Summary
Biomarkers zijn direct gemeten biologische indicatoren van ziekte of gezondheid. Van de bevolking en de sociale wetenschappen, moeten biomarkers te zijn gemakkelijk te verkrijgen, het vervoer, en te analyseren. Gedroogde Blood Spot (DBS) collectie voldoet aan deze behoefte, kunnen worden verzameld in het veld met hoge respons en voor een verscheidenheid van biomarkers geanalyseerd.
Abstract
Biomarkers zijn direct gemeten biologische indicatoren van ziekte, gezondheid, vorderingen of andere biologische informatie. Van de bevolking en de sociale wetenschappen, moeten biomarkers te zijn gemakkelijk te verkrijgen, het vervoer, en te analyseren. Gedroogde bloedvlekken in deze behoefte, en kunnen worden verzameld in het veld met hoge respons. Deze elementen zijn met name belangrijk in longitudinale studie ontwerpen met inbegrip van interventies waar verloop is van cruciaal belang om te voorkomen, en een hoge respons te vergroten de interpretatie van de resultaten. Gedroogde Blood Spot monstername is eenvoudig, snel, relatief pijnloos, minder invasief dan venapunctie, en vereist een minimale veld opslag eisen (dwz monsters hoeven niet onmiddellijk ingevroren te zijn en kan worden opgeslagen voor een lange tijd in een stabiele omgeving vriezer voordat assay). De monsters kunnen worden geanalyseerd voor een verscheidenheid van verschillende analyten, zoals cholesterol, C-reactief proteïne, geglycosyleerd hemoglobine, talrijke cytokinen en oTher analyten, en verstrekt genetisch materiaal. DBS collectie wordt afgeschilderd als toegepast in verschillende recente studies.
Introduction
Biomarkers kunnen waardevolle informatie over biologische processen, variërend van normaal tot pathogene die kunnen bijdragen aan klinisch aantoonbare ziekte 1 bieden. In het onderzoek instellingen, gedroogd bloed vlekken (DBS) worden steeds de voorkeur aan venapunctie als een methode voor het verzamelen van biomarkers in volbloed. DBS collectie is eenvoudig, relatief pijnloos, minder invasief dan venapunctie en vereist minimale opslagvereisten (bijvoorbeeld monsters hoeven niet onmiddellijk ingevroren en worden opgeslagen voor een lange tijd in een vriezer stabiele omgeving voor assay). DBS monsters kunnen worden getest op een verscheidenheid van verschillende analyten, zoals cholesterol, C-reactief proteïne, geglycosyleerd hemoglobine, Epstein-Barr virus antilichamen en verschillende cytokinen.
Venapunctie is al lange tijd de gouden standaard voor het verzamelen van biomarkers in het bloed. Echter, het verkrijgen, opslaan en verzenden van bloedmonsters nodig adherence een aantal protocollen en gezondheid codes, die niet mogelijk zijn in bepaalde onderzoeksprotocollen. Phlebotomists moet officieel worden gecertificeerd voor venapunctie, terwijl DBS bemonstering procedures zijn eenvoudiger en niet het officiële certificering niet nodig. Veneuze bloedafname vereist ook meer apparatuur dan doet DBS collectie (dwz naalden, buizen, tourniquets), en meer post-collectie inspanning. Venapunctie monsters moeten worden verwerkt (bijv. serum of plasma uit het bloedmonster via centrifugatie of staan bij kamertemperatuur gedurende een bepaalde periode) en tussen -20 ° C en -70 ° C ingevroren onmiddellijk om de afbraak van analyten voorkomen terwijl DBS monsters gewoon moet worden aan de lucht gedroogd en vervolgens worden opgeslagen bij kamertemperatuur voor een week of meer, afhankelijk van de analyt, vóór de overdracht naar een vriezer 2. DBS monsters goedkoper te verzamelen dan venapunctie monsters om redenen hierboven beschreven. DBS ook monstersnemen minder ruimte in, waardoor transport en opslag kosten voorafgaand aan het onderzoek.
Het gebruik van speeksel als biomarker is belangrijk geworden in de bio-studies. Speeksel biedt een eenvoudige, niet-invasieve methode om biomarkers te verzamelen en is uitgegroeid tot de standaard voor het veldwerk gericht op het meten van cortisol of cotinine 3-5. Urine is een ander monster dat niet-invasief kan worden verzameld en kan worden gebruikt populatieniveau studies testen van melatonine of toxicologie. Terwijl zowel urine en speeksel bieden rechttoe rechtaan procedures collectie die kunnen worden ingevuld door de deelnemers zelf zijn, kunnen niet alle analyten worden gemeten in deze media.
DBS bieden een eenvoudige, kosteneffectieve, alternatief voor venapunctie en zijn een steeds geïmplementeerd onderzoeksinstrument in het veld en de bevolking bestudeert 6.
Protocol
Het volgende protocol is goedgekeurd door de van toepassing zijnde Institutional Review Board en werd uitgevoerd in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki.
1. Alvorens te beginnen met: Standard Precuations
Zorg ervoor dat alle monstername medewerkers zijn geslaagd voor de NIOSH vereiste Blood Borne Pathogen (BBP) Training.
- Technische maatregelen
- Gebruik Food and Drug Administration goedgekeurd slijpsel afvalcontainers te ontdoen van gebruikte steriele, voor eenmalig gebruik lancetten. Gebruik een correct geëtiketteerd biologisch afval vat voor elk ander materiaal dat in contact komt met mogelijk besmet materiaal.
- Laat de naaldencontainer niet te vol. Slechts een naaldencontainer vullen tot 3/4 capaciteit voordat de container te vervangen om letsel te voorkomen. Er is een indicator voor compartimentele volheid op elke naaldhouder.
- Alleen opruimen slijpsel in de naaldencontainer. Laat de naaldencontainer niet voor een ot gebruikenhaar afval.
- Vervreemding van nonsharp materiaal dat in contact komt met potentiële BBP in een gemerkte biologisch afval vat.
- Persoonlijke beschermingsmiddelen (PBM)
- Altijd goed te gebruiken beschermingsmiddelen die bescherming bieden tegen infectie van BBP. PBM die bij het verzamelen van DBS omvatten handschoenen, laboratorium jassen, oogbescherming, lange broek en gesloten-toed schoenen.
- Draag handschoenen om bloed of iets dat bloed of andere potentieel infectieuze materialen (OPIMs) heeft contact hanteren. Handschoenen moeten niet te strak of te los, omdat dit het proces van "melken" (later te beschrijven) kunnen belemmeren. Draag geen ringen, terwijl het verzamelen van bloed vlekken als ze de handschoen kon doorboren.
- Draag een laboratoriumjas aan huid en kleding van bloed en OPIMs beschermen. Een laboratoriumjas die in contact is gekomen met een BBP moet gewassen worden in een 10% bleekwater / wateroplossing voorafgaand aan hergebruik. Ongeacht de blootstelling, dient de laboratoriumjas regelmatig gewassen te houden cleunen.
- Draag gesloten toed schoenen aan de voeten te beschermen tegen mogelijk contact met bloed en OPIMs.
- Indien gewenst, draag een veiligheidsbril ter bescherming tegen mogelijke contact met bloed en OPIMs vanwege splatter.
- Om de netheid van een werkruimte te behouden, verwijder alle PPE voor het verlaten van de werkplek te voorkomen dat besmetting van items buiten het lab omgeving.
- Work Practice Controls
- Handen wassen met warm water en zeep gedurende 20 seconden voor en na fysiek contact met elke deelnemer. Gebruik een handdoek om uit te schakelen het stromend water. Als een wastafel niet beschikbaar is, gebruik dan een handdesinfecterend van ten minste 60% alcohol.
- Ongeacht de gelegenheid om handen te wassen, gebruik van alcohol handdesinfecterend voor het aanbrengen en na het uittrekken van handschoenen. Gebruik voldoende ontsmettingsmiddel op alle oppervlakken van beide handen te bedekken en wrijf de handen samen tot het droog is. Niet afspoelen of afvegen handen droog met een handdoek, omdat dit de effectiviteit van het ontsmettingsmiddel verminderen.
- Niet eten ofdrinken of make-up of contactlenzen gelden bloedafname gebieden. Persoonlijke blootstelling aan BBPs kan optreden door deze paden die directe routes naar de slijmvliezen zijn.
- Heeft biologisch gevaarlijk materiaal niet verwerken zonder handschoenen en behandelen geen ongevaarlijk materiaal met handschoenen die eerder hebben aangeraakt biologisch gevaarlijk materiaal.
- Proper Schoonmaak
Good housekeeping zal blijven helpen bij de bescherming tegen blootstelling aan een BBP en wordt voorkomen dat cross-besmetting van het milieu.- Gebruik virusdodend microbiële desinfecterende doekjes om goed schone gebieden die tijdens DBS collectie.
- Houd biologisch gevaarlijk of besmet afval gescheiden van het gewone afval, verontreinigde materialen zijn die zichtbaar bloed of OPIM hebben op hen.
- Exposure Response
Indien blootgesteld aan een BBP reageren op de volgende wijze.- Was het blootgestelde gebied onmiddellijk en grondig met water en zeep.Snelle actie kan het risico van infectie.
- Identificeer de bron en route van de blootstelling kunnen de situatie uit te leggen van het veld promotor en / of de reagerende arts.
- Houd de toezichthouder op afroep direct na de blootstelling plaatsvindt. Benadrukt wordt om steun te krijgen uit een veld supervisor om het risico op infectie te begrijpen zodat het kan worden beoordeeld of onmiddellijke medische verzorging nodig. Vastgelegd in specifieke belichting Plans (ECP) vastgestelde richtsnoeren moeten worden verstrekt aan al diegenen die in gevaar worden blootgesteld aan BBP.
2. Setup van Collection Room en Materials
- Selecteer een sample collectie locatie die niet bestemd is voor het eten, zoals een breakroom, en die vrij is van alle niet-verbonden project apparatuur. Men wil niet te worden in een gebied dat druk is, is het belangrijk om meer bewegingsvrijheid hebben. Hieronder wordt beschreven hoe u de gedroogde bloed-spot collectie (lab) gebied.
- Stel de biologisch afval vat en lijn het interieur met een biologisch gevaarlijk afval zak. Het afval vat moet toegankelijk zijn zittend.
- Reinig de collectie gebied grondig met desinfecterende doekjes of soortgelijk product. Gooi al het materiaal gebruikt om het lab gebied in het biologisch afval vat te reinigen. Draag handschoenen tijdens deze stap om de huid te beschermen tegen blootstelling aan schadelijke chemische stoffen.
- Vervang handschoenen en het opzetten van de resterende collectie benodigdheden.
- Plaats handschoenen en alcohol handdesinfecterend op de collectie tafel.
- Plaats de naaldencontainer binnen het bereik van de stoel van de collector's. De naaldencontainer moet met handschoenen worden behandeld ten alle tijden en dan de juiste wijze wanneer vol.
- Plaats alle overige materialen die nodig zijn voor DBS collectie op een beschermende onderlegger in het betrokken gebied. Onder andere een papieren filter collectie kaart, een paar lancetten, alcohol pads, gaasjes en pleisters, maar niet te veel, zodat het gebied is rommelig. Doenniet meer dan wat kan worden gebruikt voor elke deelnemer opstelling.
3. DBS Sample Cellection
Draag altijd PPE (laboratoriumjas, handschoenen, lange broek, gesloten toed schoenen en indien gewenst, veiligheidsbril) tijdens het verzamelen en plaatsen van een beschermende onderlegger (chux) op schoot om je gewone kleding te beschermen.
- Voorbereiden van de deelnemer:
- Na het verkrijgen van toestemming, vragen de deelnemer of hij / zij er de voorkeur aan de linker-of rechterhand voor het verzamelen gebruiken en selecteer een vinger voor het verzamelen. Vermijd zwaar eeltige of beschadigd (gescheurd) vingers en alle geringde vingers. Typisch de pink en de duim zijn niet zo gekozen dat deelnemer pijn respectievelijk een minimum te beperken en het verzamelen vergemakkelijken. De zijkanten van de vingertoppen worden gebruikt als de verzamelplaats voor de consistentie en het gemak van de collectie.
- Hebben de deelnemer wrijven hun handen in elkaar om op te warmen hun handen en stimuleren de bloedsomloop. Een hand warmer kan worden gebruikt, of de deelnemer kunnen hun handen draaien onder warm water als een gootsteen beschikbaar is. Een andere techniek om de doorbloeding te stimuleren zou zijn om de deelnemer afwisselend balde en ontspannen de doelgroep hand, dan rust volledig voorafgaand aan de vingerprik.
- Maak de geselecteerde vinger met een doekje met alcohol en laat het volledig drogen. Herhaal dit met een tweede alcohol pad om eventuele verontreinigingen of handlotions volledig te verwijderen. De vinger moet volledig droog zijn voordat u verder gaat met de vinger stick of de alcohol zal het bloedmonster besmetten. Zoals bij alle gebruikte collectie materialen, onmiddellijk verwijderen van de alcohol doekjes in de biologisch afval container.
- Het voorbereiden van de prikplaats op de vinger van de deelnemer:
- Beveilig arm van de deelnemer om beweging tijdens het verzamelen te voorkomen en om de arm-en handspieren te ontspannen. Rest elleboog van de deelnemer aan de rand van de tafel of op schoot. Houd de deelnemer de hand positioned moeiteloos tot onder het niveau van hart en hun spieren ontspannen om de bloedstroom te bevorderen.
- Pak de gekozen vinger tussen duim en wijsvinger en voorzichtig melken de vinger door langzaam en stevig knijpen de vinger tijdens het verplaatsen van de greep van palm naar vingertop om het bloed naar de vingertop te trekken.
- Druk op de micro-lancet stevig tegen de vinger van de deelnemer loodrecht op de vingerafdruk en ontlaad de lancet. Niet doorboren het midden van de vinger of nabij het nagelbed, maar richten tussen deze twee punten, aan de ulnaire zijde van de vinger. Onmiddellijk Gooi de gebruikte lancet in de naaldencontainer.
- Het verzamelen van de bloedvlekken:
- Veeg de eerste druppel bloed weg met een steriel gaasje om het weefselvocht uit het monster te verwijderen en direct afvoeren van het gaas in de biologisch gevaarlijk afval vat.
- Met behoud van de hand van de deelnemer onder hun hart met een neerwaartse hoek, gentgevoerd melk hand vanaf de pols en werk naar beneden naar de basis van de vinger bloed produceren. Niet alleen knijp de vinger, omdat dit de bloedstroom zal verminderen. Melk de vinger tot een grote daling is opknoping van de vingertop.
- Verzamel plekken met de inzameling van papier.
- Plaatst zorgvuldig de collectie papier onder de vinger en laat de druppel vallen van zijn eigen gewicht. Dit maakt inzameling van bloed vlekken van het maximale volume. Als er bloed zwembaden op het filterpapier, dwz "kralen", tikt u voorzichtig tegen de kaart om bloed aan te moedigen om te verzadigen in het papier.
- Als het bloed te stroperig of druppels zijn te klein om te vallen van hun eigen gewicht, breng langzaam de collectie papier in contact komt met de bloeddruppel om het bloed weg van de vinger te absorberen via capillaire werking zonder de vinger aan te raken. Als de vinger raakt het verzamelen papier naar een andere plek op het papier dat verzamelgebied is aangetast. De deelnemer vinger should nooit het filterpapier raken.
- Plaats geen bloed druppels op de top van elkaar, zelfs als een bloedvlek de collectie cirkel niet vult.
- Laat je niet door het bloed run down de vinger of op de nagel, dit maakt verzameling van grote vlekken moeilijker.
- Als er bloed van de deelnemer stolt elk moment tijdens het incassotraject, toestemming vragen om een andere vinger te prikken, daarna schoon en bandage de initiële prikplaats en opnieuw beginnen als het verzoek wordt aanvaard.
- Om stolling te voorkomen, blijven melken vinger van de deelnemer aan het bloed stroomt houden of probeer stevig schoonvegen van de punctie met een steriel gaasje om stolselvorming te verstoren.
Opmerking: Latere vinger-sticks kan nodig zijn om een paar redenen: Een koude kamer kan snellere stolling veroorzaken, ook de viscositeit van het bloed van de deelnemers misschien niet ideaal, of slechte melktechnieken kan ook gevolgen doorbloeding. Hand warmers, of warm stromend water, voorafgaand aan punc gebruikttuur kan het effect van een koude kamer te keren.
- Om stolling te voorkomen, blijven melken vinger van de deelnemer aan het bloed stroomt houden of probeer stevig schoonvegen van de punctie met een steriel gaasje om stolselvorming te verstoren.
- Zodra de DBS zijn verzameld, of als de deelnemer niet wil daaropvolgende vinger-sticks, het reinigen van de prikplaats van een vreemde bloed.
- Bandage de prikplaats om mogelijke besmetting zodra de deelnemer verlaat de monstername gebied te voorkomen.
- FI Quality Control (QC) evaluatie:
Na het afronden van monstername, beoordeelt de monsters voor de kwaliteit. Zorg plekken zijn 1) ten minste 0.375 in diameter, gemeten vanaf de achterzijde van het betrokken gebied, 2) voldoende doorweekt het verzamelen papier teneinde van vergelijkbare grootte aan beide zijden van het filterpapier, vlekken niet aan dit criterium aangeven collectie via contact van de vinger het verzamelen papier en waarschijnlijk vegen, 3) niet in contact met elkaar (overlappende gebieden vlekken niet analyseerbaar). - Het invullen van de monstername
- Na guivendien in stap 1.1 beschreven, gooi dan alle resterende verontreinigde collectie materialen, met inbegrip van alle onderdelen die in contact komen met potentieel infectieus materiaal kan geweest zijn.
- Staan de collectie papier op een beschermende onderlegger te drogen. Ruimte de collectie kaarten om een goede luchtstroom tussen hen in staat. De minimale tijd drogen is 15 minuten, bij voorkeur tenminste 30 minuten. Om maximale luchtstroom toestaan, is het belangrijk om de achterkant van de inzamelingskaart vouwen op een manier dat hij vrij kan staan en zorgen luchtstroom achter de monsters aan de collectie papier.
- Met alle stappen voltooid, verwijdert PPE.
- Reactie op een onderwerp gevoel flauw of niet goed
Hoewel onwaarschijnlijk, kan een deelnemer duizelig, licht in het hoofd, of flauw te worden tijdens of na de vingerprik. Wees alert op tekenen zoals bleekheid, transpiratie op het gezicht en voorhoofd, klachten van het zicht vertroebelt, hangende of fladderen oogleden, of klachten van misselijkheid. Het begin van de teze symptomen is vaak plotselinge; monsterverzamelaars moet bereid zijn om snel te reageren als een van de symptomen zichtbaar zijn. Als een van deze symptomen aanwezig zijn op enig moment tijdens de procedure, reageren volgens de volgende procedures.- Indien een deelnemer zwak voelt, licht in het hoofd, duizelig, of toont geen tekenen van flauwvallen, de volgende maatregelen nemen:
- Stop de procedure.
- Zorg ervoor dat de deelnemer niet vallen en zwaar gewond.
- Rustig geruststellen de deelnemer en, indien nodig, vragen de deelnemer om te buigen in de taille en legde zijn / haar hoofd tussen zijn / haar benen. Als mobiliteit is beperkt en de deelnemer kan worden bewogen, kan een aangrenzende kussens locatie worden gebruikt om te rusten.
- Hebben gedurende 10 minuten de deelnemer rust.
- Hervat de procedure als de deelnemer toestemming om verder te gaan.
- Indien een deelnemer flauwvalt, neem dan de volgende maatregelen:
- Stop de procedure.
- Zorg ervoor datde deelnemer niet vallen en zwaar gewond.
- Heeft de deelnemer liggen op zijn / haar rug zo snel mogelijk met de voeten verhoogd. De deelnemer wordt geïnstrueerd om direct vanuit zittende positie liggen zonder opstaan.
- Vraag de deelnemer aan een strakke kleding los te maken.
- Hebben gedurende 10 minuten de deelnemer rust.
- Bloedvlek collectie mag niet doorgaan.
- Indien de deelnemer niet reageert na 1 min, bel 911.
- Indien een deelnemer zwak voelt, licht in het hoofd, duizelig, of toont geen tekenen van flauwvallen, de volgende maatregelen nemen:
- Het afbreken van het lab gebied:
Zodra de inzameling van bloed vlekken is voltooid, moet het betrokken gebied worden afgebroken en het gebied ontsmet om bepaalde dat voorbijgangers te maken zal niet worden geïnfecteerd door BBP. De bloedafname gebied, moet de apparatuur containers, collectie materialen, en afvalcontainers schoon van BBP zijn. Zoals altijd, draag PPE bij het hanteren van potentieel infectieus materiaal.- Haal ze uit de collectie gebied eninpakken alle onbesmette materialen.
- Gooi de resterende verontreinigde afval in de GFT vat.
- Sluit de naaldencontainer en bewaar het op een gebied dat bescherming biedt tegen verontreiniging zorgt. Als de naaldencontainer is 3/4 vol, adequaat afvoeren en vervangen door een nieuwe naaldcontainer.
- Veeg het gehele monster collectie met virusdodend microbiële desinfecterende doekjes.
- Zodra alle biologisch gevaarlijk materiaal is verwijderd, kan het biohazard zak worden geautoclaveerd. Bij het verwijderen van de zak uit het afval vat, wees voorzichtig om alleen de buitenkant van de tas te raken en om de zak goed af. Het is ook een goede gewoonte om te gebruiken virusdodend microbiële doekjes om de buitenkant van alle apparatuur schoon te maken om kruisbesmetting te voorkomen.
4. Trainen te verzamelen DBS
Controleer elke gedroogde bloedvlek collector is gecertificeerd door een gekwalificeerd persoon voor het uitvoeren van de procedureDure op patiënten of proefpersonen. Zorgen voor verzamelaars tonen respect voor de deelnemers, vertrouwen en vaardigheid in het gebruik van PBM en bloedafname, in de collectie van plekjes van voldoende volume, en de voltooiing van de procedure in een tijdige en efficiënte manier, idealiter in minder dan 10 minuten.
5. Monster Verpakking en opslag
- Zorgen DBS monsters zijn gedroogd gedurende minimaal 15 minuten voordat ze worden verpakt voor opslag, kan een verzadigde kaart 30 min of langer adequaat droog te nemen. Sluit de collectie klepje, zodat het monster volledig droog is om te voorkomen dat vlekken en besmetting van het monster.
- Neem een biologisch monster zak en zet een vochtabsorberend zakje in het monster zak. Plaats de DBS monster in de biologisch monster zak. Draag altijd handschoenen bij het hanteren van DBS monsters. Laat de bloedmonsters aan de buitenkant van de zak monster aanraakt.
- Plaats elk monster in zijn eigen biologisch monster zak witha droogmiddel pakket. Vlak de zak om overtollige lucht te verwijderen en vervolgens sluit de zak goed. Plaats de zakken monster in een opslag koeler voor transport of tijdelijke opslag. Vermijd verhoogde temperaturen.
- Freeze of assay DBS monsters binnen twee weken na inzameling, DBS monsters gewoonlijk worden bewaard bij kamertemperatuur gedurende twee weken zonder significante afbraak afhankelijk analyt 7,2.
6. Sample Transport en Verzending
- Tenzij bekend om infectieus materiaal bevatten, schip opgedroogde bloed steekproefmonsters vrijgesteld menselijke specimens onder US Department of Transportation voorschriften en in overeenstemming met deel 2, hoofdstuk 6, § 6.3.2.3.6 van de International Civil Aviation Organization (ICAO) Technische Instructies 8 .
- Indien bevroren, schip monsters 's nachts op droog ijs met de nodige extra voorzorgsmaatregelen voor gevaarlijke stoffen, of met gelpaks tot -80 ° C ingevroren Schip op maandag-woensdagom dooi in het vervoer te voorkomen als gevolg van vertragingen of in het weekend / feestdagen, met bevestiging van de ontvangende site die ze verwachten en klaar om monsters te ontvangen en te bevriezen.
7. Quality Control Assessment
- Na inzameling en vóór assay (bij voorkeur voor het invriezen om het aantal vries-dooi cycli minimaliseren) beoordeelt monsters voor kwaliteit.
- Onder meer de volgende criteria bij de beoordeling van de kwaliteit van het monster, de juiste verpakking, kleurgecodeerde droogmiddel resterende intacte (droog), verzadiging van vlekken, grootte van vlekken, correcte inning methoden, inclusief plekken niet overlappende of gesmeerd op kaart aangeeft contact met onderwerp vinger.
8. Vriezer Opslag
Hoewel degradatie tijden verschillen te analyseren, te bevriezen DBS monsters binnen twee weken van de collectie voor de beste resultaten. Freeze monsters met droogmiddel in een laboratorium-grade vriezer. Zoals bij elk biologisch monster, minimaliseren vries-dooi cycles, hoewel sommige assays DBS monsters geen bewijs van afbraak toont in maximaal zes vries-dooi cycli 9-11.
Representative Results
Figuur 1. Gedroogd bloed steekproefmetingen. Een collectie kaart wordt getoond met vier, geldig verzamelde plekken in het proces van drogen. Klik hier voor grotere afbeelding.
Figuur 2. Goede en slechte opgedroogde bloed steekproefmonsters. Resultaten van succesvolle (rechts) en mislukte (links) DBS collectie worden getoond. Klik hier om een grotere im bekijkenleeftijd.
Figuur 3. Attitudes en praktijken in verband met de werknemer cardiometabolic ziekterisico 6 Managers '. Is dit cijfer aangepast is Berkman, LF, Buxton, OM, Ertel, K. en Okechukwu, praktijken C. Manager met betrekking tot balans-familie werken voorspellen werknemer cardiovasculaire risico en slaapduur in de uitgebreide zorg-instellingen. Journal of Occupational Health Psychology 115, 316-329 (2010). Werknemers blootgesteld aan managers met mid of lage werk-gezin scores van openheid en creativiteit voor het helpen met het werk van hun medewerkers en familie behoefte, hebben statistisch significant verhoogde kans van het hebben van twee of meer cardiovasculaire risico's (huidige roker, overgewicht, hoge bloeddruk of hypertension, hoge cholesterol en hoge geglycosyleerd hemoglobine (Hb A1C) of diabetes diagnose). Top-en middenkader panelen schilderen gemiddelde waarden ± standaard deviaties voor totale cholesterol beoordeeld door gedroogde bloedvlek en Hb A1C beoordeeld door point of care-apparaat (die ook op betrouwbare wijze kan worden gemeten door opgedroogd bloed vlekken). Onderste paneel toont risico op cardiovasculaire ziekten door manager score. Analyse beperkt tot de verpleegkundigen en andere medewerkers die directe zorg aan dat blootstelling aan managers met weinig creativiteit en openheid met betrekking tot werk-familie die in het bijzonder van belang kan zijn voor deze personen (OR voor laag WF score = 6.4, p = 0.01). Alle modellen controleren voor leeftijd, geslacht, salaris, opleiding, ras / etniciteit, en werkplek. Klik hier voor grotere afbeelding.
Discussion
Biomarkers zijn uiterst nuttige hulpmiddelen over meerdere disciplines, waaronder geneeskunde, celbiologie, genetica, psychologie, sociologie, demografie en sociale epidemiologie. Binnen elke discipline, werd validiteit en betrouwbaarheid vroege fase onderzoek naar biomarkers gebruikt om zowel de verborgen risico van de ziekte te ontdekken en bieden longitudinale voorspelling van gezondheidsresultaten. In deze gevallen, biomarkers die nauwkeurig zijn, duurzaam (dwz ze kunnen de vertraging tussen monstername en de uitvoering van het lab test overleven voor de biomarker halen), en veelzijdige (dwz nuttig in een verscheidenheid aan modellen) zijn verplicht.
Terwijl DBS collectie is een relatief eenvoudige procedure kan verschillende technieken helpen maximaliseren hoeveelheid ingezamelde plekken. Voordat collectie begint, zodat de hand van een deelnemer is warm, en dus dat de bloedvaten wijder worden, helpt de bloedstroom wanneer de vinger wordt aangeprikt. Behulp van de hand warmers of met eendeelnemer draaien hun handen onder warm water kan helpen met dit proces. Het melken van de vinger voordat collectie zal bloed trekken om de vingertop en warm de hand om te helpen de doorbloeding. Melken is een proces dat verbetert met de praktijk. Verzamelaars moeten gebruiken wat techniek die zij het prettigst vindt en effectief, maar de meest voorkomende aanpak omvat de hand van de deelnemer melken met andere hand de verzamelaar. Deze methode zal toelaten de duim van de collector's te werken tot diep in de palm van de deelnemer, terwijl de andere hand de pols van de deelnemer kan stabiliseren. Als voorbeeld, als men bloed werden verzamelen van een vinger aan de linkerhand van de deelnemer, de verzamelaar zou pols van de deelnemer met hun linkerhand en melk met hun rechterhand te stabiliseren. Voorkomende fouten gemaakt tijdens het melken zijn het niet met behulp van een stevige grip, het trekken van de huid boven de hand in plaats van het werken in de spieren om het bloed naar de vingertop te trekken. Het is ook belangrijk om pin te vermijdenching de vinger met het melken hand of pols stevig vastgrijpen van de deelnemer met de nonmilking hand beide belemmeren bloedstroom.
Wanneer aanprikken van de vinger, maken de punctie zo diep mogelijk door stevig op de lancet in de vinger voor de lozing. Een ondiepe punctie resulteert in minder doorbloeding en sneller stolt. Na aanprikken van de vinger, snel te werken is de sleutel. Dun bloed leidt tot eenvoudiger verzameling en grotere vlekken. Na punctie, het bloed wordt meer en meer viskeuze tot stolling. Hoe minder tijd nodig is om de bloedvlekken op de kaart groter het volume verzamelen.
Idealiter bloed van de deelnemer zal dun genoeg dat de druppels zullen hun eigen gewicht vallen, maar dit zal het geval zijn voor alle deelnemers niet, zoals sommige mensen het bloed kruipt of stolsels sneller dan anderen. Wanneer het bloed te dik van de vinger te vallen, moet het filter kaart het bloed verzamelen gebracht. When waardoor de kaart om het bloed is het belangrijk om de kaart in contact met de druppel tijdens het opknoping van de vinger zo lang mogelijk in plaats van alleen deppen het bloed naar de kaart. Dit trekt bloed hulp van de vinger om de grootte van de vlek te maximaliseren. Deze techniek vereist een vaste hand om het contact tussen het bloed en de kaart te houden. Met beide handen, een aan de deelnemers hand en een gestage om de kaart vast te houden, en het houden van beide handen in contact met elkaar helpt om de kaart en het bloed samen te stabiliseren.
Geavanceerde onderzoeksgebieden, zoals cardiometabolic risicobeoordeling, hebben lang vertrouwd op biomarkers, zoals C-reactive protein (CRP), insuline, en versuikerde hemoglobine (HbA1c) voor de vroegtijdige herkenning van risico's en preventie-inspanningen, evenals biomarkers van "harde eindpunten" voor hart-en vaatziekten (HVZ) en risico-CVD geassocieerde mortaliteit 12. Klinische epidemiologie beoordeelt vaak biomarkers te prospectively voorspellen cardiometabolic risico resultaten zoals hart-en vaatziekten en diabetes type II. Misschien wel de meest gebruikte van alle biomarkers is de Framingham risicoscore, een composiet dat de bloeddruk, HDL-cholesterol en totaal cholesterol niveaus die nut in het voorspellen van CVD 13 heeft aangetoond omvat. Toch heeft de Framingham score ervaren wat technische controverses, en heeft beperkingen in studies gericht op het koppelen van sociale en ecologische factoren voor de gezondheid, wat suggereert dat de behoefte aan meer accurate en specifieke biomarkers in verband met het cardiovasculaire onderzoek.
Er zijn een aantal commercieel verkrijgbare kits met ELISA of soortgelijke technieken voor de bepaling van DBS monsters. Noodzakelijk voor de bepaling van DBS monsters het gebruik van specifieke en geoptimaliseerde elutiestappen de gedroogde monsters in oplossing 2 te brengen. Dit is een opkomend gebied van onderzoek assays voor meer analyten zijn in ontwikkeling 1. Onder the assays reeds gevalideerd en wordt veel gebruikt zijn cholesterol 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, leptine 17 en cyotkines 18. Er zijn een aantal laboratoria die gespecialiseerd zijn in de test van de DBS, waaronder de Universiteit van Washington Afdeling Laboratoriumgeneeskunde (UW Lab Med) Biomarker Laboratorium (Director: Mark Wener).
Gezien het feit dat een panel van biomarkers, in plaats van een eenzame biomarker is vooral nuttig in het gebied van cardiovasculaire en diabetes onderzoek moeten biomarkers worden beschouwd samen met een aantal contextuele factoren om optimale aanwending. Biomarker onderzoek kan echter duur zijn, zowel financieel als in tijd voor het verzamelen van gegevens. Dus, terwijl het essentieel is om biomarkers die accuraat, duurzaam en veelzijdig zijn kiezen, werk en gezin biomarker onderzoek moet geworteld zijn in praktisch door het selecteren van biomarkers die zijn goedkoop, passend zijn, en kan snel worden verzameld wiste gemak. Bovendien praktische overwegingen vaak leiden tot een onvermogen om gelijktijdig prijs, kwaliteit en snelheid te maximaliseren binnen een procedure. Hierin liggen de volgende stappen in de gezondheid van biomarker onderzoek binnen het veld en bevolkingsonderzoeken. Het gebied van biomarker onderzoek is momenteel in een periode van sterke groei, maar het meeste werk is nog komen.
Disclosures
Orfeu Buxton heeft een onderzoeker geïnitieerde subsidie van Sepracor Inc ontvangen (nu Sunovion; ESRC-0977, ClinicalTrials.gov Identifier NCT00900159), dient als adviseur en deskundige voor Dinsmore LLC, op de Scientific Advisory Board van Matsutani Amerika, en ontving consulting honoraria van de Wake Forest University Medical Center.
Acknowledgments
Dit werk werd ondersteund door het werk, gezin en gezondheid Network (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), dat wordt gefinancierd door een samenwerkingsverband door de National Institutes of Health en de Centers for Disease Control en Prevention: Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health en Menselijke Ontwikkeling (Grant # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), National Institute on Aging (Grant # U01AG027669), Office of Behavioral and Science Sciences Research, de National Heart, Lung and Blood Institute (R01HL107240) en Nationaal Instituut voor Arbeid Veiligheid en gezondheid (Grant # U01OH008788, U01HD059773). Subsidies van de William T. Grant Foundation, Alfred P Sloan Foundation, en de Administratie voor kinderen en gezinnen hebben extra financiering verstrekt. De inhoud van deze publicatie is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en vertegenwoordigen niet noodzakelijk de officiële standpunten van deze instituten en kantoren.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Asepti II Microbial Wipes | EcoLab | D12330345 | 3rd party shipping |
| Biohazard waste bags | VWR | 14220-092 | High Strength Autoclavable Polypropylene Biohazard Bags, 2 mil |
| Biohazard waste barrel | Tyco | 58578-092 | 8 g Slide lid |
| Sharps Container | BD Medical | BD305487 | 1.4 qt |
| Chux | VWR | 82020-845 | Absorbent bench underpads |
| Gloves | VWR | XSmall: 89038-267 | Powder-free, latex-free nitrile gloves |
| Small: 89038-268 | |||
| Medium: 89038-270 | |||
| Large: 89038-272 | |||
| XLarge: 89038-274 | |||
| Hand sanitizer (e.g. Purell) | Johnson Johnson | 89040-210 | 3rd party shipping |
| Alcohol wipes | Webcol and Curity | 82003-856 | Prep pads |
| Gauze | Versalon | 82004-826 | Nonwoven sponges |
| Band-Aids | Nutramax Stat Strips | 15431-475 | |
| Lancets | Owen Mumford | 82028-060 | 3.0 mm, 21 G |
| Protein paper collection cards | Whatman | Custom-build | 903 Protein Saver Collection paper |
| Desiccant | VWR | 61161-319 | Humidity sponges |
| Specimen bags | Lab Guard Reclosable Biohazard Bags, ITW Minigrip | 56766-370 | 6 in x 9 in |
| Specimen storage cooler | Igloo | Playmate Mini | 4 qt; direct from manufacturer |
References
- McDade, T. W., Williams, S., Snodgrass, J. J. What a drop can do: dried blood spots as a minimally invasive method for integrating biomarkers into population-based research. Demography. 44, 899-925 (2007).
- Kirschbaum, C., Read, G. F., Hellhammer, D. H. Assessment of hormone and drugs in saliva in biobehavioral research. , Hogrefe & Huber Publishers. (1992).
- Piazza, J. R., Almeida, D. M., Dmitrieva, N. O., Klein, L. C. Frontiers in the use of biomarkers of health in research on stress and aging. J. Gerontol. Series B Psychol. Sci. Soc. Sci. 65, 513-525 (2010).
- Smyth, J. M. Individual differences in the diurnal cycle of cortisol. Psychoneuroendocrinology. 22, 89-105 (1997).
- Berkman, L. F., Buxton, O. M., Ertel, K., Okechukwu, C. Manager's practices related to work-family balance predict employee cardiovascular risk and sleep duration in extended care settings. J. Occup. Health Psychol. 115, 316-329 (2010).
- Buxton, O. M., Malarick, K., Wang, W., Seeman, T. Changes in dried blood spot Hb A1c with varied postcollection conditions. Clin. Chem. 55, 1034-1036 (2009).
- International Civil Aviation Organization. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air. , (2010).
- McDade, T. W. Epstein-Barr virus antibodies in whole blood spots: a minimally invasive method for assessing an aspect of cell-mediated immunity. Psychosom. Med. 62, 560-567 (2000).
- McDade, T. W., Burhop, J., Dohnal, J. High-sensitivity enzyme immunoassay for C-reactive protein in dried blood spots. Clin. Chem. 50, 652-654 (2004).
- McDade, T. W., Shell-Duncan, B. Whole blood collected on filter paper provides a minimally invasive method for assessing human transferrin receptor level. J. Nutr. 132, 3760-3763 (2002).
- Gerszten, R. E., Wang, T. J. The search for new cardiovascular biomarkers. Nature. 451, 949-952 (2008).
- D'Agostino, R. B., Grundy, S., Sullivan, L. M., Wilson, P. Validation of the Framingham coronary heart disease prediction scores: results of a multiple ethnic groups investigation. J. Am. Med. Assoc. 286, 180-187 (2001).
- McDade, T. W., Rutehrford, J., Adair, L., Kuzawa, C. W. Early origins of inflammation: microbial exposures in infancy predict lower levels of C-reactive protein in adulthood. Proc. R Soc. B.. , (2009).
- McDade, T. W. Measuring Stress in Humans. A Practical Guide for the Field. Ice, G. H., James, G. D. , Cambridge University Press. 181-207 (2007).
- Tanner, S., McDade, T. W. Enzyme immunoassay for total immunoglobulin E in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. 19, 440-442 (2007).
- Miller, A. A., Sharrock, K. C., McDade, T. W. Measurement of leptin in dried blood spot samples. Am. J. Hum. Biol. 18, 857-860 (2006).
- Miller, E. M., McDade, T. W. A highly sensitive immunoassay for interleukin-6 in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. , (2012).
