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Medicine

एक संशोधित गिरफ्तार तकनीक का प्रयोग murine सरवाइकल हृदय प्रत्यारोपण मॉडल

Published: October 12, 2014 doi: 10.3791/50753
* These authors contributed equally

Summary

murine ग्रीवा हृदय प्रत्यारोपण मॉडल प्रतिरक्षाविज्ञानी के साथ ही ischemia reperfusion की चोट के अध्ययन के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है. हम एक गैर सिवनी कफ तकनीक का उपयोग प्रक्रिया संशोधित और इस दृष्टिकोण के साथ 1,000 से अधिक सफल प्रत्यारोपण किया.

इस के साथ साथ, हम वीडियो के पूरक के लिए इस तकनीक का अतिरिक्त विवरण प्रदान करते हैं.

Abstract

माउस मॉडल मोनोक्लोनल एंटीबॉडी की एक विस्तृत विविधता के बाद से अनुसंधान के क्षेत्र में विशेष रुचि के हैं और व्यावसायिक रूप से जन्मजात परिभाषित और पीटा उपभेदों vivo अध्ययन में यंत्रवत प्रदर्शन करने के लिए उपलब्ध हैं. एक सीवन तकनीक का उपयोग कर हृदय प्रत्यारोपण मॉडल पहले सफलतापूर्वक चूहों में विकसित किया गया है, जबकि एक समान रूप से बड़े पैमाने पर खेतों में murine बराबर में अनुवाद microsurgical प्रक्रिया की तकनीकी जटिलता की वजह से कभी नहीं हासिल किया गया था. इसके विपरीत, इसके अलावा, चूहों में शुरू में विकसित गैर सिवनी कफ तकनीक को सफलतापूर्वक चूहों 1-3 में उपयोग के लिए अनुकूलित किया गया. Revascularization के लिए इस तकनीक का एक पॉलीथीन कफ से अधिक प्राप्तकर्ता पोत everting दो प्रमुख चरणों मैं) शामिल है; द्वितीय) पूर्व everted प्राप्तकर्ता पोत से अधिक दाता पोत खींच और एक परिधीय टाई के साथ जगह में पकड़े हुए. इस endothelial परत, कम परिचालन समय और बहुत ही उच्च प्रत्यक्षता दरों 4 के एक निरंतरता सुनिश्चित करता है.

टी "> संवहनी सम्मिलन के लिए इस तकनीक का प्रयोग हम आम मन्या धमनी प्रवाह धमनी के लिए. 95% की समग्र सफलता दर के साथ 1,000 से अधिक ग्रीवा हृदय प्रत्यारोपण प्रदर्शन किया और समीपस्थ महाधमनी चाप प्रतिरोपित दिल की एक प्रतिगामी छिड़काव में जिसके परिणामस्वरूप anastomosed गया. शिरापरक जल निकासी के लिए भ्रष्टाचार के फेफड़े के धमनी प्राप्तकर्ता 5 के बाहरी गले नस साथ anastomosed था.

इस के साथ साथ, हम वीडियो के पूरक के लिए इस तकनीक का अतिरिक्त विवरण प्रदान करते हैं.

Introduction

कार्डिएक प्रत्यारोपण अलग अंत चरण दिल की बीमारियों से पीड़ित रोगियों के लिए पसंद की चिकित्सा का प्रतिनिधित्व करता है. शल्य चिकित्सा तकनीक, संक्रमण के अधिक प्रभावी प्रोफिलैक्सिस, और उपन्यास immunosuppressive regimens के क्षेत्र में अग्रिम अंग प्रत्यारोपण की 6 में उल्लेखनीय सुधार परिणाम हुई. हालांकि, लंबी अवधि के भ्रष्टाचार अस्तित्व पिछले साल 7 से अधिक कड़ाई से सुधार नहीं हुआ है. प्रत्यारोपण धमनीकाठिन्य के द्वारा होती जीर्ण अस्वीकृति, लंबी अवधि के भ्रष्टाचार अस्तित्व 8-11 के लिए एक बड़ी बाधा बना हुआ है.

चूहों में heterotopic हृदय प्रत्यारोपण की मॉडल एक तीव्र दौरान प्रतिरक्षात्मक तंत्र के विश्लेषण के लिए महत्वपूर्ण और वैध उपकरण के रूप में अच्छी तरह से जीर्ण अस्वीकृति 12-15 प्रदान करता है.

तिथि करने के लिए सबसे लगातार प्रत्यारोपण मॉडल सिवनी तकनीक का उपयोग कर पेट माउस हृदय प्रत्यारोपण अब भी है. दाता दिल के आरोही महाधमनी एक को anastomosed हैbdominal महाधमनी और फुफ्फुसीय धमनी प्राप्तकर्ता के अवर रग कावा को anastomosed है. सिवनी मॉडल के microsurgical कठिनाई की ज्यादातर 16,17 sutured कर रहे हैं, जो जहाजों के छोटे आकार पर आधारित है.

सिवनी मॉडल के विपरीत दिल बाहरी गले नस फेफड़े के धमनी और आम मन्या धमनी दाता की महाधमनी को anastomosed है जहां प्राप्तकर्ता की गर्दन क्षेत्र में रखा गया है.

कफ तकनीक का उपयोग ग्रीवा हृदय प्रत्यारोपण मॉडल के विकास का तर्क इस मॉडल की व्यापक आवेदन की अनुमति देगा कि बुनियादी microsurgical कौशल के साथ उच्च सफलता दर को प्राप्त करने की अनुमति देता है जो एक पशु मॉडल, के लिए गया था. इस विधि का प्रमुख लाभ सिवनी मॉडल 18 की तुलना में जब हेमोरेज और घनास्त्रता की तरह जटिलताओं से संबंधित काफी कम होने वाली सम्मिलन हैं.

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Protocol

पशु एक बाधा रोगाणु मुक्त सुविधा में रखे जाते हैं. सभी जानवरों को राष्ट्रीय चिकित्सा अनुसंधान के लिए राष्ट्रीय संस्था "और" राष्ट्रीय विज्ञान अकादमी द्वारा तैयार प्रयोगशाला पशु "की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड द्वारा तैयार और प्रकाशित" प्रयोगशाला पशु की देखभाल के प्रधानाध्यापकों "के अनुपालन में मानव देखभाल प्राप्त स्वास्थ्य संस्थान (एनआईएच प्रकाशन नहीं. 86-23, 1985 संशोधित). सभी प्रयोगों शिक्षा, विज्ञान और संस्कृति के ऑस्ट्रिया के मंत्रालय द्वारा अनुमोदित कर रहे हैं.

1 प्राप्तकर्ता तैयारी

  1. Xylazine (5 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन) और ketamine (100 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन) के एक आईएम इंजेक्शन के साथ प्राप्तकर्ता पशु anesthetize.
  2. पशु के पार्श्व ग्रीवा क्षेत्र के सभी बाल निकालें और सहकारी क्षेत्र chlorhexdine का उपयोग तीन बार हाथ धोने.
  3. सहकारी क्षेत्र पर एक लापरवाह स्थिति में माउस रखें.
  4. अगला कंठ इंक से एक त्वचा चीरासही कम जबड़ा को ision.
  5. इसके बाद दो टूक सही बाहरी गले नस (EJV) जुटाने और संयुक्ताक्षर के बीच शाखाओं विभाजित करते हैं.
  6. तो कफ शरीर पर समीपस्थ स्टंप एवर्ट के लिए पर्याप्त लंबाई छोड़ने के लिए सुनिश्चित बनाने संयुक्ताक्षर के बीच EJV विभाजित करते हैं.
  7. अगला अवअधोहनुज ग्रंथि का सही पालि हटा दें.
  8. शिरापरक सम्मिलन के लिए पॉलीथीन कफ के माध्यम से EJV के समीपस्थ अंत के पास और एक माइक्रो क्लैंप के साथ कफ की संभाल पर इसे ठीक.
  9. , पोत के अंत में संयुक्ताक्षर निकालें कफ से अधिक लुमेन एवर्ट और एक 8-0 रेशम पाश (चित्रा 1 ए) के साथ यह तय कर लो.
  10. इसके बाद आम मन्या धमनी में पहुँच प्राप्त करने के लिए द्विध्रुवी दाग़ना साथ सही sternocleidomastoid पेशी आड़ा काट.
  11. अगला आम मन्या धमनी जुटाने और संयुक्ताक्षर के बीच पोत काटा.
  12. अगला आम मन्या धमनी जुटाने और संयुक्ताक्षर के बीच पोत काटा.
  13. जिले दर्राताल कफ के माध्यम से पोत के अंत और धमनी क्लैंप के साथ यह तय कर लो.
  14. पोत के अंत में संयुक्ताक्षर निकालें और नाड़ी dilatators का उपयोग लुमेन फैलाना. अगला, EJV को सादृश्य में, कफ से अधिक धमनी एवर्ट और एक 8-0 रेशम पाश के साथ यह तय कर लो.

2 हार्ट खरीद

  1. Xylazine (5 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन) और ketamine (100 मिलीग्राम / किग्रा शरीर के वजन) के एक आईएम इंजेक्शन के साथ दाता माउस anesthetize. फिर जानवर के पेट क्षेत्र के सभी बाल हटा दें. Chlorhexdine का उपयोग सहकारी क्षेत्र तीन बार हाथ धोने. सहकारी क्षेत्र पर एक लापरवाह स्थिति में माउस के रूप में पहले से वर्णित अगले जगह.
  2. एक midline पेट चीरा के बाद, अवर रग Cava (IVC) का पर्दाफाश करने के क्रम में बाईं ओर क्यू सुझावों के साथ आंत वापस लेना.
  3. Heparinization के लिए आईवीसी में 4 heparin- sodium- समाधान: एक 1 के 400 μl इंजेक्षन.
  4. एसीसी हासिल करने के लिए cranially से अधिक पूर्वकाल छाती दीवार एक thoracotomy प्रदर्शन और गुनादिल को ईएसएस.
  5. अगला, थाइमस हटाने और बाएँ और दाएँ बेहतर रग कावा में चीरों में उतार रही है.
  6. बाद में, प्रगंडशीर्षी शाखा के स्तर पर एक 27 जी सिरिंज के साथ महाधमनी चाप की केन्युलेशन से 4 डिग्री सेल्सियस HTK समाधान के साथ एक प्रतिगामी फैशन में दिल छिड़कना.
  7. 8-0 रेशम के साथ अवर और बेहतर रग कावा ligate और संयुक्ताक्षर के लिए distally उन्हें विभाजित.
  8. अगला पिछला केन्युलेशन के स्तर पर महाधमनी चाप विभाजित और फेफड़े के ट्रंक मुक्त काटना और जितना संभव हो दूर distally विभाजित.
  9. निम्नलिखित है कि, एक थोक बंधाव साथ फेफड़े के नसों टाई और संयुक्ताक्षर के लिए distally उन्हें विभाजित.
  10. अंत में, दाता साइट से दिल को हटाने और 4 डिग्री सेल्सियस HTK समाधान (चित्रा 1 बी) में स्टोर.

3 आरोपण

  1. एक उल्टा स्थिति में प्राप्तकर्ता गर्दन क्षेत्र में दिल भ्रष्टाचार प्लेस (चित्रा 1C
  2. अगला प्राप्तकर्ता की नस कफ निर्माण से अधिक दिल के फेफड़े ट्रंक खींचने के लिए और एक रेशम पाश (चित्रा -1) के साथ यह तय कर लो.
  3. भ्रष्टाचार के महाधमनी और एक ही फैशन (चित्रा 1E) में प्राप्तकर्ता जानवर की everted धमनी के बीच सम्मिलन प्रदर्शन करना.
  4. बाद में, धमनी दबाना द्वारा पीछा पहले शिरापरक दबाना, हटा दें. दिल reperfused है और 1-2 मिनट के भीतर पिटाई शुरू होता है. Reperfusion के दौरान गर्म (35 डिग्री सेल्सियस) खारा के साथ दिल को गीला.
  5. अंत में 6-0 सतत टांके (चित्रा 1E) के साथ सर्जिकल घाव को बंद करें.

4 पश्चात की देखभाल, समापन बिंदु

  1. द्रव प्रतिस्थापन के लिए postoperatively 0.3 मिलीलीटर सामान्य खारा आईपी दे.
  2. संज्ञाहरण से awaking तक एक गर्मी दीपक के नीचे पशु रखें.
  3. जाग जाने के बाद, वे भोजन और पानी यथेच्छ प्राप्त जहां आवास की सुविधा के लिए पशु वापसी.
  4. एमआई के लिएपहले 7 पश्चात दिनों के दौरान nimize दर्द Carprofen (4mg / किलो हर 12 घंटा subcutaneously (सुप्रीम कोर्ट) प्रशासन. इसके अलावा, 5 दिनों के लिए सही कार्रवाई करने के बाद) Buprenorphin हर 12 घंटे (0.1 मिलीग्राम / किग्रा दे.
  5. उचित पोषक तत्वों की मात्रा के लिए मूल्यांकन करने के लिए प्रत्येक प्राप्तकर्ता पशु साप्ताहिक का वजन (ग्राम) प्राप्त करते हैं. 10-15% से अधिक वजन घटाने के सबूत सर्जरी की तारीख, उदासीनता, गंभीर या एक बहुत तुला पीठ पर वजन की तुलना में वहाँ है, नैदानिक ​​अंत बिंदु तक पहुँचने से पहले टर्मिनल isoflurane साँस लेना उपयोग कर पशु बलि. दिल को अस्वीकार कर दिया गया है के बाद भी पशु बलि.

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Representative Results

चित्रा 2 पूरी तरह MHC बेमेल C57BL 6 / प्राप्तकर्ताओं में प्रत्यारोपण के बाद BALB / ग दाताओं से हृदय allografts के प्रतिनिधि अस्तित्व डेटा से पता चलता है. दिल प्रत्यारोपण के बाद सुबह 7 ± 1 पर खारिज कर रहे हैं. प्रतिरोपित allograft की उंगली छूने का काम allograft अस्वीकृति के समय निर्भर पाठ्यक्रम का पता लगाने के लिए एक संवेदनशील तरीका है. हमारे श्रृंखला में प्रदर्शन सभी syngeneic हृदय प्रत्यारोपण अनिश्चित काल बच (> 150 दिन).

चित्रा 1
चित्रा 1: Intraoperative तस्वीरें प्राप्तकर्ता तैयारी के दौरान (क) सहकारी क्षेत्र की खरीद के बाद (ख) हार्ट भ्रष्टाचार (ग) एक उल्टा स्थिति में प्राप्तकर्ता गर्दन क्षेत्र में रखा दिल भ्रष्टाचार (डी ई) से पहले दाता साइट.... दाखिल करने से. (च) बीमार योजनाबद्ध आरेखप्राप्तकर्ता पोत, दाता पोत और कफ ustrating

चित्रा 2
चित्रा 2: कार्डिएक allograft अस्तित्व. पूरी तरह से MHC- बेमेल BL6 प्राप्तकर्ताओं में कलम बांधने का काम के बाद BALB / ग चूहों से हृदय allograft के अस्तित्व को प्रदर्शित कापलान-Meier साजिश (n = 7; अस्तित्व समय मतलब = 7 दिन) और साथ ही एक syngeneic नियंत्रण समूह (एन = 7; भ्रष्टाचार अस्तित्व > 150 दिन). अस्वीकृति के दिन दिल की धड़कन की समाप्ति के दिन के रूप में परिभाषित किया गया था.

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Discussion

Vascularized allografts की अस्वीकृति केवल अपर्याप्त विट्रो मॉडल में उपयोग कर मूल्यांकन किया जा सकता है, जो विभिन्न चरणों के ढेर सारे जरूरत पर जोर देता. प्राप्तकर्ताओं को संवेदनशील, प्रतिजन प्रसंस्करण माध्यमिक lymphoid अंगों में बल्कि प्रतिरक्षा सक्षम कोशिकाओं के भेदभाव और प्रसार जैसे घटनाएं विवो में बेहतर विशेषता है. पशु मॉडलों जिससे शोधों 16 के लिए आदर्श उपकरण हैं. माउस मॉडल अभी भी ट्रांसजेनिक और जीन पीटा चूहों की एक विस्तृत श्रृंखला के बाद से बुनियादी प्रत्यारोपण और immunologic अनुसंधान में सोने के मानक का प्रतिनिधित्व उपलब्ध हैं, और immunologic और नैदानिक ​​उपकरणों की एक बड़ी संख्या में चूहों 18 के लिए विशेष रूप से विकसित किया गया है. murine ग्रीवा हृदय प्रत्यारोपण मॉडल सवालों के पते और ischemia reperfusion की चोट, प्रतिरक्षादमन, तीव्र और जीर्ण अस्वीकृति और सहिष्णुता प्रेरण 1-3, 17, 22 से संबंधित यंत्रवत अध्ययनों प्रदर्शन करने के लिए एक अनूठा उपकरण प्रदान करता है.

एक सीवन तकनीक का उपयोग माउस पेट हृदय प्रत्यारोपण मॉडल पहले Corry एट अल द्वारा वर्णित किया गया था. 1973 19 में. छोटे जहाजों के suture- सम्मिलन के साथ जुड़े तकनीकी चुनौतियों, हालांकि, इसकी व्यापक उपयोग सीमित.

1991 में, मातसूरा एट अल. चूहों 16 में एक गैर सिवनी कफ तकनीक का उपयोग ग्रीवा हृदय प्रत्यारोपण मॉडल पेश किया. Zimmerman एट अल., और Kamada और Calne "कफ तकनीक" से शुरूआत के बाद से अंग प्रत्यारोपण 20-22 के कई अलग murine मॉडल में microvascular anastomoses के लिए इस्तेमाल किया गया है.

हम> 95% सफलता दर के साथ, revascularization के लिए एक संशोधित गैर सिवनी कफ तकनीक का विकास किया है और पिछले कई वर्षों में 1,000 से अधिक सफल प्रत्यारोपण पूरा कर लिया है. कई अलग तनाव संयोजन और उपचार परहेज किया जाता था. तकनीक लागू वह वर्णितफिर से, कुल संचालन समय लगभग 45 मिनट तक कम किया जा सकता है. महत्वपूर्ण बात है कुल ischemia समय सिवनी तकनीक 23 का उपयोग करते समय विपरीत में आमतौर पर 15 से अधिक मिनट है, जो कम से कम 7 मिनट, की एक आरोपण समय के साथ 20 मिनट पर रखा जा सकता है. माउस पेट हृदय प्रत्यारोपण मॉडल के साथ तुलना में, गर्भाशय ग्रीवा के हृदय प्रत्यारोपण ऐसे नाबालिग पश्चात तनाव और उच्च सर्जिकल सफलता दर के रूप में कई फायदे हैं,. दिल भ्रष्टाचार की पिटाई आसानी से सतही स्थिति के कारण नजर रखी जा सकती है. कफ तकनीक 18 का उपयोग करते समय सिवनी सम्मिलन, सहित खून बह रहा है और घनास्त्रता के साथ जुड़े जटिलताओं काफी कम आम हैं.

हमारे समूह एक बेहतर सफलता दर के लिए और ऑपरेशन के समय की एक नाटकीय कमी करने के लिए नेतृत्व द्वारा प्रस्तावित इस तकनीक के निम्न संशोधन:

  • 3 मिलीग्राम HTK समाधान के साथ महाधमनी चाप के माध्यम से एक प्रतिगामी छिड़काव का प्रयोग करें.
  • HTK प का उपयोग नम दिल रखेंपूरे कटाई प्रक्रिया के दौरान ution.
  • छोड़ा बेहतर रग कावा काटना और चयनात्मक ligate न करें.
  • कफ को ठीक करने के लिए भी महत्वपूर्ण बात, वाहिकाओं रोक देना लेकिन सूक्ष्म clamps का उपयोग करें.
  • यह बहुत आसान कफ से अधिक पोत एवर्ट को बनाता है जो आम मन्या धमनी तान देना करने के लिए अति सूक्ष्म सुझावों के साथ संवहनी dilatators का प्रयोग करें.
  • मातसूरा एट अल द्वारा वर्णित मूल रूप टांके पकड़े जगह नहीं है.
  • धमनी सम्मिलन के लिए 0.75 मिमी की एक अंदर व्यास और 0.94 मिमी की एक व्यास के बाहर के साथ शिरापरक सम्मिलन के लिए, 0.5 मिमी की एक अंदर व्यास और 0.63 मिमी की एक व्यास के बाहर के साथ एक कफ एक कफ का उपयोग करें.
  • एक नाड़ी दबाना का उपयोग कर, पोत को अपनी उचित निर्धारण करने के लिए कार्य करता है जो एक 1 मिमी संभाल सहित 2 मिमी की लंबाई के साथ कफ का प्रयोग करें.

इस विधि के लिए हो सकता है कि एक सीमा है कि यह उचित कफ को प्राप्त करना कठिन हो सकता है. इसलिए हम व्यावसायिक रूप से उपलब्ध P इस्तेमाल कियाचिकित्सा Rivertech (चट्टानूगा, TN) से olyethylene कफ.

निम्नानुसार प्रक्रिया के दौरान मुख्य मुसीबत शूटिंग कर रहे थे.

रक्त प्रवाह विकार: रंग जब तक लोगों को दाता दिल रंग में सफेद हो जाता है. अत्यधिक दबाव हर्जाना के रूप में बहुत अधिक दबाव भ्रष्टाचार के बिना फ्लश.

  • कठिनाई कफ से अधिक पोत एवर्ट को: पोत है पता लगाना है कि (क) पर्याप्त लंबाई, (ख) संलग्न वसा और संयोजी ऊतक और (ग) पोत संवहनी dilatators का उपयोग कर, अच्छी तरह से distended था कि यह सुनिश्चित कर लें की नि: शुल्क की.
  • शाखामिलन संबंधी साइट पर खून बह रहा: लगभग 5 मिनट के लिए प्रभावित साइट पर दबाव लागू करने के लिए क्यू सुझावों का उपयोग करें.
  • शिरापरक रक्त प्रवाह में रुकावट: मुख्य रूप से कफ नियुक्ति की प्रक्रिया के दौरान गले नस की मरोड़ की वजह से. शिरापरक साइट पर कफ संभाल निकालें.
  • भ्रष्टाचार घुमा और गला घोंटने: भ्रष्टाचार से पहले त्वचा को बंद करने के लिए दाता पक्ष में ठीक से रखा गया है कि सुनिश्चित करें.

vivo में किसी भी यंत्रवत के लिए सोने के मानक बनी हुई है. हमारे संशोधित दृष्टिकोण इस मॉडल की व्यापक आवेदन की अनुमति देगा कि बुनियादी microsurgical कौशल के साथ उच्च सफलता दर को प्राप्त करने की अनुमति देता है. इस वीडियो में मदद मिलेगी और उनके प्रयोगशालाओं में मॉडल स्थापित करने के लिए अन्य शोध मार्गदर्शन करना है.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Yasargil Clip Mini Permanent 7 mm Aesculap FE720K
Micro vessel clip S & T B1 00396 V
Microscissor FST 14075-11
Vesseldilatator S & T D-5a.2 00125
Microforceps FST Dumont 11271- 30
Clipapplicator S & T CAF-4 00072
Microvessel clip S & T B1 00396 V

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References

  1. Brandacher, G., et al. Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity. Transplantation. 81, 583-589 (2006).
  2. Schneeberger, S., et al. The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation. Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).
  3. Sucher, R., et al. IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival. JImmunol. 188, 37-46 (2012).
  4. Yamashita, K., et al. Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs. FASEB J. 20, 776-778 (2006).
  5. Kienzl, K., et al. Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection. Transplantation. 88, 553-560 (2009).
  6. Aurora, P., et al. Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report--2007. J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).
  7. Häyry, P. Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development. Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).
  8. Hosenpud, J. D. Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update. Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).
  9. Libby, P., Pober, J. S. Chronic rejection. Immunity. 14, 387-397 (2001).
  10. Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine. Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).
  11. Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction. Transpl Int. 13, 385-401 (2000).
  12. Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
  13. Huang, X., Chen, D., Chen, L. [A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research]. Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).
  14. Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).
  15. Wang, C. Y., et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105, 1609-1614 (2002).
  16. Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51, 896-898 (1991).
  17. Tomita, Y., et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).
  18. Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).
  19. Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
  20. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  21. Zimmermann, F. A., et al. Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts. Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).
  22. Maglione, M., et al. Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model. Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).
  23. Heron, I. A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats. Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).

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चिकित्सा अंक 92 प्रत्यारोपण Microsurgery हार्ट इम्यूनोलॉजी अस्वीकृति माउस
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Oberhuber, R., Cardini, B., Kofler,More

Oberhuber, R., Cardini, B., Kofler, M., Ritschl, P., Oellinger, R., Aigner, F., Sucher, R., Schneeberger, S., Pratschke, J., Brandacher, G., Maglione, M. Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique. J. Vis. Exp. (92), e50753, doi:10.3791/50753 (2014).

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