Summary
Ein Verfahren, das eine Demonstration von robusten Vergrößerung von Drogen sucht in Essen-Ratten ermöglicht beschränkt beschrieben. Nach Heroin Selbstverwaltung Ausbildung, Ratten gehen durch eine Zeit der Abstinenz, in einer drogenfreien Umgebung, in der sie leicht Nahrung beschränkt. Drogensucht wird dann in dem Medikament-assoziierten Umgebung getestet.
Abstract
In der menschlichen Drogenabhängige, kann die Exposition gegendrogenassoziierte Reize oder Umgebungen, die zuvor mit Drogenkonsum verbunden waren Rückfall während Abstinenz auslösen. Darüber hinaus können verschiedene Umweltprobleme diesen Effekt zu erhöhen sowie laufende Einnahme von Arzneimitteln verstärken.
Das Verfahren, das wir hier beschreiben, hebt die Wirkung einer gemeinsamen Umwelt-Herausforderung, Lebensmittel-Beschränkung für die Gier nach Drogen, die als eine Verstärkung der Suche nach Drogen in abstinent Ratten exprimiert wird.
Ratten werden mit chronischen intravenösen Katheter implantiert iv und dann trainiert, einen Hebel drücken für iv Heroin über einen Zeitraum von 10-12 Tagen. Nach der Heroin-Selbstverabreichungsphase werden die Ratten aus der operanten Konditionierung Kammern entnommen und in der Tierstation für einen Zeitraum von mindestens 14 Tagen untergebracht ist. Während eine Gruppe wird unter uneingeschränkter Zugang zu Nahrung (satt-Gruppe) gehalten wird, wird eine zweite Gruppe (FDR-Gruppe) zu einer mi ausgesetztld Nahrungsmittelbeschränkung Therapie, die in ihrer Körpergewicht resultiert gehalten, bei 90% ihrer nonrestricted Körpergewicht. Am Tag 14 der Nahrungsmittelbeschränkung werden die Ratten wieder auf die Droge-Trainingsumgebung übertragen und eine Drogen-sucht-Test wird unter Aussterben Bedingungen (dh. Hebelpressen nicht in Heroin Lieferung).
Das hier vorgestellte Verfahren führt zu einer sehr robusten Vergrößerung von Heroin such am Testtag in der Lebensmittel beschränkt Ratten. Darüber hinaus, im Vergleich zu den akuten Nahrungsentzug Manipulationen wir vorher verwendet wird, ist das derzeitige Verfahren ein klinisch relevantes Modell für die Auswirkungen der kalorischen Restriktion über Drogensucht. Darüber hinaus könnte es näher an den menschlichen Zustand, wie die Ratten sind nicht verpflichtet, durch eine vom Aussterben-Trainingsphase vor der Drogen-sucht-Test, der ein integraler Bestandteil des beliebten Wieder Verfahren ist zu gehen.
Introduction
Eine der Hauptschwierigkeiten bei der Behandlung von Drogenabhängigkeit ist die hohe Rezidivrate, auch nach einem längeren Zeitraum der Abstinenz 1,2. Studien in menschlichen Süchtige haben einen kritischen Beitrag der ökologischen Herausforderungen, wie der Kontakt zu drogenassoziierte diskrete Hinweise oder Umgebungen 3 und belastenden Lebensereignissen 4, bis zum Rückfall identifiziert. Eine gemeinsame umweltpolitische Herausforderung, die gefunden wurde, um eine Wirkung auf Drogenkonsum und das Verlangen haben, ist die chronische Nahrungsmittelbeschränkung. Zum Beispiel wurde berichtet, dass die chronische Kalorienreduktion ist mit einer erhöhten Zigarettenrauchen 5 verbunden. Darüber hinaus ist eine Diät Schwere (Kalorienrestriktion) positiv mit einer erhöhten Prävalenz des Drogenkonsums bei jungen Frauen 6 korreliert. Jedoch sind die zugrundeliegenden Mechanismen des Gehirns nicht vollständig verstanden.
Aus praktischen und ethischen Überlegungen zu Humanforschung, Tiermodelle h bezogenenave entwickelt worden, um die entsprechenden neuronalen Mechanismen zu identifizieren. Wir haben bisher die Wiederzulassung 7,8 auf Wiederaufnahme des erloschenen Medikament suchen in Ratten, die zu akuten (24-48 h), Nahrungsentzug 9,10 ausgesetzt sind, zu demonstrieren. , Ein integraler Teil der Wiederzulassung ist jedoch eine Zeit, die nicht vom Aussterben ist ein gemeinsames Merkmal der Drogensucht Behandlungen 11 (siehe aber Epstein et al. 12 für eine umfassende Diskussion über die Gültigkeit der Wieder Verfahren). Darüber hinaus ist in dem speziellen Fall von Nahrungs Manipulationen in den Menschen, nur chronische Nahrungsmittelbeschränkung, aber nicht akute Nahrungsmittelentzug, wurde gezeigt, dass Drogenkonsum 5,13 effektiv zu erhöhen.
Daher haben wir eine "Abstinenz-Verfahren" 14, der die Studie über die Auswirkungen der chronischen Nahrungsmittelbeschränkung über Drogensucht können vorgeschlagen. Mit diesem Verfahren haben wir kürzlich eine robuste Vergrößerung von heroin suchen in abstinent Ratten nach Exposition mit 14 Tagen mild Nahrungsmittelbeschränkung 15.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Tiere
Alle Ratten werden in Übereinstimmung mit den Richtlinien des Canadian Council on Animal Care und Zulassung für alle experimentellen Verfahren wurde von der Concordia University Animal Research Ethics Committee gewährt behandelt.
- Erhalten Ratten bei 275 bis 300 g (Männer) bzw. 225 bis 250 g (Frauen). Haus Ratten paarweise, bis der Operation in Standard-Kunststoffkäfigen Maiskolben Bettwäsche und Papierschnitzel enthalten.
- Pflegen Ratten auf einer umgekehrten Licht-Dunkel-Zyklus (Licht aus um 9:30 Uhr).
- Stellen Sie sicher, Nahrung und Wasser ad libitum zur Verfügung, außer während der Zeit der Abstinenz. Wir verwenden eine regelmäßige Rattenfutter (20,9% Eiweiß, 67,2% Kohlenhydrate und 11,8% Fett).
2. Katheter und Steckverbinder
- Katheter machen in der Masse und die Verwendung als über einen langen Zeitraum nach der Sterilisation im Autoklaven benötigt.
- Schneiden Sie die Silasticschlauch bis 12 cm lange Stücke schneiden.
- Verwenden Sie einen Zahnstocher, einen kleinen zu OrtTropfen Silizium um den Katheter, 3 cm von der Spitze.
- Lassen Sie den Silizium trocken für 24 h und dann im Autoklaven und speichern die Katheter.
- Biegen Sie den langen Schlauch der "5-up"-Kanüle, die als Anschluss dienen wird, in einem rechten Winkel zu den Kunststoffsockel, dann im Autoklaven und zu speichern.
- Zubauen, aseptisch, die Katheter am Tag der Operation, durch Drücken der "langen" Seite der Silastic Röhre über der gebogenen Metallrohr des "5-up"-Kanüle, etwa auf halbem Weg an dem Kunststoffsockel.
- Verbinden den "5-up"-Rohr über Tygon-Schlauch und einem abgestumpften 22 G-Nadel in eine 1 ml-Spritze mit einer sterilen Kochsalzlösung gefüllt.
- Spülen Kochsalzlösung durch den Katheter, um einen ungehinderten Fluss zu gewährleisten.
3. Die intravenöse Katheter Chirurgie
- Ermöglichen die Ratten eine Woche Akklimatisierung in der Tierstation (ACF) vor der Operation. Sie die Operation an Ratten durchführen nicht mit einem Körpergewicht niedrigerals 300-325 g (Männer) bzw. 250 bis 275 g (Frauen).
- Vor der Operation zu wiegen und die Ratten anästhesiert mit Ketamin / Xylazin-Mischung (90/13 mg / kg, ip).
- Rasur, und reinigen Sie den Kopf und den Bereich auf der rechten Schulter (in der Nähe Basis des Halses) mit Alkohol und chirurgische scheuern.
- Spritzen Sie Penicillin (450.000 IE / Ratte, sc) gegen Infektionen zu schützen, und 2 ml Kochsalzlösung (sc) für Flüssigkeitszufuhr. Bewerben Tränen Gel für die Augen der Ratte zur Trockene Anästhesie induzierte verhindern.
- Platzieren Sie die Ratte auf ihre Abdomen und einen Einschnitt unter Verwendung eines Skalpells auf der Oberseite des Kopfes, zwischen den Augen, und kaudal zu den Ohren der Ratte.
- Legen Sie die Ratte auf seinem Rücken mit den Unterarmen auf die Oberfläche geklebt. Heben Sie die Haut in den Schnittbereich, nur rostral bis zum Schlüsselbein, mit einer Pinzette und machen ein 1 cm in Längsrichtung mit einer kleinen Schere geschnitten.
- Mit zwei geraden Zangen, trennen das Fett und andere Gewebe, bis der externe Hals vein ausgesetzt ist.
- Drücken Sie die Spitzen der Pinzette gerade unter der Vene vom umgebenden Gewebe zu heben und trennen die Vene. Die Vene sorgfältig reinigen von jeder anhaftendem Gewebe und setzen gebogenen Pinzette unter die Vene zu halten, angehoben und leicht gedehnt.
- Machen Sie eine kleine, v-förmig, auf der oberen Fläche der Ader geschnitten mit kleinen Feder Schere.
- Halten Sie den Schnitt öffnen mit einem Gefßaufweiter, und vorab die "kurze", 3 cm Spitze des Katheters in die Vene zum Herzen hin, bis das Silikon Abfall an der Einschnittstelle.
- Krawatte des Katheters an die Vene mit 3 Fäden: eine so weit wie möglich Schwanz, einer unmittelbar rostral des Silikontropfen und der dritte bis rostral wie möglich.
- Pass Kochsalzlösung durch den Katheter nach jeder Naht, um sicherzustellen, dass sie frei und ungestört ist, und dass die Nähte sind nicht zu eng.
- Entfernen Sie das Band um die Arme und legen Sie die Ratte Bauchseite nach unten.
- Legen Sie eine Gefäßklemme turch die Schwanz Seite des Kopfes Schnitt und schieben Sie die Haut vor dem darunter liegenden Gewebe zu trennen, um eine subkutane "Tasche" zu schaffen.
- Führung der Gefäßklemme unter die Haut in Richtung der Öffnung auf den Schultern, wenn der Katheter eingeführt wird.
- Brechen durch das Bindegewebe mit der Gefäßklemme und fest klemmen den Katheter am meisten rostral Punkt, unter der Basis der "5-up."
- Nehmen Sie das "5-up" und führen Sie das lange Ende des Katheters unter der Haut und aus den Einschnitt an der Spitze der Kopf der Ratte entfernt.
- Mit einer Schere, um den Katheter unten, wo die Gefäßklemme eingespannt wurde geschnitten und bringen Sie die lange Ende der "5-up."
- Ziehen des Katheters entlang der Metallwelle des "5-up" den ganzen Weg zu dem Kunststoffsockel. Pass Kochsalzlösung durch den freien Fluss zu gewährleisten.
- Legen Sie die Ratte auf dem Rücken, und vernähen nur den Schnitt in der Nähe des Schlüsselbeins. Der Kopf sollte Einschnitt remain offenen.
- Legen Sie die Ratte in einem stereotaktischen Apparat. Ziehen Sie die Haut weg an der Schnitt an der Oberseite des Kopfes mit Bulldogge Schellen und reinigen und trocknen Sie die Oberfläche des Schädels.
- Verwenden Sie einen Handbohrer, vier bis fünf Löcher in den Schädel bohren und setzen Maschinenschrauben in die Löcher als Gerüst für den Kopf-Kappe zu handeln.
- Legen Sie die "5-up"-Anschluss zwischen den Schrauben und stecken die Überlänge des Katheters in das subkutane "Tasche" zuvor mit der Gefäßklemme gemacht.
- Verwenden Sie Zahnzement, die "5-up" an die Spitze des Schädels zu befestigen. Entfernen Sie die Ratte von der stereotaktischen Apparat, nachdem der Zement vollständig getrocknet ist.
- Geben Sie die Ratte post-operative Betreuung, die von Ketoprofen besteht (Analgetikum, 5 mg / kg, sc) und 2 ml Kochsalzlösung (sc). Verwalten Ketoprofen für weitere 2 Tage nach der Operation, mit Schmerz-Management zu unterstützen.
- Ab 48 Stunden nach der Operation, bündig Ratten täglich with eine Mischung aus Heparin und Gentamicin in steriler Kochsalzlösung (7,5 IU + 12 ug; 0,2-0,3 ml) während der Erholungszeit von ~ 2 Tage und durch die Heroinselbstverwaltung Phase.
4. Verhaltensordnung
Der Zeitplan für das Verfahren der Nahrungsmittelbeschränkung-induzierten Verstärkung der Heroinsucht ist in Abbildung 1 dargestellt.
- Operante Konditionierung Kammern.
- Haus Ratten einzeln in der operanten Konditionierung in schalldämpfende Kammern Holzfächer mit einem Ventilator ausgestattet eingeschlossen.
- Jede Kammer besteht aus einem Edelstahl-Metallgitterboden, einer vorderen und hinteren Plexiglaswand und zwei Seitenwände Metallplatte. Berg zwei einziehbaren Hebel 9 cm über dem Boden der rechten Seitenwand, und suchen Sie einen Cue-Licht über jeden Hebel. Als Reaktion auf das Medikament gepaarten (aktiv) Hebel aktiviert eine Infusionspumpe während der Reaktion auf der nondrug gepaarten (inaktiv) Hebel hat keine programmierbare Folgen. </ Li>
- Suchen Sie eine Ton-Modul (2,9 kHz) über dem aktiven Hebel, und positionieren Sie ein rotes Haus-Licht in der oberen Mitte des linken Seitenwand.
- Schließen Sie die Medikamentenpumpe an den Katheter über eine Flüssigkeits Schwenk-und Tygon-Schlauch mit einer Metallfeder geschützt. Darüber hinaus statten jede Kammer mit einem Nahrungsmittelbehälter und einer Wasserflasche ermöglicht uneingeschränkten Zugang zu Nahrung und Wasser.
- Habituation Tag:
- Nach der Erholung von der Operation zu bewegen, die Ratten auf die operante Ausbildung Kammern und ermöglichen eine 24-Stunden Eingewöhnungszeit.
- Die Ratten auf die Metallfeder verbinden Sie nicht, und die komplexe cue-light/tone nicht aktivieren.
- Stellen Sie sicher, dass die aktive Hebel bleibt eingefahren, sondern sicherzustellen, dass die inaktive Hebel wird erweitert, um mit der Diskriminierung zwischen den beiden Hebeln beim Training helfen.
- Heroin Selbstverwaltung:
- Verbinden Sie das 5-up-Stecker an den Tygon Schlauch und befestigen Sie die Metallfeder.
- Lassen Sie die Ratten auf Selbst administer Heroin (0,1 mg / kg / Infusion) für 10 Tage, während drei Sitzungen von 3 h 3 h Intervalle getrennt.
- Beginnen Sie jede Sitzung nach Beginn der Dunkelphase (um 9.30 Uhr in unserem Labor) mit der Verlängerung der aktiven und inaktiven Hebel sowie Beleuchtung des Haus-Licht und die Aktivierung des cue-light/tone Komplex für 30 sek.
- Antworten auf die aktive Hebel in Folge der Aktivierung des Medikamentenpumpe (5 sec, 0,13 ml / Infusion) und die Einleitung einer 20 Sekunden Zeitlimit, während der der Haus-Licht wird ausgeschaltet und die Cue-Licht / Ton-Komplex über der aktiven Hebel aktiviert (FR-1, 20 sec Timeout). Während des Zeitlimits werden aktive Hebel Antworten aufgezeichnet, aber nicht verstärkt. Inaktive Hebel Antworten werden aufgezeichnet, aber haben keine programmierbare Folgen.
- Nach jeder Sitzung 3 Stunden wird die aktive Hebel zurückgezogen, während die inaktiven Hebel bleibt erweiterten bis 1 Stunde vor der ersten Sitzung des folgenden Tages.
- Abstinenz-und Nahrungsmittelbeschränkung:
- Nach der Selbstverwaltung Ausbildung, entfernen Sie die Ratten aus den Kammern der operanten Konditionierung und individuell beherbergen sie in der ACF, und geben Sie uneingeschränkten Zugang zu Nahrung und Wasser für ein drogen Auswaschen Tag.
- Teilen Sie die Ratten in zwei Gruppen: Lebensmittel beschränkt (FDR) oder satt, je nach Körpergewicht, Anzahl der Infusionen und Wirkhebel Antworten in den letzten 5 Tagen Training abgestimmt.
- Nach der Drogen Auswaschen Tag, entfernen Sie die Lebensmittel FDR Ratten, und füttern sie ca. 15 g Rattenfutter um 1:30 Uhr. Passen Sie die Menge der Nahrung in 14 Tagen Abstinenz zu den FDR Ratten Körpergewicht (KG) auf etwa 90% ihrer eigenen Grundlinie BW erhalten.
- Drogen-sucht-Test: Am Morgen des 14. Tag Abstinenz, kehren die Ratten auf die operante Konditionierung Kammern und sie an der Metallfeder. Verwenden Sie eine 1 Stunde oder 3 Stunden Sitzung, während der aktiven und inaktiven Hebel Antworten haben die gleichen Folgen eins in Selbstverwaltung Ausbildung, ohne die Verfügbarkeit der Droge (dh unter Aussterben Bedingungen).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Das Körpergewicht im Laufe der Zeit: Typische Ergebnisse zeigen, dass das Körpergewicht während der gesamten Heroinselbstverwaltung Ausbildungsstall. Während der Abstinenz, Ratten mit uneingeschränkten Zugang zum Chow-Chow erhöhen ihre Körpergewicht, während diejenigen, die Lebensmittel beschränkt sind, ihr Körpergewicht zu verringern, um etwa 90% ihrer eigenen ursprünglichen Körpergewicht oder 75-80% der satt Ratten Körpergewicht (Abbildung 2) .
Infusionen, aktiven und inaktiven Hebel Antworten über Ausbildung: Infusions-und Wirkhebel Zunahme über Trainingstagen reagiert, während inaktive Hebel reagiert nicht (Abbildung 3). Typischerweise reagiert aktiv Hebel steigt im gesamten Ausbildung und stabilisiert sich auf einem höheren Zinssatz zu reagieren. Inaktive Hebel reagiert minimal bleibt während Training, was bedeutet, dass die Ratten richtig zwischen den beiden Hebeln diskriminiert. Schließlich werden die Anzahl Infusionen genommen ganzen Ausbildung zu erhöhen undbleiben bei einer Rate niedriger als die der aktiven Hebel Antworten stabil. Diese Dissoziation ist auf die 20 Sekunden Zeitüberschreitung nach der Arzneimittel Infusionen möglich.
Aktive und Inaktive Hebel Antworten auf Test Tag: Aktive Hebel reagiert für die Lebensmittel beschränkt Ratten signifikant erhöht im Vergleich zu den satt-Ratten (wir oft beobachtet, eine 250% Unterschied zwischen den Behandlungsgruppen, siehe 15). Inaktive Hebel reagiert ist minimal und vergleichbar zwischen dem Lebensmittel beschränkt und satt Ratten (Abbildung 4).
Fig. 1 ist. Eine Zeitleiste der experimentellen Verfahren. Das Verfahren besteht aus drei Phasen. Tiere werden zunächst selbst verabreichen eines Arzneimittels in Gegenwart eines Cue / Ton-Komplex (Heroin Selbstverwaltung Phase) trainiert, dann in einem anderen Kontext undlaufen eine Ein-Tages-Drogen Auswaschphase. Washout Tag wird von einer längeren Zeit der Abstinenz, wo Ratten sind ein Regime von Lebensmitteln Einschränkung oder unbegrenzten Zugang zu Nahrung gegeben gefolgt. Am 14. Tag der Abstinenz werden die Ratten auf die Selbstverwaltungsumgebung für eine Drogen-sucht-Test in Anwesenheit von Drogen gepaart Hinweise unter Aussterben Bedingungen (Drogen-sucht Testphase) zurück. Klicken Sie hier für eine größere Ansicht .
2. Das Körpergewicht in der Lebensmittel beschränkt (FDR) und Satt Gruppen, über experimentelle Tage. Alle Ratten unterziehen 10 Tagen Heroin Selbstverwaltung Ausbildung in Trainingsoperante Kammern und einem 1 Tag Drogen Auswaschung in der Tierstation. Ratten werden nach Körper wir abgestimmtight, Wirkhebel reagiert und Drogen Infusionen vor der Trennung in die FDR oder Satt-Gruppe. Klicken Sie hier für eine größere Ansicht .
3. Die Anzahl der Infusionen, aktiven und inaktiven Hebel Reaktionen während Heroin Selbstverwaltung Ausbildung gemacht. Heroin (0,13 mg / kg / Infusion) ist selbst verabreicht in drei Sitzungen 3 Stunden, über 10 Tage unter einem FR-1, 20 Sek. Timeout Verstärkungsplan. Klicken Sie hier für eine größere Ansicht .
Figure 4. Die Auswirkungen der Exposition gegen verlängert Nahrungsmittelbeschränkung (FDR) auf der Suche nach Heroin in abstinent Ratten. Die Daten stellen typische aktiven und inaktiven Hebel reagiert auf Test Tag. Test-Tag besteht aus einem 1 Std. (oder 3 Stunden) Testsitzung unter Aussterben Bedingungen, nach Heroin Selbstverwaltung Ausbildung und 14 Tagen der Abstinenz unter FDR oder Bedingungen satt. Klicken Sie hier für eine größere Ansicht .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Das hier beschriebene Verfahren hat starke Gesicht Gültigkeit, weil 1) es ermöglicht für die freiwillige Einnahme von Medikamenten und Kontrolle über die Medikamentengabe, 2) es eine Art der Verabreichung, die in menschlichen Süchtigen gemeinsam ist verwendet, 3) es spiegelt (relativ) längere Zeiträume Arzneimittelexposition und Abstinenz, und 4) es das Aussterben Training vor dem Drogen-sucht-Test, die integraler Bestandteil der Wieder Verfahren ist aber nur selten in der menschlichen Abhängigen 14 beobachtet vermeidet. Darüber hinaus werden die Vorgehensmodelle ein längerer Nahrungsmittelbeschränkung Bedingung, die gedacht wird, kritisch zu sein, wenn man die Effekte der kalorischen Restriktion auf der Suche nach Drogen-5.
In dem Protokoll wir hier beschreiben, sind die Ratten in den Kammern der operanten Konditionierung durch die Drogenselbstverwaltung Zeit (24 h / Tag) untergebracht. Es könnte möglich sein, um die Effizienz der Datenerhebung durch die Verwendung eines "Kader"-Protokoll, in dem die Ratten zurück zum ACF ein über erhöhenN ach einer einzigen täglichen Trainingseinheit, so dass für mehrere Gruppen, jeden Tag trainiert werden. Allerdings könnte dieser Ansatz besser geeignet für Kokain Training sein, da Heroin wird vorzugsweise in der "Heimat"-Umgebung 16 verabreicht. Wir haben noch nicht bewertet die Effizienz des Verfahrens mit der Option Kader. Ein anderer Weg, um den Durchsatz des Verfahrens zu erhöhen, ist durch Versetzen der Drogenselbstverabreichung Ausbildung für zwei Gruppen von Ratten 10-12 Tage. Mit diesem Design werden Ratten in der zweiten Gruppe zur Selbstverabreichung geschult, während die erste Gruppe geht durch die Zeit der Abstinenz in der ACF. Drug Selbstverwaltung Ausbildung für die zweite Gruppe muss mindestens einen Tag vor der geplanten Test für die erste Gruppe geschlossen werden, um für eine gründliche Reinigung der Kammern zu ermöglichen.
Wir haben vor 15 berichtet, dass die Länge der Sperrfrist kritisch ist, mit 3-5 Tagen von Nahrungsmittelbeschränkung andernfalls auf der Suche nach Heroin unter der E erweiternnd der Abstinenz. Wir haben mit einer erhöhten Exposition Perioden (, unveröffentlichte Daten ~ 28 Tage) beobachtet eine Erhöhung der Wirksamkeit der Nahrungsmittelbeschränkung Manipulation.
Es ist auch erwähnenswert, dass die Änderung in Zusammenhang zwischen der Selbstverwaltung Phase und der Abstinenz scheint wichtig für die Vermehrung der Drogensucht zu sein. Wir haben Daten, die eine sehr reduzierte Wirkung für Nahrungsmittelbeschränkung vorschlagen, wenn die Ratten in der Droge-Trainingsumgebung während der Zeit der Abstinenz (unveröffentlichte Beobachtung) gehalten gesammelt.
Im Ergebnis ist das Essen Einschränkung-induzierte Verstärkung der Heroinsucht eine robuste, leicht replizierbar Wirkung. Es ermöglicht somit eine effiziente Designs von Studien über die neuronalen Mechanismen, die Rückfall nach Abstinenz zugrunde liegen, mit pharmakologischen Vorbehandlungen, Online-Überwachung der neurochemischen oder neuronale Aktivität mit Mikrodialyse oder elektrophysiologischen Techniken und post-test histologische Analysen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Zulassung für alle experimentellen Verfahren wurde von der Concordia University Animal Research Ethics Committee in Übereinstimmung mit den Richtlinien des Canadian Council on Animal Care, gewährt. Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen konkurrieren. FS und TD gleich der Entwicklung der hier und zum Schreiben des Manuskripts stellte Verfahren beigetragen.
Acknowledgments
Diese Arbeit wurde von den Naturwissenschaften & Engineering Council Discovery-Program (US: 298915) unterstützt, der Fonds de Recherche du Quebec - Santé (CSBN) und das Canada Research Chairs-Programm (US).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Name | Company | Catalogue Number | |
| Ketamine (Vetalar, 100 mg/ml) | Bioniche Animal Health | Obtained through local distributer | |
| Xylazine (Rompun, 100 mg/ml) | Bayer | Obtained through local distributer | |
| Heroin HCl | National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA | ||
| Anafen injection 1 mg/ml Vial/20 ml | CDMV, Canada | 12868 | |
| Equipment | |||
| Name | Company | Catalogue Number | |
| Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037) | Fisher Scientific | 1118915A | |
| GE marine silicon | GE | SE-1134 | |
| Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060) | VWR | 63018-044 | |
| Cannulae (22 G, 5-up) | Plastics One | C313G-5up | |
| Liquid swivels, plastic, 22 G | Lomir Biomedical, Inc. | RSP1 | |
| Fixed speed infusion pump (3.3 rpm) | Coulbourn Instruments | A73-01-3.3 | |
| Rat test cage | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC | |
| Stainless steal grid floor | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC-SF | |
| House light-rat | Coulbourn Instruments | H11-01R | |
| Single high-bright cue-rat | Coulbourn Instruments | H11-03R | |
| Tone module 2.9 kHz | Coulbourn Instruments | H12-02R-2.9 | |
| Retractable lever-rat | Coulbourn Instruments | H23-17RA | |
| Balance arm | Coulbourn Instruments | H29-01 | |
| Sound attenuation boxes | Concordia University | Home made | |
| System controller 2 | Coulbourn Instruments | SYS CTRL 2 | |
| System power base | Coulbourn Instruments | H01-01 | |
| Habitest Universal Linc | Coulbourn Instruments | H02-08 | |
| Environment connection board & Linc cable | Coulbourn Instruments | H03-04 | |
| Graphic State Notation 3 | Coulbourn Instruments | GS3 |
References
- Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. , Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).
- O'Brien, C. P., McLellan, A. T. Myths about the treatment of addiction. Lancet. 347, 237-240 (1996).
- Childress, A. R., Ehrman, R., Rohsenow, D. J., Robbins, S. J., O'Brien, C. P. Classically conditioned factors in drug dependence. Substance abuse: A comprehensive textbook. Lowinson, J. W., Luiz, P., Millman, R. B., Langard, G. , Williams and Wilkins. Baltimore. 56-69 (1992).
- Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
- Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers. Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).
- Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women. J. Subst. Abuse. 4, 341-353 (1992).
- de Wit, H., Stewart, J. Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat. Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).
- Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings. Psychopharmacology. 168, 3-20 (2003).
- Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).
- Tobin, S., Newman, A. H., Quinn, T., Shalev, U. A role for dopamine D1-like receptors in acute food deprivation-induced reinstatement of heroin seeking in rats. Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 217-226 (2009).
- Katz, J. L., Higgins, S. T. The validity of the reinstatement model of craving and relapse to drug use. Psychopharmacology. 168, 21-30 (2003).
- Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189, 1-16 (2006).
- Zacny, J. P., de Wit, H. The effects of a restricted feeding regimen on cigarette smoking in humans. Addict. Behav. 17, 149-157 (1992).
- Fuchs, R. A., Lasseter, H. C., Ramirez, D. R., Xie, X. Relapse to drug seeking following prolonged abstinence: the role of environmental stimuli. Drug Discov. Today Dis. Models. 5, 251-258 (2008).
- D'Cunha, T. M., Sedki, F., Macri, J., Casola, C., Shalev, U. The effects of chronic food restriction on cue-induced heroin seeking in abstinent male rats. Psychopharmacology. 225, 241-250 (2013).
- Caprioli, D., Celentano, M., Dubla, A., Lucantonio, F., Nencini, P., Badiani, A. Ambience and drug choice: cocaine- and heroin-taking as a function of environmental context in humans and rats. Biol. Psychiatry. 65, 893-899 (2009).
