Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

פרוצדורה כדי לחקור את ההשפעה של הגבלת מזון ממושכת בהרואין מחפש אצל חולדות מתנזרות

doi: 10.3791/50751 Published: November 11, 2013

Summary

הליך המאפשר הדגמה של הגדלת החזקה של סמים המבקשים בחולדות מוגבלות מזון מתואר. לאחר אימון הרואין מנהל עצמי, חולדות לעבור תקופת התנזרות, בסביבה נקיה מסמים, שבמהלכו הם אסירי מזון מוגבל. מבקשי תרופה נבדקו ולאחר מכן בסביבה הקשורים בסמים.

Abstract

במכורים לסמי אדם, חשיפה לרמזים הקשורים לסמים או סביבות שהיו קשור בעבר עם נטילת תרופה יכולה לגרום להישנות במהלך התנזרות. יתר על כן, אתגרים סביבתיים שונים יכולים להחמיר את האפקט הזה, כמו גם צריכת סמים עלייה מתמשכת.

ההליך מתואר כאן מדגיש את ההשפעה של אתגר משותף סביבתי, הגבלת מזון, בתשוקת הסמים שבאו לידי ביטוי כהגדלה של סמים המבקשים בחולדות מתנזרות.

חולדות מושתלות עם צנתרים תוך ורידית כרוניים iv, ולאחר מכן הוכשרו ללחוץ מנוף ל iv הרואין על פני תקופה של 10-12 יום. לאחר שלב ה הרואין המינהל עצמי החולדות יוסרו מתאי התניה אופרנטית ושוכנו במתקן הטיפול בבעלי חיים לתקופה של לפחות 14 ימים. בעוד קבוצה אחת נשמר תחת גישה בלתי מוגבלת למזון (קבוצה שבעה), קבוצה שנייה (קבוצת רוזוולט) חשופה למיילמשטר הגבלת מזון ld כי תוצאות במשקולות הגוף שלהם נשמר ב90% ממשקל גוף nonrestricted. ביום 14 של הגבלת מזון החולדות מועברות בחזרה לסביבת סמים אימונים, ובדיקה מחפשים סמים מנוהלת בתנאי הכחדה (כלומר. לוחץ על דוושה לא לגרום למשלוח הרואין).

ההליך שהוצג כאן התוצאה הוא הגדלת חזקה מאוד של חיפוש הרואין ביום בדיקה בחולדות מזון מוגבל. בנוסף, בהשוואה למניפולציות מניעת מזון חריפות שהשתמשנו בעבר, ההליך הנוכחי הוא יותר רלוונטי קליני מודל להשפעה של הגבלת קלוריה על המבקשים בסמים. יתר על כן, זה יכול להיות קרוב יותר למצבו של האדם, כפי שהחולדות אינן נדרשים לעבור שלב הכחדת אימון לפני הבדיקה מחפש סמים, שהוא מרכיב בלתי נפרד מההליך הפופולרי הכינון.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

אחד הקשיים העיקריים בטיפול בהתמכרות לסמים הוא השיעור הגבוה של הישנות, גם לאחר תקופות ממושכות של התנזרות 1,2. מחקרים במכורים לאדם זיהו את התרומה קריטית של אתגרים סביבתיים, כגון חשיפה לאותות בדידים הקשורים לסמים או סביבות 3 ואירועי חיים מלחיצים 4, כדי להרע. אתגר סביבתי נפוץ שנמצא להם השפעה על נטילת סמים והשתוקקות הוא הגבלת מזון כרונית. לדוגמא, זה כבר דווח כי הגבלת קלוריות כרונית קשורה עם סיגריה מוגברת עישון 5.   יתר על כן, חומרה בדיאטה (הגבלת קלוריה) מתואמת חיובי עם עלייה בשכיחות של שימוש בסמים בקרב נשים צעירות 6. עם זאת, מנגנוני המוח הבסיסיים אינם מובן במלואו.

בשל שיקולים מעשיים ואתיים הקשורות למחקר אנושי, h מודלים של בעלי החייםולהעיף פותחו כדי לזהות את המנגנונים עצביים הרלוונטיים. יש לנו שימשו בעבר 7,8 הליך הכינון להפגין חידוש סמים כבויים מחפשים בחולדות שנחשפו לאקוטי מניעת מזון (24-48 hr) 9,10. עם זאת, חלק בלתי נפרד מהליך הכינון הוא תקופת הכחדה שאינה תכונה נפוצה של טיפולי התמכרות לסמי 11 (אך ראה אפשטיין ואח'. 12 לדיון מקיף על תוקפו של נוהל ההחזרה). יתר על כן, במקרה המסוים של מניפולציות תזונתיות בבני אדם, אלא רק הגבלת מזון כרונית, אבל מניעת מזון לא חריפה, הוצג כדי להגדיל 5,13 לקיחת תרופה בצורה יעילה.

כתוצאה מכך, יש לנו הציעו "הליך התנזרות" 14 שמאפשר הלימוד של ההשפעות של הגבלת מזון כרונית בחיפוש סמים. באמצעות הליך זה אנחנו לאחרונה הדגמנו הגדלת חזקה של heroin מחפש בחולדות מתנזרות בעקבות חשיפה ל14 ימים של הגבלת מזון קלה 15.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. בעלי חיים

הם התייחסו לכל החולדות בהתאם להנחיות של המועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים ואישור לכל הפרוצדורות ניתנו על ידי ועדת המחקר בבעלי חיים באוניברסיטת קונקורדיה האתיקה.

  1. השג חולדות ב275-300 g (גברים) או 225-250 g (נקבות). חולדות בית בזוגות עד ניתוח בכלובי פלסטיק סטנדרטיים המכילים מצעי קלח תירס ונייר גרוס.
  2. לשמור על חולדות על מחזור אור כהה הפוך (להדליק את שעת 9:30 בבוקר).
  3. ודא מזון ומים הם כרצונך מודעה זמינים, למעט בתקופת ההתנזרות. אנו משתמשים באוכל עכברים רגיל (חלבון 20.9%, פחמימות 67.2% ושומן 11.8%).

2. צנתרים ומחברים

  1. הפוך צנתרים בכמויות גדולות ולהשתמש לפי צורך על פני תקופה ארוכה של זמן לאחר עיקור החיטוי.
  2. חותכים את צינורות Silastic ל12 סנטימטר חתיכות ארוכות.
    1. השתמש בקיסם שיניים, למקום קטןטיפה של סיליקון סביב הקטטר, 3 סנטימטר מהקצה.
    2. בואו יבש סיליקון ל24 שעות ולאחר מכן חיטוי ולאחסן את צנתרים.
  3. בנד הצינור של הצינורית "5-up", שישמש כמחבר, בזווית נכונה לכן הפלסטיק הארוך, ולאחר מכן חיטוי וחנות.
  4. להרכיב, סביבה נקיה מחיידקים, צנתרים ביום של הניתוח, על ידי לחיצה על הצד "הארוך" של צינור Silastic על צינור המתכת המכופף של הצינורית "5-up", בערך בחץ דרך למעמד הפלסטיק.
    1. חבר את הצינור "5-up" באמצעות צינורות Tygon ומחט 22 G הקהתה למזרק 1 מיליליטר מלא מלוח סטרילית.
    2. לשטוף מלוח באמצעות קטטר כדי להבטיח זרימה בלא הפרעה.

3. ניתוח צנתור תוך ורידי

  1. לאפשר חולדות שבוע של התאקלמות אחת במתקן הטיפול בבעלי החיים (ACF) לפני הניתוח. אל תבצע את הניתוח בחולדות עם משקולות פלג גוף תחתונהמ 300-325 g (גברים) או 250-275 g (נקבות).
  2. לפני הניתוח לשקול ולהרדים את החולדות בתערובת קטמין / xylazine (90/13 מ"ג / קילוגרם; IP).
    1. להתגלח, ולאחר מכן לנקות את הראש ואת האזור על כתף ימין (קרוב לבסיס הצוואר) עם אלכוהול ולקרצף כירורגית.
    2. הזרק פניצילין (450,000 IU / עכברוש, sc) כדי להגן מפני זיהום, ו2 מיליליטר של תמיסת מלח (SC) לטיפול בהתייבשות. החל ג'ל המדמיע לעיניים של החולדה כדי למנוע יובש הנגרם על ידי הרדמה.
  3. מניחים את החולדה על הבטן שלה ועושה חתך, באמצעות אזמל, בחלק העליון של הראש, בין העיניים, וcaudally לכיוון האוזניים של החולדה.
  4. מניחים את החולדה על הגב שלה עם האמות הדביקו אל פני השטח. הרם את העור באזור החתך, מקורי רק לעצם הבריח, עם מלקחיים ולעשות 1 סנטימטר אורך לגזור במספריים קטנים.
  5. שימוש בשני מלקחיים ישרים, להפריד את השומן ורקמות אחרות, עד שדבי הצוואר החיצוניתn הוא חשוף.
  6. דחוף את העצות של מלקחיים ישר מתחת לווריד כדי להרים ולהפריד את הווריד מהרקמה שמסביב. לנקות בזהירות את הווריד מכל רקמת דבקות ולאחר מכן הכנס מלקחיים מעוקלים תחת הווריד כדי לשמור אותו הרים ומעט מתוח.
  7. הפוך קטן, בצורת V, לגזור על פני השטח העליונים של הווריד באמצעות מספריים באביב קטנים.
    1. החזק את החתך הפתוח באמצעות מרחיב כלי, ולהתקדם, טיפ 3 סנטימטר "קצר" של קטטר לתוך הווריד לכיוון הלב עד טיפת סיליקון היא בנקודת החתך.
    2. לקשור את הצנתר לווריד עם 3 תפרים: אחד עד הזנב ככל האפשר, אחד מקורי רק טיפת סיליקון והשליש ככל מקורי ככל האפשר.
    3. לעבור מלוח דרך קטטר לאחר כל תפר כדי להבטיח שהוא נשאר בלא הפרעה ושהתפרים אינם הדוקים מדי.
  8. הסר את הסרט מסביב לידות ומניח בצד הגחון העכברוש למטה.
    1. הכנס לא hemostathrough צד הזנב של החתך בראש ולדחוף כדי להפריד את העור מהרקמה הבסיסית כדי ליצור "כיס" תת עורי.
    2. מדריך hemostat מתחת לעור לקראת הפתיחה על הכתפיים שבו הוכנס קטטר.
    3. לפרוץ את רקמת חיבור באמצעות hemostat, ומהדק בחוזקה את הקטטר בנקודה מקורי ביותר, מתחת לבסיס של "5-up".
  9. לנתק את "5-up" וחוט סוף הצנתר הארוך מתחת לעור ואת החתך ממוקם בחלק העליון של ראשו של העכברוש.
    1. השתמש במספריים כדי לחתוך את הקטטר בהמשך שבו hemostat היה מהודק ולצרף את סופו של הארוך "5-up".
    2. משוך את הקטטר לאורך מוט המתכת של "5 עד" כל הדרך עד למעמד הפלסטיק. עובר דרך תמיסת מלח כדי להבטיח זרימה חופשית.
  10. מניחים את החולדה על הגב שלה, ולתפור רק את החתך ליד עצם הבריח. חתך הראש צריך הרמ"אבפתוח.
  11. מניחים את החולדה במנגנון stereotaxic. למשוך את העור משם בחתך בחלק העליון של הראש באמצעות מהדק בולדוג ונקי ולייבש את פני השטח של הגולגולת.
  12. השתמש במקדח ידני, כדי לתחקר 4:56 חורים לתוך הגולגולת ולהכניס את ברגים במכונה לתוך החורים לפעול כפיגומים לראש הכובע.
    1. מקם את מחבר "5-up" בין הברגים ולתחוב את האורך העודף של קטטר לתוך "הכיס" תת עורית שנעשה בעבר השימוש בhemostat.
  13. השתמש מלט שיניים להדביק "5-up" לחלק העליון של הגולגולת. הסר את העכברוש ממנגנון stereotaxic אחרי המלט הוא מיובש באופן מלא.
  14. תן טיפול העכברוש שלאחר ניתוח, אשר מורכב מketoprofen (משכך כאבים, 5 מ"ג / קילוגרם, sc) ו2 מיליליטר של תמיסת מלח (SC). לנהל ketoprofen עבור 2 ימים נוספים לאחר ניתוח כדי לסייע בטיפול בכאב.
  15. ניתוח 48 שעות החל הבא, חולדות סומק יומי wה-i תערובת של הפרין וגנטמיצין בתמיסת מלח סטרילית (7.5 יחב"ל + 12 מיקרוגרם; 0.2-0.3 מיליליטר) לכל אורך תקופת ההתאוששות של ~ 2 ימים ועד לשלב ניהול עצמי הרואין.

4. נוהל התנהגות

ציר הזמן להליך של הגדלת מושרה הגבלת מזון של חיפוש הרואין מוצג באיור 1.

  1. תאי התניה אופרנטית.
    1. חולדות בית בנפרד בתאי התניה אופרנטית סגורות בקול הפחתת תאי עץ מצויד במאוורר.
    2. כל תא מורכב מרצפת נירוסטה רשת מתכת, קדמית ואחורי קיר פרספקס ושני הצדדיים לוח מתכת. הר שני מנופים נשלפים 9 סנטימטר מעל רצפת הדפנות תקין, ולאתר אות אור מעל כל מנוף. בתגובה על הידית לזווג סמים (הפעילה) מפעילה משאבת עירוי תוך מענה על הידית לזווג לא התרופתית (לא פעילה) אין לו השלכות לתכנות. </ Li>
    3. אתר מודול בטון (2.9 קילוהרץ) מעל למנוף הפעיל, ולמקם את הבית באור אדום בחלק העליון המרכזי של דפנות שמאל.
    4. חבר את משאבת התרופה לקטטר באמצעות מסתובב נוזל וצינורות Tygon מוגן עם קפיץ מתכת. בנוסף, לצייד כל חדר עם הופר אוכל ובקבוק מים ומאפשר גישה חופשית למזון ומים.
  2. יום הרגלה:
    1. בעקבות התאוששות מניתוח להזיז את החולדות לתאי אימונים אופרנטית ולאפשר לתקופה התרגלות 24 שעות.
    2. אל תחבר את החולדות לקפיץ המתכת ולא תפעיל את מתחם cue-light/tone.
    3. לוודא כי המנוף הפעיל נשאר חזר בו, אבל להבטיח את המנוף פעיל מורחב כדי לעזור עם האפליה בין שתי הידיות במהלך אימון.
  3. ממשל עצמי הרואין:
    1. חבר את מחבר 5 עד צינור Tygon ולצרף את קפיץ המתכת.
    2. לאפשר לחולדות לADM העצמיinister הרואין (0.1 מ"ג / קילוגרם / עירוי) ל10 ימים בשלושה מפגשים 3 שעות מופרדים על ידי מרווחי 3 שעות.
    3. בגין כל פגישה הבאה עם תחילת השלב הכהה (בסביבות 9:30 במעבדה שלנו) עם הסיומת של מנופים הפעילים ולא הפעילים, כמו גם תאורה של בית האור וההפעלה של המתחם לcue-light/tone 30 שניות.
    4. תגובות על תוצאת המנוף הפעילה בהפעלה של משאבת הסמים (5 שניות, 0.13 מיליליטר / עירוי) וחניכה של תקופת 20 פסק זמן שניות שבמהלכן בית האור כבוי ומורכב אות אור / טון מעל הידית הפעילה הוא הופעל (FR-1, 20 פסק זמן שניות). במהלך תקופת הזמן הקצוב, תגובות מנוף פעילים נרשמות אך לא מחוזקת. תגובות מנוף פעילים נרשמות אבל אין לי השלכות לתכנות.
    5. בעקבות כל מפגש 3 שעות, המנוף הפעיל חזר בו ואילו המנוף פעיל נשאר מורחב עד שעה 1 לפני המושב הראשון של היום הבא.
  4. התנזרות והגבלת מזון:
    1. לאחר אימון ניהול עצמי, הסר את החולדות מתאי התניה אופרנטית ובנפרד לשכן אותם בACF, ולתת גישה חופשית למזון ומים ליום לתרופות כישלון אחד.
    2. מחלקים את החולדות לשתי קבוצות: מזון מוגבל (רוזוולט) או שבעים, מתאים בהתאם למשקל הגוף, מספר החליטות ותגובות מנוף פעילים על פני 5 הימים האחרונים של אימונים.
    3. בעקבות יום סמים סחף, להסיר מזון של חולדות רוזוולט, ולהאכיל אותם כ 15 גרם של אוכל חולדה בשעה 1:30 PM. התאם את כמות מזון על פני 14 ימים של התנזרות כדי לשמור על המשקל של חולדות רוזוולט גוף (BW) לכ 90% BW הבסיסי שלהם.
  5. בדיקה מחפש בסמים: בבוקרו של יום התנזרות 14, להחזיר את החולדות לתאי התניה אופרנטית ולצרף אותם לקפיץ המתכת. השתמש במושב שעה 1 שעות או 3 שבמהלכו יש תגובות מנוף פעילות ולא פעילים באותו השלכותים באימון ניהול עצמי, לא כולל הזמינות של התרופה (כלומר בתנאי הכחדה).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

משקל גוף לאורך זמן: תוצאות אופייניות מראים כי משקל גוף יישאר יציב לאורך כל אימון הרואין ממשל עצמי. במהלך התנזרות, חולדות עם גישה בלתי מוגבלת לזוללות להגדיל את משקל הגוף שלהם, ואילו אלה שמוגבלים מזון להפחית במשקל הגוף שלהם לכ 90% ממשקל הגוף המקורי שלהם או 75-80% ממשקל גופם של חולדות סיפוקו (איור 2) .

חליטות, תגובות מנוף פעילות ולא פעילים על אימונים: חליטות ומנוף פעיל להגיב עלייה על ימי הדרכה, ואילו מנוף פעיל להגיב לא (איור 3). בדרך כלל, מנוף פעיל להגיב עליות לאורך כל אימון ומייצב בשיעור גבוה יותר מלהגיב. מנוף פעיל להגיב נותר מינימאלי בכל אימון, מסמן כי החולדות הפלו כראוי בין שני המנופים. לבסוף, חליטות המספר נלקחו יגדלו לאורך כל אימון ולהישאר יציב בשיעור נמוך יותר מאלה של תגובות מנוף הפעילים. ניתוק זה הוא אפשרי בשל פסק זמן 20 שניות הבאות חליטות סמים.

תגובות פעילים ולא פעילים מנוף ביום בדיקה: מנוף פעיל להגיב לחולדות מזון מוגבלות מגבירה באופן משמעותי בהשוואה לחולדות סיפוקו (לעתים קרובות אנו נצפו הבדל 250% בין קבוצות הטיפול, ראו 15). מנוף פעיל להגיב הוא מינימאלי ולהשוות בין המזון המוגבל וחולדות סיפוקו (איור 4).

איור 1
איור 1. ציר זמן של ההליך ניסיוני. ההליך מורכב משלושה שלבים. בעלי חיים הראשונים מאומנים לניהול עצמי בסמים בנוכחותו של מתחם רמז / טון (שלב מנהל עצמי הרואין), ולאחר מכן עבר להקשר אחר ולעבור תקופה כישלון תרופה ליום אחד. יום סחף אחריו תקופה ארוכה של התנזרות, שבו ניתנות חולדות משטר של הגבלת מזון או גישה בלתי מוגבלת למזון. ביום ה 14 של התנזרות, חולדות חזרו לסביבת ממשל העצמי לבדיקה מחפש סמים בנוכחות רמזים לזווג סמים בתנאי הכחדה (שלב בדיקת סמים שוחרת). לחצו כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.

איור 2
איור 2. משקל גוף במזון המוגבל (רוזוולט) וקבוצות סיפוקו, על פני ימי ניסוי. כל החולדות לעבור 10 ימים של אימוני הרואין ממשל עצמי בתאי אימונים אופרנטית וכישלון תרופה ביום 1 במתקן הטיפול בבעלי החיים. חולדות הם מתאימים על פי שגוףight, מנוף פעיל להגיב וחליטות תרופה לפני ההפרדה לרוזוולט או קבוצה שבעה. לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.

איור 3
איור 3. מספר החליטות, פעילים, ותגובות מנוף פעילים עשו במהלך אימון הרואין ממשל עצמי. הרואין (0.13 מ"ג / קילוגרם / עירוי) הוא למילוי עצמי בשלושה מפגשים 3 שעות, מעל 10 ימים, תחת, 20 שניות FR-1 פסק זמן בלוח זמנים של חיזוק. לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.

איור 4
Figure 4. ההשפעה של חשיפה להגבלת מזון ממושך (רוזוולט) על הרואין מחפש בחולדות מתנזרות. הנתונים מייצגים מנוף פעיל ולא פעיל טיפוסי להגיב ביום בדיקה. יום מבחן מורכב משעה אחת 1 (או 3 שעות) פגישת מבחן בתנאי הכחדה, לאחר אימון ניהול עצמי הרואין ו14 ימים של התנזרות תחת רוזוולט או תנאי סיפוקו. לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

יש ההליך המתואר כאן חזק תוקף הנראה בגלל 1) הוא מאפשר לצריכת סמים מרצון ושליטה על מתן תרופה, 2) הוא משתמש בתוואי של ממשל כי הוא נפוץ במכורים לאדם, 3) שהוא משקף (תקופות יחסית) ממושכות של חשיפה לסמים והתנזרות, ו 4) זה ימנע את אימון הכחדה לפני הבדיקה שוחרת תרופה שהיא חלק בלתי נפרד מהליך הכינון אך הוא ציין רק לעתים נדירות במכורים לאדם 14. בנוסף, דגמי הליך מצב הגבלת מזון ממושך שהוא חשב להיות קריטי כאשר בוחנים את ההשפעות של הגבלת קלוריות על תרופה המבקשת 5.

בפרוטוקול שאנו מתארים כאן, החולדות הם שוכנו בתאי התניה אופרנטית דרך תקופת הסמים המינהל עצמי (24hr / יום). זה יכול להיות אפשרי כדי להגביר את היעילות של איסוף נתונים על ידי שימוש בפרוטוקול "חוליות" שבו החולדות מועברות בחזרה לACFחרי אימון יומי אחד, ומאפשר לקבוצות מרובות כדי להיות מיומנים בכל יום. עם זאת, גישה זו עשויה להיות מתאימה יותר לאימוני קוקאין, הרואין מאז הוא מנוהל רצוי בסביבת "הבית" 16. יש לנו לא העריך את היעילות של ההליך באמצעות אפשרות החוליות. דרך נוספת להגדיל את התפוקה של ההליך היא על ידי מדהים הכשרת מנהל עצמי בסמים לשתי קבוצות של חולדות על ידי 10-12 ימים. שימוש בעיצוב הזה, חולדות בקבוצה השנייה מאומנים לממשל עצמי ואילו הקבוצה הראשונה עוברת את תקופת ההתנזרות בACF. אימון ניהול עצמי בסמים לקבוצה השנייה חייב להסיק לפחות יום לפני הבדיקה המתוכננת לקבוצה הראשונה, כדי לאפשר ניקוי יסודי של התאים.

יש לנו דיווח לפני 15 כי אורך תקופת ההגבלה הוא קריטי, עם 3-5 ימים של הגבלת מזון שלא הצליחו להגדיל את הרואין מחפש בדוארnd של תקופת ההתנזרות. אנחנו לא נצפו עלייה ביעילות של המניפולציה הגבלת מזון בתקופות חשיפה מוגברת (~ 28V ימים; נתונים שלא פורסמו).

כמו כן, ראוי לציין כי נראה השינוי בהקשר בין שלב ניהול העצמי ותקופת ההתנזרות להיות חשוב להגדלה של חיפוש סמים. יש לנו שנאספו נתונים שמרמזים על השפעה מופחתת בהרבה להגבלת מזון כאשר החולדות נשמרות בסביבת סמים אימונים בתקופת ההתנזרות (תצפית לא פורסם).

לסיכום, הגדלת מושרה הגבלת המזון של חיפוש הרואין היא אפקט חזק, בקלות לשכפול. לפיכך מאפשר לעיצובים יעילים של מחקרים על המנגנונים העצביים העומדים בבסיס הימנעות ההישנות הבאה, תוך שימוש pretreatments תרופתי, ניטור מקוון של פעילות neurochemical או עצבית באמצעות microdialysis או טכניקות אלקטרו, ולאחר t-היסטולוגית est מנתח.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

אישור לכל הפרוצדורות ניתנו על ידי ועדת המחקר בבעלי חיים באוניברסיטת קונקורדיה האתיקה, בהתאם להנחיות של המועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים. החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים. FS וTD תרמו במידה שווה להתפתחותו של הנוהל שהוצג כאן ולכתיבה של כתב היד.

Acknowledgments

עבודה זו נתמכה על ידי המדעים והנדסת תכנית מועצת דיסקברי (בארה"ב: 298,915) טבעיים, Fonds דה משוכלל ונדיר du קוויבק - סנטה (CSBN), והמחקר בקנדה כיסאות תכנית (ארה"ב).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Name Company Catalogue Number
Ketamine (Vetalar, 100 mg/ml) Bioniche Animal Health Obtained through local distributer
Xylazine (Rompun, 100 mg/ml) Bayer Obtained through local distributer
Heroin HCl National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA
Anafen injection 1 mg/ml Vial/20 ml CDMV, Canada 12868
Equipment
Name Company Catalogue Number
Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037) Fisher Scientific 1118915A
GE marine silicon GE SE-1134
Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060) VWR 63018-044
Cannulae (22 G, 5-up) Plastics One C313G-5up
Liquid swivels, plastic, 22 G Lomir Biomedical, Inc. RSP1
Fixed speed infusion pump (3.3 rpm) Coulbourn Instruments A73-01-3.3
Rat test cage Coulbourn Instruments H10-11R-TC
Stainless steal grid floor Coulbourn Instruments H10-11R-TC-SF
House light-rat Coulbourn Instruments H11-01R
Single high-bright cue-rat Coulbourn Instruments H11-03R
Tone module 2.9 kHz Coulbourn Instruments H12-02R-2.9
Retractable lever-rat Coulbourn Instruments H23-17RA
Balance arm Coulbourn Instruments H29-01
Sound attenuation boxes Concordia University Home made
System controller 2 Coulbourn Instruments SYS CTRL 2
System power base Coulbourn Instruments H01-01
Habitest Universal Linc Coulbourn Instruments H02-08
Environment connection board & Linc cable Coulbourn Instruments H03-04
Graphic State Notation 3 Coulbourn Instruments GS3

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).
  2. O'Brien, C. P., McLellan, A. T. Myths about the treatment of addiction. Lancet. 347, 237-240 (1996).
  3. Childress, A. R., Ehrman, R., Rohsenow, D. J., Robbins, S. J., O'Brien, C. P. Classically conditioned factors in drug dependence. Substance abuse: A comprehensive textbook. Lowinson, J. W., Luiz, P., Millman, R. B., Langard, G. Williams and Wilkins. Baltimore. 56-69 (1992).
  4. Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
  5. Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers. Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).
  6. Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women. J. Subst. Abuse. 4, 341-353 (1992).
  7. de Wit, H., Stewart, J. Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat. Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).
  8. Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings. Psychopharmacology. 168, 3-20 (2003).
  9. Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).
  10. Tobin, S., Newman, A. H., Quinn, T., Shalev, U. A role for dopamine D1-like receptors in acute food deprivation-induced reinstatement of heroin seeking in rats. Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 217-226 (2009).
  11. Katz, J. L., Higgins, S. T. The validity of the reinstatement model of craving and relapse to drug use. Psychopharmacology. 168, 21-30 (2003).
  12. Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189, 1-16 (2006).
  13. Zacny, J. P., de Wit, H. The effects of a restricted feeding regimen on cigarette smoking in humans. Addict. Behav. 17, 149-157 (1992).
  14. Fuchs, R. A., Lasseter, H. C., Ramirez, D. R., Xie, X. Relapse to drug seeking following prolonged abstinence: the role of environmental stimuli. Drug Discov. Today Dis. Models. 5, 251-258 (2008).
  15. D'Cunha, T. M., Sedki, F., Macri, J., Casola, C., Shalev, U. The effects of chronic food restriction on cue-induced heroin seeking in abstinent male rats. Psychopharmacology. 225, 241-250 (2013).
  16. Caprioli, D., Celentano, M., Dubla, A., Lucantonio, F., Nencini, P., Badiani, A. Ambience and drug choice: cocaine- and heroin-taking as a function of environmental context in humans and rats. Biol. Psychiatry. 65, 893-899 (2009).
פרוצדורה כדי לחקור את ההשפעה של הגבלת מזון ממושכת בהרואין מחפש אצל חולדות מתנזרות
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats. J. Vis. Exp. (81), e50751, doi:10.3791/50751 (2013).More

Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats. J. Vis. Exp. (81), e50751, doi:10.3791/50751 (2013).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter