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Biology

शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता में में आकलन मतभेद Published: August 22, 2013 doi: 10.3791/50547
Automatic Translation
1, 1, 1
1Department of Ecology and Evolutionary Biology, University of California, Irvine

Summary

के बीच अंतर शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता

Abstract

अंडाणु निषेचन के लिए सजातीय पुरुषों के बीच प्रतियोगिता यौन चयन के तंत्र में से एक, बल्कि अधिकतम अस्तित्व और व्यवहार्यता पर 1 से सफल संभोग घटनाओं की संख्या को अधिकतम करने पर चल रही है यानी कि चयन है. शुक्राणु प्रतिस्पर्धा उनके शुक्राणु समय और अंतरिक्ष में संयोग हैं, जिनमें एक ही महिला 2, के साथ मैथुन के बाद पुरुषों के बीच प्रतियोगिता का प्रतिनिधित्व करता है. इस घटना पौधों और जानवरों 3 की कई प्रजातियों में सूचित किया गया है. उदाहरण के लिए, जंगली पकड़ा डी. मेलानोगास्टर महिलाओं आमतौर पर 2-3 पुरुषों के 4 से शुक्राणु होते हैं. शुक्राणु अलग पुरुषों 2,5 से शुक्राणु की सीधी प्रतिस्पर्धा को जन्म दे सकता है जो सीमित भंडारण क्षमता के साथ विशेष अंगों में जमा हो जाती है.

ब्याज की अलग पुरुषों (प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार) का शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता की तुलना नियंत्रित डबल संभोग experimen के माध्यम से प्रदर्शन किया गया हैप्रयोगशाला 6,7 में टीएस. संक्षेप में, एक भी महिला लगातार दो अलग पुरुषों, एक प्रयोगात्मक पुरुष और एक पार संभोग संदर्भ पुरुष के संपर्क में है. एक ही संभोग योजना तो इस प्रकार एक सामान्य संदर्भ के माध्यम से अपने शुक्राणु की प्रतिस्पर्धात्मक क्षमता का अप्रत्यक्ष तुलना की सुविधा के अन्य प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार के उपयोग के बाद है. प्रयोगात्मक और संदर्भ पुरुषों से जन्मा व्यक्तियों के अंश एक सरल गणितीय अभिव्यक्ति 7,8 का उपयोग कर शुक्राणुओं की प्रतिस्पर्धात्मक क्षमता का अनुमान लगाने के लिए अनुमति देता है जो मार्कर का उपयोग करने की पहचान की है. इसके अलावा, शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता प्रयोगात्मक पुरुष अलग क्षमता विशेषताओं को प्रतिबिंबित करता है माना जाता है जो दोस्त (क्रमशः अपराध और रक्षा परख) 9, के लिए दूसरी या पहली निर्भर है कि दो विभिन्न परिदृश्यों में अनुमान लगाया जा सकता है.

यहाँ, हम कथित रूप से टी आबाद कि विभिन्न आनुवंशिक कारकों की भूमिका को पूछताछ के लिए मदद करता है एक दृष्टिकोण का वर्णनडी. में शुक्राणुओं की प्रतिस्पर्धी क्षमता की वह घटना मेलानोगास्टर.

Introduction

ज्योफ पार्कर कीड़े और इसके विकासवादी निहितार्थ 2 में शुक्राणु प्रतियोगिता के प्रसार विख्यात बाद से, ड्रोसोफिला और अन्य प्रजातियों में पढ़ाई की भारी उछाल के कई विभिन्न स्तरों पर इस घटना पर कुछ प्रकाश डाला करने की कोशिश की है. हित के क्षेत्रों के कुछ उदाहरण प्राकृतिक आबादी 9,10, इसकी आनुवंशिक संरचना और आनुवांशिक कारक 11-14 अंतर्निहित की प्रासंगिकता, और लिंगों 15,16 बीच coevolution ड्राइविंग में अपनी भूमिका में अपनी विभिन्नता का सर्वेक्षण किया गया है. डी. में मेलानोगास्टर महिलाओं, विशेष शुक्राणु भंडारण अंगों की सीमित क्षमता, spermatheca और लाभदायक गोदाम 6,17 की एक जोड़ी, अलग पुरुषों से शुक्राणु की प्रतियोगिता के लिए योगदान देता है. लगभग 1,500 शुक्राणु उल्लेख अंगों 18,19 में शामिल किया जा सकता है औरत लेकिन केवल ~ 500 को संभोग के दौरान स्थानांतरित कर रहे हैं. प्रयोगशाला, नियंत्रित डबल संभोग अनुभव मेंएक संदर्भ पुरुष और ब्याज की एक या एक से अधिक पुरुषों से जुड़े बयान को बड़े पैमाने पर शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता 7,8 के मूल्यांकन के लिए इस्तेमाल किया गया है.

शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता कुल संतान से अधिक डबल संभोग प्रयोगों में प्रयोगात्मक पुरुष द्वारा जन्म दिया संतान के अनुपात के रूप में अनुमान लगाया गया है, यानी कि प्रयोगात्मक और संदर्भ पुरुषों दोनों से है. शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता के दो घटक, एक अलग परख में मूल्यांकन उनमें से प्रत्येक शामिल हैं. अपराध परख में, पहली बार पुरुष शुक्राणु से विस्थापित करने के लिए प्रयोगात्मक पुरुष शुक्राणु की क्षमता, संदर्भ पुरुष यानी, मूल्यांकन किया जाता है. इसके विपरीत, रक्षा परख में, प्रयोगात्मक पुरुष शुक्राणु की क्षमता विस्थापन का विरोध करने या संदर्भ पुरुष शुक्राणु का निषेचन की सफलता को कम करने के लिए मूल्यांकन किया जाता है. परख, रक्षा या अपराध के प्रकार पर निर्भर करता है, शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता स्कोर पी 1 या पी 2, क्रमशः के माध्यम से अनुमान लगाया गया है. पी1 और पी 2 0 और 1 के बीच मूल्यों को ही ले जा सकते हैं. मध्यवर्ती मूल्यों आमतौर पर प्रत्यक्ष शुक्राणु प्रतियोगिता से जुड़े एक शारीरिक परिदृश्य पता चलता है जो शुक्राणु मिश्रण, का अप्रत्यक्ष सबूत के रूप में व्याख्या कर रहे हैं. एक ही तर्क के बाद, चरम मूल्यों को मजबूत अंतर शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता के लिए साक्ष्य के रूप में व्याख्या की जा सकती है. प्रारंभिक अध्ययन से पता चला है कि डी में पी 2 मेलानोगास्टर 7 lengthens दो matings के बीच गुजरे समय में वृद्धि के रूप में 0.8 से अधिक है. इस एक ही प्रयोगात्मक डिजाइन अन्य ड्रोसोफिला प्रजातियों में इस्तेमाल किया गया है, पी 2 शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता 20 का मूल्यांकन करने के लिए अध्ययन में आमतौर पर इस्तेमाल आंकड़ा जा रहा है. अधिकांश प्रजातियों के लिए, परीक्षण उपभेदों के पी 2 मूल्यों 0.6 21 से अधिक है. फिर भी, अलग पुरुषों के शुक्राणु के बीच सीधी प्रतिस्पर्धा से संबंधित नहीं कई अन्य तंत्र के समान स्कोर (चर्चा देखें) अर्जित कर सकते हैं.

डीपहले या दूसरे पुरुषों से जन्म दिया istinguishing संतान आसानी से पहचाना मार्कर के उपयोग के माध्यम से संभव है. प्रारंभिक अध्ययन में, पुरुषों में से एक की sublethal खुराक पर विकिरणित किया गया था, उदाहरण के लिए, एक्स - रे ऐसे विकिरणित शुक्राणु से निषेचित लगभग सभी ओवा 7 हैच करने में विफल रहा है. इसके बाद आंख रंजकता या पंख आकार फेरबदल म्यूटेशन सबसे अधिक इस्तेमाल किया मार्करों किया गया है. पूर्व के उदाहरण म्यूटेशनों हैं bw (ब्राउन) 9, सीएन (सिंगरिफ) 22 और डब्ल्यू (सफेद) 23, phenotypes के दूसरे प्रकार को उत्परिवर्तन Cy (घुंघराले) 24 मेल खाती है, जबकि इन म्यूटेशनों के कुछ में सम्मिलित किया गया है एक ही व्यक्ति, उदाहरणार्थ bw. एक हद तक कम करने के लिए, allozymes 25 और प्रसिद्ध विरासत पैटर्न के साथ microsatellites 26,27 भी इस्तेमाल किया गया है.

में मतभेद के लिए परीक्षण करने के लिए प्रयोगात्मक डिजाइनशुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता है कि क्लार्क एट अल का अनिवार्य रूप से यहाँ निम्नानुसार वर्णित. 9. इन प्रयोगों से प्राप्त परिणामों पूरी तरह से जांच के दायरे में प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार का अंतर पितृत्व के बारे में जानकारी दे. भी फिटनेस 14,28 और शुक्राणु दृश्य तकनीकों 24 में बाद निषेचन मतभेद के लिए भत्ता बनाने कि assays पी 1 में मतभेद (या पी 2) अंक शुक्राणु क्षमता में अंतर के रूप में व्याख्या की जा सकें.

चित्रा 1 अपराध और रक्षा assays के दोनों का तर्क रूपरेखा. प्रक्रिया की रसद को वर्णन करने के लिए, एक अपराध प्रयोग डी. में किए गए मेलानोगास्टर 14 विस्तार से समझाया जाएगा. इस विशेष अपराध परख शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता पर बहुजीनीय परिवार शुक्राणु विशेष dynein मध्यवर्ती श्रृंखला (SDIC) के एक औसत दर्जे का प्रभाव के लिए परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया गया था. सभी सदस्यइस बहुजीनीय परिवार की एक्स गुणसूत्र पर मिलकर में रहते हैं. नॉकआउट पुरुषों Sdic क्लस्टर हटाने के द्वारा उत्पन्न किया गया. हटाए गए खंड भी आवश्यक जीन कम विंग (SW) शामिल है और अध्ययन का उद्देश्य Sdic की प्रासंगिकता का मूल्यांकन करने के लिए था, Sdic-दप हटाए जाने को ले जाने के पुरुषों (पी {दप} के रूप में प्रतीक दप के एक ट्रांसजेनिक प्रतिलिपि द्वारा बचाया गया , भी 2 गुणसूत्र पर एक मिनी सफेद रिपोर्टर जीन) किया जाता है. आँखों का रंग पितृत्व की पहचान के लिए एक दृश्य मार्कर के रूप में इस्तेमाल किया गया था. सभी मक्खियों संदर्भ पुरुषों के रूप में इस्तेमाल किया गया जो तनाव ओरेगन-R से उन के अपवाद के साथ एक सफेद उत्परिवर्ती पृष्ठभूमि में थे.

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Protocol

छोटे पैमाने पर प्रयोग पूरी प्रक्रिया से परिचित बनने के लिए किया जाना चाहिए.

1. वर्जिन महिलाओं और भोले नर एकत्रित

ख) ओरेगन आर व्यक्तियों भोले संदर्भ पुरुषों लेने के लिए, ग क) डब्ल्यू 1118 व्यक्तियों कुंवारी महिलाओं को इकट्ठा करने के क्रम में: उल्लिखित प्रयोग की सरल संस्करण वयस्कों के निम्नलिखित संयोजन शामिल है जो प्रारंभिक पार के चार प्रकार के होते हैं, ) पी {दप} समयुग्मक पुरुषों और कुंवारी महिलाओं भोले प्रयोगात्मक पुरुषों (प्रकार मैं) इकट्ठा करने के क्रम में Sdic के जंगली प्रकार के संगठन किया जाता है कि एक नियंत्रण रेखा से, और घ) पी {दप} समयुग्मक पुरुषों और Sdic-दप विलोपन ले जाने Sdic-दप कमी (प्रकार द्वितीय) ले जो भोले प्रयोगात्मक पुरुषों को इकट्ठा करने के क्रम में कुंवारी महिलाओं.

  1. 8-10 महिलाओं और 5 पुरुषों प्रत्येक युक्त कई शीशियों सेट करें. महिलाओं रखना करने की अनुमति देंअंडे और हर 3-5 दिन नए शीशियों को वयस्कों के हस्तांतरण. बोतलों के बजाय शीशियों यदि आवश्यक हो तो का प्रयोग करें और हमेशा ताजा भोजन का उपयोग करें. आवश्यक शीशियों की संख्या अध्ययन के तहत प्रायोगिक पुरुष प्रकार की संख्या और मतभेद (1 टेबल) का पता लगाने के लिए आवश्यक होने का अनुमान व्यक्तियों की संख्या पर निर्भर करेगा. शीशी प्रति 10 से अधिक महिलाओं को संतान की प्रजनन क्षमता में बदलाव के कारण हो सकता है जो लार्वा विकास के दौरान से अधिक भीड़ में परिणाम हो सकता है. 25 पर स्टोर शीशियों ° एक तापमान नियंत्रित कक्ष में सी.
  2. प्रारंभिक पार की स्थापना के बाद के दिनों में 11 वें और 12 वें कुंवारी महिलाओं और भोले पुरुषों का संग्रह शुरू. प्रतीक्षा अवधि के तापमान के अनुसार बदलता रहता है, कम तापमान परिणाम अब विकास के समय में व्यक्तियों के संग्रह में देरी. Eclosion करने के समय को प्रभावित एक और पहलू मध्यम के प्रकार है. ऐसे cornmeal-खमीर मध्यम 29 के रूप में पौष्टिक भोजन, वयस्क के समुचित विकास का आश्वासन दियासंभोग की सुविधा जो प्रजनन प्रणाली,. Unmated लीजिए हर 4-6 घंटे मक्खियों. एकत्रित करते हैं, शीशी में सीओ 2 को शुरू करने से मक्खियों anesthetize, मक्खियों नीचे नल, और सेक्स stereomicroscope के तहत उन्हें (चित्रा 2). सेक्स और उचित phenotype और लेबल शीशियों से अलग शीशियों में वांछित मक्खियों रखें.

1 ध्यान दें. संग्रह दिनचर्या छोड़ते पिछली रात के दौरान उभरा है कि वयस्कों द्वारा सुबह में शुरू होता है. दिन के दौरान एक बार या दो बार कुंवारी महिलाओं और भोले पुरुषों लीजिए. आमतौर पर, डी. मेलानोगास्टर पुरुषों के 25 डिग्री सेल्सियस 30 में eclosion के बाद यौन परिपक्व 8 घंटा हो गया है. मक्खियों 0:12 घंटा / प्रकाश अंधेरे चक्र के तहत रखा जाता है, तो eclosion की दो चोटियों उम्मीद कर रहे हैं: पहले 1-2 घंटे के दौरान प्रकाश बंद कर दिया गया है, पहले प्रकाश पर, और 2 घंटे के दौरान बदल गया है के बाद. Eclosion प्यूपा darkens के बाद 24 घंटे के भीतर होता है.

2 ध्यान दें. कोई 10 से अधिक महिलाओं के शould से अधिक भीड़ को रोकने के लिए एक ही शीशी में डाल दिया. उनमें से कम से कम एक कुंवारी नहीं है क्योंकि यह भी कहा कि वे त्याग किया है मामले में महिलाओं के नुकसान को सीमित करता है.

3 ध्यान दें. एक कम समय अवधि में कुंवारी महिलाओं और भोले पुरुषों की उपयुक्त संख्या में एकत्र करने के लिए, निम्न उपायों को अपनाया जा सकता है. प्रयोगात्मक पुरुषों के दो प्रकार (1 टेबल) से जुड़े प्रयोगों के लिए 1118 w के 15-20 शीशियों सेट करें. हल्के मीडिया की सतह छिड़क और oviposition की सुविधा के लिए कुछ सूखे सक्रिय खमीर छर्रों जोड़ें. लगातार दिन पर माता पिता के कम से कम 4 बार स्थानांतरण. माता पिता को एक और शीशी (चित्रा 3) में स्थानांतरित कर रहे हैं के बाद प्रत्येक शीशी में पोटा बनना लिए उपलब्ध सतह बढ़ाने के लिए, 4 वें या 5 वें दिन के दौरान बहु - मुड़ा हुआ कागज (7 एक्स 5 सेमी) डालें. प्रारंभिक पार से उभरा वयस्कों की संख्या पर्याप्त नहीं है, तो कुछ और दिनों के लिए प्रतीक्षा करें और व्यक्ति के इकट्ठाशीशियों से ए एल एस अलग तारीखों में स्थापित की. कार्यभार बाहर भी कई लगातार दिन भर में प्रयोगों के लिए बाहर ले जाने की योजना है.

2. डबल संभोग प्रयोगों

चित्रा 4 14 में प्रदर्शन डबल संभोग प्रयोगों में शामिल मुख्य कदम से पता चलता है.

  1. 1 दिवस की सुबह पहले संभोग की स्थापना की. ओरेगन आर पुरुषों अपराध परख में दोस्त के लिए पहली बार कर रहे हैं.
    1. हवा खींचने की मशीन का प्रयोग, 04-05 अक्टूबर दिन पुरानी सफेद आंखों डब्ल्यू 1118 कुंवारी महिलाओं और 10 लाल आंखों ओरेगन आर भोले पुरुषों प्रत्येक युक्त शीशियों की स्थापना की. दो से तीन शीशियों लगातार 5 दिनों के लिए दैनिक स्थापित कर रहे हैं. स्थापित किए जाने वाले शीशियों की संख्या उपलब्ध व्यक्तियों की संख्या के आधार पर भिन्न हो सकता है. मक्खियों 2 घंटे के लिए दोस्त के लिए अनुमति देते हैं.
    2. ओरेगन आर पुरुषों त्यागें और एक Aspirator (चित्रा 5) का उपयोग कर एक नई शीशी में प्रत्येक महिला के लिए जगह. लिंग पहचान कुछ के दृश्य निरीक्षण के द्वारा प्राप्त किया जा सकता हैरूपात्मक मतभेद (चित्रा 2). उचित प्रत्येक शीशी लेबल और 2 दिन (इसके बाद "V1") के लिए शीशी में महिला को छोड़ दें.
  2. 3 दिन, पर दूसरी संभोग की स्थापना की. की स्थापना पुरुषों और पार के चयन प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार के किसी भी दिशा में किसी भी संभावित पूर्वाग्रह को कम करने के क्रम में यादृच्छिक पर प्रदर्शन किया जाना चाहिए.
    1. प्रकाश बंद कर दिया जाता है दो घंटे से पहले, एक Aspirator के साथ एक नई शीशी में फिर महिला हस्तांतरण. उचित नई शीशी लेबल (इसके बाद "V2").
    2. वी 2 में एक ही जीनोटाइप के तीन 5-6-दिन पुरानी प्रयोगात्मक पुरुषों का परिचय दें.
    3. प्रत्येक महिला के लिए 2.2.1 और 2.2.2 दोहराएँ.
    4. 4 दिवस पर, सही प्रकाश से पहले दो घंटे खींचने की मशीन का उपयोग करके (यानी 2.2.1 के बाद कोई और अधिक से अधिक 12 घंटा), त्यागने पुरुषों पर बदल दिया है.
  3. दिन 6 पर, एक और नई शीशी में फिर से एक महिला का स्थानांतरण. उचित (इसके बाद "v3 के") नई शीशियों लेबल.
  4. दिवस 10 को, डब्ल्यू 1118 त्यागने
  5. V2 और v3 में वंशज जांच करते हैं. महिला V2 में महिला पहली बार शुरू ovipositing के बाद 17 दिन पर जैसे वी 2 (या v3) में पेश होने के बाद पहली बार निरीक्षण के 13-15 दिनों के बाद किया जाता है. दूसरी निरीक्षण के 17 दिनों के बाद वास्तव में किया जाता है. इस समय सीमा में ही शीशी में कोई दूसरी पीढ़ी की गारंटी देता है कि एक सुरक्षित ऊपरी अस्थायी सीमा बन गया है. संतान की गिनती की सुविधा है, जबकि दो निरीक्षणों से अधिक भीड़ को रोकने के.
    1. 17 दिन में, v1 का निरीक्षण किया और मौजूद लाल आंखों संतान सुनिश्चित करें कि वहाँ; तदनुसार शीशी के निशान नहीं हैं. कोई संतान संदर्भ या प्रयोगात्मक पुरुषों घटित नहीं था के साथ कि संभोग इंगित करता है, जबकि सफेद आंखों संतान की उपस्थिति महिला प्रारंभिक संभोग के समय में कुंवारी नहीं था कि इंगित करता है.
    2. 17 दिन में, वी 2 के पहले निरीक्षण करते हैं. Anesthetize सीओ 2 के साथ V2 में संतान उभरा है और आंखों का रंग और सेक्स से उन्हें तरह. पहले और सेकंड से जन्मा रिकार्ड संतान संख्यादूसरी पुरुषों. चित्रा 6 प्रत्येक संभोग योजना की संतान में उम्मीद phenotypes से पता चलता है. यह विशेष रूप से प्रयोग 14 में, केवल महिला संतान स्पष्ट संदर्भ या प्रयोगात्मक पुरुषों ने जन्म दिया है और इसलिए ही बेटियों से जानकारी पी 2 की गणना करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है के रूप में सौंपा जा सकता है. अन्य मार्कर के साथ पुरुष वंश की पितृत्व असंदिग्ध रूप से आवंटित किया जा सकता है, तो दोनों लिंगों की संतान मायने रखता बहाव गणना में इस्तेमाल किया जा सकता है. संतान त्यागें लेकिन दूसरी निरीक्षण के लिए V2 रखना.
    3. दिवस 20 को, वी 2 में नव उभरा संतान के साथ 2.5.2 में के रूप में आगे बढ़ना है और फिर शीशी त्यागें.
    4. दिवस 20 को, पहली बार के लिए v3 में उभरा संतान का निरीक्षण किया और कदम 2.5.2 का पालन करें.
    5. दिवस 23 को, v3 में नव उभरा संतान के साथ 2.5.3 में के रूप में आगे बढ़ना.

नोट 1: एकाधिक संभोग के लिए हो सकता है कि पी के स्कोर पर संभावित inflating प्रभाव (2.2.2 और 2.2.3) के कारण, संभोगएक विशेष समय सीमा तक सीमित किया जा सकता है. समय सीमा के महिला और इस्तेमाल पुरुषों के जीनोटाइप के साथ जुड़े remating आवृत्ति पर निर्भर करेगा. एकाधिक संभोग की संभावना विशेष रूप से रात के समय 11 के दौरान कम हो जाता है.

नोट 2: इस वयस्क मक्खियों की संख्या कम होने पर खमीर की संभावित अतिवृद्धि के कारण समस्या पैदा हो सकती है क्योंकि जीना खमीर छर्रों न जोड़ें.

3. डेटा विश्लेषण

  1. रिकॉर्ड संतान मायने रखता है एक उपयुक्त सांख्यिकीय पैकेज (एसएएस संस्थान से जैसे जेएमपी) या नि: शुल्क वेब आधारित उपकरण (उदाहरण के साथ आसान दृश्य निरीक्षण और कुशल विश्लेषण के लिए उचित रूप से आयोजित किया जाना चाहिए http://vassarstats.net/ ).
  2. शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता. V2 और v3 से मायने रखता जोड़ें. नहीं या बहुत सीमित संतान (जैसे <10) को जन्म दे दिया है कि महिला मक्खियों, प्रक्रिया के दौरान मृत्यु हो गई, या केवल सफलतापूर्वक insemina थेदो पुरुषों की एक से टेड ​​गैर जानकारीपूर्ण के रूप में माना जाता है और किसी भी बहाव के सांख्यिकीय विश्लेषण (2.5.1 और तालिका 2) से बाहर रखा गया है. प्रत्येक जानकारीपूर्ण महिला के लिए पी 2 स्कोर की गणना.
  3. तुलना प्रयोगात्मक पुरुषों के बीच पी 2 मूल्यों में सांख्यिकीय महत्वपूर्ण मतभेद हैं कि क्या टेस्ट. इस पैरामीट्रिक (जैसे Tukey के एचएसडी) या पी 2 मूल्यों के वितरण की विषमता और विचरण और मतलब के बीच निर्भरता सहित कई कारकों पर निर्भर करता है कि गैर पैरामीट्रिक (जैसे इस्पात Dwass) परीक्षण का उपयोग किया जा सकता है. कोणीय परिवर्तन आमतौर पैरामीट्रिक परीक्षण 31 का उपयोग करने से पहले इस तरह के पी 2 के अनुपात में लागू किया जाता है.
  4. संभोग दर मतभेद (वैकल्पिक). प्रत्येक प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार के लिए, दोगुना mated महिलाओं और केवल प्रथम पुरुष (अपराध परख में संदर्भ पुरुष और घ में प्रयोगात्मक पुरुष के साथ mated है कि उन लोगों की संख्या की गणनाefense परख). एक दो पूंछ फिशर सटीक परीक्षण (पर उपलब्ध का उपयोग http://www.langsrud.com/fisher.htm ), प्रयोगात्मक पुरुषों के दो प्रकार के बीच सांख्यिकीय महत्वपूर्ण मतभेद हैं कि क्या यह निर्धारित.
  5. लिंग अनुपात (वैकल्पिक). प्रत्येक प्रयोगात्मक पुरुष के लिए, उम्मीद 1:1 के अनुपात से प्रत्येक महिला भटक से संतान में चाहे लिंग अनुपात का निर्धारण करने के लिए ची के वर्ग परीक्षण का उपयोग करें.

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Representative Results

तालिका 2 दो अपराध प्रयोगों के कुछ प्रमुख विशेषताएं (Assays के 1 और 2) के सार में डी. साथ और (क्रमशः प्रकार मैं और द्वितीय) एक कार्यात्मक Sdic क्लस्टर बिना मेलानोगास्टर प्रयोगात्मक पुरुषों के 14 की तुलना में कर रहे हैं. खाते में कुछ replicates के साथ सामना करना पड़ा अलग घटनाओं में लेने के बाद, महिलाओं के 58-83% जानकारीपूर्ण और इसलिए उनकी संतान की पितृत्व मायने रखता पी 2 की गणना के लिए इस्तेमाल किया जा सकता होना पाया गया है. गैर पैरामीट्रिक परीक्षण के परिणाम बरकरार क्लस्टर के साथ पुरुषों (प्रकार मैं) 14 की तुलना में Sdic क्लस्टर (प्रकार द्वितीय) के बिना पुरुषों में एक कम शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता के साथ संगत कर रहे थे. यह पैटर्न प्रदर्शन अपराध assays के पार प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य था. एक समान है लेकिन सांख्यिकीय महत्वपूर्ण नहीं प्रवृत्ति () नहीं दिखाया समानांतर में प्रदर्शन रक्षा assays में पाया गया था. महत्वपूर्ण बात है, संभोग दर मतभेद (3.4 कदम) के अभाव संभावना से इनकार किपुरुष जीनोटाइप महिला remating व्यवहार 14 को प्रभावित कर सकता है.

अपराध परख रक्षा परख
प्रायोगिक ♂ प्रकार डब्ल्यू 1118 ♀ या आर ♂ ♂ प्रयोगात्मक डब्ल्यू 1118 ♀ ♂ प्रयोगात्मक या आर ♂
मैं 60-70 60-70 180-210 60-70 60-70 180-210
द्वितीय 60-70 60-70 180-210 60-70 60-70 180-210

तालिका 1. दो प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार की तुलना के लिए डबल संभोग प्रयोगों में आवश्यक व्यक्तियों की संख्या. या आर, ओरेगन, आर.

♀
प्रायोगिक ♂ प्रकार प्रारंभिक गणना संदर्भ के साथ कोई सफल निषेचन ♂ प्रयोगात्मक ♂ साथ कोई सफल निषेचन समस्याग्रस्त 1 जानकारीपूर्ण (%) पी 2 2
परख 1
बी +(प्रकार मैं) 60 5 6 2 47 (78%) 1,000 (1.000-0.987)
ए (प्रकार द्वितीय) 55 1 7 5 42 (76%) 0,986 (1.000-0.936)
परख 2
मैं + (प्रकार मैं) 74 9 7 15 43 (58%) 1,000 (1.000-0.979)
ई (प्रकार द्वितीय) 75 3 8 2 62 (83%) 0,983 (1.000-0.927)

तालिका 2. अपराध assays में इस्तेमाल किया महिलाओं की संख्या में विभिन्न घटनाओं के प्रभाव का सारांश प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार के बीच मतभेद का परीक्षण करने के लिए प्रदर्शन किया. 1, ESCA मर गयापरख के दौरान ped, या एक सीमा मूल्य से नीचे वंश के एक नंबर को जन्म दे रही है. 2 माध्य (अन्तःचतुर्थक श्रेणी).

चित्रा 1
चित्रा 1. अपराध और रक्षा assays के लिए प्रायोगिक डिजाइन. प्रत्येक जीनोटाइप के लिए प्रयोग किया जाता रंग कोड वयस्क मक्खी की आंखों का रंग बताता है. अध्ययन के तहत आनुवंशिक कारक के जंगली प्रकार के प्रपत्र (प्रकार मैं) ले जा रहा एक और आनुवंशिक कारक की कार्यक्षमता को दिया गया है, जिसमें से एक: ओरेगन आर पुरुषों दो प्रयोगात्मक पुरुषों की परोक्ष रूप से शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता की तुलना करने के लिए एक संदर्भ के रूप में इस्तेमाल कर रहे हैं (प्रकार द्वितीय) परेशान. दप transgene 2 गुणसूत्र पर स्थित है, जबकि Sdic क्लस्टर, इस मामले में आनुवंशिक कारक, एक्स गुणसूत्र पर स्थित है. चित्रित प्रयोगों में प्रदर्शन उन का हिस्सा हैं लोमो (SDIC, दप), Sdic बहुजीनीय परिवार और आसन्न जीन दप सहित कमी. वाई, वाई गुणसूत्र, पी {दप}, transgene है, डब्ल्यू 1118, सफेद जीन की एक उत्परिवर्ती एलील.

चित्रा 2
चित्रा 2. डी. में लिंग पहचान मेलानोगास्टर. (ए) पृष्ठीय, (बी) के पार्श्व, और 1 घंटा पुराने महिलाओं (बाएं) और stereomicroscope के तहत सीओ 2 के साथ anesthetized पुरुषों (सही) (सी) उदर दृश्य. पुरुष जननांग एक स्पष्ट अंधेरे स्थान को जन्म दे रही योनि प्लेट की तुलना में काफी अधिक रंजित है, इस sexing के लिए उपयोग करने के लिए सबसे विश्वसनीय चरित्र है. इसके अलावा, पुरुष forelegs की पदकूर्च अंधेरे के एक किनारे में (सेक्स कंघी) अनुपस्थित bristles के अधिकारीएस्पिरेटरों उपयोग कर शीशियों में व्यक्तियों के हस्तांतरण जब महिला. (डी) नग्न आंखों से पुराने मक्खियों के विश्वसनीय और तेजी से लिंग पहचान अत्यधिक की सिफारिश की है. पुराने वयस्कों में, पुरुष पेट महिला की तुलना में पीछे की ओर ज्यादा गहरा है. महिलाओं को आमतौर पर बड़े होते हैं और पुरुषों की तुलना में एक पीला पेट है. अंडनिधानांग महिला पेट की ओर इशारा करता है.

चित्रा 3
चित्रा 3. लार्वा भटक के लिए उपलब्ध सतह को बढ़ाने के लिए इस्तेमाल किया मल्टी मुड़ा हुआ कागज.

चित्रा 4
4 चित्रा. डी. में शुक्राणुओं की प्रतिस्पर्धी क्षमता में परख अंतर करने के लिए प्रयोग की रूपरेखा वीर का उपयोग कर 2 घंटे के लिए मेलानोगास्टर. मास संभोग जिन डब्ल्यू 1118 महिलाओं और ओरेगन आर पुरुषों के 5 दिनों के लिए हर दिन शुरू कर रहे हैं. प्रत्येक मास सहवास में एक बार समाप्त, 12-14 महिलाओं के व्यक्तिगत शीशियों (v1) में अलग से aspirated किया जाना चाहिए. दो दिन बाद, प्रत्येक महिला एक ही जीनोटाइप के तीन प्रायोगिक पुरुषों के साथ मिलकर एक नई शीशी (वी 2) में स्थानांतरित किया है. इन व्यक्तियों को रातोंरात दोस्त के लिए अनुमति दी जाती है. महिलाओं के 2 दिनों के लिए अंडे देना करने की अनुमति है, जबकि पुरुषों ~ 12 घंटे के बाद खारिज कर रहे हैं. इसके बाद महिलाओं को फिर से अंडे देना करने की अनुमति दी नई शीशियों (v3) में स्थानांतरित कर रहे हैं, और अंत में 3 दिनों के बाद खारिज कर दिया. महिलाओं v2 और v3, प्रयोगात्मक और संदर्भ पुरुषों से जन्मा संतान दोनों में अंडे देना शुरू कर दिया तेरह से पंद्रह और 17 दिनों के बाद उचित मार्कर का उपयोग पहचान की है और दर्ज की गई हैं. V2 और v3 में वंशज दो बार निरीक्षण कर रहे हैं के बाद, शीशियों खारिज कर रहे हैं. नीचे तीर, त्याग व्यक्तियों, आंख प्रतीक, शीशी निरीक्षण. 9 से अनुकूलित.d/50547/50547fig4large.jpg "लक्ष्य =" _blank "> बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें.

चित्रा 5
चित्रा 5. लचीले वातशोषक. एम्बर लाटेकस टयूबिंग से इकट्ठे, एक 1 मिलीलीटर डिस्पोजेबल mouthpart के रूप में मक्खियों और अन्य कामकाज को प्राप्त करने के लिए टिप स्नातक किया. ट्यूब में चूसा जा रहा है मक्खियों को रोकने के लिए, ठीक मेष कपड़े ट्यूब को जंक्शन पर फ्लाई प्राप्त टिप ढाल इस्तेमाल किया जाता है.

चित्रा 6
6 चित्रा. अपराध परख की संतान में उम्मीद phenotypes. वाम और सही, क्रमशः शुक्राणु प्रतिस्पर्धी नियंत्रण की क्षमता और दस्तक बाहर पुरुषों का मूल्यांकन करने के लिए पार. Parentals और च दोनों की संतान के लिए जीनोटाइप और आंखों का रंगathers दिखाए जाते हैं. क्योंकि इस परख में इस्तेमाल विशेष आनुवंशिक मार्करों के, केवल महिला संतान पी 1 (या पी 2) अंक (विवरण के लिए पाठ देखें) की गणना करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, प्रयोगात्मक पुरुष द्वारा जन्म दिया पुरुष संतान का हिस्सा सफेद आंखों है और . संदर्भ पुरुष का पुरुष संतान से इसलिए phenotypically पृथक लोमो, कमी, पी {दप}, transgene है;. सफेद जीन की डब्ल्यू 1118 उत्परिवर्ती एलील बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .

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Discussion

हम आनुवंशिक रूप से अलग के सापेक्ष योगदान में मतभेद का आकलन करने के लिए प्रयोगात्मक डिजाइन का वर्णन किया है डी. नियंत्रित डबल संभोग प्रयोगों 7,8 में संतान को मेलानोगास्टर पुरुषों. यह शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता प्रभावित करने के लिए और एक समान प्रक्रिया का बचाव परख (चित्रा 1) पर लागू होता है, हालांकि यह अपराध परख के भीतर यह साफ कर दिया गया है धारणा एक आनुवंशिक कारक के संदर्भ में किया गया है. इस प्रयोगात्मक डिजाइन ऐसी महिला जीनोटाइप 32 के प्रभाव के रूप में पितृत्व सफलता के अन्य पहलुओं का परीक्षण करने के लिए संशोधित किया जा सकता है. शामिल किया जा सकता है कि संशोधनों का एक उदाहरण महिला और दूसरा पुरुष के बीच शयन की प्रत्यक्ष निगरानी कर रहा है. इसके अलावा, प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार के रिश्तेदार प्रदर्शन पुरुष और महिला उपयोग किया परीक्षक के जीनोटाइप पर निर्भर है और इसलिए अन्य परिदृश्यों के लिए extrapolated नहीं किया जा सकता है ध्यान दें कि यह भी महत्वपूर्ण हैविभिन्न परीक्षक पुरुषों और महिलाओं 10,32,33 को शामिल.

आवश्यक व्यक्तियों (कुंवारी महिलाओं और भोले पुरुषों) और संतान की स्कोरिंग का संग्रह श्रम गहन हैं, मूल्यांकन करने के लिए अलग प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार की संख्या में उपलब्ध अच्छी तरह से प्रशिक्षित कर्मियों की संख्या के अनुसार समायोजित किया जाना चाहिए. यहाँ उल्लिखित प्रयोगों को आसानी से छह सप्ताह से अधिक एक व्यक्ति द्वारा नियंत्रित किया जा सकता है. वास्तव में, अप करने के लिए पाँच प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार समानांतर में मूल्यांकन किया जा सकता है. अपनाया जाना ही अतिरिक्त उपाय दिनों प्रारंभिक जन matings स्थापित करने और उनके लिए आवश्यक व्यक्तियों को एकत्रित करने की संख्या को लम्बा करने के लिए है.

हमारे अनुभव में, इस्तेमाल किया महिलाओं का प्रारंभिक संख्या (60-70) प्रयोगात्मक पुरुष प्रकारों (तालिका 2) के बीच अंतर का पता लगाने के लिए हमारी सांख्यिकीय शक्ति समझौता किए बिना नमूना आकार में कमी को समायोजित करने के लिए पर्याप्त है. मैं की संख्या में कमीnformative महिलाओं के विभिन्न कारकों से, डबल संभोग या अकाल मृत्यु का सबूत का उदाहरण कमी के लिए परिणाम कर सकते हैं. फिर भी, पर्याप्त सांख्यिकीय शक्ति प्राप्त करने के लिए प्रत्येक प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार के लिए आवश्यक महिलाओं की संख्या आनुवंशिक कारक के अंतर्गत अध्ययन के प्रभाव की भयावहता के आधार पर अलग अलग होंगे. एक पायलट प्रयोग प्रतिकृति का उपयुक्त स्तर का अनुमान लगाने के क्रम में बहुत ही उचित है.

वे इस तरह के मतभेदों को योगदान अंतर्निहित तंत्र के बारे में सूचित नहीं करते, हालांकि पी 1 में सांख्यिकीय मतभेद (या पी 2) अंक पुरुष निषेचन दक्षता में बदलाव का संकेत मिलता है. यह शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता (बड़े पैमाने पर 20 और 34 में समीक्षा) पर प्रभाव पड़ सकता है कि कई चर के कारण है. आकार, संख्या और गतिशीलता की तरह शुक्राणु विशेषताओं सीधे 35 शुक्राणु की प्रतिस्पर्धा पर प्रभाव डाल सकता है. इसके अलावा, अन्य तंत्र प्रत्यक्ष शुक्राणु प्रतियोगिता सीए से संबंधित नहींपता भी पी 1 या पी 2 मूल्यों में अंतर करने के लिए योगदान करते हैं. उदाहरण के लिए, पहली बार पुरुष शुक्राणु को प्राथमिकता, हटा repositioned, या पहले या दूसरे पुरुष 19,20 साथ संभोग के दौरान बाहर निकाले जा सकते हैं. यह संभोग के दौरान और नकारात्मक 19,36 पहले पुरुष शुक्राणु को प्रभावित करेगा जो दूसरे पुरुष के वीर्य में मौजूद अणुओं के माध्यम से, उदाहरण के लिए, यांत्रिक उत्तेजना से हो सकता है. इसलिए, उन अतिरिक्त अप्रत्यक्ष तंत्र के प्रभाव का मूल्यांकन कि पूरक assays के आदर्श से पहले यहाँ वर्णित डबल संभोग प्रयोग करने के लिए, प्रदर्शन किया जाना चाहिए. इन assays का उदाहरण युग्मनज व्यवहार्यता में मतभेद (जैसे लार्वा अस्तित्व) और अंततः संतान संख्या में मतभेद का परिणाम जो अंडा हैचेबिल्टीः (सफल अंडे निषेचन के लिए एक प्रॉक्सी) 28,37, के लिए उन परीक्षण कर रहे हैं.

शुक्राणु इमेजिंग तकनीक भी 19,24,28 बहुत जानकारीपूर्ण हो सकता है. मूलतः, एक ओच पुरुषों के शुक्राणु महिला प्रजनन पथ में निगरानी शुक्राणु गतिशीलता की मदद करने के लिए एक फ्लोरोसेंट संलयन प्रोटीन (जैसे एक हरे रंग का फ्लोरोसेंट प्रोटीन के साथ संदर्भ पुरुष के) के साथ लेबल है कि आनुवंशिक रूप से संशोधित किया जाता है. 4 का उपयोग करते हुए आगे धुंधला के साथ संयुक्त यह दृष्टिकोण ',6-diamidino-2-phenyllindole (DAPI) सीधे डी. के विच्छेदित लाभदायक पात्र में पहले और दूसरे पुरुषों से शुक्राणु मायने रखता है की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया गया था मेलानोगास्टर महिलाओं 24,28. एक अध्ययन में 24 में, शुक्राणु की गिनती में मतभेद पुरुष पितृत्व में उन मतभेदों को अप्रत्यक्ष तंत्र के शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता और नहीं में सच मतभेद के चिंतनशील थे कि समर्थन धारणा पी 2 मूल्यों में अंतर के साथ अच्छे समझौते में थे.

बाद के शोधन शुक्राणु विशेष प्रोटीन 19 के लिए जुड़े हुए हरे और लाल फ्लोरोसेंट टैग व्यक्त की कि ट्रांसजेनिक उपभेदों उत्पन्न करके हासिल किया गया है. ये improvemपिता शोधकर्ताओं संकल्प का एक अभूतपूर्व स्तर के साथ दो सीधे प्रतिस्पर्धा के पुरुष शुक्राणु के शुक्राणु की निगरानी करने की अनुमति दी है. निष्कर्ष में डबल संभोग प्रयोगों और लोगों की तरह अतिरिक्त assays के निष्पादन की आनुवंशिकी आधार काटना संभावना को खोलता है जो प्रयोगात्मक पुरुष प्रकार, के बीच पाया पी 1 या पी 2 के स्कोर में कोई मतभेद की प्रकृति को सटीक बनाने में मदद का सुझाव दिया स्वाभाविक रूप से शुक्राणु प्रतिस्पर्धी क्षमता में भिन्नता होने वाली.

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Disclosures

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

Acknowledgments

लेखकों के वित्त पोषण के लिए (एमसीबी-1157876) NSF के धन्यवाद. हम भी उनकी टिप्पणी के लिए अल्बर्टो Civetta, जॉन Roote, और दो गुमनाम रेफरी धन्यवाद.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Amber latex tubing VWR 62996-473 1/4 inch ID, 1/6 inch Wall
1 ml graduated XL filter tips USA Scientific 1126-7810 Any 1 ml pipette tip can be used but semi-transparent and long tips are better as a fly receiver. If filter tips are used, poke out and discard the filter using a needle after the tip end is trimmed
Parafilm Sigma P-7793
Mesh Fabric Thin and smooth
Stereomicroscope Leica S6D
CO2 Tank Airgas CD-50 Use FlyNap (Carolina Biological Supply Company) as an alternative if CO2 is not available
FlyStuff Foot Valve, complete system Genesee Scientific 59-121C Not necessary if FlyNap is used
Plastic vials Genesee Scientific 32-109 Come with carboard trays that can be reused for holding vials
Cotton balls Fisher Scientific AS-212
Active dry yeast Red Star Found in general grocery store
Sharpie markers Different colors may be used for marking different genotypes

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References

  1. Darwin, C. The descent of man and selection in relation to sex. , John Murray. (1871).
  2. Parker, G. A. Sperm competition and its evolutionary consequences in the insects. Biol. Rev. 45, 525-567 (1970).
  3. Birkhead, T. R., Møller, A. P. Sperm competition and sexual selection. , Academic Press. (1998).
  4. Jones, B., Clark, A. G. Bayesian sperm competition estimates. Genetics. 163, 1193-1199 (2003).
  5. Griffiths, R. C., McKechnie, S. W., McKenzie, J. A. Multiple mating and sperm displacement in natural populations of Drosophila melanogaster. Theor. Appl. Genet. 62, 89-96 (1982).
  6. Jonsson, U. B. Sperm transfer, storage, displacement, and utilization in Drosophila melanogaster. Genetics. 47, 1719-1736 (1962).
  7. Boorman, E., Parker, G. A. Sperm (ejaculate) competition in Drosophila melanogaster, and the reproductive value of females to males in relation to female age and mating status. Ecol. Entomol. 1, 145-155 (1976).
  8. Gromko, M. H., Gilbert, D. G., Richmond, R. C. Sperm Competition and the Evolution of Animal Mating Systems. Smith, R. L. , Academic Press. 372-427 (1984).
  9. Clark, A. G., Aguade, M., Prout, T., Harshman, L. G., Langley, C. H. Variation in sperm displacement and its association with accessory gland protein loci in Drosophila melanogaster. Genetics. 139, 189-201 (1995).
  10. Clark, A. G., Begun, D. J., Prout, T. Female x male interactions in Drosophila sperm competition. Science. 283, 217-220 (1999).
  11. Civetta, A., Clark, A. G. Chromosomal effects on male and female components of sperm precedence in Drosophila. Genet. Res. 75, 143-151 (2000).
  12. Greenspan, L., Clark, A. G. Associations between variation in X chromosome male reproductive genes and sperm competitive ability in Drosophila melanogaster. Int. J. Evol. Biol. 2011, 214280 (2011).
  13. Chapman, T., Neubaum, D. M., Wolfner, M. F., Partridge, L. The role of male accessory gland protein Acp36DE in sperm competition in Drosophila melanogaster. Proc. Biol. Sci. 267, 1097-1105 (2000).
  14. Yeh, S. D., et al. Functional evidence that a recently evolved Drosophila sperm-specific gene boosts sperm competition. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 109, 2043-2048 (2012).
  15. Pitnick, S., Markow, T. A., Spicer, G. S. Evolution of multiple kinds of female sperm-storage organs in Drosophila. Evolution. 53, 1804-1822 (1999).
  16. Pitnick, S., Miller, G. T., Schneider, K., Markow, T. A. Ejaculate-female coevolution in Drosophila mojavensis. Proc. Biol. Sci. 270, 1507-1512 (2003).
  17. Nonidez, J. F. The internal phenomenon of reproduction in Drosophila. Biol. Bull. 39, 207-230 (1920).
  18. Miller, G. T., Pitnick, S. Sperm-female coevolution in Drosophila. Science. 298, 1230-1233 (2002).
  19. Manier, M. K., et al. Resolving mechanisms of competitive fertilization success in Drosophila melanogaster. Science. 328, 354-357 (2010).
  20. Simmons, L., Siva-Jothy, M. Sperm competition and sexual selection. Birkhead, T. R., Møller, A. P. , Academic Press. 826 (1998).
  21. Singh, S. R., Singh, B. N., Hoenigsberg, H. F. Female remating, sperm competition and sexual selection in Drosophila. Genetics and Molecular Research. 1, 178-215 (2002).
  22. Markow, T. A. A comparative investigation of the mating system of Drosophila hydei. Animal Behaviour. 33, 775-781 (1985).
  23. Barbadilla, A., Quezada-Díaz, J. E., Ruiz, A., Santos, M., Fontdevila, A. The evolutionary history of Drosophila buzzatii. XVII. Double mating and sperm predominance. Genet. Sel. Evol. 23, 133-140 (1991).
  24. Civetta, A. Direct visualization of sperm competition and sperm storage in Drosophila. Curr. Biol. 9, 841-844 (1999).
  25. Turner, M. E., Anderson, W. W. Sperm predominance among Drosophila pseudoobscura karyotypes. Evolution. 38, 983-995 (1984).
  26. Harshman, L. G., Clark, A. G. Inference of sperm competition from broods of field-caught Drosophila. Evolution. , 1334-1341 (1998).
  27. Imhof, M., Harr, B., Brem, G., Schlotterer, C. Multiple mating in wild Drosophila melanogaster revisited by microsatellite analysis. Mol. Ecol. 7, 915-917 (1998).
  28. Price, C. S., Dyer, K. A., Coyne, J. A. Sperm competition between Drosophila males involves both displacement and incapacitation. Nature. 400, 449-452 (1999).
  29. Ashburner, M. Drosophila: A Laboratory Manual. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. (1989).
  30. Greenspan, R. J. Fly Pushing: The Theory and Practice of Drosophila Genetics. , CSHL. (1997).
  31. Sokal, R. R., Rohlf, F. J. Biometry : the principles and practice of statistics in biological research. , 3d, Freeman, W.H. (1994).
  32. Clark, A. G., Begun, D. J. Female genotypes affect sperm displacement in Drosophila. Genetics. 149, 1487-1493 (1998).
  33. Clark, A. G., Dermitzakis, E. T., Civetta, A. Nontransitivity of sperm precedence in Drosophila. Evolution. 54, 1030-1035 (2000).
  34. Wigby, S., Chapman, T. Sperm competition. Curr. Biol. 14, 100-102 (2004).
  35. Pizzari, T., Parker, G. A. Sperm biology: an evolutionary perspective. Birkhead, T. R., Hosken, D. J., Pitnick, S. , Academic Press. 674 (2008).
  36. Ram, K. R., Wolfner, M. F. Seminar influences: Drosophila Acps and the molecular interplay between males and females during reproduction. Integr. Comp. Biol. 47, 427-445 (2007).
  37. Civetta, A., Rosing, K. R., Fisher, J. H. Differences in sperm competition and sperm competition avoidance in Drosophila melanogaster. Animal Behaviour. 75, 1739-1746 (2008).

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Yeh, S. D., Chan, C., Ranz, J. M.… More

Yeh, S. D., Chan, C., Ranz, J. M. Assessing Differences in Sperm Competitive Ability in Drosophila. J. Vis. Exp. (78), e50547, doi:10.3791/50547 (2013).

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