Summary
我们描述了一个分析估计寿命星形胶质膜谷氨酸在星形胶质细胞谷氨酸转运电流的电生理记录的方法。
Abstract
发现大脑中的谷氨酸转运体密度最高的星形胶质细胞。谷氨酸转运体的移动耦合谷氨酸穿过细胞膜的与共同运输3的Na +和1 H +和1 K计数器运输+。运输过程中所产生的化学计量电流可以监视从星形胶质细胞与全细胞膜片钳记录。的时间过程中所记录的电流的时间过程中谷氨酸的浓度分布的星形胶质细胞暴露,谷氨酸转运体的动力学,和被动电张性能的星形胶质细胞的膜的形状。这里,我们描述的实验和分析的方法,可用于记录在星形胶质细胞谷氨酸转运体的电流和隔离的谷氨酸间隙从所有的其他因素而形成波形的星形胶质细胞的转运电流的时间过程。这里描述的方法可以被用来估计的生命周期F闪光灯开锁和突触释放的谷氨酸在任何地区的中枢神经系统在健康和疾病中的星形胶质细胞的膜。
Introduction
星形胶质细胞是大脑中的星形形态和细膜突起,扩展到整个神经纤维到达邻近的突触联系1,2最丰富的细胞类型之一。星形胶质细胞的细胞膜被密密麻麻的与谷氨酸转运分子3。谷氨酸转运体在生理条件下,迅速地结合在细胞外谷氨酸侧膜,并将其转移到细胞的细胞质中。通过这样做,转运保持较低的基底浓度的谷氨酸在细胞外空间4。精美的星形胶质细胞的过程相邻兴奋性突触的谷氨酸转运体在理想的位置,结合谷氨酸突触活动期间发布,因为它远离突触间隙扩散。通过这样做,运输也限制对围绝经期和额外的突触区域到相邻的突触的谷氨酸溢出,减少兴奋信号的空间传播5-7大脑S IN。
谷氨酸转运是一个生电的过程中化学计量的运动耦合到3 Na +和H +的电化学梯度沿它们的1 K + 8的逆运输。谷氨酸运输相关的(但不是化学计量)阴离子电导渗透到SCN - (硫氰酸盐)> NO 3 - (硝酸)≈CLO 4 - (高氯酸盐)> - > - >氯- > F -不CH 3 SO 3 - (甲烷磺酸钠)和C 6 H 11 O 7 - (葡萄糖酸钙)9-11。这两个电流(化学计量的和非化学计量的),可记录,可通过获得全细胞膜片钳记录从星形胶质细胞,视觉识别根据DODT照明或者红外微分干涉对比(IR-DIC)ACUTê大脑切片12。当前与谷氨酸转运穿过膜的化学计量成分,可以分离通过使用CH 3 SO 3 - ,或C 6 H 11 O 7 -基于细胞内的解决方案,可诱发的星形胶质细胞的闪光uncaging谷氨酸对13,14,或从邻近的突触激活谷氨酸释放,无论是电12或有针对性的光遗传学控制。
的化学计量成分的转运电流的时间过程中被成形由谷氨酸浓度资料在星形胶质细胞的膜( 即谷氨酸间隙)的生存期,谷氨酸转运体动力学的,被动的星形胶质细胞的膜性能,并在突触的刺激,由同步跨激活突触13谷氨 酸的释放。在这里,我们描述的全部细节:(1)实验:约oach隔离电流全细胞膜片钳记录从使用急性小鼠海马脑片作为一个例子实验准备的星形胶质细胞谷氨酸转运体的化学成分;(2)分析法得出谷氨酸清除的时间当然从这些录音13, 14。这些方法可用于记录和分析在中枢神经系统的任何区域中星形胶质细胞谷氨酸转运电流。
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Protocol
1。切片制备
- 准备500毫升/存储解决方案(单位:mm):119氯化钠,氯化钾2.5 1.3 0.5 氯化钙 , 硫酸镁 ·7H 2 O,4 氯化镁 ,26.2的NaHCO 3,1的NaH 2 PO 4,和22葡萄糖,320切片毫渗量,pH值7.4
- 使用250毫升的烧杯中,准备淹没室,为片,填充200毫升切片/存储解决方案,在水浴加热34°C和95%O2,5%CO2泡沫。
- 保留剩下的切片/存储解决方案的玻璃瓶中,在4°C。
- 使用氰基丙烯酸酯粘接剂vibratome的样本保持器上附加一个小的琼脂块(6%时,制备的人工脑脊液),并将其存储在4℃下
- 前30分钟开始切片,将切片/存储解决方案,在一个桶充满了冰,用95%O 2,5%CO 2的气泡的玻璃瓶中。
2。星形胶质细胞的识别和录音 3。 PHARMAC生理隔离的K +电流的持续 4。我染料溶液的突触活性炭运输车电流的(fSTCs促进部分) 5。减法的的剩余zdustained K表+电流从fSTCs 6。隔离的闪光激活运输车电流(外贸公司) 7。解卷积分析
注意:取得最高品质的片,重要的是,这两个部位的脑牢固地粘在vibratome的基板。要做到这一点,使用氰基丙烯酸酯胶粘剂,是不是太液不干燥太快。
注意:如果一切正确的方向,vibratome的应切割矢状切片从背侧向腹侧和从内侧向大脑的横向侧。
注:星形胶质细胞通常具有较低的输入线电阻Ë(〜10MΩ),极化静息膜电位(〜-90毫伏),以及没有烧成活动。星形胶质细胞保持在电压钳模式下( 即保持电流应读为0 pA的)在整个实验中,其静息膜电位。每次刺激前,一个10毫秒的超极化电压阶跃(-3毫伏)是用来监视的星形胶质细胞的串联输入电阻。
注意:的不敏感TBOA的成分(即在TBOA(50 - 100μM))的存在下被记录的一方表示持续的K +电流。上述单指数函数近似它的时间过程。
注:在这里描述拍摄条件(即细胞内CH 3 SO 3 -或C 6 H 11 O 7 - ),生成星形胶质细胞的兴奋性神经轴突突触的刺激与复杂波形的电流由一个快速上升的瞬态向内化学计量电流和缓慢上升,持续内向K +电流反射K +沿周边轴突动作电位的传播后,在细胞外空间的重新平衡。这是至关重要删除此持续的K +电流,任何剩余电流将导致高估谷氨酸寿命。
注意:请记住,在得到控制的条件和在TBOA(10微米)的平均痕迹分析在4.7-4.10必须执行。
注:在这里描述拍摄条件(即细胞内CH 3 SO 3 -或C 6 H 11 O 7 - ),闪光刺激产生星形胶质细胞仅包括快速崛起的瞬时计量内向电流的电流。
注:在6.7中描述的分析,必须执行控制条件和在TBOA(10μM)中得到的平均的痕迹。
图3d左)。
和最能说明(10微米)( 图3b)TBOA记录在转运电流衰减阶段。
注意:在7.2中描述的功能(即H(t))的代表从TBOA(10μM)的存在下的星形胶质细胞的谷氨酸清除的时间过程。
注:反褶积中包含许多分析软件包,如(如MATLAB,蟒蛇)是一种数学运算。编程代码在IgorPro,我们通常使用的执行这种分析,卷积操作可以有效的计算方法如下所述,通过使用离散快速傅立叶变换。首先,使用了FFT运算,来计算二7.2中得到的单指数函数拟合获得的记录,可在TBOA 7.1转运电流screte快速傅立叶变换。接下来,使用的IFFT运算的逆离散快速傅立叶变换的两个FFT函数的比例来计算。由此产生的函数I(t)的可以被描述如下:
第7.3节中描述的步骤允许导出电流TBOA(10μM)( 图3c右)转运的过滤器。该过滤器代表的失真因素,转换谷氨酸的寿命星形细胞的膜转运电流隔离在第4 - 6(即FSTC或FTC)。
注:此步骤可以推导在控制条件下( 图3d权)星形胶质细胞谷氨酸清除的时间过程。假设此解卷积步骤是在控制条件保持不变,并在TBOA(10μM),过滤器的时间的档案。
其中G(t)被在步骤7.1中得到的波形。在上述方程中,术语t对应的时间的积分计算。
注意:当成立之初的方法,<T>计算随着时间的推移被留下的窗户,不受约束的13。这种方法可以被使用,只要整合窗口被设置为宽于谷氨酸的间隙的间隙波形衰减的持续时间完全恢复到基线。然而,如果不是这种情况下,这估计<T>的方法遇到一定的局限性。例如,如果间隙波形不完全衰减回基线,然后按<t>集成窗口的宽度增加。以避免任何潜在的误差源为<T>估计,我们现在计算超过转运电流的峰值的10%相对应的一个时间窗口,其发病14之前和之后。后者的做法,提高细胞之间的一致性与<T>测量。这派上用场,特别是当药物治疗效果分析小间隙的时间过程。
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Representative Results
这里描述的分析方法的成功严重依赖于获得高质量转运电流从任何地区的中枢神经系统的神经胶质细胞的电生理记录。星形胶质细胞在急性小鼠海马脑片,可以很容易地确定下DODT照明或IR-DIC,因为他们的小细胞体(O = 10微米)和髓核突出( 图1)。其独特的星形的形态与落射荧光,共焦或双光子激光扫描显微镜,可以理解,当加入类似的Alexa 594荧光团(50μM)细胞内的溶液中,( 图1)。上面的电生理水平,星形胶质细胞的特点是低输入电阻,超极化膜电位(约-90毫伏),不能产生动作电位。星形胶质细胞产生的电流响应邻近的神经元的刺激,电或光遗传学约紫外光解GED化合物MNI-L-谷氨酸等。
星形细胞转运电流可以记录使用CS +或K +的内部解决方案。需要注意的是,一个流行的K +的替代品,Cs +的支持谷氨酸转运,但减缓的谷氨酸转运体循环率16,17(因为谷氨酸转运体结合和/或转运CS +穿过细胞膜更为缓慢K +)。如果Cs +的显着降低可以结合谷氨酸转运体的数量,它也导致较小/慢转运电流比的记录,可与K +的内部解决方案16,17。
当使用CH 3 SO 3 -或C 6 H 11 O 7 -为主要的细胞内的阴离子,产生的电流由星形胶质细胞谷氨酸转运体在1谷氨酸的化学计量学上耦合的运动,是由于三钠+和K +穿过膜。这个计量电流是国内唯一一家从星形胶质细胞在光解实验记录,我们把它作为美国联邦贸易委员会。当进行光解实验时,建议交替得到的光路打开和阻止紫外线刺激。阻塞的光路所获得的有用的分离所产生的闪光灯可以减去得到的光路打开,被完全隔离的FTC的刺激伪迹的痕迹。
唤起记录在星形胶质细胞突触释放的谷氨酸目前有一个更复杂的波形。它是由一个快速上升的瞬态向内侧的组成部分,由于化学计量学上耦合的谷氨酸转运体电流上述。此外,它包括一个缓慢上升的,持续的内向K +电流由于涌入的K +积累在细胞外空间后,动作电位沿周边轴突传播。一种药物的方法可以用来隔离转运从持续的K +电流的电流,并需要使用高浓度的广谱谷氨酸转运拮抗剂TBOA(100μM)在实验结束12。这里描述的方法采用的是纯粹的分析方法,以隔离谷氨酸转运电流从+电流,因此允许更短的实验( 图2)的持续Ķ。
作为第一个步骤中,我们交错单和双脉冲的突触刺激(相距100毫秒),每10 - 20秒,平均相等数量的次扫描得到的单和双脉冲刺激。成对的刺激诱发的所述第一电流的振幅应该匹配单刺激诱发的电流的幅值。我们开始分析减去当前单一的刺激所诱发诱发成对的刺激。 ,这个减法允许隔离响应第二的刺激,这也是由快速上升,谷氨酸转运瞬态电流和一个缓慢上升的,持续的K +电流( 图2a权)。接着,转移单刺激的响应的时间间隔相对应的成对的刺激脉冲间的时间间隔,这样的时间匹配时出现上述分离的第二响应的单一响应的发病( 图2b )。通过这两个电流相减,分离促进部的转运电流,在这里我们称之为FSTC( 图2c)。 FSTC动力学的突触活化转运电流(标准条款和条件)药理学与高浓度的谷氨酸转运的拮抗剂TBOA(100μM)13孤立的动力学相似。出于这个原因,在以往的工作中,为简单起见,我们简称FSTC作为STC 13,14。尽管具有相似特性的电流,fSTCs和标准条款和条件不相同的电流。出于这个原因的准确性,在这项工作中,我们会参考他们明确作为fSTCs和STC。减法这里描述的方法可以准确地隔离在大多数录音fSTCs。然而,在某些情况下,仍然存在K +电流的剩余持续。在这种情况下,这是必要的隔离持续的K +电流在不同的实验中,使用高浓度的TBOA(50 - 100μM)。药理学上隔离的持续K +电流的时间过程中,可以说是由单指数函数的形式:
星形胶质细胞在不同细胞中的电流通过记录,我们估计平均值τ 崛起 。接下来,我们创造件的单像一个指数函数如上所述,Τ 上升对应Τ 上升实验测量在不同的星形胶质细胞的平均值,A对应于我们要删除的剩余持续Ķ+电流的振幅( 图2d )。
我们刚才所描述的隔离fSTCs,工程的方法,很好地唤起时,谷氨酸释放的,促进突触,也可以用来研究谷氨酸释放突触进行配对脉冲抑郁。然而,这是没有多大用处时,谷氨酸突触正在研究没有显示出任何清晰的形式短期的便利或抑郁症。在这种情况下,药物转运体与高浓度的TBOA(100μM)的电流隔离,隔离的化学计量学上耦合,诱发的突触的谷氨酸转运体电流仍然是最可行的方案。
即没有完全阻止它)。这里的目标是没有失去分辨能力从录音的噪音明显减慢转运电流的时间过程。基本假设是,存在一个小的浓度TBOA,当星形胶质细胞的吸收能力减弱,塑造转运电流衰减的主要因素是谷氨酸浓度逐渐下降,在星形细胞膜12,18。我们适合的转运在控制条件和TBOA的电流,(10μM)与多指数函数:
( 图3a)。我们谷氨酸间隙在TBOA(10μM)与单指数衰减( 图3b),并从多指数函数描述转运体电流在TBOA(10μM; 图3c)反卷积的函数瞬时上升。由此产生的波形的“过滤器”,表示的因子组合,扭曲( 即滤波)到转运电流( 图3c)中的谷氨酸的浓度分布。在控制条件下转运电流从多指数拟合解卷积滤波器允许在控制条件下记录的星形胶质细胞( 图3D)估计谷氨酸浓度分布的时间过程。对于这个反卷积分析中,我们假设的动力学在缺乏和在TBOA(10μM)的存在下,在过滤器保持不变。这是一个合理的假设,因为所有这些因素都有助于过滤器( 即转运动力学,电张过滤和突触的刺激过程中,跨突触的谷氨酸释放的异步)不太可能被影响的存在下,化合物的数量减少TBOA结合谷氨酸转运。
我们使用质心(<T>)谷氨酸在不同细胞的星形胶质细胞的膜的寿命的量度。<T>表示“质量中心”的间隙波形,上升时间和衰减的变化是敏感的谷氨酸清除波形。的质心是表示为:
类=“jove_content”>决定的时间间隔过,我们可以在这个表达式的分子和分母计算积分的方法有两种。由于间隙波形上升和衰变回零,当方法成立之初,有没有规范如何设置的整合窗口,其实这样做是相当松散13。解决这个问题的方法之一是限制整合窗口所花费的时间达到一个任意比例的FTC / FSTC峰,例如10%14。这个简单的准则允许相一致时,执行此分析在不同细胞中,提高在的<T>估计的间隙时波形不完全衰减到零的准确性,并可以提高分析的灵敏度间隙波形小的差异,可能会发生在不同组的细胞。
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图1。鉴定星形胶质细胞在急性海马切片。(AB)DODT“海马CA1区辐射层的星形胶质细胞的图像。根据DODT照明和IR-DIC,星形胶质细胞可以识别他们的小细胞体和突出的髓核。红色箭头指向多个星形胶质细胞,可确定在片制备。黄色的箭头示出的星形胶质细胞的修补和填充用荧光染料(见下文)。 (CD)的海马脑片和双光子经过修补的星形胶质细胞,用黄色箭头(AB)强调的叠加DODT图像。在这个实验中,星形胶质细胞的修补和填充有许3 SO 3 -的内部溶液加入与Alexa 594(50μM)。的星形胶质细胞的过程中扩大几十μm的相差的吨他的细胞体。注解左确定的三个主要的细胞层片可确认的海马CA1形成的。
图2。隔离的fSTCs从的突触活化的转运电流的记录,可在星形胶质细胞 ( 交流 )计划,需要隔离fSTCs,从的突触活化的转运电流的记录,可在星形胶质细胞的分析的步骤。 (四)使用的分析方法,以去除残留的持续K +-从fSTCs电流(见第5节)。 点击这里查看大图 。
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图3。解卷积分析用于计算的星形胶质细胞的谷氨酸清除的时间过程 ( 一 )单指数拟合的FSTC / FTC,孤立在控制条件下(左),和(10μM;右)的存在下TBOA。 (二 )谷氨酸在TBOA间隙(10μM)的时间过程的瞬时上升与单指数衰减函数近似。 (三)解卷积谷氨酸在TBOA间隙(10μM)的时间过程中,从多指数拟合的转运电流在TBOA(10μM)允许估计过滤器。 (四)多指数拟合转运电流控制条件允许去卷积滤波器估计在控制条件下的星形胶质细胞谷氨酸清除的时间过程。files/ftp_upload/50708/50708fig3large.jpg“目标=”_blank“>点击这里查看大图。
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Discussion
这里,我们描述的实验方法得到的星形胶质细胞的电生理记录,协议在星形胶质细胞谷氨酸转运电流隔离的分析和数学方法获得谷氨酸的空隙,星形细胞转运电流的时间过程。
分析的成功依赖于星形胶质细胞的能力,获得高品质的膜片钳记录,用来描述转运电流的拟合算法的准确性。反卷积分析依赖于以下两个假设,(1)的多个进程扭曲谷氨酸的间隙进入实验记录转运电流的时间过程可被表示为一个线性系统。虽然在绝对数许多形状转运电流是非线性系统(谷氨酸原则结合和运输都可以进行饱和度),实验证据籼稻的因素TES,它们的线性制度是广泛的。因此,转运电流和谷氨酸清除的时间过程仍然是相同的,在很宽的范围内的刺激强度,释放概率,谷氨酸浓度13,14,18。近似虽然这似乎是合法的我们的实验条件下,它应该被验证之前重复该分析在不同的实验制剂,(2)过滤器的特点是不受TBOA(10μM)的存在下。这个假设似乎是合理的,因为所有的因素,有助于过滤器( 即转运动力学,电紧张的过滤,并在突触的刺激,异步跨突触释放谷氨酸)是不太可能受到的存在TBOA。
派生谷氨酸清除波形从fSTCs和外贸公司的,我们得到两个不同类型的信息。通过分析fSTCs,我们测量的时间astrocy抽动膜谷氨酸从突触释放的暴露。通过唤起满场的外贸公司的紫外光照射( 即在整个星形细胞表面的谷氨酸uncaging),我们测量时,星形胶质细胞膜暴露于谷氨酸出笼的。所有的谷氨酸分子在这些uncaging实验被释放( 即出笼)在同一时间,所有的转运被激活的同时,由相同的谷氨酸浓度。因此,通过外贸公司的分析,我们可以得到一个间接读出的星形胶质细胞谷氨酸摄取能力。
重要的是要注意,这里描述的方法允许推定谷氨酸的间隙,而不是实际的谷氨酸浓度唤起转运电流值的时间过程 。估计时间当然是一个平均的措施在各个领域的星形胶质细胞的膜电接入谷氨酸清除的时间过程:它是没有敏感的非均质性谷氨酸摄取不同的网站内星形胶质细胞的膜19吨。此信息更有可能通过以下方式获得用高分辨率显微镜对谷氨酸敏感的荧光记者20。然而,目前可用的谷氨酸盐敏感的记者表现出相对较窄的动态范围。这可以引入之间的谷氨酸的浓度分布和荧光信号的非线性失真,限制使用这些探针中提取的时间信息上的谷氨酸浓度的瞬态。因此,它可能是所有这些不同的方法相结合,可以得到最全面的了解星形细胞膜谷氨酸信号的动态。
总之,这里介绍的方法可以用来估计过关时间当然的突触释放或闪存出笼的谷氨酸在星形胶质细胞的膜。他们提供了宝贵的工具,CAn为用于判断谷氨酸在细胞外空间的生存期,在多种生理和病理条件下21动物物种14和脑区在不同的发展阶段13。
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Disclosures
作者宣称没有利益冲突。
Acknowledgments
这项工作是由国家神经紊乱和中风院内研究计划(NS002986)。写的手稿和实施反褶积分析。 JSD反褶积分析,并开发了最初的版本上的文字进行了评论。
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
CGP52432 | Tocris | 1246 | |
(R,S)-CPP | Tocris | 173 | |
DPCPX | Tocris | 439 | |
LY341495 disodium salt | Tocris | 4062 | |
MSOP | Tocris | 803 | |
NBQX disodium salt | Tocris | 1044 | |
D,L-TBOA | Tocis | 1223 | |
Picrotoxin | Sigma | P1675 | |
MNI-L-glutamate | Tocris | 1490 | |
Alexa 594 | Life Technologies | A10438 | Optional |
Matrix electrodes | Frederick Haer Company | MX21AES(JD3) | |
Borosilicate glass capillaries | World Precision Instruments | PG10165-4 | |
Dual-stage glass micro-pipette puller | Narishige | PC-10 | |
Loctite 404 instant adhesive | Ted Pella | 46551 | |
Xe lamp | Rapp OptoElectronic | FlashMic | |
Igor Pro 6 | Wavemetrics |
References
- Ventura, R., Harris, K. M. Three-dimensional relationships between hippocampal synapses and astrocytes. J. Neurosci. 19, 6897-6906 (1999).
- Witcher, M. R., Kirov, S. A., Harris, K. M. Plasticity of perisynaptic astroglia during synaptogenesis in the mature rat hippocampus. Glia. 55, 13-23 (2007).
- Danbolt, N. C. Glutamate uptake. Prog. Neurobiol. 65, 1-105 (2001).
- Herman, M. A., Jahr, C. E. Extracellular glutamate concentration in hippocampal slice. J. Neurosci. 27, 9736-9741 (2007).
- Arnth-Jensen, N., Jabaudon, D., Scanziani, M. Cooperation between independent hippocampal synapses is controlled by glutamate uptake. Nat. Neurosci. 5, 325-331 (2002).
- Barbour, B. An evaluation of synapse independence. J. Neurosci. 21, 7969-7984 (2001).
- Rusakov, D. A., Kullmann, D. M. Extrasynaptic glutamate diffusion in the hippocampus: ultrastructural constraints, uptake, and receptor activation. J. Neurosci. 18, 3158-3170 (1998).
- Zerangue, N., Kavanaugh, M. P. Flux coupling in a neuronal glutamate transporter. Nature. 383, 634-637 (1038).
- Eliasof, S., Jahr, C. E. Retinal glial cell glutamate transporter is coupled to an anionic conductance. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93, 4153-4158 (1996).
- Wadiche, J. I., Amara, S. G., Kavanaugh, M. P. Ion fluxes associated with excitatory amino acid transport. Neuron. 15, 721-728 (1995).
- Wadiche, J. I., Kavanaugh, M. P. Macroscopic and microscopic properties of a cloned glutamate transporter/chloride channel. J. Neurosci. 18, 7650-7661 (1998).
- Bergles, D. E., Jahr, C. E. Synaptic activation of glutamate transporters in hippocampal astrocytes. Neuron. 19, 1297-1308 (1997).
- Diamond, J. S. Deriving the glutamate clearance time course from transporter currents in CA1 hippocampal astrocytes: transmitter uptake gets faster during development. J. Neurosci. 25, 2906-2916 (2005).
- Scimemi, A., Tian, H. Neuronal transporters regulate glutamate clearance, NMDA receptor activation, and synaptic plasticity in the hippocampus. J. Neurosci. 29, 14581-14595 (2009).
- Zuo, Z. Isoflurane enhances glutamate uptake via glutamate transporters in rat glial cells. Neuroreport. 12, 1077-1080 (2001).
- Barbour, B., Brew, H., Attwell, D. Electrogenic uptake of glutamate and aspartate into glial cells isolated from the salamander (Ambystoma) retina. J. Physiol. 436, 169-193 (1991).
- Bergles, D. E., Tzingounis, A. V., Jahr, C. E. Comparison of coupled and uncoupled currents during glutamate uptake by GLT-1 transporters. J. Neurosci. 22, 10153-10162 (2002).
- Diamond, J. S., Jahr, C. E. Synaptically released glutamate does not overwhelm transporters on hippocampal astrocytes during high-frequency stimulation. J. Neurophysiol. 83, 2835-2843 (2000).
- Benediktsson, A. M., et al. Neuronal activity regulates glutamate transporter dynamics in developing astrocytes. Glia. 60, 175-188 (2012).
- Hires, S. A., Zhu, Y., Tsien, R. Y. Optical measurement of synaptic glutamate spillover and reuptake by linker optimized glutamate-sensitive fluorescent reporters. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 4411-4416 (2008).
- Scimemi, A., Meabon, J., Woltjer, R. L., Sullivan, J. M., Diamond, J. S., Cook, D. G. Amyloidβ1-42 slows clearance of synaptically-released glutamate by mislocalizing astrocytic GLT-1. J. Neurosci. 33, 5312-5318 (2013).