축이 발생할 수 있으므로, 긴장​​의 밑에 질 또는 각 자궁 난소 말 중 하나를 놓지 않도록주의해야합니다. 비서가 지속적으로 자궁 수축을 방지하기 위해 따뜻하게 식염수 노출 된 자궁을 관개한다. 만져 각각의 경적에 존재하는 태아의 수를 기록한다. 규칙에 따라, 난소 끝에 태아는 첫 번째 태아 지정되어 있습니다. 하나의 자궁이 사건 경적이며, 다른 하나는 제어 경적이다. IUGR 유도에 대해 이전에 무작위로 할당 된 경우 경적을 식별하고 복부 (내부 통제 태아)로 다시 제어 경적을 대체합니다.
    5. 수술 IUGR을 유도. 지정된 경우 경적 (그림 1C)의 각 임신낭에 uteroplacental 혈관을 식별합니다.수술 5-0 polyglactin 봉합사 (Vicryl ETHICON, 존슨과 존슨 의료, USA) (그림은 1D-1E)를 사용하여 이러한 혈관 40 ~ 50 %가 결찰. 실제로, 각 임신낭을 공급하는 세 혈관 번들은 종종 있습니다. 이 경우 가장 큰 혈관 번들은 결찰합니다. 완료되면, 자궁이 다시 따뜻하게 식염수 조심스럽게 복부에 반환과 관개.
    6. 복부 폐쇄. 연속 실행 2-0 polyglactin 봉합 (ETHICON Vicryl, 존슨과 존슨 의료, USA)를 사용하여 두 레이어의 복부를 닫습니다. subcuticular 3-0 polyglactin 봉합 (ETHICON Vicryl, 존슨과 존슨 의료, USA)를 사용하여 피부를 닫습니다. 나중에 봉합을 방해 토끼를 방지하기 위해 상처 위에 스프레이 알루미늄 에어로졸.
    7. 복구. 마취를 중단하고 밀접하게 호흡의 회복을 관찰합니다. 음식과 물을 광고 무제한으로 액세스 위에서 설명한 매일 관찰로 토끼는 그 자리하고 있습니다.

2. 태아 심 초음파 및 펄스 파 도플러 초음파를 수행

  1. 같은 토끼 한 후 GA 심 초음파 및 초음파 평가 30 일째 전송됩니다. 토끼는 시험 기간 동안 온난 패드에 배치됩니다.
  2. 마취 절차.
    1. 유도 마취는 케타민을 35 ㎎ / ㎏ (CEVA 산테 ANIMALE, 브뤼셀, 벨기에)와 xylazine 5 ㎎ / 근육 kg (CEVA 산테 ANIMALE, 브뤼셀, 벨기에).을 관리함으로써 달성된다 일단 진정, 주변 귀 정맥에 삽입 된 24 게이지 정맥 (BD Insyte-W, 벡톤 디킨슨 주입 치료 시스템, 유타, 미국)를 사용하여 정맥 액세스 권한을 얻을 수 있습니다.
    2. 마취제와 xylazine의 연속 주입으로 마취 유지 : 2 ML 케타민 (100 ㎎ / ㎖) 1.5 ML xylazine (20 MG / ML) 생리 식염수의 46.5 ML에, 다음 40 주사기 펌프를 통해 주입 ML / HR. 세 방향 - 탭을 보호하고 구조 마취의 5 ML의 주사기 첨부 : 2 ㎖를케타민 (100 ㎎ / ㎖) 1.5 ML xylazine (20 MG / ML). 0.5 ML 구조 마취 Boluses는 거의 필요하지 않습니다. 수술 subcutaneouslyprior, 0.03 ㎎ / ㎏ (Schering 쟁기 Temgesic) 진통제 부 프레 노르 핀을 관리 할 수​​ 있습니다. 산소 2 L / 분은 마스크로 적용됩니다. 지속적으로 심장 박동과 동맥 O 2 포화도를 모니터링하는 어머니의 두 번째와 세 번째 발가락에 맥박 산소 농도 체 (Nellcor N-20, 코비 디엔, 아일랜드)를 놓습니다.
  3. 복부 개복 수술과 자궁 exteriorization가. 1.3.3 및 1.3.4을 참조하십시오.
  4. 심 초음파 및 초음파 검사를위한 태아 위치.
    1. 연구원 향 측면 위치에 토끼를 놓습니다. 이 시험에 대한 하나의 임신낭을보다 쉽게​​ 검색을 용이하게하고 uteroplacental 혈관에 과도한 견인을 방지 할 수 있습니다. 최대한 노출을 최소화하기 위해 한 번에 하나의 임신낭을 외면하려고합니다. 노출 된 임신낭이와 관개 거즈에 배치되어 있는지 확인식염수를 따뜻하게. 난소 및 각 자궁의 질 끝 일반적으로 다른 스터디 그룹 만 태아 사이의 표준화 된 결과를 확인하기 위해 초음파 검사에 사용됩니다.
    2. 태아의 심장 기능은 자궁 exteriorization의 영향에 매우 취약하며 온도와 태반의 혈관을 통해 초음파 트랜스 듀서 압력을 변경합니다. 심장 기능에 이러한 환경과 인성 혼란 함을 주죠 효과를 최소화하기 위해, 초음파 검사는 임신 낭의 exteriorization 후 즉시 시작해야하며, 체계적이고 효율적이어야한다. 우리의 경험에서, 태아 심장 기능의 변화는 거의 노출의 첫 5 분에 발생하지 않습니다. 태아 서맥이 발생하면, 초음파 프로브를 제거 fetoplacental 혈관의 꼬임 방지하기 위해 태아의 위치를​​, 따뜻하게 식염수 또는 짧게 산모의 복부에 다시​​ 임신 낭을 반환과 관개. 이 철에 대한 태아 서맥이 지속되면, 시험TUS은 다음 태아 검사에 찬성하여 포기해야한다.
  5. 태아 심 초음파.
    1. Visualsonics VEVO 2100 (토론토, 캐나다)가 설치되어 심장 및 변형 분석 소프트웨어와 고해상도 microultrasound 플랫폼이 필요합니다. VisualSonics MS-250 트랜스 듀서 (VisualSonics, 토론토, 캐나다)의 데이터 수집에 사용됩니다. 이 대역 13-24 MHz의와 21 MHz의 중심 주파수를 가지고 있습니다. 기하학적 초점은 15mm이고, 최대 이미지 폭은 23mm이며 최대 이미지 깊이 30 mm입니다. 면적은 28 X 5.75 mm입니다. 데이터는 태아 심 초음파의 성능을 위해 초음파 심장 검진 지침의 미국 사회에 따라 그리고 표준에 인수된다. 20
    2. 데이터 수집 1 : 측면보기 측면 네 챔버보기의 수준에서, 스트레인, 변형 속도, 속도 및 변위를 결정하기 위해 적어도 다섯 심장주기의 B-모드 시네 루프를 기록합니다.. 이 오프라인 VevoStrain을 사용하여 분석이전 자세하게 저널에 설명 된대로 (Visualsonics, 토론토, 캐나다) 알고리즘입니다. 21 M-모드 초음파 검사 지표는 다음이 표준보기에서 얻을 수 있습니다. 심장의 구조와 기능을 모두 오프라인으로 측정 한 후 분석 할 수 있습니다 : 수축기 및 이완기 내부 심실 중격 및 직경, 볼륨 박출량, 분수 쇼트닝, 방출 분율과 심장 출력 21.
    3. 데이터 수집 2. 정점보기 혀끝 네 챔버보기 B-모드 시네 루프의 수준에서 위에서 설명한대로 분석을 VevoStrain 반복 할 수 있습니다. M-모드 초음파 검사는 삼첨판 (TAPSE)과 승모판 고리 모양의 평면 수축기 소풍 (MAPSE)과 세로 변형률 및 변형률을 평가하는 데 사용됩니다. 22,23이 정점 뷰는 이전과 같이 판막 흐름 속도 파형의 평가 및 수정 심근 성과 지표를 허용 설명했다. 24
  6. Fetoplacental 도플러 ULT에게 펄스 - 손을 흔들었다rasound.

제대 동맥의 흐름 속도 파형 (FVW은) 컬러 도플러를 사용하여 제대 혈관의 위치를 다음 탯줄의 무료 루프 제대 동맥을 통해 펄스 도플러 샘플 게이트를 배치하여 얻을 수 있습니다. 25 중대 뇌동맥 (MCA) FVW이 있습니다 윌리스의 원이 색 도플러에 의해 위치되면 바로 MCA의 기원을 넘어 펄스 도플러 샘플 문을 배치하여 있습니다. 26 정맥관 (DV) FVW 볼 DV의 근위 부분에서 펄스 도플러 샘플 게이트를 배치하여 얻을 수 있습니다 그것은 태아의 시상 또는 가로보기에서 두 간내 제대 정맥에서 유래. 26 색 도플러와 박동 지수 (PI)는 VisualSonics 심장 혈관 분석 소프트웨어를 사용하여 오프라인으로 계산됩니다.

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Representative Results

uteroplacental 혈관 결찰에서 태아와 태반 제한 비대칭 성장은 그림 1 층에서 정상 대조군 태아 및 태반과 비교됩니다. 컨트롤에 복부 둘레 비율 : 비대칭 성장은 감소 신생아의 출생 체중 증가 머리 둘레가 확인됩니다. fetoplacental 도플러 연구의 대표적인 결과는 그림 2에 표시됩니다. 제어 태아 긍정적 인 이완 기말 유동의 일반적인 저 저항 패턴이 표시됩니다. 다음 IUGR 태아, 부재에서 본 태반 저항의 진보적 인 증가로 끝나는 이완기 흐름이 분명 반전. 그림 3은 건강한 태아의 정상적인 높은 저항 중뇌 동맥 도플러 신호와 같은 태아에 긍정적 인 정맥관을 보여줍니다. IUGR 태아에서 파의 정맥관과 반전의 증가 박동 지수를 볼 수 있습니다. 14 대표 결과 M 모드에서 태아 심 초음파 검사는 다음 그림 4에 표시됩니다. 이 측면 뷰는 내부 심실 직경 및 볼륨 계산을 할 수 있습니다. 치근단보기 TAPSE 및 MAPSE의 계산을 할 수 있습니다. 그림 5에서 보여 변형, 변형률, 변위 및 속도를 계산하는 속도 벡터와 결과 지역 변형 곡선 추적 반점.

그림 1
그림 1. 토끼 모델에서 IUGR을 만드는 수술 방법 : 정중선 개복술은 직근 칼집, 화살표 = mammory 분비 노출, B :. 복강에 안전 항목, C : 임신낭을 제공 화살표 = uteroplacental 혈관, D : 봉합 방법, E : 화살표 uteroplacental 용기 = 완료 내고, F : 대표자 제어 및 IUGR 태아 및 태반.

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그림 2. 제대 동맥의 도플러 초음파 A : 긍정적 인 이완 기말 흐름 (EDF) B :. 결석 이완 기말 흐름 (AEDF), C는 : 이완 기말 흐름 (REDF)를 반전.

그림 3
그림 3 : 정맥관, S = 초 파 (심실 수축기 수축)의 도플러 초음파, D = D 파 (조기 심실 이완기) = 파 (심방 수축) B :. 중대 뇌동맥의 도플러 초음파 .

그림 4
그림 4. M 모드 심 초음파 :. 측면 개의 챔버보기 LVID = 좌심실 내경, IVSD = 심실 중격 직경 RVID은 = 오른쪽 봤어요ntricular 중격 직경, ESD = 최종 수축기 직경, EDD = 최종 이완기 직경 B : 정점보기 삼첨판 고리 비행기 수축기 소풍 (TAPSE) 시연, C : 승모판 고리 모양의 평면 수축기 소풍 (MAPSE)를 보여주는 정점보기.

그림 5
그림 5. 태아 심장 변형 분석 : 좌심실의 엔도와 에피 cardium에 의해 정의 된 관심 영역, B :. 여섯 심근 세그먼트, SR = 최대 수축 변형률 속도의 변형율 곡선, C : 6 심근 세그먼트의 변형 곡선, STR = 최고 수축기 변형​​. M 모드 시연 끝 이완기 (ED) 및 최종 수축기 (ES)에 의해 묘사 된 심장 운동. 큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오 .

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Discussion

우리는 수술 IUGR 13-16를 생산하는 토끼 uteroplacental 혈액 흐름을 감소시키고 나중에 microultrasound 기술과 VisualSonics VEVO 2100에서 사용할 수 심장 기능 분석을 설명하기 위해 태아의 심장 기능 14 검사 이전에 검증 된 방법을 사용했습니다. 작은 동물 모델에서 인간의 IUGR 태아의 fetoplacental 도플러 변화를 재현하고 최근 기술 심 초음파 검사와 심장 기능의 검사를 허용하는 능력은 임상 적 방법으로 태아의 심장 연구를 진행 가능성이 높습니다.

반면 작은 동물 모델은 일반적으로 산모의 열량 제한 또는 낮은 단백질 소비 9 그러나 이러한이 감소 태반 혈액의 흐름, 선진국에서 IUGR의 기본 메커니즘입니다. 쥐 27 또한, 수술 양측 자궁 동맥 결찰술을 입증하는 무능력에 의해 제한됩니다 의존 일반적으로보고, 재현성 나는 발생하지 않습니다N의 성장 제한. 28 토끼 태아에서이 현재의 방법에서, 우리는 인간의 IUGR의 초음파 소견과 일치 제대 동맥 도플러 (UA AREDF)의 부재 또는 역 이완 기말 흐름에 의해 분명 할 태반 부전을 보여줍니다. 그것은이 도플러 신호의 저항 증가는 태반 혈관 침대에서 혈액의 흐름을 하류 임피던스를 반영하고 태반 부전을 나타내는 것을 실험적으로 밝혀졌다 29 UA AREDF의 존재는 분명 50시 -. 융모 혈관의 70 %가 장애입니다 . 임상 적으로 30,31, UA AREDF은 저산소증과 주 산기 예후의 강력한 예측 인자이며, 높은 수준의 위험 임신의 관리에서의 사용을 지원하기 위해 1 - 증거가있다. 17

UA AREDF이 관찰되는 경우이 모델에서는, 연구원은 차 수술은 심한 태반 기능 부전을 생산 성공 확신하고 더 echocardiograph는 할 수 있습니다IC 평가는 결실 될 가능성이 높습니다. 태아 심 초음파는 최근 지금 심장 기능의 자세한 기능 평가를 제공하는 선천성 기형 주로 진단 도메인에서 밖으로 분기하고있다. 18 도플러와 M 모드 둘 다 태아 심실 기능을 평가하고 심 박출량의 측정 값을 도출하는 데 사용할 수 있습니다. 32 최근에, 태아 심장의 성능의 소설 인덱스가 같은 얼룩 추적 및 스트레인 측정을 33로 설명되고, 심근 성능 지수 24,34, 조직 도플러 35 (3D) 입체 기술. 32이 연구의 중요한 기능입니다 이러한 최근의 발전은 Visualsonics VEVO 2100 microultrasound 및 심장 기능 분석 소프트웨어를 사용하여이 작은 규모의 토끼 모델에서 수행 할 수 있습니다. 또한, 앞에서이 모델은 다른 혈관 territ에있는 태아의 혈역학 적 반응의 평가를 할 수 있습니다 14 설명ories에가, 특히 성장 제한 태아를 검사 할 때 임상 연습에서 널리 사용되는 중간 대뇌 동맥, 정맥관 및 대동맥 협부. 36 마찬가지로 조산에 대비하여 당질 코르티코이드를 투여 효과도 검사 할 수있다. 37, 38이 토끼 모델은 자궁의 반대 경적 내부 통제의 측면에서 더 장점, 인간 임신 13 저렴한 비용, 가용성 및 비교적 쉽게 처리에 유사한 융모와 hemochorial 태반을 제공합니다.

해결해야 할이 모델의 몇 가지 제한 사항, 그럼에도 불구하고있다. 주요 제한은 심 초음파 검사시 의원 태아 서맥이다. 모계 isoflurane을 태아 서맥 39 발생할 수 있습니다 흡입 투여 및 심 초음파 검사시 전혀 사용하지 않는 우리의 경우 최소 또는로 보관해야합니다. 대신, 우리는 마취제의 정맥 주입이를 대체하고최근 동맥 압력 40을 의미 변경할 수없는 토끼에 표시되어 xylazine은, 따라서 아마도 태반 (따라서 태아) 관류를 유지. 이 방법에도 불구하고, 외부 환경, 취급 및 초음파 트랜스 듀서 압력에 임신 낭의 노출은 모두 일시적 태아 서맥을 일으킬 수 있습니다. 우리는이 효과를 최소화하기 위해 방법 방법에 대해 설명합니다, 그러나 정확한 결과를 위해 우리는 심 초음파 및 fetoplacental 도플러 초음파가 가장 전체 노출의 약 5 분으로 제한됩니다 믿습니다. 현재 임상 문헌 41에서 설명한 점점 더 복잡 심 초음파 기술과 학습 곡선, 세심한 계획이 표준화 된 결과를 보장하기 위해 사전에 필요합니다. 심 초음파 측정의 몇 가지 예를 들면, 본 연구에서 판막 고리 비행기 수축기 여행을 설명하고 변형 분석을 추적 작은 반점, 일에도 불구하고, 현재의 산과 임상 연습에 설립되지 않습니다성인 심장의 유효 이자율을 사용. 그럼에도 불구하고 42,43, 태아 의학의 이러한 새로운 측정에서 최근의 연구 관심 주어진, 우리는 그들이 토끼 모델을 사용할 때 얻을 가능한 것을 연구를 알리기 위해 우리의 방법론에 포함하기로 결정했습니다. IUGR 태아에서 이러한 특정 매개 변수의 분석이 방법론 연구의 범위를 벗어납니다. 또 다른 제한이 있으므로 잘 관류 난소 및 각 뿔의 질 끝이 태아의 경우 할당에 추천 태아 위치 44에 따라 IUGR의 토끼 자연적인 경향에 관한 것이다. 또한이 방법론 25 일 재태 연령은 수술 IUGR를 유도하는 데 사용됩니다. 이것은 앞에서 설명한 성공적인 실험을 기반으로,하지만 예상 사망률은 50 %입니다. 13,14가 마지막으로 태아의 크기는 나중에 비 안락사 측정 혈류 흐름 프로브 배치를위한 양 모델에서 유용 만성 계측을 배제하고 반복ED 혈액 채취 11. 결론은 심장 기능의 다음 microultrasound 검사와 토끼에 IUGR을 생산하는 uteroplacental 혈관의 선택적 합자 현대 임상 연습에 부합하고 양방향 번역 연구하는 것이 유용합니다 동물 모델을 나타냅니다.

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Disclosures

저자 교수 월 D' hooge는 VisualSonics와 연구 계약을 가지고 있습니다. 나머지 저자는 어떤 공시가 없습니다.

Acknowledgments

(ME, PD) 유럽위원회 (European Commission)의 후원을 부여 빅토리아 정부의 운영 인프라 지원 프로그램 (RH, EW)와 마리 퀴리 INDUSTRIA 산학 협력 및 진학,이 작품은 해밀턴 Fairley는 NHMRC 원정대 (RH, AL)에 의해 지원됩니다 . 저자는이 비디오를 생산하는 자신의 전문 지식에 대한 박사 앙드레 Miyague 박사 프란체스카 루소 씨 로지 타 Kinnart 씨와 이반 Laermans에게 감사의 말씀을 전합니다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ketamine Ceva Sante Animale http://www.ceva.com/en
Xylazine Ceva Sante Animale http://www.ceva.com/en
Depot Provera Pharmacia Upjohn
Penicillin G Kela Pharma http://www.kela.be
Lidocaine B Braun Medical http://www.bbraun.com/
Temgesic Schering-Plough http://www.merck-animal-health-usa.com/
Isolurane Isoba Vet; Abbott Laboratories Ltd http://www.abbottanimalhealth.com/index.html
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
Ethicon Johnson and Johnson http://www.ethiconproducts.co.uk/products/sutures
VEVO 2100 VisualSonics SN100-0032 http://www.visualsonics.com/
Aquasonic Gel Parker Laboratories 01 02 http://www.parkerlabs.com/ultrasound_products.html
Nellcor N-20PA Pulse oximeter Covidien http://www.nellcor.com/prod/PRODUCT.ASPX?S1=POX&S2=MON&id=282&V

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Hodges, R., Endo, M., La Gerche, A., More

Hodges, R., Endo, M., La Gerche, A., Eixarch, E., DeKoninck, P., Ferferieva, V., D'hooge, J., Wallace, E. M., Deprest, J. Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction. J. Vis. Exp. (76), e50392, doi:10.3791/50392 (2013).

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