Summary
En procedur som gör att en demonstration av robust förstärkning av läkemedel som söker i livsmedels begränsade råttor beskrivs. Efter heroin självadministrering utbildning, råttor gå igenom en abstinensperiod, i en drogfri miljö, då de är milt livsmedel begränsas. Drug seeking testas sedan i läkemedelsassocierade miljön.
Abstract
I humana narkomaner, kan exponering för narkotikarelaterade ledtrådar eller miljöer som tidigare i samband med narkotikamissbruk utlösa återfall under abstinens. Dessutom kan olika miljöutmaningar förvärra denna effekt, samt öka pågående drogintag.
Förfarandet beskriver vi här belyser effekterna av en gemensam miljöutmaning, mat begränsning, om drog begäret som uttrycks som en förstärkning av läkemedel som söker i avhållsamma råttor.
Råttor implanteras med kronisk intravenös iv katetrar, och sedan utbildade för att trycka på en hävstång för iv heroin under en period av 10-12 dagar. Efter den heroinsjälvadministrering fasen råttorna bort från operant kamrarna konditione och inrymt i djurvård anläggningen under en period av minst 14 dagar. Medan en grupp upprätthålles under obegränsad tillgång till mat (sated grupp) är en andra grupp (FDR grupp) som utsätts för en mileld mat begränsning regim som leder till deras kroppsvikt bibehålls på 90% av sin icke-begränsad kroppsvikt. På dag 14 av mat begränsning råttorna återförs till drogen-utbildningsmiljö, och en drog-söker testet körs under utdöendeförhållanden (dvs.. Hävarmspressar inte leder till heroin leverans).
Förfarandet presenteras här resulterar i en mycket robust ökning av heroin söker på testdag i maten begränsade råttor. Dessutom, jämfört med de akuta livsmedelsbrist manipulationer som vi har använt tidigare, är det nuvarande förfarandet ett mer kliniskt relevant modell för effekterna av kalorimängden på drogsökande. Dessutom kan det vara närmare det mänskliga tillståndet eftersom råttorna inte behöver gå igenom en utdöende-träningsfasen innan läkemedels söker test, som är en integrerad del av den populära återanställning förfarandet.
Introduction
En av de största svårigheterna vid behandling av narkotikamissbruk är den höga graden av återfall, även efter långa perioder av avhållsamhet 1,2. Studier på humana missbrukare har identifierat ett kritiskt bidrag som miljöutmaningar, till exempel exponering för läkemedelsassocierade diskreta ledtrådar eller miljöer 3 och stressande livshändelser 4, till återfall. En gemensam miljöutmaning som befanns ha en effekt på narkotikamissbruk och begäret är kronisk mat begränsning. Till exempel har det rapporterats att kronisk kalorirestriktion är associerad med ökad cigarettrökning 5. Dessutom är bantning svårighetsgrad (kalorimängden) positivt korrelerad med en ökad frekvens av missbruk hos unga kvinnor 6. Men de bakomliggande hjärnmekanismer inte helt klarlagda.
På grund av praktiska och etiska överväganden som rör människors forskning, djurmodeller have utvecklats för att identifiera relevanta neurala mekanismer. Vi har tidigare använt handläggningen av återinträdet 7,8 påvisa återupptas släckt drog söker hos råttor som utsätts för akut (24-48 timmar) livsmedelsbrist 9,10. Men det är en del av handläggningen av återinträdet en utdöende period som inte är ett vanligt inslag i narkotikamissbruk behandlingar 11 (men se Epstein et al. 12 för en omfattande diskussion om giltigheten av handläggningen av återinträdet). Dessutom, i det särskilda fallet med kost manipulationer hos människor, bara kronisk mat begränsning, men inte akut livsmedelsbrist, visade sig effektivt öka dopning 5,13.
Vi har därför föreslagit ett "avhållsamhet förfarande" 14 som möjliggör studier av effekterna av kronisk mat begränsning på drogsökande. Med användning av denna procedur har vi nyligen visat en kraftig ökning av heroin söker i avhållsamma råttor efter exponering för 14 dagar av mild mat begränsning 15.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Djur
Samtliga råttor behandlas i enlighet med riktlinjerna i den kanadensiska rådet om Animal Care och godkännande för alla experimentella förfaranden beviljades av Concordia University Animal forskningsetiska kommittén.
- Skaffa råttor på 275-300 g (hanar) eller 225-250 g (honor). Hus råttor i par tills kirurgi i vanliga plastburar som innehåller majskolv sängkläder och strimlat papper.
- Upprätthålla råttor på en ljus-mörker-cykel omvända (tända av vid 09:30).
- Se till mat och vatten är tillgängliga ad libitum, utom under abstinensperioden. Vi använder en vanlig råttfoder (20,9% protein, 67,2% kolhydrater och 11,8% fett).
2. Katetrar och kontakter
- Gör katetrar i bulk och användning som behövs under en lång tidsperiod efter autoklavsterilisering.
- Skär Silastic slang till 12 cm långa bitar.
- Använd en tandpetare, för att placera en litendroppe av kisel runt katetern, 3 cm från spetsen.
- Låt kisel torka under 24 h och därefter autoklaveras och lagra katetrar.
- Böj långt rör av "5-up" kanyl, som kommer att fungera som en kontakt, i rät vinkel mot plast piedestal, sedan autoklav och lagra.
- Montera aseptiskt, katetrarna på dagen för operationen, genom att trycka på "lång" sidan av Silastic röret över det böjda metallröret av den "5-up"-kanyl, ungefär halvvägs till plast piedestal.
- Anslut den "5-up"-röret via Tygonrör och en trubbiga 22 G nål till en 1 ml spruta fylld med steril koksaltlösning.
- Spola saltlösning genom katetern för att säkerställa obehindrat flöde.
3. Intravenös Kateterisering Kirurgi
- Låt råttorna en vecka av acklimatisering i djurvård anläggningen (ACF) före operation. Inte utföra operationen på råttor med kroppsvikt lägreän 300-325 g (män) eller 250-275 g (honor).
- Före operation väga och söva råttorna med ketamin / xylazin-blandning (90/13 mg / kg, ip).
- Raka, och sedan rengöra huvudet och det område på höger axel (nära basen av nacken) med alkohol och kirurgisk skrubba.
- Injicera penicillin (450,000 lU / råtta, se) för att skydda mot infektion, och 2 ml saltlösning (se) för hydratisering. Applicera riva gel på råtta ögon för att förhindra torrhet inducerad av anestesi.
- Placera råttan på dess buk och gör ett snitt, med användning av en skalpell, på toppen av huvudet, mellan ögonen, och kaudalt mot öronen hos råtta.
- Placera råttan på rygg med underarmarna tejpade till ytan. Lyft huden i snittet området, precis rostralt om nyckelbenet, med pincett och göra en 1 cm längsgående snitt med en liten sax.
- Användning av två raka pincett, separera fett och annan vävnad tills den externa jugular vein är utsatt.
- Skjut tips av raka pincett i venen för att lyfta och separera venen från omgivande vävnad. Rengör noga ven från alla vidhäftande vävnad och sedan in böjda pincett i venen för att hålla den lyfte och något sträckt.
- Gör en liten, v-formad, skär på den övre ytan av venen med hjälp av små fjäder sax.
- Håll den skurna öppna med en kärldilatator, och avancera till "korta", 3 cm spetsen av katetern in i venen mot hjärtat tills silikonfallet är vid snittet punkten.
- Bind katetern till venen med tre suturer: en så långt kaudala som möjligt, en precis rostralt till silikon droppe och den tredje en så långt rostralt som möjligt.
- Passera saltlösning genom katetern efter varje sutur för att se till att det förblir intakt och att suturerna inte sitter för hårt.
- Ta bort tejpen runt armarna och placera råttventrala sidan nedåt.
- Sätt i en hemostat through den kaudala sidan av huvudet snitt och tryck för att separera huden från den underliggande vävnaden för att skapa en subkutan "ficka".
- Guide hemostat under huden mot öppningen på axlarna där katetern fördes in.
- Bryta igenom bindväv med hjälp av hemostat, och tätt klämma katetern vid den mest rostrala punkt, under basen av den "5-up."
- Loss "5-up" och tråd den långa änden av katetern under huden och ut snittet ligger på toppen av råttans huvud.
- Använd en sax för att klippa katetern nedanför där hemostat klämdes fast och sätt tillbaka den långa änden av "5-up."
- Dra katetern längs metallaxeln av "5-up" hela vägen till plast piedestal. Passera saltlösning genom att säkerställa fritt flöde.
- Placera råttan på rygg, och sutur endast snittet nära nyckelbenet. Huvudet snitt bör remai öppen.
- Placera råttan i en stereotaktisk apparat. Dra huden bort på snittet på toppen av huvudet med hjälp av bulldog klämmor och rent och torka ytan av skallen.
- Använd en manuell borr, borra 4-5 hål i skallen och sätt maskinskruvar i hålen för att fungera som byggnadsställning för huvud-cap.
- Placera "5-up"-kontakten mellan skruvarna och stoppa in den överflödiga längden av katetern i den subkutana "ficka" som tidigare gjorts med hemostat.
- Använd dentalcement att anbringa "5-up" till toppen av skallen. Ta råttan från stereotaxic apparaten efter att cementen är helt torkas.
- Ge råttan postoperativ vård, som består av ketoprofen (analgetikum, 5 mg / kg, sc) och 2 ml saltlösning (se). Administrera ketoprofen i ytterligare två dagar efter operationen för att bistå med smärtlindring.
- Med början 48 timmar efter kirurgi, spola råttor dagligen wed en blandning av heparin och gentamicin i steril koksaltlösning (7,5 IE + 12 mikrogram, från 0,2 till 0,3 ml) under återhämtningsperioden ~ 2 dagar och genom heroinsjälvadministrering fasen.
4. Behavioral Procedur
Tidsspannet för förfarandet för livsmedels begränsning-inducerad ökning av heroin söker presenteras i figur 1.
- Operant kammare.
- Hus råttor individuellt i operant kammare konditioneslutna i ljuddämpande trä fack utrustad med en fläkt.
- Varje kammare består av en rostfri metallgallergolv, en fram och bak plexiglas vägg och två metallpanelsidoväggar. Montera två infällbara spakar 9 cm över golvet i den högra sidoväggen, och hitta en cue-ljus ovanför varje spak. Som svar på drogen-parade (aktiv) spak aktiverar en infusionspump samtidigt svara på icke-drogrelaterade-parade (inaktiv) spak har inga programmerbara konsekvenser. </ Li>
- Leta upp en ljudmodul (2,9 kHz) ovanför den aktiva spaken, och placera ett rött hus-ljus högst upp i mitten på vänster sidovägg.
- Anslut läkemedelspump till katetern via en vätskevirvel och Tygonrör skyddad med en metallfjäder. Dessutom utrusta varje kammare med en livsmedelstratt och en vattenflaska som tillåter obegränsad tillgång till mat och vatten.
- Tillvänjning dag:
- Efter återhämtning från kirurgi flytta råttorna till operant träningskamrarna och möjliggöra en 24 hr tillvänjningsperiod.
- Anslut inte råttorna på metallfjädern och inte aktivera cue-light/tone komplexet.
- Se till att den aktiva spaken förblir indragen, men se till att den inaktiva spaken utvidgas till att hjälpa till med den diskriminering mellan de två spakarna under träning.
- Heroinsjälvadministration:
- Anslut den 5 upp kontakten till Tygon slang och fäst metallfjäder.
- Tillåt råttorna till själv administer heroin (0,1 mg / kg / infusion) under 10 dagar under tre 3 hr sessioner separerade med 3 timmars intervall.
- Börja varje session efter uppkomsten av den mörka fasen (ca 09:30 i vårt laboratorium) med en utvidgning av de aktiva och inaktiva spakar, samt belysning av huset-ljus och aktivering av cue-light/tone komplexa för 30 sek.
- Svaren på den aktiva spaken resultatet i aktivering av läkemedelspump (5 sek, 0.13 ml / infusion) och initiering av en 20 sek timeout under vilken huset-ljuset är avstängd och cue ljus / ton komplex ovanför den aktiva spaken är aktiverad (FR-1, 20 sek timeout). Under timeout-perioden, är aktiva spaken svar registreras men inte förstärkt. Inaktiva spaken svar registreras men har inga programmerbara konsekvenser.
- Efter varje 3 tim session, är den aktiva spaken indragen medan den inaktiva spaken förblir förlängd fram till 1 timme före det första mötet i den följande dagen.
- Avhållsamhet och begränsning mat:
- Efter självadministrering utbildning, ta bort råttorna från operant kamrarna konditione och individuellt hus dem i ACF, och ger obegränsad tillgång till mat och vatten för en drog-wash-out dag.
- Dela upp råttorna i två grupper: mat begränsad (FDR) eller mätta, matchas enligt kroppsvikt, antalet infusioner och aktiva spaksvar över de senaste 5 dagars utbildning.
- Efter drog-wash-out dag, ta bort FDR råttornas mat, och mata dem ca 15 g av råttfoder vid 01:30. Justera mängden mat över 14 dagar av avhållsamhet för att upprätthålla FDR råttornas kroppsvikt (BW) till cirka 90% av sin egen baslinje BW.
- Drog-söker test: På morgonen den avhållsamhet dag 14, tillbaka råttorna till operant kamrarna konditione och bifoga dem till metallfjädern. Använd en 1 timme eller 3 timmar session under vilken aktiva och inaktiva spaken svar har samma konsekvenser ensi självadministrering utbildning, exklusive tillgången på läkemedlet (dvs. under utdöendeförhållanden).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Kroppsvikt över tid: Typiska resultat visar att kroppsvikten förblir stabil under hela heroin egen administration utbildning. Under abstinens, råttor med obegränsad tillgång till chow öka sin kroppsvikt, medan de som mat begränsas minska sin kroppsvikt till ca 90% av sina egna ursprungliga kroppsvikt eller 75-80% av de mätta råttornas kroppsvikt (figur 2) .
Infusioner, aktiva och inaktiva spaken svar över utbildningen: infusioner och aktiva spaken svara ökning under träningsdagar, medan inaktiva spaken svarar inte (Figur 3). Normalt aktiva spaken svara ökningar under hela utbildningen och stabiliseras på en högre svara. Inaktiv spak svarar fortfarande minimal under hela utbildningen, vilket innebär att råttorna ordentligt har diskriminerat mellan de båda spakarna. Slutligen kommer antalet infusioner som tas öka under hela utbildningen ochförbli stabila med en hastighet lägre än för de aktiva spaken svar. Denna dissociation är möjligt på grund av det 20 sek timeout efter drog infusioner.
Aktiva och inaktiva spaken svar på testdag: Aktiv spak som svarar för livsmedels begränsade råttorna signifikant ökar jämfört med de mätta råttorna (vi observerade ofta en skillnad 250% mellan behandlingsgrupperna, se 15). Inaktiv spak svarar är minimal och jämförbar mellan maten begränsad och mätta råttor (Figur 4).
Figur 1. En tidslinje av den experimentella proceduren. Proceduren består av tre faser. Djuren först utbildade för att själv administrera ett läkemedel i närvaro av en cue / ton komplex (heroin egen administration fasen), flyttade sedan till ett annat sammanhang ochgenomgå en endagsdrog wash out-period. Blekt dag följs av en längre period av abstinens, där råttor ges en diet av mat begränsning eller obegränsad tillgång till mat. På den 14: e dagen av avhållsamhet, är råttor återvände till egen administration miljö för en drog-söker prov i närvaro av drog-parade ledtrådar i utdöendeförhållanden (drogsökande testfas). Klicka här för att visa en större bild .
Figur 2. Kroppsvikter i livsmedels begränsad (FDR) och mätta grupper, över experimentella dagar. Samtliga råttor genomgår 10 dagar heroin egen administration utbildning i operant träningskammare och en 1 dag drog washout i djurvård anläggningen. Råttor matchas enligt kropp viight, aktiva spaken svara och drog infusioner före separation i FDR eller mätta grupp. Klicka här för att visa en större bild .
Figur 3. Antalet infusioner, aktiva och inaktiva spaken svar som gjorts under heroin egen administration utbildning. Heroin (0,13 mg / kg / infusion) är själv administreras i tre 3 tim sessioner, under 10 dagar, enligt ett FR-1, 20 sek timeout schema för förstärkning. Klicka här för att visa en större bild .
Figur 4. Effekten av exponering för långvarig mat begränsning (FDR) på heroin söker i avhållsamma råttor. Datan representerar typiska aktiva och inaktiva spaken svara på testdag. Test dag består av en 1 timme (eller 3 tim) testsession i utdöende förhållanden, efter heroin egen administration utbildning och 14 dagar av avhållsamhet i FDR eller mätta förhållanden. Klicka här för att visa en större bild .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det förfarande som beskrivs här har starka ansikte giltighet eftersom 1) den möjliggör frivillig drogintag och kontroll över läkemedelsadministrering, 2) den använder ett administrationssätt som är vanligt i mänskliga missbrukare, 3) det reflekterar (relativt) långa perioder av drogexponering och avhållsamhet, och 4) den undviker utrotning utbildning innan drogen som söker testet som är en integrerad del av handläggningen av återinträdet men ses sällan i mänskliga missbrukare 14. Dessutom proceduren modellerna en långvarig mat restriktion skick som tros vara kritisk när man bedömer effekterna av kalorimängden på läkemedel som söker 5.
I det protokoll som vi beskriver här råttorna inrymt i operant konditionekamrarna genom läkemedelssjälvadministrering perioden (24 tim / dag). Det kan vara möjligt att effektivisera datainsamling med hjälp av en "squads" protokoll där råttorna överförs tillbaka till ACF enfter en daglig träningspass, vilket möjliggör flera grupper som ska tränas varje dag. Dock kan denna metod vara mer passande för kokain utbildning, eftersom heroin administreras företrädesvis i "hemmet" miljö 16. Vi har inte bedömt effektiviteten av förfarandet med alternativet squads. Ett annat sätt att öka genomströmningen av förfarandet är att förskjuta läkemedelsegenadministration utbildning för två grupper av råttor efter 10-12 dagar. Med hjälp av denna design, är råttor i den andra gruppen tränade för självadministrering, medan den första gruppen går igenom abstinensperioden i ACF. Läkemedels egen administration utbildning för den andra gruppen måste slutas minst en dag före den planerade testet för den första gruppen för att möjliggöra noggrann rengöring av kamrarna.
Vi har rapporterat tidigare 15 att längden på begränsningsperioden är kritisk, med 3-5 dagars mat begränsning låter att öka heroin söker på end av abstinensperioden. Vi har inte observerat en ökning av effektiviteten av mat begränsning manipulation med ökade exponeringsperioder (~ 28 dagar, opublicerade data).
Det är också värt att notera att förändringen i samband mellan självadministrering fasen och abstinensperioden verkar vara viktiga för förstärkning av drogsökande. Vi har samlat in data tyder på en mycket reducerad effekt för mat begränsning när råttorna hålls i drogen-utbildningsmiljö under abstinensperioden (opublicerad observation).
Sammanfattningsvis är maten begränsning-inducerad ökning av heroin söker en robust, lätt reproducerbara effekt. Den tillåter därför effektiva design av studier av neurala mekanismer som ligger bakom återfall efter abstinens, med hjälp av farmakologiska förbehandlingar, online-övervakning av neurokemiska eller nervaktivitet med hjälp av mikrodialys eller elektrofysiologiska metoder, och efter test histologiska analyser.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Godkännande för alla experimentella förfaranden beviljades av Concordia University Animal forskningsetiska kommittén, i enlighet med riktlinjerna för den kanadensiska rådet om Animal Care. Författarna förklarar att de inte har några konkurrerande ekonomiska intressen. FS och TD lika bidragit till utvecklingen av det förfarande som presenteras här och skrivandet av manuskriptet.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av naturvetenskap och teknik rådet Discovery Program (USA: 298.915), Fonds de Recherche du Quebec - Santé (CSBN), och Kanada forskning Stolar Program (US).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Name | Company | Catalogue Number | |
| Ketamine (Vetalar, 100 mg/ml) | Bioniche Animal Health | Obtained through local distributer | |
| Xylazine (Rompun, 100 mg/ml) | Bayer | Obtained through local distributer | |
| Heroin HCl | National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA | ||
| Anafen injection 1 mg/ml Vial/20 ml | CDMV, Canada | 12868 | |
| Equipment | |||
| Name | Company | Catalogue Number | |
| Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037) | Fisher Scientific | 1118915A | |
| GE marine silicon | GE | SE-1134 | |
| Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060) | VWR | 63018-044 | |
| Cannulae (22 G, 5-up) | Plastics One | C313G-5up | |
| Liquid swivels, plastic, 22 G | Lomir Biomedical, Inc. | RSP1 | |
| Fixed speed infusion pump (3.3 rpm) | Coulbourn Instruments | A73-01-3.3 | |
| Rat test cage | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC | |
| Stainless steal grid floor | Coulbourn Instruments | H10-11R-TC-SF | |
| House light-rat | Coulbourn Instruments | H11-01R | |
| Single high-bright cue-rat | Coulbourn Instruments | H11-03R | |
| Tone module 2.9 kHz | Coulbourn Instruments | H12-02R-2.9 | |
| Retractable lever-rat | Coulbourn Instruments | H23-17RA | |
| Balance arm | Coulbourn Instruments | H29-01 | |
| Sound attenuation boxes | Concordia University | Home made | |
| System controller 2 | Coulbourn Instruments | SYS CTRL 2 | |
| System power base | Coulbourn Instruments | H01-01 | |
| Habitest Universal Linc | Coulbourn Instruments | H02-08 | |
| Environment connection board & Linc cable | Coulbourn Instruments | H03-04 | |
| Graphic State Notation 3 | Coulbourn Instruments | GS3 |
References
- Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. , Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).
- O'Brien, C. P., McLellan, A. T. Myths about the treatment of addiction. Lancet. 347, 237-240 (1996).
- Childress, A. R., Ehrman, R., Rohsenow, D. J., Robbins, S. J., O'Brien, C. P. Classically conditioned factors in drug dependence. Substance abuse: A comprehensive textbook. Lowinson, J. W., Luiz, P., Millman, R. B., Langard, G. , Williams and Wilkins. Baltimore. 56-69 (1992).
- Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
- Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers. Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).
- Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women. J. Subst. Abuse. 4, 341-353 (1992).
- de Wit, H., Stewart, J. Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat. Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).
- Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings. Psychopharmacology. 168, 3-20 (2003).
- Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).
- Tobin, S., Newman, A. H., Quinn, T., Shalev, U. A role for dopamine D1-like receptors in acute food deprivation-induced reinstatement of heroin seeking in rats. Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 217-226 (2009).
- Katz, J. L., Higgins, S. T. The validity of the reinstatement model of craving and relapse to drug use. Psychopharmacology. 168, 21-30 (2003).
- Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189, 1-16 (2006).
- Zacny, J. P., de Wit, H. The effects of a restricted feeding regimen on cigarette smoking in humans. Addict. Behav. 17, 149-157 (1992).
- Fuchs, R. A., Lasseter, H. C., Ramirez, D. R., Xie, X. Relapse to drug seeking following prolonged abstinence: the role of environmental stimuli. Drug Discov. Today Dis. Models. 5, 251-258 (2008).
- D'Cunha, T. M., Sedki, F., Macri, J., Casola, C., Shalev, U. The effects of chronic food restriction on cue-induced heroin seeking in abstinent male rats. Psychopharmacology. 225, 241-250 (2013).
- Caprioli, D., Celentano, M., Dubla, A., Lucantonio, F., Nencini, P., Badiani, A. Ambience and drug choice: cocaine- and heroin-taking as a function of environmental context in humans and rats. Biol. Psychiatry. 65, 893-899 (2009).
