Summary
En prosedyre som gir en demonstrasjon av robust styrking av medikament som søker i næringsbegrensede rotter er beskrevet. Etter heroin selvadministrering trening, rotter gå gjennom en avholdenhet periode, i et rusfritt miljø, hvor de er mildt mat begrenset. Drug søkende blir deretter testet i medikament-assosiert miljø.
Abstract
I menneskelige narkomane, kan eksponering for narkotika-forbundet pekepinner eller miljøer som tidligere var forbundet med narkotikabruk utløse tilbakefall under avholdenhet. Videre kan forskjellige miljø utfordringer forsterke denne effekten, så vel som økning kontinuerlig medikamentinntak.
Prosedyren vi beskriver her fremhever betydningen av en felles miljøutfordring, mat begrensning, på trangen til narkotika som blir uttrykt som en styrking av narkotika søker i rusfrie rotter.
Rotter er implantert med kroniske intravenøse iv katetre, og deretter trent til å trykke på en spak for iv heroin over en periode på 10-12 dager. Etter heroin selvadministrering fasen blir rottene fjernet fra operant kondisjoneringskamrene og plassert i anlegget for dyrehold i en periode på minst 14 dager. Mens den ene gruppe holdes under fri tilgang til mat (mett gruppe), blir en andre gruppe (FDR-gruppen) som utsettes for en mild mat begrensning regime som resulterer i deres kroppsvekter opprettholdt ved 90% av deres ikke-begrenset kroppsvekt. På dag 14 av mat begrensning rottene blir overført tilbake til narkotika-treningsmiljø, og en narkotika-søker testen kjøres under utryddelse forhold (dvs.. Spaken presser ikke fører til heroin levering).
Prosedyren presenteres her resulterer i en svært robust styrking av heroin søker på testdagen i maten begrenset rotter. I tillegg, sammenlignet med de akutte mat deprivasjon manipulasjoner vi har brukt før, er den nåværende prosedyren en mer klinisk relevant modell for virkningen av kaloribegrensning på narkotika søker. Dessuten kan det være nærmere den menneskelige tilstand som rottene ikke er nødvendig å gå gjennom en utryddelse-treningsfase før den narkotika-søker test, som er en integrert del av den populære gjeninnsettelse prosedyren.
Introduction
En av de store vanskeligheter ved behandling av narkotikaavhengighet er den høye frekvensen av tilbakefall, selv etter lengre perioder med avholdenhet 1,2. Studier på humane narkomane har identifisert et kritisk bidrag på miljøutfordringer, som for eksempel eksponering for narkotika-forbundet diskrete signaler eller miljøer 3 og stressende livshendelser 4, til tilbakefall. En felles miljøutfordring som ble funnet å ha en effekt på narkotikabruk og craving er kronisk mat begrensning. For eksempel har det blitt rapportert at kronisk kalorirestriksjon er assosiert med økt sigarettrøyking 5. Videre er slanking alvorlighetsgrad (kalorirestriksjon) positivt korrelert med økt prevalens av narkotikabruk hos unge kvinner seks. Men, er de underliggende mekanismene hjernen ikke fullt ut forstått.
På grunn av praktiske og etiske betraktninger knyttet til menneskelig forskning, dyremodeller have blitt utviklet for å identifisere den relevante neurale mekanismer. Vi har tidligere brukt gjeninnføringen prosedyre 7,8 for å demonstrere gjenopptakelse av slukket narkotika søker hos rotter som utsettes for akutt (24-48 timer) mat deprivasjon 9,10. Men en integrert del av gjeninnføringen prosedyren er en utryddelse periode som ikke er et felles trekk ved narkotikaavhengighet behandlinger 11 (men se Epstein et al. 12 for en omfattende diskusjon om gyldigheten av gjeninnføringen prosedyre). Videre, i den enkelte sak av kosttilskudd manipulasjoner i mennesker, bare kronisk mat begrensning, men ikke akutt mat deprivasjon, ble vist å effektivt øke narkotikabruk 5,13.
Derfor har vi foreslått en "avholdenhet prosedyre" 14 som gjør det mulig å studere effektene av kronisk mat begrensning på narkotika søker. Ved hjelp av denne fremgangsmåten vi har nylig demonstrert en robust styrking av heroin søker i rusfrie rotter etter eksponering for 14 dager med mild mat begrensning 15.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
En. Dyr
Alle rotter blir behandlet i samsvar med retningslinjene fra den kanadiske Council on Animal Care og godkjenning for alle de eksperimentelle prosedyrer ble gitt av Concordia University Animal forskningsetiske komité.
- Skaffe rotter på 275-300 g (menn) eller 225-250 g (kvinner). Hus rotter i par inntil kirurgi i standard plastmerder som inneholder maiskolbe sengetøy og makulert papir.
- Opprettholde rotter på et reversert lys-mørke-syklusen (lys av på 9:30).
- Sørg for at mat og vann er tilgjengelig ad libitum, unntatt under avholdenhet perioden. Vi bruker en vanlig rotte chow (20,9% protein, 67,2% karbohydrater og 11,8% fett).
2. Katetre og kontakter
- Lag katetre i bulk og bruk som er nødvendig over en lang periode etter autoklav sterilisering.
- Kutt silastinrør til 12 cm lange biter.
- Bruk en tannpirker, for å plassere en litendråpe silisium rundt kateteret, 3 cm fra tuppen.
- La silisium tørke i 24 timer og deretter i autoklav og lagre katetre.
- Bøy langt rør av "5-up"-kanyle, som vil tjene som en plugg, i en rett vinkel i forhold til plast pidestall, og deretter i autoklav og lagre.
- Sett sammen, aseptisk, katetrene på dagen for kirurgi, ved å trykke på "lange" side av Silastic røret over den bøyde metallrør av den "5-up"-kanyle, omtrent halvveis til plastsokkel.
- Koble "5-up"-røret via Tygon rør og en avstumpet 22 G nål til en 1 ml sprøyte fylt med sterilt saltvann.
- Skyll saltvann gjennom kateteret for å sikre uhindret strømning.
Tre. Intravenøs Kateterisering Kirurgi
- La rottene én uke med akklimatisering i dyr omsorg anlegget (ACF) før operasjonen. Ikke utføre kirurgi på rotter med kroppsvekt lavereenn 300-325 g (menn) eller 250-275 g (kvinner).
- Før kirurgi veie og anesthetize rottene med en ketamin / xylazin blanding (90/13 mg / kg, ip).
- Barbere, og deretter rense hodet og området på høyre skulder (nær bunnen av nakken) med alkohol og kirurgisk kratt.
- Injiser penicillin (450,000 IU / rotte, sc) for å beskytte mot infeksjon, og 2 ml saltløsning (sc) for hydrering. Påfør tåre gel til rotte øyne for å hindre tørrhet indusert av anestesi.
- Plasser rotte på dens buk og foreta et innsnitt, ved hjelp av en skalpell, på toppen av hodet, mellom øynene og kaudalt mot ørene på rotte.
- Plasser rotte på ryggen med underarmene teipet til overflaten. Løft huden i innsnitt området, bare rostral til krageben, med tang og gjøre en 1 cm langsgående kutt med liten saks.
- Ved hjelp av to rette tang, separere fett og andre vev til det ytre hals vein er eksponert.
- Skyv tips av rette tang under blodåre å løfte og skille venen fra omkringliggende vev. Rengjør forsiktig venen fra alle holde vev og deretter sette buet tang under blodåre å holde det løftet og litt strukket.
- Foreta en liten, v-formet, skåret på den øvre overflaten av venen ved hjelp av små fjær saks.
- Hold i snitt åpen ved hjelp av et fartøy dilator, og før "kort", 3 cm spissen av kateteret inn i venen mot hjertet til silikonfallet er ved snittet punktet.
- Bind kateteret til venen med tre suturer: en så langt som mulig caudal, en like rostral til silikonfallet og den tredje en så langt rostral som mulig.
- Pass saltvann gjennom kateteret etter hver sutur for å sikre at det forblir uhindret og at suturene ikke er for stramt.
- Fjern tapen rundt armene og plassere rotte ventral side ned.
- Sett inn en hemostat through hale siden av hodet snitt og presse å skille huden fra underliggende vev for å skape en subkutan "lomme".
- Før hemostat under huden mot åpningen på skuldrene, hvor kateteret ble innsatt.
- Bryte gjennom bindevevet ved hjelp av pinsetten, og tett klemme kateteret på det mest rostral punkt, under bunnen av den "5-up".
- Ta av "5-up" og træ den lange enden av kateteret under huden og ut innsnitt er plassert på toppen av rotte hode.
- Bruk saks til å klippe kateteret under der pinsetten ble spent fast og fest den lange enden av "5-up."
- Trekk kateteret langs metallskaftet for "5-up" helt til plastsokkel. Pass saltvann gjennom å sikre fri flyt.
- Plasser rotte på ryggen, og sy bare snittet nær krageben. Hodet snitt bør Remai åpen.
- Plasser rotte i en stereotaksisk apparat. Trekk huden bort på snittet på toppen av hodet ved hjelp av bulldog klemmer og ren og tørke overflaten av skallen.
- Bruk en manuell bore litt, for å bore 04:56 hull inn i skallen og sette inn maskinskruer i hullene for å fungere som stillas for hodet-cap.
- Plasser "5-up"-kontakt mellom skruene og brette det overskytende lengden av kateteret i underhudsfettet "lomme" som tidligere er gjort ved hjelp av pinsetten.
- Bruk dental sement for å feste "5-up" til toppen av skallen. Fjern rat fra stereotaksisk apparatur etter at sementen er fullstendig tørket.
- Gi rotte postoperativ behandling, som består av ketoprofen (analgetikum, 5 mg / kg sc) og 2 ml saltløsning (sc). Administrere ketoprofen i ytterligere to dager etter operasjonen for å hjelpe med smertebehandling.
- Begynnelsen 48 timer etter operasjonen, flush rotter daglig wi. en blanding av heparin-og gentamicin i sterilt saltvann (7,5 IU + 12 ug, 0,2 til 0,3 ml) i hele rekonvalesensperioden på ~ 2 dager og gjennom heroin selvadministrering fase.
4. Behavioral Prosedyre
Tidslinjen for prosedyren av mat begrensning-indusert styrking av heroin seeking er presentert i figur 1.
- Operant betinging kamre.
- Hus rotter individuelt i operant betinging kamre vedlagt i lyddempende tre avdelinger som er utstyrt med en vifte.
- Hvert kammer består av en rustfri metallgittergulvet, en foran og bak Plexiglas vegg og to metallpanelveggene. Mount to uttrekk spaker 9 cm over gulvet i høyre sidevegg, og finne en kø-lys over hver spak. Svare på narkotika-paret (aktive) spaken aktiverer en infusjonspumpe mens svare på nondrug-paret (inaktiv) spaken har ingen programmerbare konsekvenser. </ Li>
- Finn en tone modul (2,9 kHz) over det aktive spaken, og plassere et rødt hus-lys øverst midt på venstre sidevegg.
- Koble medikament pumpen til kateteret gjennom en væske svivel og Tygon rør som er beskyttet med en metallfjær. I tillegg utstyre hvert kammer med en mat-beholderen, og en vannflaske tillate ubegrenset tilgang til mat og vann.
- Tilvenning dag:
- Etter utvinning fra kirurgi flytte rottene til operant trening kamre og gi rom for en 24 timers tilvenning periode.
- Ikke koble rottene til metall våren og ikke aktivere cue-light/tone kompleks.
- Sørg for at den aktive spaken forblir tilbaketrukket, men sikre den inaktive spaken er utvidet til å hjelpe til med diskriminering mellom de to spakene under trening.
- Heroin selv administrasjon:
- Koble den 5-up kontakt til Tygon slange og fester metallfjær.
- La rottene til selv administer heroin (0,1 mg / kg / infusjon) for 10 dager i løpet av tre 3-timers økter adskilt med 3 timers mellomrom.
- Begynn hver økt etter utbruddet av den mørke fasen (ca. 09:30 i vårt laboratorium) med forlengelse av de aktive og inaktive spaker, i tillegg til belysning av hus-lys og aktivering av cue-light/tone kompleks for 30 sek.
- Svarene på aktive spaken resultat i aktivering av stoffet pumpe (5 sek, 0,13 ml / infusjon) og initiering av en 20 sek timeout periode hvor huset-lyset er slått av og køen lys / tone kompleks over det aktive spaken er aktivert (FR-1, 20 sek timeout). Under timeout perioden, er aktive spaken svar på, men ikke forsterket. Inaktive spaken svar blir registrert, men har ingen programmerbare konsekvenser.
- Etter hvert tre timers sesjon, er den aktive spaken trukket mens den inaktive spaken forblir utvidet til en time før den første økten av den påfølgende dagen.
- Avholdenhet og mat begrensning:
- Etter selvadministrering trening, fjerne rottene fra operant betinging kamre og individuelt huse dem i ACF, og gir ubegrenset tilgang til mat og vann i en narkotika-utvasking dag.
- Fordel rottene inn i to grupper: mat begrenset (FDR) eller mett, matchet i henhold til kroppsvekt, antall infusjoner og aktive spaken svar på tvers av de siste fem dager med trening.
- Etter narkotika-utvasking dag, fjerne FDR rottenes mat, og mate dem ca 15 g rotte chow på 01:30. Juster mengden mat over 14 dager med avholdenhet for å opprettholde de FDR rottenes kroppsvekt (BW) til ca 90% av sin egen baseline BW.
- Drug-seeking test: Om morgenen avholdenhet dag 14, returnere rottene til operant betinging kamre og feste dem til metall våren. Bruk en en time eller tre timers økt der aktive og inaktive spaken svarene har de samme konsekvenser ens i selvadministrering trening, unntatt tilgjengeligheten av stoffet (dvs. i henhold til utryddelse forhold).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Kroppsvekt over tid: Typiske resultater viser at kroppsvekt forblir stabil gjennom heroin selvadministrering trening. Under avholdenhet, rotter med ubegrenset tilgang til chow øke sin kroppsvekt, mens de som er mat begrenset redusere sin kroppsvekt på ca 90% av sin egen opprinnelige kroppsvekt eller 75-80% av de mett rottenes kroppsvekt (Figur 2) .
Infusjoner, aktive og inaktive spaken svar enn trening: infusjoner og aktiv spaken reagerer økning over treningsdager, mens inaktive spaken reagerer ikke (figur 3). Vanligvis aktiv spaken reagerer øker gjennom trening og stabiliserer seg på et høyere rate av å svare. Inaktive spaken reagerer forblir minimal gjennom trening, som betyr at rottene har skikkelig diskriminert mellom begge spakene. Til slutt, vil antallet infusjoner tatt øke gjennom trening ogvære stabilt ved en hastighet lavere enn de av de aktive spak respons. Denne dissosiasjon er mulig på grunn av 20 sek timeout etter medikament infusjoner.
Aktive og inaktive spaken svar på testdagen: Aktiv spaken svare for mat begrenset rotter øker betydelig i forhold til de mett rotter (vi ofte observert en 250% forskjell mellom behandlingsgruppene, se 15). Inaktive spak respons er minimal, og kan sammenlignes mellom mat begrenset og mett rotter (figur 4).
Figur 1. En tidslinje for den eksperimentelle prosedyre. Fremgangsmåten består av tre faser. Dyr er første opplært til å selv administrere et medikament i nærvær av en kø / tone kompleks (heroin selvadministrering fase), deretter flyttet til en annen sammenheng oggjennomgå en en-dags narkotika utvaskingsperiode. Bleke dag er etterfulgt av en lengre periode med avholdenhet, hvor rotter er gitt en diett av mat begrensning eller ubegrenset tilgang til mat. På den 14. dagen av avholdenhet, er rotter tilbake til selvadministrering miljø for en narkotika-søker test i nærvær av narkotika-paret signaler i henhold til utryddelse forhold (narkotika-søkende testfase). Klikk her for å se større bilde .
Figur 2. Kroppsvekt i maten begrenset (FDR) og mett grupper, på tvers av eksperimentelle dager. Alle rotter gjennomgå 10 dager med heroin selv-administrativ utdanning i operant trening kamre og en en dag narkotika utvasking i dyr omsorg anlegget. Rotter er matchet i henhold til kropps viight, aktiv spaken reagerer og narkotika infusjoner før separasjon inn i FDR eller mett gruppe. Klikk her for å se større bilde .
Figur 3. Antallet infusjoner, aktive og inaktive spaken svarene gjøres i løpet av heroin selvadministrering trening. Heroin (0,13 mg / kg / infusjon) er selv-administrert i tre 3-timers økter, over 10 dager, under et FR-1, 20 sek tidsutkobles tidsplan av armering. Klikk her for å se større bilde .
Figure fire. Effekten av eksponering for langvarig mat begrensning (FDR) på heroin søker i rusfrie rotter. Dataene representerer typiske aktive og inaktive spaken reagerer på testdagen. Test dag består av en 1 time (eller 3 timers) test session i henhold utryddelse forhold, etter heroin selvadministrering opplæring og 14 dager med avholdenhet etter FDR eller mett forhold. Klikk her for å se større bilde .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Prosedyren er beskrevet her har sterke ansikt gyldigheten fordi 1) det gir mulighet for frivillig inntak og kontroll over narkotika administrasjon, 2) den bruker en tilførselsvei som er vanlig i menneske narkomane, 3) det reflekterer (relativt) lengre perioder med narkotika eksponering og avholdenhet, og 4) det unngår utryddelse trening før den narkotika-søker test som er integrert til gjenoppretting prosedyre, men er sjelden observert i menneske narkomane 14. I tillegg prosedyren modellene en langvarig mat begrensning tilstand som er antatt å være kritisk når man vurderer effekten av kalorirestriksjon på narkotika søker fem.
I den protokoll beskrives her, blir rottene plassert i operant kondisjoneringskamrene gjennom stoffet selvadministrering perioden (24 timer / dag). Det kan være mulig å øke effektiviteten av datainnsamling ved hjelp av et "lagene" protokoll hvor rottene blir overført tilbake til en ACFfter en enkelt daglig treningsøkt, noe som åpner for flere grupper å bli trent hver dag. Imidlertid kan denne tilnærmingen være mer egnet for kokain trening, siden heroin administreres fortrinnsvis i "hjem" miljø 16. Vi har ikke vurdert effektiviteten av prosedyren med squads alternativet. En annen måte å øke gjennomstrømningen av fremgangsmåten er ved forskyvningen stoffet selvadministrering opplæring i to grupper av rotter etter 10-12 dager. Ved hjelp av denne utformingen, blir rottene i den andre gruppen trent for selvadministrering, mens den første gruppe går inn i avholdenhet for i ACF. Drug selvadministrering trening for den andre gruppen skal være avsluttet minst en dag før den planlagte test for den første gruppe for å tillate grundig rengjøring av kamrene.
Vi har rapportert før 15 at lengden av restriksjonstiden er kritisk, med 3 til 5 dager med mat begrensning unnlater å forsterke heroin søker ved end av avholdenhet perioden. Vi har ikke observert en økning i effekten av mat begrensning manipulasjon med økte perioder eksponerings (~ 28 dager, upubliserte data).
Det er også verdt å merke seg at endringen i sammenheng mellom selvadministrering fasen og avholdenhet perioden ser ut til å være viktig for styrking av narkotika søker. Vi har samlet inn data som tyder på en mye redusert effekt for mat begrensning når rottene blir opprettholdt i narkotika-treningsmiljø i løpet av avholdenhet perioden (upublisert observasjon).
I konklusjonen, maten begrensning-indusert styrking av heroin søker er en robust, lett gjentas effekt. Det gjør derfor for effektiv design av studier på de nevrale mekanismene som ligger bak tilbakefall etter avholdenhet, bruker farmakologiske forbehandling, online overvåking av nevrokjemiske eller neuronal aktivitet ved hjelp av mikrodialyse eller elektrofysiologiske teknikker, og post-test histologiske analyser.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Godkjenning for alle eksperimentelle prosedyrer ble gitt av Concordia University Animal forskningsetiske komité, i samsvar med retningslinjene fra den kanadiske Council on Animal Care. Forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende finansielle interesser. FS og TD like bidratt til utviklingen av prosedyren som presenteres her, og til skriving av manuskriptet.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av Natural Sciences & Engineering Council Discovery Program (US: 298 915), den Fonds de Recherche du Quebec - Santé (CSBN), og Canada Research Stoler Program (US).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Name | Company | Catalogue Number | |
| Ketamine (Vetalar, 100 mg/ml) | Bioniche Animal Health | Obtained through local distributer | |
| Xylazine (Rompun, 100 mg/ml) | Bayer | Obtained through local distributer | |
| Heroin HCl | National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA | ||
| Anafen injection 1 mg/ml Vial/20 ml | CDMV, Canada | 12868 | |
| Equipment | |||
| Name | Company | Catalogue Number | |
| Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037) | Fisher Scientific | 1118915A | |
| GE marine silicon | GE | SE-1134 | |
| Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060) | VWR | 63018-044 | |
| Cannulae (22 G, 5-up) | Plastics One | C313G-5up | |
| Liquid swivels, plastic, 22 G | Lomir Biomedical, Inc. | RSP1 | |
| Fixed speed infusion pump (3.3 rpm) | Coulbourn Instruments | A73-01-3.3 | |
| Rat test cage | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC | |
| Stainless steal grid floor | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC-SF | |
| House light-rat | Coulbourn Instruments | H11-01R | |
| Single high-bright cue-rat | Coulbourn Instruments | H11-03R | |
| Tone module 2.9 kHz | Coulbourn Instruments | H12-02R-2.9 | |
| Retractable lever-rat | Coulbourn Instruments | H23-17RA | |
| Balance arm | Coulbourn Instruments | H29-01 | |
| Sound attenuation boxes | Concordia University | Home made | |
| System controller 2 | Coulbourn Instruments | SYS CTRL 2 | |
| System power base | Coulbourn Instruments | H01-01 | |
| Habitest Universal Linc | Coulbourn Instruments | H02-08 | |
| Environment connection board & Linc cable | Coulbourn Instruments | H03-04 | |
| Graphic State Notation 3 | Coulbourn Instruments | GS3 |
References
- Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. , Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).
- O'Brien, C. P., McLellan, A. T. Myths about the treatment of addiction. Lancet. 347, 237-240 (1996).
- Childress, A. R., Ehrman, R., Rohsenow, D. J., Robbins, S. J., O'Brien, C. P. Classically conditioned factors in drug dependence. Substance abuse: A comprehensive textbook. Lowinson, J. W., Luiz, P., Millman, R. B., Langard, G. , Williams and Wilkins. Baltimore. 56-69 (1992).
- Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
- Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers. Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).
- Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women. J. Subst. Abuse. 4, 341-353 (1992).
- de Wit, H., Stewart, J. Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat. Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).
- Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings. Psychopharmacology. 168, 3-20 (2003).
- Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).
- Tobin, S., Newman, A. H., Quinn, T., Shalev, U. A role for dopamine D1-like receptors in acute food deprivation-induced reinstatement of heroin seeking in rats. Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 217-226 (2009).
- Katz, J. L., Higgins, S. T. The validity of the reinstatement model of craving and relapse to drug use. Psychopharmacology. 168, 21-30 (2003).
- Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189, 1-16 (2006).
- Zacny, J. P., de Wit, H. The effects of a restricted feeding regimen on cigarette smoking in humans. Addict. Behav. 17, 149-157 (1992).
- Fuchs, R. A., Lasseter, H. C., Ramirez, D. R., Xie, X. Relapse to drug seeking following prolonged abstinence: the role of environmental stimuli. Drug Discov. Today Dis. Models. 5, 251-258 (2008).
- D'Cunha, T. M., Sedki, F., Macri, J., Casola, C., Shalev, U. The effects of chronic food restriction on cue-induced heroin seeking in abstinent male rats. Psychopharmacology. 225, 241-250 (2013).
- Caprioli, D., Celentano, M., Dubla, A., Lucantonio, F., Nencini, P., Badiani, A. Ambience and drug choice: cocaine- and heroin-taking as a function of environmental context in humans and rats. Biol. Psychiatry. 65, 893-899 (2009).
