Summary
المؤشرات الحيوية هي المؤشرات البيولوجية تقاس مباشرة من المرض أو الصحة. في عدد السكان والعلوم الاجتماعية، والحاجة المؤشرات الحيوية ليكون من السهل الحصول عليها، والنقل، وتحليل. المجففة بقعة الدم (DBS) جمع تجتمع هذه الحاجة، يمكن جمعها في الميدان مع معدلات الاستجابة العالية وتحليلها لمجموعة متنوعة من المؤشرات الحيوية.
Abstract
المؤشرات الحيوية هي المؤشرات البيولوجية تقاس مباشرة من المرض، والصحة، والتعرض، أو المعلومات البيولوجية الأخرى. في عدد السكان والعلوم الاجتماعية، والحاجة المؤشرات الحيوية ليكون من السهل الحصول عليها، والنقل، وتحليل. اماكن الدم المجفف تلبية هذه الحاجة، ويمكن جمعها في الميدان مع معدلات الاستجابة العالية. هذه العناصر لها أهمية خاصة في دراسة طولية التصاميم بما في ذلك التدخلات حيث الاستنزاف أمر بالغ الأهمية لتجنب، ومعدلات استجابة عالية تحسين تفسير النتائج. المجففة بقعة الدم جمع عينة بسيطة وسريعة وغير مؤلمة نسبيا، أقل الغازية ثم بزل الوريد، وتتطلب الحد الأدنى من متطلبات التخزين الحقل (أي عينات لا تحتاج إلى أن تكون المجمدة فورا ويمكن تخزينها لفترة طويلة من الوقت في بيئة مستقرة الفريزر قبل مقايسة). يمكن تحليل العينات لمجموعة متنوعة من analytes مختلفة، بما في ذلك الكوليسترول، بروتين سي التفاعلي، الهيموغلوبين الغليكوزيلاتي، والعديد من السيتوكينات، وسالتحاليل ذر، فضلا عن توفير المواد الوراثية. ويصور مجموعة DBS كما استخدمت في العديد من الدراسات التي أجريت مؤخرا.
Introduction
يمكن المؤشرات الحيوية توفر معلومات قيمة عن العمليات البيولوجية بدءا من الطبيعي أن الممرضة التي قد تساهم في الإصابة بأمراض يمكن تحديدها سريريا 1. في إطار دراسات بحثية، وبقع الدم المجفف (DBS) أصبحت على نحو متزايد المفضل لبزل الوريد كوسيلة لجمع المؤشرات الحيوية في الدم الكامل. مجموعة DBS هي بسيطة وغير مؤلمة نسبيا، أقل الغازية ثم بزل الوريد، ويتطلب الحد الأدنى من متطلبات التخزين (لا تحتاج أي عينات ليتم تجميدها على الفور ويمكن تخزينها لفترة طويلة من الزمن في بيئة مستقرة الفريزر قبل الفحص). ويمكن اختبار عينات DBS لمجموعة متنوعة من analytes مختلفة، بما في ذلك الكوليسترول، بروتين سي التفاعلي، الهيموغلوبين الغليكوزيلاتي، والأجسام المضادة فيروس ابشتاين بار، والعديد من السيتوكينات.
وقد بزل الوريد طويلة معيار الذهب لجمع المؤشرات الحيوية في الدم. ومع ذلك، والحصول على وتخزين وشحن عينات الدم يتطلب adherenم على عدد من البروتوكولات وقواعد الصحة، والتي قد لا يكون ممكنا في بعض بروتوكولات البحوث. المختص بأخذ يجب أن تكون مصدقة رسميا لبزل الوريد، في حين إجراءات أخذ العينات DBS هي أبسط و لا تتطلب شهادة رسمية. يتطلب جمع الدم الوريدي أيضا المزيد من المعدات مما يفعل جمع DBS (أي الإبر والأنابيب، بوابات)، وجهد أكثر جمع آخر. يجب أن تتم معالجة عينات بزل الوريد (أي مصل أو البلازما المستخرجة من عينة من الدم عن طريق الطرد المركزي أو الوقوف في درجة حرارة الغرفة لفترة معينة من الزمن) وجمدت بين -20 درجة مئوية و -70 درجة مئوية فورا من أجل منع تدهور التحاليل ، في حين يجب ببساطة أن يسمح عينات DBS إلى الهواء الجاف ومن ثم يمكن تخزينها في درجة حرارة الغرفة لمدة أسبوع أو أكثر اعتمادا على تحليلها، قبل نقلها إلى ثلاجة 2. عينات DBS هي أقل تكلفة لجمع عينات من بزل الوريد لأسباب المذكورة أعلاه. عينات DBS أيضاتأخذ مساحة أقل، والحد من تكاليف الشحن والتخزين قبل الفحص.
أصبح استخدام اللعاب كما العلامات البيولوجية الرئيسية في الدراسات biobehavioral. اللعاب يقدم، طريقة بسيطة موسع لجمع المؤشرات الحيوية، وأصبحت معيارا لعمل ميداني يهدف إلى قياس هرمون الكورتيزول أو كوتينين 3-5. البول هو عينة أخرى التي يمكن جمعها noninvasively، ويمكن استخدامها في الدراسات مستوى السكان لفحوصات الميلاتونين أو السموم. في حين أن كلا البول واللعاب تقديم إجراءات جمع التي هي قادرة على أن تستكمل من قبل المشاركين أنفسهم على التوالي إلى الأمام، ليست كل التحاليل يمكن قياسه في هذه الوسائط.
DBS تقدم بسيط، وفعالة من حيث التكلفة، كبديل لبزل الوريد وأصبحت أداة تنفذ على نحو متزايد في البحوث الميدانية والدراسات السكانية 6.
Protocol
تمت الموافقة على بروتوكول التالية من قبل مجلس المراجعة المؤسسية المطبقة وأجريت وفقا لإعلان هلسنكي.
1. قبل بداية: عادي Precuations
ضمان جميع الموظفين جمع العينات مرت NIOSH طريق الدم المطلوبة الممرض (BBP) التدريب.
- ضوابط هندسية
- وافق استخدام الغذاء والدواء حاويات الأدوات الحادة التخلص من التخلص من استخدام معقم، المشارط تستخدم مرة واحدة. استخدام برميل النفايات البيولوجية المسمى بشكل صحيح لأية مواد أخرى التي تأتي في اتصال مع المواد ربما المصابة.
- لا يفيض حاوية الأدوات الحادة. ملء حاوية الأدوات الحادة فقط إلى 3/4 القدرة قبل استبدال الحاويات لمنع الاصابة. هناك مؤشرا لملء المجزئ على كل حاوية الأدوات الحادة.
- التخلص من الأدوات الحادة فقط في حاوية الأدوات الحادة. لا تستخدم الأدوات الحادة الحاوية للأي بعد التمديدالنفايات لها.
- التخلص من أي مواد nonsharp التي تأتي في اتصال مع BBP المحتملة في برميل النفايات البيولوجية المسمى بشكل صحيح.
- معدات الحماية الشخصية (PPE)
- دائما استخدام معدات الوقاية الشخصية بشكل صحيح للحماية من العدوى من BBP. معدات الوقاية الشخصية المستخدمة خلال مجموعة من DBS تشمل القفازات، والمعاطف مختبر، وحماية العين، والسراويل الطويلة والأحذية مغلقة الأصابع.
- ارتداء قفازات للتعامل مع الدم أو أي شيء وقد اتصلت الدم أو غيرها من المواد التي قد تكون معدية (OPIMs). يجب قفازات لا تكون ضيقة جدا ولا فضفاضة جدا، لأن هذا قد يعيق عملية "حلب" (سيتم وصفها لاحقا). لا ترتدي الخواتم في حين جمع البقع الدموية لأنها يمكن أن ثقب القفازات.
- ارتداء معطف المختبر لحماية الجلد والملابس من الدم وOPIMs. وينبغي غسلها معطف المختبر الذي يأتي في اتصال مع BBP في 10٪ محلول التبييض / المياه قبل إعادة استخدامها. بغض النظر عن التعرض، ويجب غسلها في معطف المختبر بانتظام للحفاظ على جالعجاف.
- ارتداء الأحذية المغلقة الأصابع لحماية القدمين من الاتصال الممكنة مع الدم وOPIMs.
- إذا رغبت في ذلك، وارتداء نظارات واقية للحماية من اتصال ممكن مع الدم وOPIMs بسبب بقع.
- للحفاظ على نظافة مساحة عمل، وإزالة جميع معدات الوقاية الشخصية قبل مغادرة مكان العمل لتجنب تلويث العناصر خارج منطقة المختبر.
- ضوابط ممارسة العمل
- غسل اليدين بالصابون والماء الدافئ لمدة 20 ثانية قبل وبعد اتصال جسدي مع كل مشارك. استخدام منشفة لإيقاف المياه الجارية. إذا بالوعة غير متوفرة، استخدام المطهر اليد لا تقل عن 60٪ كحول.
- بغض النظر عن الفرصة لغسل اليدين، واستخدام الكحول المطهر اليد قبل تطبيق وبعد إزالة القفازات. استخدام المطهر يكفي لتغطية جميع الأسطح من كلا اليدين وفرك اليدين معا حتى تجف. لا شطف أو مسح اليدين بمنشفة جافة حيث أن هذا سوف يقلل من فعالية المطهر.
- لا تأكل أوشرب أو تطبيق ماكياج أو عدسات لاصقة في مناطق جمع الدم. التعرض لشخصية BBPs يمكن أن يحدث من خلال هذه المسارات التي هي الطرق المباشرة إلى الأغشية المخاطية.
- لا تعامل مع المواد biohazardous دون قفازات ولا التعامل مع المواد غير الخطرة مع القفازات التي لمست في وقت سابق المواد biohazardous.
- تنظيف الغرف السليم
ستواصل التدبير الإداري الجيد للمساعدة في حماية ضد التعرض لBBP وسيمنع عبر تلويث البيئة.- استخدام مبيد للفيروس مطهر الجراثيم مناديل لتنظيف المناطق الملوثة بشكل صحيح أثناء جمع DBS.
- إبقاء biohazardous أو النفايات الملوثة منفصلة عن النفايات العادية، ومواد الملوثة هي تلك التي تحتوي على دم مرئي أو OPIM عليها.
- استجابة التعرض
إذا تعرضت لBBP، والاستجابة على النحو التالي.- غسل المنطقة فورا ويتعرض جيدا بالصابون والماء.العمل السريع يمكن أن تقلل من خطر العدوى.
- تحديد مصدر ومسار التعرض لتكون قادرة على شرح الموقف إلى المشرف الميداني و / أو الطبيب الاستجابة.
- بإخطار المشرف على اساس الدعوة فورا بعد حدوث التعرض. وأكد أن الحصول على دعم من المشرف الميداني على فهم مستوى المخاطر للعدوى لذلك يمكن تقييم عناية طبية فورية إذا لزم الأمر. يجب توفير المبادئ التوجيهية الواردة في خطط التعرض للمراقبة محددة (اللجنة التنفيذية) لجميع تلك التي هي في خطر من التعرض لBBP.
2. الإعداد للغرفة جمع ومواد
- حدد موقعا جمع العينات التي لا يقصد للأكل، مثل breakroom، والتي هي خالية من جميع معدات المشاريع غير ذات صلة. واحد لا تريد أن تكون في منطقة مزدحمة؛ أنه من المهم أن يكون سهولة الحركة. فيما يلي وصف لكيفية إعداد المجففة جمع بقعة الدم (ل) منطقة من أساسها.
- إعداد برميل نفايات بيولوجية ويبطن من الداخل مع كيس نفايات بيولوجية. يجب أن يكون برميل النفايات الوصول إليها أثناء الجلوس.
- تنظيف المنطقة تماما مع جمع تطهير مناديل أو منتج مماثل. التخلص من كل المواد المستخدمة لتنظيف المنطقة المختبر في برميل نفايات بيولوجية. ارتداء القفازات أثناء هذه الخطوة لحماية الجلد من التعرض للمواد الكيميائية الضارة.
- استبدال القفازات وإعداد لوازم جمع المتبقية.
- قفازات مكان والكحول المطهر على الطاولة المجموعة.
- وضع حاويات الأدوات الحادة في متناول رئاسة جامع. يجب التعامل مع الأدوات الحادة الحاوية مع القفازات في جميع الأوقات ومن ثم التخلص منها بطريقة صحيحة عندما الكامل.
- وضع جميع المواد المتبقية اللازمة لجمع DBS على underpad الواقية في منطقة المجموعة. وتشمل بطاقة مرشح لجمع الورق، وعدد قليل المشارط، ومنصات الكحول، وقطع من الشاش، والفرقة الايدز، ولكن ليست كثيرة جدا وبالتالي فإن المجال هو تشوش. فعللا اقامت اكثر من ما يمكن أن تستخدم لكل مشارك.
3. DBS عينة شخصيات Cellection
ارتداء معدات الوقاية الشخصية دائما (معطف المختبر، والقفازات، والسراويل الطويلة والأحذية الأصابع المغلقة وإذا رغبت في ذلك، ونظارات السلامة) خلال جمع ووضع underpad الواقية (chux) في اللفة لحماية المرء الملابس في الشوارع.
- إعداد المشاركين:
- بعد الحصول على الموافقة، اطلب من المشاركين اذا كان / انها تفضل استخدام اليسار أو جهة اليمين لجمع وتحديد الإصبع لجمع. تجنب متصلبة بشكل كبير أو التالفة (تمزقه) الأصابع وأصابع أي الحلقية. عادة الخنصر والإبهام لم يتم تحديد ذلك لتقليل الألم وتسهيل جمع المشاركين، على التوالي. يتم استخدام الجانبين من نصائح الاصبع كموقع لتجميع اتساق وسهولة التحصيل.
- وقد المشارك فرك أيديهم معا لتدفئة أيديهم، وتحفيز تدفق الدم. A وا اليدrmer يمكن أن تستخدم، أو قد المشارك تشغيل أيديهم تحت الماء الدافئ إذا بالوعة هو متاح. أن أسلوب آخر لتحفيز تدفق الدم يكون لديك المشارك حسم بالتناوب والاسترخاء من ناحية الهدف، ثم بقية بالكامل قبل الأصبع.
- تنظيف الإصبع المحدد مع وسادة الكحول واتركه حتى يجف تماما. تكرار مع وسادة الكحول ثانية لإزالة تماما أي يلوث أو المستحضرات اليد. يجب أن يكون الإصبع جافة تماما قبل الشروع في العصا إصبع أو الكحول وتلوث عينة من الدم. كما هو الحال مع جميع المواد المستخدمة جمع، والتخلص فورا من مناديل الكحول في حاوية نفايات بيولوجية.
- إعداد موقع على ثقب الإصبع المشارك:
- تأمين الذراع المشارك لمنع الحركة خلال جمع وللاسترخاء الذراع وعضلات اليد. راحة الكوع المشارك على حافة الطاولة أو في اللفة الخاصة بهم. إبقاء اليد نقاط البيع المشاركitioned مريح تحت مستوى القلب وعضلاتهم خففت لتسهيل تدفق الدم.
- فهم الاصبع اختيار بين الابهام والسبابة والإصبع الحليب بلطف بواسطة ببطء وبثبات الضغط على الإصبع، في حين تتحرك قبضة من النخيل إلى الإصبع لسحب الدم نحو الإصبع.
- اضغط على-انسيت الصغيرة بحزم ضد إصبع المشارك عمودي على بصمات الأصابع والتفريغ لانسيت. لا ثقب وسط الإصبع أو على مقربة من فراش الظفر، وبدلا تهدف بين هاتين النقطتين، وعلى الجانب الزندي من الاصبع. التخلص فورا من انسيت المستخدمة في حاوية الأدوات الحادة.
- جمع البقع الدموية:
- يمسح أول قطرة من الدم بعيدا مع وسادة شاش معقم لإزالة السوائل من أنسجة عينة والتخلص فورا من الشاش في برميل نفايات بيولوجية.
- مع الحفاظ على اليد المشارك أدناه قلوبهم مع زاوية الهبوط، الجنرالالحليب TLY انطلاق اليد في اليد والعمل وصولا الى قاعدة الاصبع لانتاج الدم. لا مجرد ضغط على إصبع، حيث سيؤدي ذلك إلى تقليل تدفق الدم. الحليب الاصبع حتى انخفاض كبير هو معلق من الإصبع.
- جمع البقع باستخدام ورقة جمع.
- وضع بعناية ورقة جمع تحت الاصبع والسماح للانخفاض إلى سقوط زنه. وهذا يسمح مجموعة من البقع الدم الحد الأقصى للصوت. إذا حمامات الدم على ورقة الترشيح، أي "الخرز"، اضغط بلطف بطاقة لتشجيع الدم إلى تشبع في ورقة.
- إذا كان الدم هو لزج جدا أو قطرات صغيرة جدا لتسقط من وزنه، وجلب ببطء ورقة جمع في اتصال مع قطرة الدم على امتصاص الدم بعيدا عن إصبع عبر عمل شعري دون لمس الإصبع. إذا كان إصبع تلامس الورق جمع والانتقال إلى مكان آخر على ورقة كما تم اختراق هذا المجال جمع. إصبع شو المشاركيونيتبول لا تلمس ورقة الترشيح.
- لا تضع قطرات الدم على رأس واحد آخر، حتى إذا لم بقعة الدم ملء دائرة التحصيل.
- لا تدع الدم تشغيل أسفل الاصبع أو على ظفر لأن هذا يجعل مجموعة من البقع الكبيرة أكثر صعوبة.
- إذا جلطات الدم المشارك في أي وقت أثناء عملية جمع واستأذن لوخز الاصبع آخر، ثم ضمادة نظيفة وموقع الوخز الأولية والبدء من جديد في حال قبول الطلب.
- لمنع تخثر الدم، تستمر حلب الاصبع المشارك للحفاظ على تدفق الدم أو محاولة محو بحزم مع ثقب شاش معقم لعرقلة تشكيل الجلطة.
ملاحظة: قد تكون لاحقة الاصبع العصي الضرورية لعدة أسباب: قد يسبب تخثر غرفة باردة أكثر سرعة، كما لزوجة الدم المشاركين قد لا يكون مثاليا، أو يمكن أن تقنيات الحلب الفقراء أيضا تأثير تدفق الدم. تدفئة اليد، أو ماء دافئ التوالي، وتستخدم قبل puncتلح يمكن عكس تأثير غرفة باردة.
- لمنع تخثر الدم، تستمر حلب الاصبع المشارك للحفاظ على تدفق الدم أو محاولة محو بحزم مع ثقب شاش معقم لعرقلة تشكيل الجلطة.
- مرة واحدة وقد تم جمع DBS، أو إذا كان المشارك لا يريد اللاحقة الاصبع العصي، وتنظيف الموقع من أي ثقب الدم الدخيلة.
- ضمادة موقع البزل لمنع التلوث المحتملة مرة واحدة المشارك يترك مجال جمع العينات.
- مراقبة الجودة FI (QC) التقييم:
عند الانتهاء من جمع العينة، وتقييم عينات للجودة. ضمان البقع هي 1) 0.375 على الأقل في قطر في مقاسا من الجزء الخلفي من منطقة جمع؛ 2) غارقة بشكل كاف من خلال ورقة جمع بحيث تكون مشابهة من حيث الحجم على جانبي ورقة الترشيح، والبقع لا يفي بهذا المعيار تشير جمع عن طريق الاتصال من إصبع إلى ورقة جمع والمرجح تلطيخ؛ 3) ليس في اتصال مع بعضها البعض (تداخل مناطق من البقع ليست assayable). - استكمال جمع العينات
- واجهة المستخدم الرسومية التاليةdelines هو موضح في الخطوة 1.1، والتخلص من أي مواد المتبقية جمع الملوثة، بما في ذلك أي من البنود التي قد تكون في اتصال مع المواد التي قد تكون معدية.
- الوقوف على ورقة جمع على underpad وقائية لتجف. مساحة بطاقات جمع للسماح تدفق الهواء جيدة بينهما. الحد الأدنى من الوقت في الهواء الجاف هو 15 دقيقة، ويفضل أن لا يقل عن 30 دقيقة. للسماح الحد الأقصى لتدفق الهواء، فمن المهم لاضعاف الجزء الخلفي من بطاقة جمع في الطريقة التي يمكن أن تقف وبحرية وتوفير تدفق الهواء وراء العينات على ورقة جمع.
- مع كل الخطوات كاملة، وإزالة معدات الوقاية الشخصية.
- استجابة لشعور خافت الموضوع أو ليس على ما يرام
على الرغم من غير المرجح، قد يصبح أحد المشاركين بالدوار، بدوار، أو خافت أثناء أو بعد العصا إصبع. يكون في حالة تأهب لعلامات مثل شحوب، عرق على الوجه والجبين، والشكاوى من عدم وضوح الرؤية، أو تدلى ترفرف الجفون، أو شكاوى من الغثيان. بداية رالأعراض غالبا ما تكون ذات المناظر المفاجئ، ويجب أن يكون جامعي العينة مستعدة للاستجابة بسرعة إذا كان أي من أعراض واضحة. إذا كان أي من هذه الأعراض موجودة في أي لحظة أثناء الإجراء، تتفاعل وفقا للإجراءات التالية.- إذا أحد المشاركين والشعور بالإغماء، بدوار، بالدوار، أو يظهر أي علامات على الإغماء، واتخاذ الإجراءات التالية:
- وقف هذا الإجراء.
- الحرص على أن لا تقع المشارك أو تصبح الجرحى.
- بهدوء طمأنة المشاركين وإذا لزم الأمر، اطلب من المشاركين أن ينحني في وسطه ووضع له / رأسها بين له / ساقيها. إذا التنقل محدودة ويمكن نقل المشاركين، موقعا المجاورة خففت يمكن استخدامها للراحة.
- لديك بقية المشاركين لمدة 10 دقيقة.
- استئناف الإجراء إذا وافق المشارك للمتابعة.
- إذا يغمى عليه أحد المشاركين، واتخاذ الإجراءات التالية:
- وقف هذا الإجراء.
- الحرص على أنلا تقع المشارك أو تصبح الجرحى.
- يكون الكذب على المشاركين له / ظهرها في أسرع وقت ممكن مع أقدام مرتفعة. سيتم أوعز المشارك على الاستلقاء على الأرض مباشرة من دون وضع الجلوس واقفا.
- اطلب من المشاركين لتخفيف أي ملابس ضيقة.
- لديك بقية المشاركين لمدة 10 دقيقة.
- لا ينبغي أن يستمر جمع بقعة الدم.
- إذا لم يستجب المشارك بعد 1 دقيقة، استدعاء 911.
- إذا أحد المشاركين والشعور بالإغماء، بدوار، بالدوار، أو يظهر أي علامات على الإغماء، واتخاذ الإجراءات التالية:
- كسر منطقة المختبر:
مرة واحدة وقد تم الانتهاء من مجموعة من البقع الدموية، ولا بد من كسر منطقة أسفل جمع ولن تكون مصابة تطهير المنطقة للتأكد من أن المارة سطحها بواسطة BBP. منطقة جمع الدم، وحاويات المعدات والمواد جمع، وحاويات النفايات يجب أن تكون نظيفة من BBP. كما هو الحال دائما، وارتداء معدات الوقاية الشخصية عند التعامل مع المواد التي قد تكون معدية.- إزالة من منطقة جمع وأعد حزم جميع المواد غير ملوثة.
- التخلص من أي مواد النفايات الملوثة المتبقية في برميل النفايات البيولوجية.
- إغلاق الحاوية الأدوات الحادة وتخزينها في المنطقة التي توفر الحماية من التلوث. إذا حاوية الأدوات الحادة هو 3/4 كامل والتصرف بشكل مناسب منه واستبدالها مع حاوية الأدوات الحادة الجديد.
- مسح كامل منطقة جمع العينات مع مبيد للفيروس مناديل تطهير الميكروبية.
- مرة واحدة وقد تم التخلص من جميع المواد biohazardous، ويمكن تعقيمها حقيبة واقية. عند إزالة كيس من النفايات برميل، توخي الحذر للمس فقط الجزء الخارجي من حقيبة وختم الكيس بإحكام. بل هو أيضا ممارسة جيدة لاستخدام الجراثيم مبيد للفيروس مناديل لتنظيف الجزء الخارجي من جميع المعدات لمنع التلوث المتبادل.
4. تدريب على جمع DBS
تحقق من شهادة أي المجففة جامع بقعة الدم عن طريق شخص مؤهل قبل تنفيذ اإلجراءاتملعرفة على المرضى أو الموضوعات البحثية. ضمان جامعي إظهار الاحترام للمشاركين والثقة والكفاءة في استخدام معدات الوقاية الشخصية والإمدادات جمع الدم، في جمع النقاط من حجم كاف، واستكمال الإجراء في الوقت المناسب وبطريقة فعالة، من الناحية المثالية في أقل من 10 دقيقة.
5. عينة التعبئة والتغليف والتخزين
- ضمان جفت عينات DBS لمدة لا تقل 15 دقيقة قبل أن يتم حصل أنها للتخزين، بطاقة المشبعة قد يستغرق 30 دقيقة أو أكثر لتجف بشكل كاف. أغلق غطاء بطاقة جمع، وضمان عينة جافة تماما لمنع تلطيخ وتلويث العينة.
- أخذ عينة بيولوجية كيس ووضع الحقيبة المجففة في كيس العينة. وضع العينة في كيس DBS بيولوجية العينة. دائما ارتداء قفازات عند التعامل مع عينات DBS. لا تسمح للعينات دم للمس السطح الخارجي للكيس العينة.
- وضع كل عينة في العينة الخاصة به واقية كيس الطرافةها حزمة المجففة. تتسطح الحقيبة لإزالة الهواء الزائد ثم ختم الحقيبة بإحكام. وضع عينة حصل في برودة لتخزين النقل أو التخزين المؤقت. تجنب درجات الحرارة المرتفعة.
- تجميد أو فحص عينات DBS في غضون أسبوعين من جمع، كعينات DBS يمكن عادة تخزين في درجة حرارة الغرفة لمدة أسبوعين دون تدهور كبير اعتمادا على تحليلها 7،2.
6. النقل والشحن عينة
- ما لم يعرف لاحتواء العوامل المعدية، سفينة المجففة عينات بقعة الدم والعينات البشرية معفاة تحت الإدارة الأمريكية للأنظمة النقل وفقا للجزء 2، الفصل 6، § 6.3.2.3.6 لمنظمة الطيران المدني الدولي (ICAO) تعليمات الفنية 8 .
- إذا جمدت، وعينات السفينة بين عشية وضحاها على الثلج الجاف مع احتياطات اضافية المطلوبة للمواد الخطرة، أو مع gelpaks المجمدة إلى -80 درجة مئوية. السفينة يوم الاثنين إلى الأربعاءلتجنب ذوبان الجليد في العبور بسبب التأخير أو عطلة نهاية الأسبوع / أيام العطل، مع تأكيد من موقع المتلقي أنهم يتوقعون وعلى استعداد لتلقي وتجميد العينات.
7. تقييم مراقبة الجودة
- بعد جمع وفحص قبل (ويفضل قبل تجميد من أجل تقليل عدد دورات تجميد أذاب) تقييم عينات للجودة.
- وتشمل المعايير التالية في تقييم نوعية العينة؛ التعبئة والتغليف المناسبة، مرمزة المجففة المتبقية سليمة (الجاف)، والتشبع من البقع، وحجم البقع، طرق جمع السليم بما في ذلك البقع لا تداخل أو طخت على بطاقة تشير إلى ملامسة إصبع الموضوع.
8. الفريزر التخزين
على الرغم من تدهور مرات تختلف حسب تحليلها، وتجميد عينات DBS في غضون أسبوعين من جمع للحصول على أفضل النتائج. تجميد العينات مع المجففة في الثلاجة مختبر الصف. كما هو الحال مع أي عينة بيولوجية، والحد من تجميد أذاب جycles، على الرغم من أن بعض المقايسات في عينات DBS أظهرت عدم وجود أدلة على تدهور في ما يصل إلى ستة تجميد أذاب دورات 9-11.
Representative Results
الشكل 1. المجففة الدم عينة الفور. يتم إظهار البطاقة جمع مع أربعة، والبقع المجمعة صالحة في عملية التجفيف. اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.
يتم عرض الرقم 2. جيدة وسيئة المجفف عينات بقعة الدم. نتائج ناجحة (يمين) وغير الناجحة (يسار) جمع DBS. انقر هنا لعرض أكبر ايمالعمر.
الرقم 3. المواقف والممارسات المرتبطة مخاطر مرض الموظف cardiometabolic 6 مدراء '. تم تعديل هذا الرقم من بيركمان، LF، بوكستون، OM، إرتل، K. & أوكيشوكو والممارسات C. مدير المتصلة بالعمل والأسرة التوازن التنبؤ القلب والأوعية الدموية موظف المخاطر ومدة النوم في مرافق الرعاية طويلة. مجلة الصحة المهنية علم النفس 115، 316-329 (2010). موظف يتعرض للمديرين مع منتصف أو منخفضة عشرات العمل والأسرة من الانفتاح والإبداع لمساعدة مع عمل موظفيها وحاجة الأسرة، ويكون خلاف زيادة ذات دلالة إحصائية من وجود اثنين أو أكثر من المخاطر القلبية الوعائية (المدخن الحالي، والسمنة، وارتفاع ضغط الدم أو الضجيجrtension، وارتفاع الكولسترول، وارتفاع الهيموغلوبين الغليكوزيلاتي (الهيموغلوبين A1C) أو تشخيص مرض السكري). أعلى والمتوسطة لوحات تصور القيم يعني ± الانحراف المعياري لتقييم الكولسترول الكلي في الدم عن طريق بقعة المجففة والهيموجلوبين A1C المقررة من قبل نقطة من الرعاية الجهاز (والتي يمكن أيضا أن تكون موثوق بها لقياس بقع الدم المجفف). يظهر اللوحة السفلية خطر الاصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية عن طريق مدير النتيجة. تحليل تقتصر على الممرضات وغيرهم من الموظفين توفير الرعاية المباشرة تشير إلى أن التعرض للمديرين مع انخفاض الإبداع والانفتاح القضايا للعمل بين أفراد الأسرة ذات الصلة قد تكون ذات أهمية خاصة لهؤلاء الأفراد (أو لانخفاض درجة WF = 6.4، ص = 0.01). جميع النماذج السيطرة بالنسبة للعمر والجنس والأجور والتعليم والعرق / الإثنية، وموقع العمل. اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.
Discussion
المؤشرات الحيوية هي أدوات مفيدة للغاية في مختلف التخصصات المتعددة، بما في ذلك الطب، بيولوجيا الخلية والوراثة، وعلم النفس وعلم الاجتماع والديموغرافيا، وعلم الأوبئة الاجتماعية. داخل كل الانضباط، وكان يستخدم صلاحية المرحلة المبكرة والموثوقية البحوث العلامات البيولوجية للكشف عن كل من خطر المرض الخفي وتوفير التنبؤ طولية من النتائج الصحية. في هذه الحالات، المؤشرات الحيوية التي هي دقيقة ودائمة (أي أنها يمكن أن تنجو من فجوة بين جمع العينات وتنفيذ فحص المختبر لاستخراج العلامات البيولوجية)، وتنوعا (أي مفيد في مجموعة متنوعة من النماذج) مطلوبة.
في حين جمع DBS هو إجراء بسيط نسبيا، ويمكن أن العديد من التقنيات المساعدة على زيادة حجم البقع التي تم جمعها. قبل أن يبدأ جمع، وضمان يد المشارك دافئة، وبالتالي أن الأوعية الدموية المتوسعة، وسوف تساعد تدفق الدم بمجرد ثقب الإصبع. استخدام تدفئة اليد أو وجوديمكن تشغيل مشارك أيديهم تحت الماء الدافئ يساعد في هذه العملية. سوف حلب الاصبع قبل جمع سحب الدم إلى طرف الإصبع وتدفئة اليد للمساعدة في تدفق الدم. حلب هي العملية التي يحسن مع الممارسة. يجب استخدام كل ما جامعي تقنية وجدوا أكثر راحة وفعالية، ولكن النهج الأكثر شيوعا ينطوي حلب ناحية المشارك مع اليد مقابل جامع. وسوف تسمح هذه الطريقة الإبهام جامع للعمل في عمق النخيل المشارك بينما من ناحية العكس يمكن تحقيق الاستقرار المعصم المشارك. على سبيل المثال، إذا كان واحد كانوا يجمعون الدم من إصبع اليد اليسرى على المشارك، فإن جامع استقرار المعصم المشارك مع اليد اليسرى والحليب مع أيديهم اليمنى. الأخطاء الشائعة التي أدلى بها أثناء الحلب تشمل عدم استخدام قبضة قوية، وسحب الجلد فوق باليد بدلا العاملين في العضلات لسحب الدم نحو طرف الإصبع. من المهم أيضا لتجنب دبوستشينغ الاصبع مع اليد الحلب أو التي تجتاح بإحكام المعصم المشارك مع اليد nonmilking، وكلاهما يعوق تدفق الدم.
عندما ثقب الإصبع، وجعل ثقب عميق ممكن عن طريق الضغط بقوة لانسيت في الاصبع قبل التخلص منها. النتائج ثقب الضحلة في أقل من تدفق الدم وتخثر أسرع. بعد ثقب الإصبع، والعمل بسرعة هو مفتاح الحل. يؤدي الدم رقيقة لسهولة جمع وبقع أكبر. بعد ثقب، ويصبح الدم أكثر وأكثر لزوجة حتى تخثر. الوقت اللازم لأقل جمع البقع الدموية على بطاقة أكبر حجمها.
مثالي الدم المشارك سوف يكون كافيا أن قطرات رقيقة ستسقط من وزنه، ولكن هذا لن يكون الحال بالنسبة لجميع المشاركين، وبعض الناس الدم هو أكثر سمكا أو جلطات اسرع من غيرها. إذا كان الدم سميكا جدا لتسقط من الإصبع، ويجب تقديم بطاقة مرشح إلى الدم لجمع. ملحقأون جلب البطاقة إلى الدم من المهم الاستمرار على البطاقة في اتصال مع انخفاض في حين أنه هو معلق من الاصبع لفترة طويلة ممكن، بدلا من مجرد اللمس الدم إلى البطاقة. وهذا سوف يساعد سحب الدم من إصبع لتعظيم حجم البقعة. هذا الأسلوب يتطلب أيدي ثابتة للحفاظ على الاتصال بين الدم والبطاقة. باستخدام كلتا اليدين، واحدة لتحقيق استقرار من ناحية المشاركين واحدة لعقد البطاقة، والحفاظ على كلتا يديه على اتصال مع بعضها البعض يساعد على تحقيق الاستقرار في بطاقة والدم معا.
المجالات البحثية المتقدمة، مثل تقييم المخاطر cardiometabolic، وقد اعتمدت طويلا على المؤشرات الحيوية مثل بروتين سي التفاعلي (CRP)، الأنسولين، والهيموغلوبين الغليكوزيلاتي (نسبة HbA1c) للكشف المبكر وخطر جهود الوقاية، فضلا عن المؤشرات الحيوية من "النهاية الصعب" لأمراض القلب والأوعية الدموية للخطر والوفيات المرتبطة الأمراض القلبية الوعائية 12. علم الأوبئة السريرية في كثير من الأحيان يقيم المؤشرات الحيوية لprospectivelذ التنبؤ بالنتائج خطر cardiometabolic مثل أمراض القلب والسكري من النوع الثاني. ربما الأكثر استخداما على نطاق واسع لجميع المؤشرات الحيوية هي النتيجة فرامنغهام للخطر، وهو مركب يتضمن ضغط الدم ومستويات الكولسترول HDL ومجموع مستويات كوليسترول التي أثبتت فائدة في توقع الأمراض القلبية الوعائية 13. ومع ذلك، فقد شهدت النتيجة فرامنغهام بعض الخلافات الفنية، ولها قيود في الدراسات التي تركز على ربط العوامل الاجتماعية والبيئية للصحة، مما يشير إلى الحاجة إلى المؤشرات الحيوية أكثر دقة ومحددة تتعلق البحوث القلب والأوعية الدموية.
هناك عدد من مجموعات المتاحة تجاريا باستخدام ELISA أو تقنيات مشابهة المتاحة لفحص عينات DBS. اللازمة لفحص عينات DBS هي استخدام خطوات محددة وشطف الأمثل لجلب العينات المجففة في حل 2. هذا هو مجال التوسع في البحوث كما المقايسات لمزيد من التحاليل ويجري حاليا تطويرها 1. بين الفحوصات التحقق من صحة البريد بالفعل وتستخدم على نطاق واسع هي الكوليسترول 2، CRP 10،14،15، IgE16، EBV 9،15، 17 اللبتين، وcyotkines 18. هناك عدد من مختبرات متخصصة في فحص من DBS، بما في ذلك جامعة واشنطن قسم الطب المخبري (UW لاب ميد) مختبر العلامات البيولوجية (المدير: مارك Wener).
مع الأخذ في الاعتبار أن لجنة من المؤشرات الحيوية، بدلا من العلامات البيولوجية وحيد، هو الأكثر فائدة في مجالات البحوث القلب والأوعية الدموية والسكري وتحتاج المؤشرات الحيوية التي يتعين النظر فيها جنبا إلى جنب مع مجموعة متنوعة من العوامل السياقية من أجل تعظيم فائدتها. البحوث العلامات البيولوجية يمكن أن تكون مكلفة ولكن، سواء من الناحية المالية وفي الوقت المناسب لجمع البيانات. وهكذا، في حين أنه أمر حيوي لاختيار المؤشرات الحيوية التي هي دقيقة ودائمة، وتنوعا، ويجب أن تكون متجذرة العمل والأسرة البحوث العلامات البيولوجية في التطبيق العملي من خلال تحديد المؤشرات الحيوية التي هي غير مكلفة وملائمة، ويمكن جمعها بسرعة وايال سهولة. علاوة على ذلك، الاعتبارات العملية غالبا ما يؤدي إلى عدم القدرة على تحقيق أقصى قدر في وقت واحد السعر والجودة، والسرعة في إجراء واحد. هنا تكمن الخطوات القادمة في مجال البحوث العلامات البيولوجية الصحية في الدراسات الميدانية والسكان. مجال البحث العلامات البيولوجية حاليا في فترة من النمو الكبير، ولكن معظم العمل لم يأت بعد.
Disclosures
تلقت Orfeu بوكستون منحة بمبادرة من المحقق سبراكور شركة (الآن Sunovion؛ ESRC-0977، ClinicalTrials.gov معرف NCT00900159)؛ يخدم كمستشار والشاهد الخبير للدينسمور ذ م م، على المجلس الاستشاري العلمي من Matsutani أمريكا، وحصل على الاستشارات الرسوم من المركز الطبي في جامعة ويك فوريست.
Acknowledgments
وأيد هذا العمل من قبل العمل والأسرة وشبكة الصحة (www.WorkFamilyHealthNetwork.org)، الذي تموله اتفاق تعاوني من خلال المعاهد الوطنية للصحة ومراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها: يونيس كينيدي شرايفر المعهد الوطني لصحة الطفل والتنمية البشرية (المنحة # U01HD051217، U01HD051218، U01HD051256، U01HD051276)، والمعهد الوطني للشيخوخة (المنحة # U01AG027669)، مكتب السلوكية وعلوم أبحاث العلوم، المعهد الوطني للقلب والرئة والدم المعهد (R01HL107240)، والمعهد الوطني للالمهنية السلامة والصحة (المنحة # U01OH008788، U01HD059773). وقد وفرت المنح المقدمة من مؤسسة ويليام ت. غرانت، ألفريد سلون مؤسسة P، وإدارة للأطفال والعائلات تمويل إضافي. محتويات هذا المنشور هي فقط من مسؤولية الكتاب ولا تمثل بالضرورة وجهة النظر الرسمية من هذه المعاهد والمكاتب.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Asepti II Microbial Wipes | EcoLab | D12330345 | 3rd party shipping |
| Biohazard waste bags | VWR | 14220-092 | High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil |
| Biohazard waste barrel | Tyco | 58578-092 | 8 g Slide lid |
| Sharps Container | BD Medical | BD305487 | 1.4 qt |
| Chux | VWR | 82020-845 | Absorbent bench underpads |
| Gloves | VWR | XSmall: 89038-267 | Powder-free, latex-free nitrile gloves |
| Small: 89038-268 | |||
| Medium: 89038-270 | |||
| Large: 89038-272 | |||
| XLarge: 89038-274 | |||
| Hand sanitizer (e.g. Purell) | Johnson Johnson | 89040-210 | 3rd party shipping |
| Alcohol wipes | Webcol and Curity | 82003-856 | Prep pads |
| Gauze | Versalon | 82004-826 | Nonwoven sponges |
| Band-Aids | Nutramax Stat Strips | 15431-475 | |
| Lancets | Owen Mumford | 82028-060 | 3.0 mm, 21 G |
| Protein paper collection cards | Whatman | Custom-build | 903 Protein Saver Collection paper |
| Desiccant | VWR | 61161-319 | Humidity sponges |
| Specimen bags | Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip | 56766-370 | 6 in x 9 in |
| Specimen storage cooler | Igloo | Playmate Mini | 4 qt; direct from manufacturer |
References
- McDade, T. W., Williams, S., Snodgrass, J. J. What a drop can do: dried blood spots as a minimally invasive method for integrating biomarkers into population-based research. Demography. 44, 899-925 (2007).
- Kirschbaum, C., Read, G. F., Hellhammer, D. H. Assessment of hormone and drugs in saliva in biobehavioral research. , Hogrefe & Huber Publishers. (1992).
- Piazza, J. R., Almeida, D. M., Dmitrieva, N. O., Klein, L. C. Frontiers in the use of biomarkers of health in research on stress and aging. J. Gerontol. Series B Psychol. Sci. Soc. Sci. 65, 513-525 (2010).
- Smyth, J. M. Individual differences in the diurnal cycle of cortisol. Psychoneuroendocrinology. 22, 89-105 (1997).
- Berkman, L. F., Buxton, O. M., Ertel, K., Okechukwu, C. Manager's practices related to work-family balance predict employee cardiovascular risk and sleep duration in extended care settings. J. Occup. Health Psychol. 115, 316-329 (2010).
- Buxton, O. M., Malarick, K., Wang, W., Seeman, T. Changes in dried blood spot Hb A1c with varied postcollection conditions. Clin. Chem. 55, 1034-1036 (2009).
- International Civil Aviation Organization. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air. , (2010).
- McDade, T. W. Epstein-Barr virus antibodies in whole blood spots: a minimally invasive method for assessing an aspect of cell-mediated immunity. Psychosom. Med. 62, 560-567 (2000).
- McDade, T. W., Burhop, J., Dohnal, J. High-sensitivity enzyme immunoassay for C-reactive protein in dried blood spots. Clin. Chem. 50, 652-654 (2004).
- McDade, T. W., Shell-Duncan, B. Whole blood collected on filter paper provides a minimally invasive method for assessing human transferrin receptor level. J. Nutr. 132, 3760-3763 (2002).
- Gerszten, R. E., Wang, T. J. The search for new cardiovascular biomarkers. Nature. 451, 949-952 (2008).
- D'Agostino, R. B., Grundy, S., Sullivan, L. M., Wilson, P. Validation of the Framingham coronary heart disease prediction scores: results of a multiple ethnic groups investigation. J. Am. Med. Assoc. 286, 180-187 (2001).
- McDade, T. W., Rutehrford, J., Adair, L., Kuzawa, C. W. Early origins of inflammation: microbial exposures in infancy predict lower levels of C-reactive protein in adulthood. Proc. R Soc. B.. , (2009).
- McDade, T. W. Measuring Stress in Humans. A Practical Guide for the Field. Ice, G. H., James, G. D. , Cambridge University Press. 181-207 (2007).
- Tanner, S., McDade, T. W. Enzyme immunoassay for total immunoglobulin E in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. 19, 440-442 (2007).
- Miller, A. A., Sharrock, K. C., McDade, T. W. Measurement of leptin in dried blood spot samples. Am. J. Hum. Biol. 18, 857-860 (2006).
- Miller, E. M., McDade, T. W. A highly sensitive immunoassay for interleukin-6 in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. , (2012).
