Summary
Den tibialnerven transection modellen är en väl tolererad, validerade och reproducerbar modell för skelettmuskelatrofi. Modellen kirurgiska protokoll beskrivs och demonstreras i C57Black6 möss.
Abstract
Den tibialnerven transection modellen är en väl tolererad, validerade och reproducerbar modell för denervering-inducerad skelettmuskelatrofi hos gnagare. Även ursprungligen utvecklades och används flitigt i råttan på grund av sin större storlek, är den tibial nerv i möss stor nog att det lätt kan manipuleras med antingen krossa eller transektion, lämnar peroneala och sural nerv grenar av ischiasnerven intakt och därmed bevara deras mål muskler. Således erbjuder denna modell fördelarna med induktion mindre sjuklighet och hinder för förflyttningar än ischiasnerven transection modell och gör också att utredare för att studera fysiologiska, cellulära och molekylära biologiska mekanismer som reglerar processen med muskelatrofi i genetiskt modifierade möss. Den tibiala nerv levererar gastrocnemius, soleus och muskler plantaris, så dess transektion medger studiet av denerverad skelettmuskel sammansatt av snabba II twitch typ fibrer och / eller långsam twitch typ Ifibrer. Här kan vi visa den tibial modellen nerv transection i C57Black6 musen. Vi bedömer atrofi av gastrocnemius, som en representativ muskel, vid 1, 2, och 4 veckor efter denervering genom att mäta muskler vikter och fibertyp specifik tvärsnittsarea på paraffininbäddad histologiska snitt immunostained för snabb ryckning myosin.
Introduction
Skelettmuskel denervering, på grund av traumatisk perifer nervskada, sjukdom eller farmakologisk ingripande, resulterar i en omedelbar förlust av muskel frivillig kontraktila funktion. Muscle börjar samtidigt att förtvina och denna atrofi är reversibla om tid, bra kvalitet reinnervation inträffar 1,2. I avsaknad av reinnervation, fortskrider myofiber atrofi och irreversibla biologic förändringar i muskel inträffa med muskel fibros och myofiber död. Här kan vi visa den tibial modellen nerv transection, en modell av denervering inducerad-skelettmuskelatrofi och fibros, i möss. Denna modell gör det möjligt för forskare att studera fysiologiska, cellulära och molekylära biologiska mekanismer som ligger bakom muskelatrofi in vivo i yttre och inre vadmuskeln muskler. Även historiskt använts främst råttor, låter mer senare tillämpning av denna modell knockout och transgena linjer mus specifikt, utredare för att bedöma betydelsen av sinasärskilt protein (er) av intresse vid induktion, utveckling och underhåll, eller alternativt att lösa, muskelatrofi och fibros in vivo.
Den tibiala nerv är en blandad motor-sensorisk perifer nerv i gnagare bakben, och är en av de tre terminala grenarna av ischiasnerven. Transektion av tibialnerven denervates gastrocnemius, soleus och muskler plantaris (med de tre små djupa flexor musklerna i foten inklusive tibialis posterior, flexor digitorum longus och flexor hallicus longus), och är en väl standardiserad och validerad modell i råttor 3,4 . De yttre och inre vadmuskeln muskler kan lätt dissekeras på seriella tidpunkter efter tibialnerven transection, fixeras och bearbetas för bedömning av muskel histologi och muskelfiber Morfometri, eller flash-fryst för utvinning av muskel-RNA och protein för att studera, till exempel, de cellulära signalerande knyter reglerar muskelatrofi. Den gastrocnemius muskel är en blandad fibertyp muskel (typ I och typ II, fastän övervägande typ II) och soleusmuskeln är sammansatt av en stor del av typ I-fibrer, vilket ger både snabb och långsam muskelfibrerna för bedömning 5,6. Den tibialnerven transection modell är lämplig för att studera processen denerveringen-inducerad muskelatrofi både på kort sikt (dagar) 7 och lång sikt (veckor till månader) 4,8.
I motsats till ischiasnerven transection modell (en andra modell av denervering-inducerad muskelatrofi vanligen används i gnagare), inducerar tibialnerven transection mindre sjuklighet hos djuret, vilket gör det till en mer attraktiv modell. Transektion av ischiasnerven denervates alla musklerna i benet (under knät) och fot, vilket försämrar djurets förmåga att pendla 2, medan transektion av tibialnerven lämnar det PERONEAL och sural nerv grenar av ischiasnerven intakt och därmed skyddaderas mål muskler och sensoriska territorier. Musen är inte plantar flex eller invertera foten, men har möjlighet att pendla lätt och vikten bär lika mycket på båda bakbenen, vilket avsevärt minskar dödligheten i modellen. Gånganalys studier som utvärderar gångmönster har utförts på råttor efter sken-och ischiasnerven skador och visa att fotavtryck och viktbärande bättre bevaras med tibia skada 9,10. Dessutom i tibialnerven transection modell kan den peronealnerven mobiliseras vid en senare tidpunkt och överföras som en källa för fördröjd reinnervation, om studiens utformning kräver 3. I motsats härtill kräver fördröjd reinnervation i ischiasnerven transection modell användningen av en nerv transplantat till ischiasnerven underskott, mycket avsevärt öka den tekniska svårigheten av modellen och begränsar dess användning till skickliga kirurger.
Medan den tibialnerven transection modell requires förtrogenhet av operatören med steril operationsteknik i djur kirurgi, både tibialnerven och muskler kalv den innerverar är lättillgängliga och identifierbar för manipulation, så att individer som inte är kirurger, eller mycket erfarna med djur kirurgi, lätt kan behärska denna modell .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Innan du använder denna modell, måste utredarna ha fått godkännande för den kirurgiska protokollet från deras institutions djuranvändningen beslutande organ. Modellen är godkänd av forskningsetisk nämnd, Hamilton Health Sciences Corporation, McMaster University (AUP # 10-04-24) och utförs i strikt överensstämmelse med rekommendationerna från det kanadensiska rådet om Animal Care.
Ett. Mus Framställning
- Väg musen. Inducera anestesi med 5% isofluran eller 2% halotan. Den krets som används bör garantera tillräcklig utsug av bedövningsmedel för att skydda kirurgen. Efter 2-3 min djurets andning kommer att sakta. Säkerställ blinkreflexen är frånvarande och klämma interdigitala utrymmen i tassen för att bekräfta kirurgisk anestesi (dvs ingen respons från musen). Applicera oftalmisk smörjmedel för ögat, för att förhindra uttorkning av hornhinnan under operationen.
- Raka laterala låret och skinkan från ischiasnervensnäpp till knäet och desinficera med proviodine. Rakning kommer att hålla platsen för snittet hår fri att säkerställa adekvat visualisering av det kirurgiska området och för att minimera interferens med nerv dissekering och transektion. Den ischiasnerven notch, som är överlägsen och bakre till lårbenet, kan identifieras genom palpation.
2. Operative Procedure
- Minska inhalation isofluran till 2% (halotan 1%) och placera musen på sidan (sida som är avsedd för kirurgi uppåt), enligt ett operationellt eller dissekera mikroskop. Alternativt operation kan utföras med luppglasögon sedan 3,5 X förstoring är tillfredsställande för en vuxen (20-25 g) mus.
- Don sterila handskar. Identifiera ischiasnerven skåran genom palpation. Med en skalpell incise huden på laterala låret från sciatic notch till knäet (ca 1 cm).
- Försiktigt sprida huden. Identifiera biceps femorismuskeln, är vilka den platta ytliga muskeln i laterala låretomedelbart under huden. Använda fina saxar, dela biceps femoris muskeln längs muskelfibrerna och håller öppet med en fjäder upprullare att exponera ischiasnerven och dess filialer.
- Identifiera ischiasnerven omedelbart djupt till biceps femoris muskeln. Det kan identifieras av sin karaktäristiska skinande vit färg och är ca 0,8 mm i diameter. Den går från ischiasnerven skåran till knäet, förgrening in i tibia, peroneal och sural nerver på nivån Poplietallymfknutor fossa.
- Försiktigt separera tibial från peroneala och sural nerv grenar med ultrafina pincett och våren microdissecting sax. Den tibia nerv är den största grenen och är oftast centralt. Det är viktigt att inte krossa nerven medan separera grenarna. Hålla nerven bara på det yttre adventicial lagret med de ultrafina pincett, och hålla nerven slack (ej undervisat), kommer att undvika nerv krossa och dragkraft skada.
- För fullständig och varaktig denervatipå, klippa tibialnerven med microdissecting sax så distalt som möjligt, nogsamt undvika de popliteala fartygen. Alternativt, för tillfällig denervering med förväntade komplett reinnervation i 2-4 veckor, kan det tibialnerven enkelt krossas med ultrafina pincett för 15 sekunder istället för transected. (Perifera nerver återföds efter skada och kommer reinnervate utvalda muskeln.)
- Om fullständig denervering krävs, sutur slutet av transected tibialnerven till den främre ytan av biceps femorismuskeln med 10-0 nylon och åter ungefärlig biceps femoris med 5-0 Vicryl för att förhindra avvikande re-innervation av gastrocnemius och soleus muskler.
- Stäng huden med en kör 5-0 Vicryl sutur.
Tre. Postoperativ vård
- Stäng av inhalationsanestetiskt men upprätthålla flödet av syre. Administrera buprinorphine (eller substitut) smärtstillande subkutant.
- Överför musen till en ren bur med ingensängkläder medan vakna ur narkos. Håll på en värmande filt i buren och under direkt observation tills ambulerande.
- Transfer och hus i mjukbotten bur (ej tråd) med gott om mjuka sängar.
- Inspektera operativa lem dagligen för tillstånd operationssåret och foten för utveckling av trycksår klack sår eller bevis för tugga. Mindre problem kan hanteras med aktuella antibiotika eller desinfektionsmedel såsom proviodine. Endpoint indikatorer kräver djur dödshjälp är viktminskning, bevis på dålig egenvård (ruggig päls), och krökt kroppshållning. Dessutom bör djur med stora sår avbrott eller sår som inte läker inom 1-2 veckor med aktuella antibiotika eller verkar ha ont offras.
4. Denerverad yttre och inre vadmuskeln Muscle Harvest
- Vid postoperativ önskad tidpunkt, väger musen och offer med CO2 överdos.
- Raka den mediala sidan av bådeoperativ och kontralaterala ben kontroll och ren med alkohol. Placera musen under en drift eller dissekera mikroskop, eller alternativt använda kirurgiska visning luppar för förstoring.
- På den operativa delen, incisionsfilm den mediala kalvskinn med en skalpell från vristen till knäet och i omkretsled runt vristen. Dra försiktigt huden med pincett utanför muskeln och proximalt mot låret. Detta exponerar alla musklerna i benet. Identifiera gastrocnemiusmuskeln, som är den vadmuskeln som går från knäet till ankeln på den bakre sidan av benet och ligger omedelbart under huden. Identifiera den distala införing av biceps femorismuskeln, proximalt till gastrocnemiusmuskeln på den mediala sidan av knäet. Vid sin distala införing biceps femoris verkar tunna och filmliknande och ligger över den mest proximala delen av gastrocnemius. Med sax och trubbig ände dissektion, försiktigt separera bortre insättning av biceps femoris från gasentrocnemius muskel.
- Vid sin distala införing i calcaneous, avsmalnar gastrocnemius i hälsenan. Identifiera hälsenan, som är vit och seniga. Håll hälsenan med pincett, noga med att inte hålla eller krossa gastrocnemiusmuskeln och dela hälsenan från calcaneus insättning med sax.
- Fortfarande håller senan, försiktigt lyfta gastrocnemiusmuskeln (ljusröd) från de djupa soleus (djupare rött), från den distala införing mot sitt ursprung vid knäet (soleus kan skördas separat).
- Dissekera gastrocnemius utanför benet genom att dividera ursprung gastrocnemius från de mediala och laterala lårbenet chondyles med en sax. Mycket försiktigt dra i muskeln underlättar denna process. Var noga med att inte krossa muskeln.
- De soleus kommer nu vara klart synligt, omedelbart under platsen för gastrocnemius. Lyft soleus från dess införande på hälsenan till sitt ellerigin på den bakre vaden. Om soleus oavsiktligt höjs med gastrocnemius, försiktigt separera den från den skördade provet. Gastrocnemius (ljusröd) och soleus (mörkrött) förblir lätt identifierbara i den skördade provet på grund av sina färgskillnader.
- Väg musklerna separat på en precision skala.
- Split musklerna vertikalt, hälften för snap frysning i flytande kväve (för efterföljande protein och / eller RNA-extraktion), och hälften för histologi (dvs. morfometrisk bedömning, immunhistologi) montering av antingen i 10% formalin, eller fryst fixering i isopentan kyld med flytande kväve , enligt önskemål.
- Upprepa från steg 4.3 ovan om kontroll, icke-opererad, sida att skörda kontroll yttre och inre vadmuskeln muskler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Tibialnerven transection denervates gastrocnemius, soleus och muskler plantaris i vaden. Här kan vi bedöma utvecklingen av atrofi i gastrocnemius, som representant muskel. Gastrocnemiusmuskeln utvanns ur 2-3 månader gamla C57Black 6 möss (Jackson Laboratories) denerverad för 1, 2 eller 4 veckor. Muscle vikter minskar gradvis (figur 1), som gör det tvärsnittsarea av typ II snabba muskelfibrer (Figur 2), över tiden. Gastrocnemius är en blandad fibertyp muskeln (typ I och typ II), men denervering inducerar en fibertyp switch från typ I till typ II fibrer 11, och som ett resultat ett tillräckligt antal typ I-fibrer inte kan vara tillgängliga för mätning och robust statistisk analys.
50657fig1.jpg "/>
Figur 1. Denerverad gastrocnemiusmuskeln visar progressiv atrofi. C57Black 6 möss genomgick transektion av rätten tibialnerven. Gastrocnemiusmuskeln skördades från denerverade (höger) och kontralateral kontroll (vänster) bakben vid 1, 2, eller 4 veckor efter nerv transection. Gastrocnemius muskler vägdes, och vikten på denerverad muskel är uttryckt som ett förhållande av den kontralaterala kontroll innerverad muskel. Denervation inducerar en gradvis förlust av muskelmassa.
Figur 2. Denerverad gastrocnemiusmuskeln visar progressiv minskning myofiber tvärsnittsarea (A) denerverad och kontroll gastrocnemius muskler var formalinfixerade, skära på tvärsnitt vid muscle mittsektionen och immunfärgades för anti-skelettmuskulaturen myosin, snabbt rycka isoform (My-32, Sigma, 1:500 utspädning) följt av biotinylerad sekundär antikropp och streptavidin-HRP/DAB beskrivas som 7. Hematoxylin användes som en motfärg. Snabba rycka typ II fibrer färgas brun och långsamma rycka typ I-fibrer färgas ljust lila. Den tvärsnittsarean (CSA) av fibrerna mättes med ImageJ programvara (Bethesda, NIH) såsom beskrivits 7,12. De snabba rycka typ II fibrer visar progressiv atrofi. Alltför få typ I-fibrer är närvarande i denerverade gastrocnemius att möjliggöra en statistiskt giltig utvärdering av fiber storlek. (N = 6 till 9 möss / grupp Minst 200 myofibers mättes per muskel av en granskare blind för operativ fenotyp presenteras som medelvärde + / Data -... SD Skalfält motsvarar 100 nm). Klicka här för att se större figur .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Den tibialnerven transection modell av denervering-inducerad skelettmuskelatrofi är en allmänt använda och väl validerad modell på råttor. Vi har anpassat modellen för användning i möss, vilket gör det möjligt för forskaren att dra fördel av förekomsten av genetiskt modifierade möss och studera processen muskelatrofi in vivo i frånvaro av proteiner viktiga för regleringen av muskelmassa 7,8. De yttre och inre vadmuskeln muskler, både denervated i denna modell, kan vara enkelt och snabbt dissekeras med minimal hantering, vilket ger utmärkt kvalitet mRNA och protein för efterföljande molekylära analyser. Likaså, på grund av storleken på musklerna, kan de delas upp, ger vävnad från samma djur för samtidig histologiska och morfometrisk analyser. Om bakben funktionell bedömning krävs, kan vandringsled analys vara seriellt utförs. Fötterna doppas i bläck och musen gick igenom en låda med papper påbotten. Kännetecken för de utskrifter kan mätas på ett tillförlitligt och avslutade ange omfattningen av neuromuskulära funktionshinder och gång kompromiss, eftersom fotavtryck egenskaper återspeglar funktionella muskelgrupper 13,14. Medan ursprungligen utvecklats och validerats i råtta 13, kan vandringsled analys också utföras på möss 15.
Tibialnerven transection är i vanligen mycket väl tolereras av möss. Endast en enda dos av smärtstillande är nödvändig i den omedelbara postoperativa perioden. Med hjälp av ordentlig steril teknik, är mjuk vävnad infektion sällsynta. Medan tibialnerven transection inducerar sensorisk parestesi på plantar aspekten av foten, i vår erfarenhet C57black6 och knockout eller transgena möss härledda på denna linje inte tenderar att auto-lemlästa. Dock måste mössen inspekteras dagligen för tecken på auto-stympning, häl trycksår, samt vårdplatsen endpoints. Medan vi har försumbar dödlighet with modellen, finner vi att cirka 2-5% av mössen måste avlivas på grund av själv-medierad skada, eller trycksår utvecklas på, det opererade bakbenet. Användningen av mjuka sängar postoperativt är avgörande för att säkerställa djurets komfort och hjälper till att förhindra uppkomsten av trycksår på den opererade sidan. Ischiasnerven ligatur samt SNI modellen lige (där sken-och gemensamma peroneala grenar av ischiasnerven ligeras, men sural lämnas intakt) fungerar som modeller för neuropatisk smärta 16,17. Således kunde allodyni och termisk hyperalgesi förekommer i foten i vår modell också, men vi har inte sett öppen smärtbeteendet i möss med normal daglig aktivitet på mjukt underlag.
Den tibialnerven av endast ett bakben är transected och eftersom möss tyngd bär nästan lika mycket på båda bakbenen, kan muskulaturen från kontralaterala icke-opererad lem användas som en intern kontroll inom varje djur 7-10.Detta är inte nödvändigtvis fallet i ischiasnerven transection modellen, där mer betydande avvikelser i gång kan inducera en hypertrofisk respons i kontralaterala benet muskler. I tibialnerven transection modellen, använder vi oftast den yttre och inre vadmuskeln muskler från en icke-opererad lem som vår kontroll muskel 7,8. Om utredaren väljer att använda separata djur som vill skörda kontroll muskler, då sham operation ska utföras. Sham kirurgi skulle bestå av administration av anestesi, delning av huden för att exponera tibialnerven, men ingen transektion. Huden skulle helt enkelt vara stängd följande nerv exponering.
I vissa perifera modeller nerv transection, förorenar vandrande reinnervation från proximalstump till målet muskeln den planerade denerveringen. I denna modell, säkra den proximala änden av den transected tibialnerven till den ytliga ytan av biceps femorismuskeln, sluter på muskel gränssnitt, inhibits den vandrande reinnervation. Som sådant är det en kritisk och väsentligt steg i modellen. Errant reinnervation är sällsynt i denna modell.
Likaså är noggrann hantering av nerven under operation nödvändig. De Sural och peroneusnerven grenar måste försiktigt separeras från tibialnerven före tibial transection, och inte krossas eller sträcks i processen. Ovarsam hantering av dessa nerver kommer att äventyra deras funktion, delvis denervating andra bakben muskulatur. Om detta inträffar djurets gång kommer att differentiellt påverkas jämfört med de möss som genomgår sula tibialnerven transection, och den variabla muskel lastningen kan förorena de experimentella resultaten. Likaså måste man vara försiktig när dissekera denerverade muskulatur. Muscle bör hanteras av senan, och inte förstått direkt att undvika krossa artefakt som kommer att påverka histologi, muskelfiber morfometriska analyser och eventuellt genuttryck.
Vi typically använda denna modell i möss 20-24 g (2-3 månader), eftersom djuret är mogen och ischias och tibia nerver är båda av tillräcklig storlek för att vara lätt att hantera. Operationen kan utföras på yngre, mindre djur, om så önskas, men den begränsande faktorn här blir förmåga av kirurgen. Detta kan vara ett problem om utredaren är intresserad av att studera satelliten cellsvaret i denerverad muskeln. Satelliten cell regenerativ potential minskar i äldre jämfört med yngre, djur 18 och därmed yngre djur kan krävas i experimentell design, presenterar en teknisk utmaning för en mindre erfaren operatör.
Den tibialnerven transection modellen kan anpassas från att bara en modell av denervering-inducerad muskelatrofi, till en av fördröjd muskel reinnervation (> 4 veckor), om så önskas, och om erfarna kirurgiska operatörer finns tillgängliga 1,3. Efter en period av denervering anges av investigator, mus kan reopererade och peronealnerven mobiliseras för att reinnervate den denerverade muskulatur. Den distala stumpen av transected tibialnerven identifieras, trimmas och den peronealnerven mobiliseras vid sin distala ände och microsurgically repareras till tibialnerven stubben. Den peronealnerven växer i en takt av ca 1 mm / dygn i tibialnerven stubbe att reinnervate de yttre och inre vadmuskeln muskler. Den tibiala nerv transection modellen ger en fördel över ischiasnerven transection modell i det att en nerv transplantat är inte nödvändig i reinnervation förfarandet 2 på grund av tillgången av peronealnerven. Dock bör det noteras att nerv reanastomoses kräver precision av en kompetent och erfaren operatör.
Sammanfattningsvis, här visar vi den tibial modellen nerv transection i möss, som en enkel, robust, väl validerad och reproducerbar modell för denervering-inducerad skelettmuskelatrofi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Inga intressekonflikter deklareras.
Acknowledgments
Detta arbete har finansierats med bidrag från CIHR neuromuskulära Research Partnership (JNM - 90.959, till Jaeb).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagents and Materials | |||
| 10-0 Nylon suture | Ethicon | 2850G | |
| 5-0 Vicryl suture | Ethicon | J553G | |
| Equipment | |||
| Spring microdissecting scissors | Fine Surgical Tools | 15021-15 | |
| Ultra fine forceps | Fine Surgical Tools | 11370-40 | |
| Non locking micro needle holder (driver) | Fine Surgical Tools | 12076-12 | |
| Spring retractor | Fine Surgical Tools | 17000-02 | |
References
- Fu, S. Y., Gordon, T. Contributing factors to poor functional recovery after delayed nerve repair: prolonged denervation. J. Neurosci. 15, 3886-3895 (1995).
- Kobayashi, J., Mackinnon, S. E., Watanabe, O., Ball, D. J., Gu, X. M., Hunter, D. A., Kuzon, W. M. The effect of duration of muscle denervation on functional recovery in the rat model. Muscle Nerve. 20, 858-866 (1997).
- Bain, J. R., Veltri, K. L., Chamberlain, D., Fahnestock, M. Improved functional recovery of denervated skeletal muscle after temporary sensory nerve innervation. Neuroscience. , 103-503 (2001).
- Batt, J., Bain, J., Goncalves, J., Michalski, B., Plant, P., Fahnestock, M., Woodgett, J. Differential gene expression profiling of short and long term denervated muscle. FASEB J. 20, 115-117 (2006).
- Sher, J., Cardasis, C. Skeletal muscle fiber types in the adult mouse. Acta Neurol. Scand. 54, 45-56 (1976).
- Agbulut, O., Noirez, P., Beaumont, F., Butler-Browne, G. Myosin heavy chain isoforms in postnatal muscle development of mice. Biol. Cell. 95, 399-406 (2003).
- Nagpal, P., Plant, P. J., Correa, J., Bain, A., Takeda, M., Kawabe, H., Rotin, D., Bain, J. R., Batt, J. A. The ubiquitin ligase nedd4-1 participates in denervation-induced skeletal muscle atrophy in mice. PLoS ONE. 7, e46427 (2012).
- Plant, P. J., Bain, J. R., Correa, J. E., Woo, M., Batt, J. Absence of caspase-3 protects against denervation-induced skeletal muscle atrophy. J. Appl. Physiol. 107, 224-234 (2009).
- Varejao, A. S., Meek, M. F., Ferreira, A. J., Patricio, J. A., Cabrita, A. M. Functional evaluation of peripheral nerve regeneration in the rat: walking track analysis. J. Neurosci. Methods. 108, 1-9 (2001).
- Willand, M. P., Holmes, M., Bain, J., Fahnestock, M., de Bruin, H. Electrical muscle stimulation after immediate nerve repair reduces muscle atrophy without affecting reinnervation. Muscle Nerve. 48, 219-225 (2013).
- Sterne, G. D., Coulton, G. R., Brown, R. A., Green, C. J., Terenghi, G. Neurotrophin-3-enhanced nerve regeneration selectively improves recovery of muscle fibers expressing myosin heavy chains 2b. J. Cell Biol. 139, 709-715 (1997).
- Plant, P. J., North, M. L., Ward, A., Ward, M., Khanna, N., Correa, J., Scott, J. A., Batt, J. Hypertrophic airway smooth muscle mass correlates with increased airway responsiveness in a murine model of asthma. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 46, 532-540 (2012).
- Bain, J. R., Mackinnon, S. E., Hunter, D. A. Functional evaluation of complete sciatic, peroneal, and posterior tibial nerve lesions in the rat. Plast. Reconstr. Surg. 83, 129-138 (1989).
- Hare, G. M., Evans, P. J., Mackinnon, S. E., Best, T. J., Midha, R., Szalai, J. P., Hunter, D. A. Walking track analysis: utilization of individual footprint parameters. Ann. Plast. Surg. 30, 147-153 (1993).
- McLean, J., Batt, J., Doering, L. C., Rotin, D., Bain, J. R. Enhanced rate of nerve regeneration and directional errors after sciatic nerve injury in receptor protein tyrosine phosphatase sigma knock-out mice. J. Neurosci. 22, 5481-5491 (2002).
- Richner, M., Bjerrum, O. J., Nykjaer, A., Vaegter, C. B. The spared nerve injury (SNI) model of induced mechanical allodynia in mice. J. Vis. Exp. (54), e3092 (2011).
- Rogoz, K., Lagerstrom, M. C., Dufour, S., Kullander, K. VGLUT2-dependent glutamatergic transmission in primary afferents is required for intact nociception in both acute and persistent pain modalities. Pain. 153, 1525-1536 (2012).
- Thornell, L. E. Sarcopenic obesity: satellite cells in the aging muscle. Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care. 14, 22-27 (2011).
