Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

إجراء لدراسة تأثير الغذاء المطول تقييد على الهيروين المفضل في الجرذان متقشف

doi: 10.3791/50751 Published: November 11, 2013

Summary

ووصف الإجراء الذي يسمح مظاهرة من زيادة قوية من المخدرات تسعى في الفئران المقيدة الغذاء. التالية الهيروين التدريب الإدارة الذاتية، الفئران تذهب من خلال فترة الامتناع عن ممارسة الجنس، في بيئة خالية من المخدرات، أثناء التي هي أقل ما يقال الغذائية المقيدة. ثم يتم اختبار التماس المخدرات في البيئة المرتبطة بالمخدرات.

Abstract

مدمني المخدرات في الإنسان، يمكن التعرض لمنبهات المرتبطة بالمخدرات أو البيئات التي ارتبطت سابقا مع تعاطي المخدرات يؤدي الانتكاس خلال الامتناع عن ممارسة الجنس. علاوة على ذلك، يمكن أن تؤدي إلى تفاقم التحديات البيئية المختلفة بهذا الشأن، فضلا عن الزيادة المستمرة تناول المخدرات.

الإجراء وصفنا هنا يبرز تأثير تحديا مشتركا البيئية، وتقييد المواد الغذائية، على شغف المخدرات التي يتم التعبير باعتبارها من المخدرات زيادة تسعى في الفئران ممتنعين.

يتم زرع الفئران مع القسطرة الوريدية المزمنة الرابع، ومن ثم تدريبهم على الضغط على رافعة ل رابعا الهيروين على مدى فترة من 10-12 يوما. بعد مرحلة الإدارة الذاتية الهيروين تتم إزالة الفئران من الغرف تكييف هواء فعال ويضم في منشأة رعاية الحيوانات لمدة 14 يوما على الأقل. في حين يتم الاحتفاظ مجموعة واحدة ضمن وصول غير مقيد إلى الغذاء (مجموعة متخم)، يتعرض المجموعة الثانية (مجموعة روزفلت) إلى ميلحافظت دينار الغذاء تقييد النظام الذي ينتج في أوزان أجسامهم بنسبة 90٪ من وزن الجسم nonrestricted. في يوم 14 من التقييد الغذائي يتم نقل الفئران إلى بيئة التدريب المخدرات، ويتم تشغيل اختبار التماس المخدرات في ظل ظروف الانقراض (أي. المطابع رافعة لا يؤدي إلى تسليم الهيروين).

الإجراء المقدمة هنا النتائج في زيادة قوية للغاية من الهيروين تسعى في يوم الاختبار في الفئران الغذائية المقيدة. بالإضافة إلى ذلك، بالمقارنة مع التلاعب الحاد الحرمان من الطعام ونحن قد استخدمت من قبل، والإجراء الحالي هو نموذج أكثر سريريا ذات الصلة لتأثير الحد من السعرات الحرارية على التماس المخدرات. وعلاوة على ذلك، قد يكون أقرب إلى حالة الإنسان كما ليس مطلوبا من الفئران من خلال الذهاب الى مرحلة التدريب الانقراض قبل الاختبار التماس المخدرات، والتي هي جزء لا يتجزأ من هذا الإجراء إعادة شعبية.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

واحدة من صعوبات كبيرة في علاج الإدمان على المخدرات هو ارتفاع معدل الانتكاس، حتى بعد فترات طويلة من الامتناع عن ممارسة الجنس 1،2. وقد حددت الدراسات في مدمني الإنسان مساهمة حاسمة من التحديات البيئية، مثل التعرض لمنبهات منفصلة المرتبطة بالمخدرات أو البيئات 3 و 4 الأحداث المجهدة في الحياة، إلى الانتكاس. ويتمثل أحد التحديات البيئية المشتركة التي تم العثور عليها ليكون لها تأثير على تعاطي المخدرات وحنين هو التقييد الغذائي المزمن. على سبيل المثال، تم الإبلاغ عن أن الحد من السعرات الحرارية المزمن يرتبط مع زيادة تدخين السجائر 5.   علاوة على ذلك، يرتبط ارتباطا واتباع نظام غذائي شدة (السعرات الحرارية) بإيجابية مع زيادة انتشار تعاطي المخدرات في الشابات 6. ومع ذلك، لا يفهم تماما آليات الدماغ الكامنة.

بسبب الاعتبارات العملية والأخلاقية المتعلقة بالبحث الإنسان، النماذج الحيوانية حافي وضعت لتحديد الآليات العصبية ذات الصلة. وقد استخدمنا في السابق بإعادة إجراء 7،8 لإثبات استئناف المخدرات انطفأت تسعى في الفئران التي تتعرض لالحادة (24-48 ساعة) الغذاء الحرمان 9،10. ومع ذلك، جزءا لا يتجزأ من هذا الإجراء هو إعادة فترة الانقراض ليست سمة مشتركة من العلاجات الإدمان على المخدرات 11 (ولكن انظر ابشتاين وآخرون 12 للاطلاع على مناقشة شاملة بشأن صحة إجراء إعادة). وعلاوة على ذلك، في حالة معينة من التلاعب الغذائية في البشر، إلا التقييد الغذائي المزمن، ولكن الحرمان من الطعام لا الحاد وقد تبين، من أجل زيادة 5،13 أخذ المخدرات على نحو فعال.

وبالتالي، فإننا قد اقترح على "الامتناع عن ممارسة الجنس الإجراء" 14 التي تسمح للدراسة آثار التقييد الغذائي المزمن على التماس المخدرات. باستخدام هذا الإجراء أننا أظهرنا مؤخرا زيادة قوية من حeroin تسعى في الفئران ممتنعين بعد التعرض لمدة 14 يوما من التقييد الغذائي خفيفة 15.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. جماعة من الحيوان

يتم التعامل مع جميع الفئران وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي للرعاية الحيوان ومنحت الموافقة على جميع الإجراءات التجريبية من لجنة أخلاقيات البحوث الحيوانية جامعة كونكورديا.

  1. الحصول على الفئران 275-300 ز (ذكور) أو 225-250 غ (إناث). الفئران منزل في أزواج حتى عملية جراحية في الأقفاص البلاستيكية القياسية التي تحتوي على الفراش كوز الذره ورقة ممزقة.
  2. الحفاظ على الفئران على دورة ضوء الظلام عكس (ضوء قبالة في الساعة 9:30 AM).
  3. تأكد من الغذاء والماء بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية المتاحة، ما عدا خلال فترة الامتناع عن ممارسة الجنس. نستخدم الفئران العادية تشاو (بروتين 20.9٪، 67.2٪ و 11.8٪ الكربوهيدرات والدهون).

2. القسطرة وموصلات

  1. جعل القسطرة بكميات كبيرة واستخدامها حسب الحاجة على مدى فترة طويلة من الزمن بعد التعقيم الأوتوكلاف.
  2. قطع أنابيب Silastic إلى 12 سم قطعة طويلة.
    1. استخدام المسواك، لوضع الصغيرةقطرة من السيليكون حول القسطرة، 3 سم من الحافة.
    2. السماح للالسيليكون جافة لمدة 24 ساعة ثم الأوتوكلاف وتخزينها القسطرة.
  3. بيند أنبوب طويل من "5 إلى القمة" قنية، من شأنها أن تكون بمثابة موصل، في الزاوية اليمنى للقاعدة التمثال من البلاستيك، ثم الأوتوكلاف وتخزينها.
  4. تجميع، جو معقم و مطهر، والقسطرة في يوم الجراحة، عن طريق دفع الجانب "طويلة" من الأنبوب Silastic خلال أنبوب معدني عازمة على "متابعة 5" قنية، حوالي نصف الطريق إلى رمى البلاستيك.
    1. ربط "5 متابعة" أنبوب عبر أنابيب Tygon واضعافها 22 G الإبرة إلى حقنة 1 مل مملوءة بمحلول ملحي معقم.
    2. تدفق المياه المالحة من خلال القسطرة لضمان تدفق دون عائق.

3. جراحة قسطرة في الوريد

  1. السماح للفئران أسبوع واحد من التأقلم في مرافق الرعاية الحيوانية (ACF) قبل الجراحة. لا إجراء الجراحة على الفئران مع وزن الجسم أقلمن 300-325 غرام (الذكور) أو 250-275 غ (إناث).
  2. قبل الجراحة وتزن تخدير الفئران مع خليط الكيتامين / زيلازين (90/13 ملغ / كغ؛ الملكية الفكرية).
    1. حلاقة، ومن ثم تنظيف الرأس ومنطقة تقع على الكتف الأيمن (على مقربة من قاعدة العنق) مع الكحول وفرك الجراحية.
    2. حقن البنسلين (450،000 وحدة دولية / الفئران، SC) للحماية من العدوى، و 2 مل من المياه المالحة (الشوري) لترطيب. تطبيق هلام المسيل للدموع لعيون الفئران لمنع جفاف الناجم عن التخدير.
  3. وضع الفئران في البطن وإجراء شق، وذلك باستخدام مشرط، في الجزء العلوي من الرأس، وبين العينين، ونحو caudally نحو الأذنين من الفئران.
  4. وضع فأر على ظهرها مع الساعدين مسجلة إلى السطح. رفع الجلد في منطقة شق، فقط منقاري إلى الترقوة، مع ملقط وجعل 1 سم قطع طولية مع مقص صغير.
  5. باستخدام اثنين من ملقط على التوالي، وفصل الدهون والأنسجة الأخرى حتى (عناوين) الوداجي الخارجييتعرض ن.
  6. دفع نصائح من ملقط على التوالي تحت الوريد لرفع وفصل الوريد من الأنسجة المحيطة بها. تنظيف بعناية الوريد من أي نوع من الأنسجة التمسك ومن ثم إدراج ملقط المنحني تحت الوريد للحفاظ على رفع وامتدت قليلا.
  7. جعل صغيرة، والخامس على شكل، وقطع على السطح العلوي من الوريد باستخدام مقص الربيع الصغيرة.
    1. عقد خفض فتح باستخدام موسع السفينة، وتقدم إلى "القصير"، 3 سم غيض من القسطرة في الوريد نحو القلب حتى قطرة سيليكون هو عند نقطة شق.
    2. ربط القسطرة إلى الوريد مع 3 الغرز: واحد كما الذيلية أقصى حد ممكن، واحد فقط منقاري إلى انخفاض سيليكون والثالث واحد كما منقاري بقدر الإمكان.
    3. تمر المياه المالحة من خلال القسطرة بعد كل خياطة لضمان بقائه دون عائق وأن الغرز ليست ضيقة جدا.
  8. إزالة الشريط حول الذراعين ووضع الجانب البطني الفئران أسفل.
    1. إدراج ر مرقئhrough الجانب الذيلية من شق الرأس ودفع لفصل الجلد عن الأنسجة الأساسية لإنشاء "جيب" تحت الجلد.
    2. توجيه مرقئ تحت الجلد نحو افتتاح على أكتاف حيث تم إدراج القسطرة.
    3. اختراق النسيج الضام باستخدام مرقئ، والمشبك القسطرة بإحكام في النقطة الأكثر منقاري، تحت قاعدة "5 المتابعة."
  9. فصل "5"، إلى جانب الخيط نهاية فترة طويلة من القسطرة تحت الجلد والخروج شق تقع في الجزء العلوي من رأس فأر.
    1. استخدام مقص لقطع القسطرة أدناه حيث فرضت مرقئ وأعد نهاية فترة طويلة من "5 المتابعة."
    2. سحب القسطرة على طول رمح معدني من "5 إلى القمة" على طول الطريق إلى قاعدة التمثال البلاستيك. تمر المياه المالحة من خلال ضمان التدفق الحر.
  10. وضع فأر على ظهرها، وخياطة فقط شق بالقرب من الترقوة. شق الرأس يجب ريمافي المفتوحة.
  11. وضع الفئران في جهاز التجسيمي. سحب الجلد بعيدا في شق في الجزء العلوي من الرأس باستخدام المشابك البلدغ ونظيفة وجافة على سطح الجمجمة.
  12. استخدام مثقاب يدوي، لحفر 4-5 ثقوب في الجمجمة وإدراج براغي آلة في الثقوب لتكون بمثابة سقالات للرئيس كاب.
    1. وضع "5 متابعة" موصل بين مسامير والثنية طول الزائدة من القسطرة في "جيب" تحت الجلد التي سبق باستخدام مرقئ.
  13. استخدام الاسمنت الأسنان ليضعوا "5" الى الجزء العلوي من الجمجمة. إزالة الفئران من جهاز التجسيمي بعد تجفيفها الاسمنت بالكامل.
  14. إعطاء الفئران في مرحلة ما بعد المنطوق الرعاية، والذي يتألف من كيتوبروفين (مسكن؛ 5 مغ / كغ، واتفاقية استكهولم) و 2 مل من المياه المالحة (الشوري). إدارة كيتوبروفين لأيام 2 إضافية بعد الجراحة للمساعدة في إدارة الألم.
  15. تبدأ 48 ساعة بعد الجراحة، الفئران دافق اليومية ثإيث خليط من الهيبارين والجنتاميسين في ملحي معقم (7.5 وحدة دولية + 12 ميكروغرام؛ 0،2-0،3 مل) طوال فترة انتعاش ~ أيام 2 وخلال مرحلة الإدارة الذاتية الهيروين.

4. الإجراءات السلوكية

يتم تقديم جدول زمني لإجراء العملية من المواد الغذائية الناجم عن تقييد زيادة من الهيروين تسعى في الشكل 1.

  1. الغرف تكييف هواء فعال.
    1. الفئران في غرف المنزل بشكل فردي تكييف هواء فعال المغلقة في الصوت تخفيف مقصورات خشبية مجهزة بمروحة.
    2. تتكون كل غرفة من الفولاذ المقاوم للصدأ الطابق الشبكة المعدنية، والأمامي والخلفي جدار زجاجي واثنين من الجدران الجانبية لوحة معدنية. جبل اثنين العتلات قابل للسحب 9 سم فوق الأرض من جدار الحق، وتحديد موقع جديلة الضوء فوق كل ذراع. الاستجابة على (نشط) رافعة تقرن المخدرات ينشط مضخة التسريب حين الاستجابة على (غير نشط) رافعة تقرن nondrug لا يوجد لديه عواقب برمجة. </ لى>
    3. تحديد موقع وحدة نغمة (2.9 كيلو هرتز) أعلاه ذراع نشطة، ووضع أحمر منزل الضوء في الوسط العلوي من جدار اليسار.
    4. توصيل مضخة المخدرات إلى القسطرة عن طريق قطب السائلة وأنابيب Tygon المحمية مع الربيع معدنية. بالإضافة إلى ذلك، تجهيز كل غرفة مع النطاط الطعام وزجاجة الماء السماح بالوصول غير المقيد إلى الغذاء والماء.
  2. اليوم التعود:
    1. بعد التعافي من جراحة نقل الفئران إلى غرف التدريب فعال والسماح لفترة التعود على مدار 24 ساعة.
    2. لا تقم بتوصيل الفئران لربيع المعادن وعدم تنشيط مجمع cue-light/tone.
    3. تأكد من أن ذراع نشط يبقى تراجع، ولكن تأكد من تمديد ذراع نشط للمساعدة في التمييز بين دعامتين هما أثناء التدريب.
  3. الهيروين الإدارة الذاتية:
    1. ربط موصل 5 حتى أنبوب Tygon وإرفاق الربيع المعادن.
    2. السماح للفئران لADM الذاتيinister الهيروين (0.1 ملغ / كغ / التسريب) لمدة 10 يوما خلال ثلاث جلسات 3 ساعة مفصولة 3 فترات ساعة.
    3. تبدأ كل دورة في أعقاب بداية مرحلة مظلمة (حوالي 9:30 في مختبرنا) مع تمديد العتلات النشطة وغير النشطة، وكذلك الإضاءة للمنزل الضوء وتفعيل المجمع cue-light/tone ل 30 ثانية.
    4. الردود على النتيجة ذراع نشط في تفعيل مضخة المخدرات (5 ثانية، 0.13 مل / التسريب) والشروع في فترة 20 ثانية مهلة خلالها يتم تشغيل منزل ضوء قبالة ومجمع ضوء جديلة / لهجة فوق ذراع النشط المنشط (FR-1، 20 ثانية مهلة). خلال فترة المهلة، يتم تسجيل الاستجابات رافعة نشطة ولكن ليس تعزيزها. وتسجل ردود ذراع نشط لكن ليس لديهم عواقب برمجة.
    5. بعد انتهاء كل دورة 3 ساعة، وتراجع ذراع نشط في حين لا يزال ذراع نشط ممتدة حتى 1 ساعة قبل انعقاد الدورة الأولى من اليوم التالي.
  4. الامتناع عن ممارسة الجنس وتقييد الغذاء:
    1. بعد التدريب الإدارة الذاتية، وإزالة الفئران من غرف تكييف هواء فعال وبشكل فردي إيوائهم في ACF، ومنح حق الوصول غير المقيد إلى الطعام والماء ليوم واحد المخدرات تبييض.
    2. تقسيم الفئران إلى مجموعتين: الغذاء المقيد (روزفلت) أو متخم، المتطابقة وفقا لوزن الجسم، عدد دفعات والاستجابات رافعة النشطة عبر ال 5 أيام الأخيرة من التدريب.
    3. بعد يوم والمخدرات تبييض، وإزالة الطعام الفئران روزفلت "، وإطعامهم حوالي 15 غرام من الفئران تشاو في 01:30. ضبط كمية من المواد الغذائية عبر 14 يوما من الامتناع عن ممارسة الجنس للحفاظ على وزن الجسم للفئران روزفلت "(BW) إلى ما يقرب من 90٪ من خط الأساس الخاصة بهم BW.
  5. اختبار التماس المخدرات: في صباح يوم 14 الامتناع عن ممارسة الجنس، والعودة الفئران إلى غرف تكييف هواء فعال وإرفاقها ربيع المعادن. استخدام 1 ساعة أو ساعة 3 الدورة خلالها ردود رافعة نشطة وغير نشطة لها نفس العواقب وق في التدريب الإدارة الذاتية، باستثناء توافر الدواء (أي في ظل ظروف الانقراض).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

وزن الجسم مع مرور الوقت: نتائج نموذجي إثبات أن وزن الجسم تظل مستقرة طوال الهيروين التدريب الإدارة الذاتية. الامتناع عن ممارسة الجنس أثناء والجرذان مع الوصول غير المقيد إلى تشاو زيادة وزن الجسم، بينما تلك التي يقتصر الغذاء تقليل وزن الجسم إلى ما يقرب من 90٪ من وزن الجسم خاصة بهم الأصلي أو 75-80٪ من وزن جسم الفئران وصرح "(الشكل 2) .

دفعات، والاستجابات رافعة نشطة وغير نشطة خلال التدريب: الحقن وذراع نشط الاستجابة زيادة على أيام التدريب، بينما ذراع نشط الاستجابة لا (الشكل 3). عادة، ذراع نشط الاستجابة زيادات طوال التدريب ويستقر عند معدل أعلى من الاستجابة. ذراع نشط الاستجابة يبقى الحد الأدنى طوال التدريب، مما يدل على أن الفئران قد التمييز بشكل صحيح بين كل من العتلات. أخيرا، فإن ضخ عدد المتخذة زيادة في جميع أنحاء التدريب وتظل مستقرة بمعدل أقل من تلك الردود ذراع نشط. هذا التفكك هو ممكن نظرا لمهلة 20 ثانية بعد الحقن بالمخدرات.

ردود رافعة نشطة وغير نشطة في يوم الاختبار: رافعة بالموقع الاستجابة للفئران الغذاء تقييد زيادة كبيرة بالمقارنة مع الفئران متخم (ونحن في كثير من الأحيان لاحظ الفرق 250٪ في المعاملة بين الجماعات، انظر 15). ذراع نشط الاستجابة هو الحد الأدنى وقابلة للمقارنة بين المواد الغذائية المقيدة والفئران متخم (الشكل 4).

الشكل 1
الشكل 1. جدول زمني لإجراء التجارب. يتكون من ثلاث مراحل الإجراء. ويتم تدريب الحيوانات الأولى لإدارة الذات المخدرات في وجود مجمع جديلة / نغمة (الهيروين مرحلة الإدارة الذاتية)، ثم انتقل إلى سياق مختلف والخضوع لفترة تبييض المخدرات ليوم واحد. يتبع يوم تبييض قبل فترة طويلة من الامتناع عن ممارسة الجنس، حيث يتم إعطاء الفئران نظام من الطعام أو تقييد الوصول غير المحدود إلى المواد الغذائية. في اليوم ال 14 من الامتناع عن ممارسة الجنس، يتم إرجاع الفئران لبيئة الإدارة الذاتية لاختبار التماس المخدرات في حضور العظة-تقرن المخدرات في ظل ظروف الانقراض (المخدرات التماس مرحلة الاختبار). اضغط هنا لمشاهدة صورة بشكل اكبر .

الرقم 2
الشكل 2. وزن الجسم في الطعام المقيد (فرانكلين روزفلت) والجماعات المتخمين، عبر أيام التجريبية. جميع الفئران الخضوع 10 يوما من الهيروين التدريب الإدارة الذاتية في غرف التدريب فعال وتبييض المخدرات 1 يوم في مرفق الرعاية الحيوانية. تتم مطابقة الفئران وفقا لأننا الجسمآيت، ذراع نشط الاستجابة وضخ المخدرات قبل الفصل في فرانكلين روزفلت أو مجموعة متخم. اضغط هنا لمشاهدة صورة بشكل اكبر .

الرقم 3
الرقم 3. عدد دفعات، نشطة، والاستجابات ذراع غير نشط مصنوع خلال التدريب الهيروين الإدارة الذاتية. الهيروين (0.13 مغ / كغ / التسريب) يدار ذاتيا في ثلاث جلسات 3 ساعة، على مدى 10 يوما، تحت FR-1، 20 ثانية مهلة جدول التعزيز. اضغط هنا لمشاهدة صورة بشكل اكبر .

الرقم 4
فايجوري 4. تأثير التعرض لفترات طويلة تقييد الغذاء (روزفلت) على الهيروين تسعى في الفئران ممتنعين. يمثل البيانات النموذجية رافعة نشطة وغير نشطة الاستجابة في يوم الاختبار. يتكون الاختبار من يوم واحد 1 ساعة (أو 3 ساعة) الدورة اختبار في ظل ظروف الانقراض، بعد الهيروين التدريب الإدارة الذاتية و14 يوما من الامتناع عن ممارسة الجنس تحت ظروف روزفلت أو متخم. اضغط هنا لمشاهدة صورة بشكل اكبر .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

الإجراء الموضح هنا لديه صلاحية وجه قوي لأن 1) أنها تسمح لتناول المخدرات الطوعية والسيطرة على إدارة المخدرات، 2) أنه يستخدم طريقة التعاطي الذي هو شائع في مدمني الإنسان، 3) أنه يعكس (فترات نسبيا) لفترات طويلة من التعرض للمخدرات والامتناع عن ممارسة الجنس، و 4) أنه يتجنب التدريب الانقراض قبل الاختبار التي تسعى المخدرات التي هي جزء لا يتجزأ من إجراءات إعادة ولكن نادرا ما لوحظ في مدمني الإنسان 14. بالإضافة إلى ذلك، النماذج الإجراء لفترة طويلة الغذاء حالة التقييد التي يعتقد أن تكون حاسمة عند النظر في الآثار المترتبة على الحد من السعرات الحرارية على المخدرات تسعى 5.

في البروتوكول وصفنا هنا، ويعيش الفئران في الغرف تكييف هواء فعال من خلال فترة الإدارة الذاتية للمخدرات (24 ساعة / يوم). قد يكون من الممكن زيادة كفاءة جمع البيانات باستخدام بروتوكول "فرق" الذي يتم نقل الفئران إلى ACF لأي fter دورة تدريبية يومية واحدة، والسماح لمجموعات متعددة للتدريب كل يوم. ومع ذلك، قد يكون هذا النهج أكثر ملاءمة للتدريب الكوكايين، منذ الهيروين ويفضل أن يتم تدار في "الوطن" البيئة 16. نحن لم تقييم كفاءة الإجراء باستخدام الخيار فرق. طريقة أخرى لزيادة الإنتاجية من الإجراء هي مذهلة تدريب الإدارة الذاتية المخدرات لمجموعتين من الفئران بنسبة 10-12 يوما. باستخدام هذا التصميم، ويتم تدريب الفئران في المجموعة الثانية للإدارة الذاتية في حين يذهب الفريق الأول خلال الفترة الامتناع عن ممارسة الجنس في ACF. يجب أن نخلص المخدرات تدريب الإدارة الذاتية للمجموعة الثانية قبل يوم على الأقل الاختبار المزمع للمجموعة الأولى للسماح لتنظيف شامل للغرف.

لقد ذكرت من قبل 15 أن طول فترة الحظر أمر بالغ الأهمية، مع 3-5 أيام من تقييد الغذاء فشلها في زيادة الهيروين تسعى على البريدالثانية من فترة الامتناع عن ممارسة الجنس. ونحن لم يلاحظ زيادة في فعالية التلاعب تقييد الغذاء مع زيادة فترات التعرض (~ 28 يوما؛ بيانات غير منشورة).

فمن الجدير بالذكر أيضا أن التغيير في السياق بين مرحلة الإدارة الذاتية وفترة الامتناع عن ممارسة الجنس يبدو أن مهمة لزيادة بالسعي المخدرات. لقد جمعت البيانات التي تشير إلى تأثير أقل بكثير لتقييد الغذاء عندما يتم الحفاظ على الفئران في بيئة التدريب المخدرات خلال فترة الامتناع (المراقبة غير منشورة).

في الختام، والمواد الغذائية الناجم عن تقييد زيادة من الهيروين السعي هو قوي، وتأثير قابلة للتكرار بسهولة. وبالتالي فإنه يسمح للتصاميم كفاءة من الدراسات حول الآليات العصبية التي تكمن وراء الامتناع التالية الانتكاس، وذلك باستخدام المعالجة المسبقة الدوائية، ومراقبة الانترنت من النشاط الكيميائية العصبية أو الخلايا العصبية باستخدام microdialysis أو تقنيات الكهربية، وبعد رتحليل النسيجي بتوقيت شرق الولايات المتحدة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

منحت الموافقة على جميع الإجراءات التجريبية من لجنة أخلاقيات البحوث الحيوانية جامعة كونكورديا، وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي للرعاية الحيوان. يعلن الكتاب أنه ليس لديهم مصالح مالية المتنافسة. وFS TD ساهم بشكل متساو على تطوير الإجراء المقدمة هنا وكتابة المخطوطة.

Acknowledgments

وأيد هذا العمل من قبل العلوم الطبيعية والهندسة مجلس برنامج ديسكفري (الولايات المتحدة: 298915)، وفون دي دو كيبيك بحوث - صحة (CSBN)، وبرنامج كراسي البحث كندا (الولايات المتحدة).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Name Company Catalogue Number
Ketamine (Vetalar, 100 mg/ml) Bioniche Animal Health Obtained through local distributer
Xylazine (Rompun, 100 mg/ml) Bayer Obtained through local distributer
Heroin HCl National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA
Anafen injection 1 mg/ml Vial/20 ml CDMV, Canada 12868
Equipment
Name Company Catalogue Number
Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037) Fisher Scientific 1118915A
GE marine silicon GE SE-1134
Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060) VWR 63018-044
Cannulae (22 G, 5-up) Plastics One C313G-5up
Liquid swivels, plastic, 22 G Lomir Biomedical, Inc. RSP1
Fixed speed infusion pump (3.3 rpm) Coulbourn Instruments A73-01-3.3
Rat test cage Coulbourn Instruments H10-11R-TC
Stainless steal grid floor Coulbourn Instruments H10-11R-TC-SF
House light-rat Coulbourn Instruments H11-01R
Single high-bright cue-rat Coulbourn Instruments H11-03R
Tone module 2.9 kHz Coulbourn Instruments H12-02R-2.9
Retractable lever-rat Coulbourn Instruments H23-17RA
Balance arm Coulbourn Instruments H29-01
Sound attenuation boxes Concordia University Home made
System controller 2 Coulbourn Instruments SYS CTRL 2
System power base Coulbourn Instruments H01-01
Habitest Universal Linc Coulbourn Instruments H02-08
Environment connection board & Linc cable Coulbourn Instruments H03-04
Graphic State Notation 3 Coulbourn Instruments GS3

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).
  2. O'Brien, C. P., McLellan, A. T. Myths about the treatment of addiction. Lancet. 347, 237-240 (1996).
  3. Childress, A. R., Ehrman, R., Rohsenow, D. J., Robbins, S. J., O'Brien, C. P. Classically conditioned factors in drug dependence. Substance abuse: A comprehensive textbook. Lowinson, J. W., Luiz, P., Millman, R. B., Langard, G. Williams and Wilkins. Baltimore. 56-69 (1992).
  4. Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
  5. Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers. Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).
  6. Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women. J. Subst. Abuse. 4, 341-353 (1992).
  7. de Wit, H., Stewart, J. Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat. Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).
  8. Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings. Psychopharmacology. 168, 3-20 (2003).
  9. Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).
  10. Tobin, S., Newman, A. H., Quinn, T., Shalev, U. A role for dopamine D1-like receptors in acute food deprivation-induced reinstatement of heroin seeking in rats. Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 217-226 (2009).
  11. Katz, J. L., Higgins, S. T. The validity of the reinstatement model of craving and relapse to drug use. Psychopharmacology. 168, 21-30 (2003).
  12. Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189, 1-16 (2006).
  13. Zacny, J. P., de Wit, H. The effects of a restricted feeding regimen on cigarette smoking in humans. Addict. Behav. 17, 149-157 (1992).
  14. Fuchs, R. A., Lasseter, H. C., Ramirez, D. R., Xie, X. Relapse to drug seeking following prolonged abstinence: the role of environmental stimuli. Drug Discov. Today Dis. Models. 5, 251-258 (2008).
  15. D'Cunha, T. M., Sedki, F., Macri, J., Casola, C., Shalev, U. The effects of chronic food restriction on cue-induced heroin seeking in abstinent male rats. Psychopharmacology. 225, 241-250 (2013).
  16. Caprioli, D., Celentano, M., Dubla, A., Lucantonio, F., Nencini, P., Badiani, A. Ambience and drug choice: cocaine- and heroin-taking as a function of environmental context in humans and rats. Biol. Psychiatry. 65, 893-899 (2009).
إجراء لدراسة تأثير الغذاء المطول تقييد على الهيروين المفضل في الجرذان متقشف
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats. J. Vis. Exp. (81), e50751, doi:10.3791/50751 (2013).More

Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats. J. Vis. Exp. (81), e50751, doi:10.3791/50751 (2013).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter