Summary
Biomarkører er direkte-målte biologiske indikatorer for sygdom eller sundhed. I befolkningen og samfundsvidenskab, biomarkører nødt til at være let at opnå, transport og analysere. Tørret blod Spot (DBS) samling imødekommer dette behov, kan opsamles i marken med høje svarprocenter og analyseret for en række biomarkører.
Abstract
Biomarkører er direkte-målte biologiske indikatorer for sygdom, sundhed, eksponering, eller andre biologiske oplysninger. I befolkningen og samfundsvidenskab, biomarkører nødt til at være let at opnå, transport og analysere. Tørrede blodpletter imødekomme dette behov, og kan afhentes i marken med høje svarprocenter. Disse elementer er særligt vigtige i forløbsundersøgelse design, herunder interventioner, hvor nedslidning er afgørende for at undgå, og høje svarprocenter forbedre fortolkningen af resultaterne. Tørret blod Spot prøvetagningen er enkel, hurtig og relativt smertefri, mindre invasive derefter venepunktur og kræver minimal krav til opbevaring felt (dvs. prøver behøver ikke at være det samme fryses og kan opbevares i en længere periode i et stabilt fryser miljø før assay). Prøverne kan analyseres for en række forskellige analytter, herunder kolesterol, C-reaktivt protein, glykosyleret hæmoglobin talrige cytokiner og other analytter samt give genetisk materiale. DBS kollektion er afbildet som ansat i flere nyere studier.
Introduction
Biomarkører kan give værdifulde oplysninger om biologiske processer lige fra normal til sygdomsfremkaldende der kan bidrage til klinisk identificerbar sygdom 1. I forskningsmiljøer, er tørret blod pletter (DBS), bliver mere og mere foretrukket til venepunktur som en metode til indsamling af biomarkører i fuldblod. DBS kollektion er enkel, forholdsvis smertefri, mindre invasive derefter venepunktur og kræver minimal krav til opbevaring (dvs. prøver behøver ikke straks nedfryses og kan opbevares i en længere periode i et stabilt fryser miljø før assay). DBS prøver kan testes for en række forskellige analytter, herunder kolesterol, C-reaktivt protein, glycosyleret hæmoglobin, Epstein-Barr-virus-antistoffer, og flere cytokiner.
Venepunktur har længe været den gyldne standard for indsamling af biomarkører i blod. Men at opnå, opbevaring og forsendelse af blodprøver kræver adherence til en række protokoller og sundhed koder, som måske ikke være muligt i visse forsknings-protokoller. Phlebotomists skal være officielt certificeret til venepunktur, mens DBS prøvetagning procedurer er enklere og kræver ikke officiel certificering. Venøs blodprøvetagning også kræver mere udstyr, end DBS samling (dvs. nåle, rør, årepresser), og mere post-indsamling indsats. Venepunktur prøver skal behandles (dvs. serum eller plasma udvundet fra blodprøven ved centrifugering eller henstand ved stuetemperatur i en bestemt periode) og nedfrosset mellem -20 ° C og -70 ° C umiddelbart for at undgå nedbrydning af analytter , mens DBS prøver blot skal have lov til at lufttørre, og derefter kan opbevares ved stuetemperatur i en uge eller mere afhængigt af analytten, før overførsel til en fryser 2. DBS prøver er billigere at samle end venepunktur prøver til ovenfor beskrevne årsager. DBS prøver ogsåfylder mindre, reducere forsendelse og opbevaring før analyse.
Brugen af spyt som biomarkør er blevet nøglen i biobehavioral studier. Spyt tilbyder en enkel, noninvasiv metode til at indsamle biomarkører og er blevet standard til markarbejde til formål at måle cortisol eller cotinin 3-5. Urin er en anden prøve, som kan indsamles noninvasively og kan bruges i studier befolkningsniveau for analyser af melatonin eller for toksikologi. Mens både urin og spyt tilbyde ligetil indsamling procedurer, der er i stand til at være afsluttet ved deltagerne selv, kan måles ikke alle analytter i disse medier.
DBS tilbyder en enkel, omkostningseffektiv alternativ til venepunktur og bliver en stadig mere gennemført forskning redskab i marken og befolkningsundersøgelser 6..
Protocol
Følgende protokol er blevet godkendt af den gældende Institutional Review Board og er udført i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen.
1.. Inden du begynder: Standard Precuations
Sørg for at alle prøveindsamling medarbejdere har bestået NIOSH krævede Blood Borne Patogen (BBP) Uddannelse.
- Engineering Controls
- Brug Food and Drug Administration godkendt til skarpe genstande bortskaffelse at bortskaffe brugte sterile engangssprøjte lancetter. Brug en korrekt mærket bioaffald tønde for noget andet materiale, der kommer i kontakt med evt inficeret materiale.
- Overfyld ikke affaldsbeholder. Kun fylde en affaldsbeholder til 3/4 kapacitet, før du udskifter beholderen for at forebygge skader. Der er en indikator for kompartmental fylde på hver affaldsbeholder.
- Levér kun skarpe genstande i affaldsbeholder. Brug ikke skarpe genstande beholder til enhver othendes affald.
- Bortskaffe enhver nonsharp materiale, der kommer i kontakt med potentielle BBP i en korrekt mærkede bioaffald tønde.
- Personligt beskyttelsesudstyr (PPE)
- Altid korrekt brug PPE at beskytte mod smitte fra BBP. PV anvendes under indsamlingen af DBS omfatter handsker, kitler, øjenbeskyttelse, lange bukser og lukkede tåede sko.
- Brug handsker til at håndtere blod eller noget, der har kontaktet blod eller andre potentielt infektiøse materialer (OPIMs). Handsker bør ikke være for stram eller for løs, da det kan hæmme processen med "malkning" (for at blive beskrevet senere). Bær ikke fingerringe samtidig med at indsamle blodpletter, som de kunne punktere handsken.
- Bær en kittel for at beskytte hud og tøj fra blod og OPIMs. En kittel, der er kommet i kontakt med en BBP bør vaskes i en 10% blegemiddel / vand opløsning før genbrug. Uanset eksponering, bør kittel blive vasket regelmæssigt for at holde det clean.
- Bær lukkede-tåede sko for at beskytte fødderne mod mulige kontakt med blod og OPIMs.
- Hvis det ønskes, bære beskyttelsesbriller for at beskytte mod mulige kontakt med blod og OPIMs grund splatter.
- Til renholdelse af et arbejdsområde, skal du fjerne alle PV, inden de forlader arbejdsområdet for at undgå forurening poster uden for laboratoriet området.
- Work Practice Controls
- Vask hænderne med sæbe og varmt vand i 20 sekunder før og efter fysisk kontakt med hver enkelt deltager. Brug et håndklæde til at slukke for rindende vand. Hvis en vask ikke er tilgængelig, skal du bruge en hånd sanitizer på mindst 60% alkohol.
- Uanset muligheden for at vaske hænder, bruger alkohol hånd sanitizer før anvendelse og efter fjernelse handsker. Brug nok sanitizer at dække alle overflader af begge hænder og gnid hænderne sammen indtil tør. Må ikke skylles eller hænderne tørres med et håndklæde, da dette vil reducere effekten af rensningen.
- Du må ikke spise ellerdrikke eller anvende makeup eller kontaktlinser i blodprøvetagning områder. Personlig udsættelse for BBPs kunne ske gennem disse stier, der er direkte ruter til slimhinder.
- Må ikke håndtere biologisk farligt materiale uden handsker og ikke håndtere ufarligt materiale med handsker, der tidligere har rørt biologisk farligt materiale.
- Korrekt Housekeeping
God rengøring vil fortsætte med at hjælpe med at beskytte mod udsættelse for en BBP og vil forhindre cross-forurene miljøet.- Brug virusdræbende mikrobielle desinficerende servietter til korrekt rene områder kontamineret under DBS kollektion.
- Hold biologisk eller kontamineret affald adskilt fra almindelig trash, kontaminerede materialer er dem, der har synlig blod eller OPIM på dem.
- Eksponering Respons
Hvis udsat for en BBP, reagere på følgende måde.- Vask udsatte område omgående og grundigt med sæbe og vand.Hurtig indgriben kan reducere risikoen for infektion.
- Identificere kilden og rute af eksponeringen at være i stand til at forklare situationen til feltet vejleder og / eller reagerer læge.
- Underret rådighedsvagt supervisor umiddelbart efter eksponeringen sker. Det understreges, at få støtte fra et felt vejleder til at forstå omfanget af risiko for infektion, så det kan vurderes, om øjeblikkelig lægehjælp er nødvendig. Retningslinjer i specifikke Eksponeringsstyring Planer (ECP), skal gives til alle dem, der er i fare for at blive udsat for BBP.
2. Opsætning af Indsamling Room og Materialer
- Vælg en prøve samling placering, der ikke er beregnet til at spise, såsom en breakroom, og der er fri for alt relateret projekt udstyr. Man ønsker ikke at være i et område, der er overfyldt, det er vigtigt at have let bevægelse. I det følgende beskrives, hvordan du konfigurerer den tørrede blod stedet samling (lab) område.
- Opsætning af biologisk farligt affald tønde og linje interiør med en biologisk fare affaldspose. Affaldet tønde bør være tilgængelige, mens siddende.
- Rengør indsamlingen området grundigt med desinficerende servietter eller lignende produkt. Bortskaf alt materiale, der anvendes til at rense laboratoriet område i biologisk farligt affald tønde. Bær handsker under dette trin for at beskytte huden mod skadelige kemikalier.
- Udskift handsker og oprette de resterende forsyninger indsamlingsordninger.
- Placer handsker og alkohol hånd sanitizer om indsamling bordet.
- Placer kanylebeholderen inden for rækkevidde af solfangeren stol. Kanylebeholderen bør håndteres med handsker på alle tidspunkter og derefter bortskaffes korrekt, når fuld.
- Læg alle resterende materialer, der kræves for DBS samling på en beskyttende inkontinensunderlaget i indsamlingsområdet. Medtag et filtrerpapir samling kort, et par lancetter, alkoholservietter gazetamponer, og Band-aids, men ikke for mange så området er rodet. Gørikke oprette mere end, hvad der kan bruges til hver deltager.
3. DBS Sample Cellection
Altid bære PPE (kittel, handsker, lange bukser, lukkede-tåede sko, og hvis det ønskes, sikkerhedsbriller) under indsamling og placere en beskyttende underpad (Chux) på skødet for at beskytte ens street tøj.
- Forberedelse deltageren:
- Efter opnåelse af samtykke, bede deltageren, hvis han / hun ville foretrække at bruge venstre eller højre hånd for indsamling og vælge en finger for indsamling. Undgå stærkt barkede eller beskadiget (sønderrevne) fingre og eventuelle ringmærkede fingre. Typisk lillefingeren og tommelfinger ikke er valgt for at minimere deltager smerte og fremme indsamling, hhv. Siderne af fingerspidserne anvendes som indsamlingssted for konsistens og nem samling.
- Har deltageren gnide deres hænder sammen for at varme deres hænder og stimulere blodgennemstrømningen. En hånd warmer kan anvendes, eller deltageren kan løbe deres hænder under varmt vand, hvis en vask er tilgængelig. En anden teknik til at stimulere blodgennemstrømningen ville være at have deltageren skiftevis knuge og slappe målet hånd, derefter hvile fuldstændigt før fingerspidsen.
- Rengør den valgte finger med en alkohol pad og lad det tørre helt. Gentag med en anden alkohol pad til fuldt ud at fjerne eventuelle forureninger eller hånd lotion. Fingeren skal være helt tørt, før du fortsætter med fingeren pind eller alkohol vil forurene blodprøven. Som med alle brugte indsamling materialer, straks bortskaffe spritservietter i biologisk farligt affaldsbeholder.
- Forberedelse punkturstedet på deltagerens finger:
- Fastgør deltagerens arm for at forhindre bevægelse under indsamling og til at slappe af arm og hånd muskler. Hvil deltagerens albue på kanten af bordet eller på deres skød. Hold deltagerens hånd positioned komfortabelt under hjerte niveau, og deres muskler afslappet at lette blodgennemstrømningen.
- Tag fat i valgte finger mellem tommel-og pegefinger og forsigtigt malke finger ved langsomt og fast klemme fingeren, mens du flytter forståelse fra håndfladen til fingerspids at trække blod mod fingerspidsen.
- Tryk på mikro-lancetten fast mod deltagerens finger vinkelret på fingeraftryk og aflade Lancet. Ikke punktere centrum af fingeren eller tæt neglelejet, i stedet sigte mellem disse to punkter på den ulnare side af fingeren. Umiddelbart bortskaffe den brugte lancet i affaldsbeholder.
- Indsamling blodpletterne:
- Tør den første dråbe blod væk med en steril gaze for at fjerne vævsvæske fra prøven og straks bortskaffe gaze til smittefarligt affald tønde.
- Samtidig med at deltagerens hånd under deres hjerte med en nedadgående vinkel, gently malke hånd start ved håndleddet og arbejde ned til bunden af fingeren til at producere blod. Må ikke bare presse finger, da dette vil reducere blodgennemstrømningen. Mælk fingeren, indtil et stort fald hænger fra fingerspidsen.
- Saml pletter ved hjælp af samling papir.
- Sæt forsigtigt indsamling papir under fingeren og lade dråben falde af sin egen vægt. Dette giver mulighed for indsamling af blod pletter af maksimal lydstyrke. Hvis blod puljer på filtrerpapiret, nemlig "perler", forsigtigt trykke på kortet for at tilskynde blodet til at mætte ind i papiret.
- Hvis blod er for tyktflydende eller dråber er for små til at falde af deres egen vægt, langsomt bringe samlingen papir i kontakt med bloddråben at absorbere blod væk fra fingeren via kapillarvirkning uden at røre fingeren. Hvis finger rører indsamling af papir, flytte til et andet sted på papiret som indsamling område er blevet kompromitteret. Deltagerens finger should aldrig røre filtrerpapir.
- Anbring ikke blod dråber oven på hinanden, selv hvis en blod plet ikke fylder indsamlingen cirkel.
- Lad ikke blodet løbe ned fingeren eller på fingernegl da det gør samling af store pletter vanskeligere.
- Hvis deltagerens blodpropper enhver tid i forbindelse med indsamlingen, bede om tilladelse til at spidse en anden finger, og så ren og bandage den indledende punkturstedet og starte forfra, hvis anmodningen er accepteret.
- For at forhindre koagulation, fortsætte malkning deltagerens finger at holde blodet flyder eller prøv fast tørre punktering med steril gaze for at forstyrre koageldannelse.
Bemærk: Efterfølgende finger-sticks kan være nødvendigt for et par grunde: Et koldt rum kan forårsage hurtigere koagulation, også viskositeten af deltagernes blod kan ikke være ideel, eller dårlige malketeknikker kan også påvirke blodgennemstrømningen. Hånd brænder, eller varmt rindende vand, før punkteringturen kan vende effekten af et kølerum.
- For at forhindre koagulation, fortsætte malkning deltagerens finger at holde blodet flyder eller prøv fast tørre punktering med steril gaze for at forstyrre koageldannelse.
- Når DBS er blevet opsamlet, eller hvis deltageren ikke ønsker efterfølgende finger-sticks, rengøre punkturstedet enhver uvedkommende blod.
- Bandage punkturstedet at forhindre potentiel forurening, når deltageren forlader prøvetagningen området.
- FI Kvalitetskontrol (QC) vurdering:
Efter at have afsluttet prøvetagning, vurderer prøverne for kvalitet. Sørg for pletter er 1) mindst 0.375 i diameter målt fra bagsiden af indsamlingsområdet, 2) gennemblødt gennem indsamling af papir tilstrækkeligt således at være af samme størrelse på begge sider af filterpapir, pletter, som ikke opfylder dette kriterium angiver indsamling via kontakt af fingeren til samlingen papir og sandsynligvis udtværing, 3) ikke er i kontakt med hinanden (overlappende områder af pletter er ikke analyserbart). - Afslutning af prøvetagningen
- Efter guidelines beskrevet i trin 1.1, bortskaffe eventuelle resterende forurenede indsamling materialer, herunder eventuelle genstande, der kan have været i kontakt med potentielt smittefarlige materialer.
- Stand indsamlingen papir på en beskyttende underpad at tørre. Space indsamlingsstederne kortene for at tillade god luftgennemstrømning mellem dem. Det mindste beløb af tid til at lufttørre er 15 min, fortrinsvis mindst 30 min. For at opnå maksimal luftstrøm, er det vigtigt at folde bagsiden af kortet indsamling på en måde, at det kan stå frit og give luftstrøm bag prøverne på indsamling papir.
- Med alle trin afsluttet, fjernes PPE.
- Reaktion på et emne følelse svag eller ikke godt
Selvom usandsynligt, kan en deltager bliver svimmel, uklar, eller svag under eller efter finger stick. Vær opmærksom på tegn, såsom bleghed, sved på ansigt og pande, klager over sløring vision, hængende eller flagrende øjenlåg, eller klager over kvalme. Starten af tisse symptomer er ofte pludselig, prøve samlere skal være parat til at reagere hurtigt, hvis nogen af de symptomer er synlige. Hvis nogen af disse symptomer er til stede på noget tidspunkt under proceduren, reagere i overensstemmelse med følgende procedurer.- Hvis en deltager svimmelhed, svimmel, svimmel, eller viser tegn på besvimelse, tage følgende handlinger:
- Stop proceduren.
- Pas på, at deltageren ikke falder eller bliver såret.
- Roligt berolige deltageren og om nødvendigt bede deltageren til at bøje i taljen og sætte hans / hendes hoved mellem hans / hendes ben. Hvis mobilitet er begrænset, og deltageren kan flyttes, kan et tilstødende polstret sted bruges til at hvile.
- Har deltageren hvile i 10 min.
- Genoptage proceduren, hvis deltageren samtykker til at fortsætte.
- Hvis en deltager besvimer, skal du gøre følgende:
- Stop proceduren.
- Pas på, atdeltageren ikke falder eller bliver såret.
- Har deltageren ligge på hans / hendes ryg så hurtigt som muligt med fødderne forhøjet. Deltageren vil blive bedt om at ligge ned direkte fra siddende stilling uden at stå op.
- Spørg deltageren at løsne stramtsiddende tøj.
- Har deltageren hvile i 10 min.
- Blood spot samling bør ikke fortsætte.
- Hvis deltageren ikke reagerer efter 1 min, ringe 911.
- Hvis en deltager svimmelhed, svimmel, svimmel, eller viser tegn på besvimelse, tage følgende handlinger:
- Nedbryde laboratoriet område:
Når indsamlingen af blod pletter er afsluttet, skal indsamlingen område opdeles og området dekontamineres for at sørge for, at forbipasserende vil ikke blive inficeret af BBP. Det blodtapning område, skal udstyret containere, indsamling materialer og affaldscontainere være rene af BBP. Som altid bære PPE ved håndtering potentielt infektiøse materialer.- Fjern fra indsamlingsområdet ogpakke alle forurenede materialer.
- Kassér resterende forurenet affald i bioaffaldet tønde.
- Luk kanylebeholderen og opbevar det i et område, der giver beskyttelse mod forurening. Hvis kanylebeholderen er 3/4 fuld, passende afhænde det og erstatte med en ny affaldsbeholder.
- Tør hele prøvetagningen område med virusdræbende mikrobielle desinficerende klude.
- Når alle biologisk farligt materiale er blevet afhændet, kan biohazard taske autoklaveres. Ved fjernelse af posen fra affaldet tønde være forsigtig kun berøre ydersiden af posen og forsegle posen tæt. Det er også god praksis at anvende virucid mikrobiel vådservietter til at rense det udvendige af alt udstyr for at forhindre krydskontaminering.
4.. Uddannelse til at indsamle DBS
Kontroller indtørret blod plet solfanger er certificeret af en kvalificeret person, før du udfører proceDure på patienter eller forsøgspersoner. Sørg for samlere vise respekt for deltagerne, selvtillid og færdigheder i brugen af personlige værnemidler og af blodtapning leveringer i indsamlingen af pletter af tilstrækkelig volumen, og i gennemførelsen af proceduren i en rettidig og effektiv måde, helst på under 10 min.
5.. Sample Emballage og opbevaring
- Sørg DBS prøver har tørret i mindst 15 minutter, før de sække til opbevaring, kan en mættet kort tage 30 min eller længere tilstrækkeligt tørt. Luk dækslet indsamling kortet, og sørg prøven er helt tørre for at undgå udtværing og forurener prøven.
- Tag en biologisk fare eksemplar taske og placere en tørrende pose i prøven posen. Placer DBS prøven i biohazard modellen taske. Brug altid handsker, når du håndterer DBS prøver. Lad ikke de blodprøver røre ydersiden af prøven posen.
- Placer hver prøve i sin egen biohazard prøveopsamlingssækken witha tørrende pakke. Flatten posen for at fjerne overskydende luft og derefter forsegle posen tæt. Placer sække prøve i et lager køler til transport eller midlertidig oplagring. Undgå forhøjede temperaturer.
- Fryse eller analyse DBS prøver inden for to uger indsamling, som DBS prøver kan typisk opbevares ved stuetemperatur i to uger uden væsentlig forringelse afhængig af analyt 7,2.
6.. Sample Transport og forsendelse
- Medmindre kendt for at indeholde smitstoffer, skibs tørret blod stikprøver som fritagne humane prøver i henhold til US Department of Transportation regler og i overensstemmelse med del 2, kapitel 6, § 6.3.2.3.6 af Organisationen for International Civil Luftfart (ICAO) tekniske instruktioner 8 .
- Hvis de frosne skib prøver natten på tøris med de nødvendige ekstra sikkerhedsforanstaltninger for farlige stoffer, eller med gelpaks nedfrosset til -80 ° C. Skib på mandag-onsdagat undgå tø i transit på grund af forsinkelser eller weekender / helligdage, med en bekræftelse fra den modtagende websted, de forventer og klar til at modtage og fryse prøver.
7.. Kvalitetskontrol Assessment
- Efter indsamling og før assay (helst inden frysning med henblik på at minimere antallet af fryse-tø cykler) at vurdere prøver til kvalitet.
- Medtag følgende kriterier i vurderingen af prøven kvalitet, ordentlig emballage, farvekodede tørremiddel resterende intakt (tør), mætning af pletter, størrelse af pletter, ordentlige indsamlingsmetoder, herunder pletter ikke overlappende eller smurt på kortet angiver kontakt med emnet finger.
8.. Fryser Opbevaring
Selvom nedbrydningstider afvige analyt, fryse DBS prøver inden for to uger samling for de bedste resultater. Frys prøver med tørremiddel i et laboratorium-grade fryser. Som med enhver biologisk prøve, minimere fryse-tø cycles, selv om nogle analyser i DBS prøver har ikke vist tegn på nedbrydning i op til seks fryse-tø cykler 9-11.
Representative Results
Figur 1.. Tørret blod plet prøve. En samling kort er vist med fire, gyldige indsamlede pletter i processen med tørring. Klik her for at se større billede.
Figur 2.. God og dårlig tørret blod stikprøver. Resultaterne af vellykkede (højre) og forgæves (venstre) DBS kollektion bliver vist. Klik her for at se større imalder.
Figur 3.. Managers holdninger og praksis forbundet med risiko ansat cardiometaboliske sygdom 6. Dette tal er blevet ændret fra Berkman, LF, Buxton, OM, Ertel, K. & okechukwu, C. udlejer praksis i forbindelse med arbejde-familie balance forudsige medarbejder kardiovaskulære risiko og varigheden af søvnen i forlænget pleje indstillinger. Journal of Occupational Health Psychology 115, 316-329 (2010). Medarbejdere, der udsættes for ledere med midten eller lave arbejds-familie snesevis af åbenhed og kreativitet for at hjælpe med deres ansatte arbejde og familie har brug for, har statistisk signifikant øget odds for at have to eller flere kardiovaskulære risici (aktuel ryger, fedme, forhøjet blodtryk eller hypertension, højt kolesteroltal og højt glykosyleret hæmoglobin (Hb A1C) eller diabetes diagnose). Top-og mellemledere paneler skildrer middelværdier ± standardafvigelser for total kolesterol vurderet af tørret blod plet og Hb A1C vurderet ved point of care enhed (som også kan måles pålideligt ved tørrede blodpletter). Bottom panel viser hjertekarsygdomme risiko af manager score. Analyse begrænset til sygeplejersker og andre medarbejdere, der yder direkte pleje viser, at eksponering for ledere med lav kreativitet og åbenhed i forbindelse med arbejde, familie spørgsmål kan være særligt vigtigt for disse personer (OR for lav WF score = 6,4, p = 0,01). Alle modeller kontrol for alder, køn, løn, uddannelse, race / etnicitet og arbejdsstedet. Klik her for at se større billede.
Discussion
Biomarkører er ekstremt nyttige værktøjer på tværs af flere discipliner, herunder medicin, cellebiologi, genetik, psykologi, sociologi, demografi og social epidemiologi. Inden for hver disciplin, blev tidlig fase gyldighed og pålidelighed biomarkør forskning bruges til at afdække både skjulte sygdomsrisiko og giver langsgående forudsigelse af sundhedsresultater. I disse tilfælde biomarkører, der er præcis, holdbare (dvs. de kan overleve den forsinkelse mellem prøvetagning og implementering af laboratoriet analysen at udtrække biomarkør), og alsidig (dvs. nyttigt i en række forskellige modeller) skal udfyldes.
Mens DBS samling er en forholdsvis enkel procedure, kan flere teknikker hjælpe med at maksimere mængden af indsamlede pletter. Før samling begynder, hvilket sikrer en deltagers hånd er varm, og derfor, at blodkarrene er forstørrede, vil hjælpe blodgennemstrømningen, når fingeren er punkteret. Brug hånd brænder eller har endeltager køre deres hænder under varmt vand kan hjælpe med denne proces. Malkning fingeren før indsamlingen vil trække blod til fingerspidsen og varm hånd til at hjælpe blodgennemstrømningen. Malkning er en proces, der forbedrer med praksis. Samlere skal bruge uanset hvilken teknik de finder mest behageligt og effektivt, men den mest almindelige tilgang indebærer malkning deltagerens hånd med samlerobjekt modsatte hånd. Denne metode vil give solfangeren tommelfinger til at arbejde dybt ind i deltagerens håndflade, mens den anden hånd kan stabilisere deltagerens håndled. Som et eksempel, hvis man var indsamling af blod fra en finger på deltagerens venstre hånd, vil solfangeren stabilisere deltagers håndled med venstre hånd og mælk med deres højre hånd. Almindelige fejl, mens malkningen ikke omfatter brug af et fast greb, trækker huden over hånden snarere arbejde ind i musklerne til at trække blod mod fingerspids. Det er også vigtigt at undgå pinChing fingeren med malkningen hånden eller stramt gribende deltagerens håndled med nonmilking hånd, som begge hindre blodgennemstrømning.
Ved punktering fingeren, gør punkteringen så dybt som muligt ved et hårdt tryk lancetten ind i fingeren før udledning. En overfladisk punktering resulterer i mindre blodgennemstrømning og hurtigere størkning. Efter at punktere fingeren, der arbejder hurtigt er nøglen. Tynd blod fører til lettere indsamling og større pletter. Efter punktering, blodet bliver mere og mere tyktflydende indtil koagulation. Jo mindre tid, der kræves til at indsamle blod pletter på kortet jo større er deres volumen.
Ideelt deltagerens blod vil være tynd nok, at dråber vil falde af deres egen vægt, men dette vil ikke være tilfældet for alle deltagere, som nogle folks blod er tykkere eller blodpropper hurtigere end andre. Hvis blod er for tyk til at falde fra fingeren skal filtret kort bringes til blodet for indsamling. When bringe kortet til blodet, er det vigtigt at holde kortet i kontakt med faldet, mens den hænger i fingeren, så længe det er muligt, i stedet for blot at duppe blodet til kortet. Dette vil hjælpe pull blod fra fingeren til at maksimere størrelsen af stedet. Denne teknik kræver konstant hænder til at opretholde kontakt mellem blodet og kortet. Brug begge hænder til en stabilisering af deltagerne hånd og en til at holde kortet, og holde begge hænder i kontakt med hinanden bidrager til at stabilisere kortet og blod sammen.
Avancerede forskningsområder, såsom vurdering cardiometaboliske risiko, har længe påberåbes biomarkører såsom C-reaktivt protein (CRP), insulin, og glykosyleret hæmoglobin (HbA1c) for tidlig påvisning af risici og forebyggende indsats samt biomarkører for "hårde endpoints" for hjerte-kar-sygdom (CVD) risiko-og CVD-associeret dødelighed 12. Klinisk epidemiologi ofte vurderer biomarkører til prospectively forudsige cardiometaboliske risikofaktorer resultater, såsom hjertesygdomme og type II diabetes. Måske den mest udbredte af alle biomarkører Framingham risiko score, et kompositmateriale, der omfatter blodtryk, HDL-kolesterol og det samlede kolesterol niveauer, der har vist anvendelighed til forudsigelse af CVD 13. Imidlertid har Framingham score oplevet nogle tekniske kontroverser, og har begrænsninger i undersøgelser fokuseret på at knytte sociale og miljømæssige faktorer for sundheden, hvilket tyder på behovet for mere præcise og specifikke biomarkører relateret til hjerte-kar-forskning.
Der er en række af kommercielt tilgængelige kits anvendelse af ELISA eller tilsvarende teknikker til rådighed for analysen af DBS prøver. Nødvendigt for analysen af DBS prøver er brugen af specifikke og optimerede elueringstrin skridt til at bringe de tørrede prøver i opløsning 2. Dette er en ekspanderende forskningsområde som assays for flere analytter i øjeblikket ved at blive udviklet 1. Blandt the analyser allerede validerede og blive udbredt er kolesterol 2, CRP 10,14,15, IgE16 EBV 9,15, leptin 17, og cyotkines 18. Der er en række laboratorier, der er specialiseret i analyse af DBS, herunder University of Washington Institut for Laboratoriemedicin (UW Lab Med) biomarkør Laboratory (Instruktør: Mark Wener).
I betragtning af at et panel af biomarkører, snarere end en enlig biomarkør, er mest anvendelig i områderne kardiovaskulære og diabetes forskning, skal overvejes sammen med en række sammenhængsbetingede faktorer for at maksimere deres nytte biomarkører. Biomarkør forskning kan være dyrt dog, både økonomisk og i tid til dataindsamling. Således, mens det er vigtigt at vælge biomarkører, der er præcis, holdbar og alsidig, arbejde og familie biomarkør forskning må være rodfæstet i praktisk ved at vælge biomarkører, som er billige, passende, og kan afhentes hurtigt with lethed. Desuden praktiske overvejelser ofte resultere i en manglende evne til samtidig maksimere pris, kvalitet og hastighed inden for en procedure. Heri ligger de næste skridt i sundhed biomarkør forskning inden for mark-og befolkningsundersøgelser. Feltet af biomarkør forskning er i øjeblikket i en periode med voldsom vækst, men det meste af arbejdet er endnu ikke kommet.
Disclosures
Orfeu Buxton har modtaget en investigator-initierede bevilling fra Sepracor Inc (nu Sunovion, ESRC-0977, ClinicalTrials.gov Identifier NCT00900159), fungerer som konsulent og ekspert vidne for Dinsmore LLC, på Scientific Advisory Board of Matsutani Amerika, og modtog rådgivning gebyrer fra Wake Forest University Medical Center.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af arbejde, familie og Health Network (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), som er finansieret af en samarbejdsaftale gennem National Institutes of Health og Centers for Disease Control og Forebyggelse: Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health og menneskelig udvikling (Grant # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), National Institute on Aging (Grant # U01AG027669), Kontoret for Behavioral and Science Sciences Research, National Heart, Lung og Blood Institute (R01HL107240), og National Institute for Occupational Sikkerhed og Sundhed (Grant # U01OH008788, U01HD059773). Tilskud fra William T. Grant Foundation, Alfred P Sloan Foundation, og administrationen for Børn og Familier har givet yderligere finansiering. Indholdet i denne publikation er udelukkende forfatternes ansvar og repræsenterer ikke nødvendigvis de officielle synspunkter disse institutter og kontorer.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Asepti II Microbial Wipes | EcoLab | D12330345 | 3rd party shipping |
| Biohazard waste bags | VWR | 14220-092 | High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil |
| Biohazard waste barrel | Tyco | 58578-092 | 8 g Slide lid |
| Sharps Container | BD Medical | BD305487 | 1.4 qt |
| Chux | VWR | 82020-845 | Absorbent bench underpads |
| Gloves | VWR | XSmall: 89038-267 | Powder-free, latex-free nitrile gloves |
| Small: 89038-268 | |||
| Medium: 89038-270 | |||
| Large: 89038-272 | |||
| XLarge: 89038-274 | |||
| Hand sanitizer (e.g. Purell) | Johnson Johnson | 89040-210 | 3rd party shipping |
| Alcohol wipes | Webcol and Curity | 82003-856 | Prep pads |
| Gauze | Versalon | 82004-826 | Nonwoven sponges |
| Band-Aids | Nutramax Stat Strips | 15431-475 | |
| Lancets | Owen Mumford | 82028-060 | 3.0 mm, 21 G |
| Protein paper collection cards | Whatman | Custom-build | 903 Protein Saver Collection paper |
| Desiccant | VWR | 61161-319 | Humidity sponges |
| Specimen bags | Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip | 56766-370 | 6 in x 9 in |
| Specimen storage cooler | Igloo | Playmate Mini | 4 qt; direct from manufacturer |
References
- McDade, T. W., Williams, S., Snodgrass, J. J. What a drop can do: dried blood spots as a minimally invasive method for integrating biomarkers into population-based research. Demography. 44, 899-925 (2007).
- Kirschbaum, C., Read, G. F., Hellhammer, D. H. Assessment of hormone and drugs in saliva in biobehavioral research. , Hogrefe & Huber Publishers. (1992).
- Piazza, J. R., Almeida, D. M., Dmitrieva, N. O., Klein, L. C. Frontiers in the use of biomarkers of health in research on stress and aging. J. Gerontol. Series B Psychol. Sci. Soc. Sci. 65, 513-525 (2010).
- Smyth, J. M. Individual differences in the diurnal cycle of cortisol. Psychoneuroendocrinology. 22, 89-105 (1997).
- Berkman, L. F., Buxton, O. M., Ertel, K., Okechukwu, C. Manager's practices related to work-family balance predict employee cardiovascular risk and sleep duration in extended care settings. J. Occup. Health Psychol. 115, 316-329 (2010).
- Buxton, O. M., Malarick, K., Wang, W., Seeman, T. Changes in dried blood spot Hb A1c with varied postcollection conditions. Clin. Chem. 55, 1034-1036 (2009).
- International Civil Aviation Organization. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air. , (2010).
- McDade, T. W. Epstein-Barr virus antibodies in whole blood spots: a minimally invasive method for assessing an aspect of cell-mediated immunity. Psychosom. Med. 62, 560-567 (2000).
- McDade, T. W., Burhop, J., Dohnal, J. High-sensitivity enzyme immunoassay for C-reactive protein in dried blood spots. Clin. Chem. 50, 652-654 (2004).
- McDade, T. W., Shell-Duncan, B. Whole blood collected on filter paper provides a minimally invasive method for assessing human transferrin receptor level. J. Nutr. 132, 3760-3763 (2002).
- Gerszten, R. E., Wang, T. J. The search for new cardiovascular biomarkers. Nature. 451, 949-952 (2008).
- D'Agostino, R. B., Grundy, S., Sullivan, L. M., Wilson, P. Validation of the Framingham coronary heart disease prediction scores: results of a multiple ethnic groups investigation. J. Am. Med. Assoc. 286, 180-187 (2001).
- McDade, T. W., Rutehrford, J., Adair, L., Kuzawa, C. W. Early origins of inflammation: microbial exposures in infancy predict lower levels of C-reactive protein in adulthood. Proc. R Soc. B.. , (2009).
- McDade, T. W. Measuring Stress in Humans. A Practical Guide for the Field. Ice, G. H., James, G. D. , Cambridge University Press. 181-207 (2007).
- Tanner, S., McDade, T. W. Enzyme immunoassay for total immunoglobulin E in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. 19, 440-442 (2007).
- Miller, A. A., Sharrock, K. C., McDade, T. W. Measurement of leptin in dried blood spot samples. Am. J. Hum. Biol. 18, 857-860 (2006).
- Miller, E. M., McDade, T. W. A highly sensitive immunoassay for interleukin-6 in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. , (2012).
