Introduction
النماذج الحيوانية توفير نظرة ثاقبة علم الأمراض التي لا يمكن الحصول عليها في المختبر عن طريق التحليل. لتوفير النتائج الأكثر فعالية، فمن المهم استخدام نموذج الحيوان الذي يرتبط ارتباطا وثيقا لهذا المرض وأنواع من الفائدة. على سبيل المثال، muntjac في ريفز '(Muntiacus reevesi)، والغزلان الصغيرة الآسيوية 1،2، والفئران المعدلة وراثيا التعبير عن بروتين بريون cervid (CerTgPrP) 3 هي نماذج حيوانية مفيدة لأنواع cervid. كلا النوعين هي متعدد الودق، مما يسمح للتربية على مدار السنة، وبالتالي مصدر ثابت للأنسجة المرتبطة بالحمل والسوائل لدراسة آليات محددة في cervid علم الأحياء. دراسات من الحليب لديها مجموعة واسعة من التطبيقات التي هي ببساطة أكثر (وغير مكلفة) أنجزت في النماذج الحيوانية من في البشر. يمكن الباحثين التحقيق الحليب واللبأ بوصفها مصدرا محتملا لل1) انتقال الأمراض المعدية، 2) المناعية المنقولة من الأم إلى الأبناء في development الحصانة السلبي 4 و 3) اللاكتوفيرين، وهو البروتين الموجود في حليب الثدي البشري المشاركة في الحصانة السلبي أن الباحثين يحاولون حاليا لإنتاج تجاريا 5.
يمكن جمع كمية كبيرة من الحليب من الحيوانات الصغيرة أن يكون مهمة صعبة. اقترح روجرز نهجا لجمع الحليب من الفئران 6، والذي تم استخدامه في وقت لاحق في الفئران. DePeters وهوفي المقترحة طريقتين لجمع الحليب، واحد باستخدام فراغ إنشاؤها يدويا التي تنتجها لمبة المطاط تعلق على ماصة ماصة باستور، والثانية تتطلب بناء وحدة الحلب، والتي يتم بعد ذلك تعلق على مصدر فراغ (مثل كما صنبور) لحصاد الحليب الماوس 7. ونحن هنا نقترح لذلك، طريقة منخفضة التكلفة بسيطة لجمع الحليب من كلا الفئران وريفز 'muntjac الغزلان، الأمر الذي يتطلب معدات المختبرات فقط متاحة بسهولة والمهارات التقنية الأساسية. أسلوبنا ينتج كميات كافية من الحليب لمختلفالتطبيقات.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. بروتوكول حلب ماوس
تمت الموافقة على الطرق الموضحة في هذا البروتوكول من قبل IACUC.
1. الفصل بين السد من النسل
- حدد السد أن تحلب. اختيار السد مع القمامة من 4 أو أكثر من الجراء التي هي 8-12 أيام بعد الولادة لتوفير الحليب القصوى التحصيل على الرغم من جمع من الممكن في أي وقت آخر نقطة الولادة تصل إلى 21 يوما.
- فصل السد من القمامة لها على الأقل 2 ساعة قبل الحلب.
ملاحظة: يجب أن رغبة واحدة لحلب السد أكثر من واحد في فترة زمنية معينة، كان مقبولا لإيواء السدود فصل في نفس القفص مع الغذاء الكافي والمياه.
2. إدارة الأوكسيتوسين، التخدير وشحم العين
- 2 إدارة وحدة دولية / كجم من الأوكسيتوسين الغشاء البريتونى (IP). الأوكسيتوسين هو الهرمون الذي يعمل على الغدد الثديية من الإناث المرضعات لتحفيز الافراج عن الحليب. الأوكسيتوسين يمكن الحصول على الابام طبيب بيطري.
- إدارة خليط مخدر تحتوي على 80-100 ملغ / كغ الكيتامين في تركيبة مع 5-10 ملغ / كغ زيلازين IP. على سبيل المثال، يمكن إعداد 10 مل الأسهم خليط مخدر مقدما على الفئران وزنها حوالي 30 غراما، وتشمل 0.1 مل زيلازين، 8.9 مل H 2 O، و 1.0 مل الكيتامين. سوف 0.25 مخدر مجموع مل رزين ماوس من هذا الحجم لحوالي 20-30 دقيقة، والتي ينبغي أن توفر الوقت الكافي لجمع الحليب.
ملاحظات: لتحديد أن هذا الحيوان قد تم تخدير بنجاح، ووضع لها بلطف على بطنها على سطح صلب؛ وقالت انها لا ينبغي أن يتحرك قدميها أو محاولة للارتقاء إلى قدميها إذا كانت تخدير كامل. في حالة وجود الماوس لا يتم تخدير الكامل مع الجرعة الأصلي، قد الباحثة إدارة أخرى ¼ أو ½ من الجرعة الأصلية من خليط مخدر اعتمادا على حجم من الفأرة و / أو مستوى التخدير أن الفأر قد تحققت بالفعل . ومع ذلك، وهذا يمكن ليncrease فرصة رد فعل سلبي على التخدير، وأيضا قد يؤدي إلى تخدير الماوس يجري أكثر عمقا و / أو تخدير لفترة أطول من الزمن.
ملاحظة: إذا حلب السد أكثر من واحد، فمن الضروري لارباك الأوكسيتوسين وحقن مخدر بسبب القصير نصف عمر الأوكسيتوسين والأوقات لتخدير الكيتامين وزيلازين. - تنطبق على كمية صغيرة من الشحم العين إلى الركن من كل عين وتنتشر لمنع عيون الماوس، من الجفاف بينما تحت التخدير.
3. جمع الحليب
يتم تنفيذ معظم جمع الحليب بسهولة مع اثنين من الباحثين: الباحث واحد لعقد الماوس تخدير أثناء التعبير عن الحليب (المشار إليها باسم R1)، وأحد الباحثين لجمع الحليب (R2) يدويا. ويمكن أيضا أن هذا الأسلوب أن يؤديها مع شخص واحد، إذا تم تأمين الماوس على سطح مستو لتجنب الضرر.
- يجب أن تكون مجهزة R2 مع العقيمة منصات الإعدادية الكحول، والنقطة P-200عتمان، وهي غيض ماصة نظيفة لكل الماوس، وحاوية لعقد الحليب، مثل أنبوب 1.5 مل إيبندورف أو 1.2 مل cryovial (انظر جدول المواد).
- كما يبدأ الأوكسيتوسين نافذة المفعول، والحليب خيبة أمل تصبح مرئية في منطقة الثديية الماوس (انظر الشكل 1A). R1: بسط العقيمة وحة الإعدادية الكحول وبلطف مسح منطقة الثديية من الماوس لتنظيف المنطقة قبل الحلب. التعبير يدويا الحليب من حلمة باستخدام الإبهام والسبابة لتدليك بلطف والضغط على الأنسجة الثديية في حركة تصاعدية حتى يبدأ حبة مرئية من الحليب لتشكيل في قاعدة الحلمة.
- اضغط على المكبس pipetman P-200 لأول محطة لإطلاق سراح الهواء من طرف ماصة والاستعداد لتجميع الحليب.
- موقف الطرف ماصة في الجزء العلوي من قطرة من الحليب، وسحب بلطف الحليب في تلميح ماصة عن طريق الإفراج عن ببطء الضغط على المكبس. الحرص على عدم وضع غيض قريبة جدا من حلمة أو الجلد (انظرالشكل 1B). فإنه ليس من الضروري لاطلاق سراح تماما المكبس حيث سيؤدي ذلك إلى سحب الحليب على طول الطريق إلى الأعلى من غيض ماصة وسوف تجعل من الصعب طرد الحليب في كثير من الأحيان لزج في وعاء القابضة.
- طرد الحليب في وعاء باستخدام الإبهام للضغط على المكبس الماضي المحطة الأولى (انظر الشكل 1C). لتسهيل طرد كميات صغيرة، اضغط على تلميح ماصة ضد الجانب من الأنبوب بحيث لا يضيع السائل.
- الاستمرار في التعبير عن الحليب يدويا من كل حلمة، وتتحرك في اتجاه عقارب الساعة أو إما بعكس اتجاه عقارب الساعة حتى لا تخطي أي الحلمات. إلا أنه من غير المقبول والمفيد أن نعود إلى والتعبير عن الحليب باستمرار من نفس حلمة يجب أن تنتج المزيد من الحليب من الآخر.
4. عكس التخدير في السد
- في معظم الحالات، فإنه من الشائع للالسد للبدء في البدء أن تستيقظ أثناء عملية الحلب. إذا لم تكن هذه هي الحالة، وضع السد في CAGالبريد غير مباشرة تحت مصدر الحرارة، مثل بطانية تعميم ساخنة، حتى انها تبدأ في الاستيقاظ.
ملاحظة: كما يبدأ السد أن يستيقظ، والحفاظ على مراقبة وثيقة من نشاطها حتى انها قادرة على المشي حول القفص لها على بلدها. - مرة واحدة السد تتحرك حول القفص دون صراع، ووضع ظهرها الى بلدها الأصلي قفص مع القمامة لها. وقد لوحظ عدم وجود آثار سوء فيما يتعلق بقدرة الجراء 'لإطعام بعد جمع الحليب.
2. البروتوكول حلب Muntjac
تمت الموافقة على الطرق الموضحة في هذا البروتوكول من قبل IACUC.
1. الفصل بين الفلاني من النسل
- حدد ظبية أن تحلب. الغزلان muntjac ريفز 'تعطي عموما ادة واحدة تزلف 2. الألبان وظبية اليوم بعد الولادة للسماح للتزلف فرصة للوصول إلى المواد الغذائية الأساسية في اللبأ 8.
ملاحظة: عادة ما يخفي وتزلف لا تعود الى الظهور خلال بروكedure؛ فصل الزوج من الأم ذرية ليست ضرورية.
2. إدارة الأوكسيتوسين، التخدير وشحم العين
- إدارة 10 وحدة دولية / كجم من العضل أوكسيتوسين (IM). الأوكسيتوسين هو الهرمون الذي يعمل على الغدد الثديية من الإناث المرضعات لتحفيز أسفل السماح للحليب. الأوكسيتوسين يمكن الحصول عليها من طبيب بيطري.
- إدارة مخدر BAM IM تحتوي على 11 بوتورفانول 0.45 مغ / كغ، azaperone 0.25 مغ / كغ، medetomadine 0.07 ملغم / كغم. وجرعة واحدة من الخليط مخدر BAM رزين وmuntjac لحوالي 20-30 دقيقة، والتي توفر وقتا كافيا لجمع الحليب كاملة. خيار آخر هو لمخدر ميدازولام في 1-2 مغ / كغ، والتي سوف رزين وmuntjac لحوالي 10-15 دقيقة. في حين أن هذا يوفر الوقت الكافي لجمع الحليب، ويتم استقلاب هذا مخدر بسرعة أكثر من BAM والحيوان قد يحاول الهروب في نهاية فترة زمنية أقصر.
ملاحظة: الحد الأدنى استجابة للألم، وردود الفعل طفيفة عند لمس الأذنين، تليها قدرة R1 لعقد MJ دون النضال يشير إلى أن الحيوانات قد تم تخدير بنجاح.
ملاحظة: في حالة وجود muntjac لا يتم تخدير الكامل مع الجرعة الأصلي، قد الباحثة إدارة أخرى ¼ أو ½ من الجرعة الأصلية من خليط مخدر تبعا لحجم الحيوان و / أو مستوى التخدير التي كانت بالفعل تحققت. ومع ذلك، وهذا يمكن أن يزيد من فرصة حدوث رد فعل سلبي على التخدير، وأيضا قد يؤدي إلى muntjac كونها أكثر تخدير عميق و / أو تخدير لفترة أطول من الزمن. - تنطبق على كمية صغيرة من الشحم إلى زاوية كل عين وانتشار لمنع عيون muntjac من الجفاف بينما تحت التخدير.
3. جمع الحليب
يتم تنفيذ معظم جمع الحليب بسهولة مع اثنين من الباحثين؛ باحث واحد لعقد muntjac تخدير فياللفة بينما معربا عن الحليب (يشار إلى R1)، والباحث الثاني للحفاظ على رأس muntjac في وضع مريح وآمن وجمع الحليب (R2) يدويا.
- تبعا للمخدر يستخدم، يجب أن يتم تنفيذ الحلب إما 1) في أقلامهم لتوفير مكان آمن لهم يجب أن تستيقظ أثناء إجراء (أو من صنع ميدازولام) 2) في حجرة الانتظار خالية من الفراش للحفاظ على نظافة (BAM- الناجم).
- يجب أن تكون مجهزة R1 و R2 بشاش غارقة الإيثانول وعدة أنابيب البولي بروبلين 15 مل المخروطية لعقد الحليب.
- كما يبدأ الأوكسيتوسين نافذة المفعول، والحليب خيبة أمل تصبح مرئية في منطقة الثدي وmuntjac ل. R1: تعقيم اليدين والأصابع القفاز، وكذلك الضرع كامل ولكل فرد من حلمة الحيوان مع الشاش غارقة في الايثانول. R2: عقد رأس muntjac في وضع آمن ومريح للسماح سهولة التنفس وتساعد على منع الكرش قلس. عقد البنود أنبوب جمع بيئة نظام التشغيل إلى حلمة يجري تحلب دون لمسها لمنع التلوث المحتملة.
- شفط الحليب من حلمة واحدة باستخدام الإبهام والسبابة للضغط بلطف الأنسجة الثديية في حركة تصاعدية حتى يتم محتقن حلمة مع الحليب، ولفة بلطف الحليب من حلمة والى الانبوب الذي R2 تحتجز (انظر الشكل 2 ).
- ملاحظة: الحليب يخرج في تيار، لذلك من المهم أن يكون لR2 أنبوب جمع وضعه بحيث قليل من دون حليب سوف يضيع.
- وينقسم الضرع وmuntjac حيز الأرباع. R1: الاستمرار في شفط الحليب من كل رباعي حتى الحليب لم يعد يتدفق بسهولة. إذا الحليب لا يمكن التعبير عنها من حلمة واحدة، والتعبير عن كل من الحلمات أخرى قبل أن تعود إلى الأول. إلا أنه من غير المقبول والمفيد أن نعود إلى والتعبير عن الحليب باستمرار من نفس حلمة يجب أن تنتج المزيد من الحليب من الآخر.
4. عكس التخدير في الفلاني
ر "> ومن الشائع لالناجم عن ميدازولام ظبية أن تبدأ في الاستيقاظ أثناء عملية الحلب، وفي معظم الحالات، سوف ظبية محاولة للهروب قبل وقد أعرب كل الحليب. يستخدم ضبط النفس الصغرى في محاولة لزيادة الحليب العائد، إلا أن سلامة وراحة كل من الباحثين وظبية لا تقل أهمية.- إدارة atipamezole في 2.5 ملغ / ملغ medetomadine تحت الجلد لعكس السريع للBAM تخدير ظبية.
ملاحظة: مع كلا النوعين من مخدر، فمن الضروري للحفاظ على مراقبة وثيقة من وزارة الطاقة حتى انها قادرة على السير بمفردها دون عثرة أو السقوط، وغير قادرة على تناول الطعام والشراب دون خوف من الطموح أو الاختناق. وقد لوحظ عدم وجود آثار سوء فيما يتعلق بقدرة تزلف لممرضة بعد جمع الحليب.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
فأر
من تجاربنا، فقد قررنا أنه من الممكن لجمع ما يقرب من 100-400 ميكرولتر من الحليب من الماوس مختبر واحد، تعتمد على العديد من المتغيرات. وتشمل هذه المتغيرات 1) كمية من الوقت المخصص لجمع، 2) جرعة من الأوكسيتوسين تدار، 3) كم عدد الجراء السد حاليا التمريض و4) مقدار الوقت آخر الولادة. وقد أظهرت دراساتنا أن أعلى محصول تم الحصول عليها عندما يتم فصل السدود من ذريتهم لا يقل عن 2 ساعة، ويتم تعيين 45 دقيقة على الأقل لمدة ساعة جانبا في الماوس لحلب. تم حصادها كميات الحليب الأقصى 8-12 أيام بعد الولادة باستخدام 2 وحدة دولية / كجم من الأوكسيتوسين. نتائجنا هي في معظمها وفقا للدراسات أخرى حيث ارتبط حجم القمامة بشكل إيجابي مع الحليب العائد 9 (انظر الشكل 3).
Muntjac
على الرغم من أن كمية الحليب هارالمكتسبة من muntjac كان متغير من يوم إلى يوم، وكنا قادرين على جمع 5-30 مل حليب / سد / الدورة، اعتمادا على التخدير المستخدمة و / أو آخر وقت الولادة. الغزلان Muntjac هي متعدد الودق؛ الحليب يمكن جمعها في نقاط مختلفة وقت على مدار العام 2 (انظر الجدول 1). ظلت الناجم عن ميدازولام ظبية تحت التخدير لاقل من 10 دقيقة، مما يسمح لمجموعات أصغر حجم (عادة 5-30 مل)، في حين ظبية BAM التي يسببها تعرض لفترة أطول من تأثير المخدر (20-30 دقيقة)، مما يسمح للتعبير الحليب الكامل (15-130 مل). أوقفت مجموعات الحليب عندما لم يعد يتم إنتاجها الحليب بكميات كافية من قبل وزارة الطاقة، ويجري يتغذى تزلف المقابلة على نظام غذائي من العلف والتبن في الغالب.
الشكل 1 (أ) والسد217، ق الحلمات تصبح محتقن مع الحليب على حقن الأوكسيتوسين (B) جمع الحليب من السد تخدير باستخدام pipetman P-200 (C) طرد من الحليب إلى 1.2 مل cryovial..
يتم جمع الرقم 2. الحليب Muntjac في أنبوب مخروطي 15 مل.
الرقم 3. إنتاج الحليب التقريبي جمعها من الفئران على أساس حجم القمامة، وعمر الجراء.
الجدول 1. كول الحليبection تواريخ البدء والانتهاء لالمرضعات السدود muntjac ريفز '.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
فأر
هناك العديد من العوامل التي تأخذ بعين الاعتبار عند جمع الحليب من ماوس، بما في ذلك 1) كمية من الوقت المخصص لجمع، 2) جرعة من الأوكسيتوسين تدار، 3) كم عدد الجراء السد حاليا التمريض و4) مبلغ الفترة الزمنية التي مرت منذ الولادة في وقت جمع. استخدام الدراسات السابقة كمبادئ توجيهية، شرعنا في تحسين الظروف لإنتاج الحليب.
الأبحاث السابقة قد ترتبط مباشرة مع حجم إنتاج الحليب 8 القمامة. للأسف، حجم القمامة هو المتغير الذي لا يمكن السيطرة عليها. ومع ذلك، فإن وقت الحلب آخر الولادة يمكن السيطرة عليها. وفقا لإفراز الحليب أقصى ماوس مختبر هو في 8-10 أيام آخر الولادة 9. تجربتنا في التطابق مع هذا البيان.
وقد تبين أن الأوكسيتوسين يلعب دورا لا غنى عنه في الحليب بعد الإنتاجالولادة 10. وقد تم الإبلاغ عن جرعات الأوكسيتوسين تتراوح بين 0.1 وحدة دولية / كجم 9-4 وحدة دولية / كغ 6 لجمع الحليب من القوارض 6،7،9. بدأنا دراستنا عن طريق إعطاء أقل جرعة اقترح، 0.1 وحدة دولية / كجم 9. استخدام هذا الدواء، وكمية الحليب التي تنتجها فأر صغير للغاية لقياس أو جمع. عند زيادة الجرعة إلى 2 الأوكسيتوسين وحدة دولية / كغ 6،7، كان إنتاج الحليب أعلى بكثير في حوالي 120 ميكرولتر. لأننا أردنا استخدام أقل جرعة من الأوكسيتوسين لتحقيق جمع الحليب الأمثل، ونحن لم جرعات أعلى من 2 وحدة دولية / كجم.
إنتاج الحليب يعتمد أيضا على كمية من الوقت المخصص لجمع. لقد قررت أن لا تقل عن 3 ساعة ضروري لجمع الأمثل ساعة-2 لالجراء لا يمكن فصلها عن السد و1 ساعة لإعداد المواد والتحصيل. وجمع الحليب من عدة سدود في جلسة واحدة تقليل الوقت الكلي اللازم لحصاد حجم معين من الحليب، أي 2 ساعة لفصل الجراء، 30 دقيقة لمواد الإعداد و20-30 دقيقة لجمع الحليب من كل السدود. يجب مراقبة كل السدود حتى أنهم مستيقظا قبل أن يتم وضعها مرة أخرى مع صغارها. لاحظنا أن المزيد من الوقت وضعت جانبا لحلب يؤدي إلى عائدات أعلى الحليب، لأن الماوس يمكن تحلب حتى انها يستعيد وعيه.
الحالات لا تنشأ مع النماذج الحيوانية التي من شأنها أن تؤثر على إنتاج الحليب. قضية واحدة مشتركة هي وجود الدم أو الافرازات في الحليب السدود القديمة التي تم تربيتها بشكل متكرر ولها الفضلات كبيرة، أو في السدود التي يتم التمريض الأولى القمامة الخاصة بهم. ينبغي لهذا أن يحدث، فإننا نقترح التوقف عن جمع الحليب من حلمة أن وجه الخصوص. فإنه من المستحسن للتبديل نصائح الماصة في هذا الوقت، وتجاهل أي الافرازات أو الدم.
يجب على الباحثين إجراء هذا الأسلوب أيضا أن يكون مدركا أنه، كما هو الحال في كثير من الأحيان عند استخدام النماذج الحيوانية، تختلف النتائج (الشكل3). إذا تم جمعها على مبلغ أقل من الأمثل من الحليب في جلسة واحدة، فمن الأفضل لتكرار الإجراء في وقت لاحق (على سبيل المثال 24-48 ساعة) بدلا من تغيير الظروف التجريبية من أجل الافراج عن الحليب.
Muntjac
بلغ حجم الحليب التي جمعت من السدود muntjac ريفز 'تعتمد على التخدير المستخدمة. كان لدينا مخدر الأولي من اختيار ميدازولام. قدمت ميدازولام التخدير كافية للسماح ضبط النفس لفترات قصيرة من الزمن، أي إذا كان R1 التصرف الهدوء ويمكن أن يحافظ على الهدوء muntjac، R2 يمكن السيطرة على حلب لزيادة الغلة قبل أن توقظ-muntjac سلامة والراحة على حد سواء وكانت الحيوانات ومعالج من أهمية قصوى، ونحن تخلى عن المحاولة الحلب إذا شعرنا تعرض للخطر سواء. اكتشفنا أن muntjac ظبية تصبح بسرعة تحملا للميدازولام وأن الجرعات الكبيرة ستكون ضرورية بعد التعرض المتكرر، مما يجعل جمع الحليب مرتين أسبوعيا من الصعب على نحو متزايد.
نقص ميدازولام، إلى جانب وجود التسامح المبنى، قادنا للبحث مخدر البديلة. ويتم استخدام خليط من بوتورفانول، Azaperone وMedetomadine (BAM) بشكل فعال لتجميد الأبيض الذيل الغزلان 11. في أيدينا، قدمت كوكتيل BAM التخدير كافية للسماح جمع كميات مقبولة من الحليب بطريقة آمنة، مع أقل التسامح المخدرات بعد الاستخدام المتكرر، ومع تحكم أفضل في عكس آثار مخدر.
عانى بعض السدود muntjac من الضروع الحساسة و / أو كانت الأمهات لأول مرة. وضعت هذه muntjac كدمات على الحلمات أثناء عملية الحلب، وتباطأ تدفق الحليب أو توقفت تماما، مما دفع بنا إلى وقف الدورة الحالية. ينبغي لهذا أن يحدث، ينبغي للمرء أن استخدام تقنية الحلب أكثر لطيف في محاولة لمنع عدم الراحة أو كدمات في الحلمات.
e_content "> ظهرت إنتاج الحليب إلى الشمع وانخفاضها في عدة مناسبات. قد يكون سبب انخفاض المحاصيل الحليب بنسبة 1) والظبيان بعد أن رعت فقط قبل مجموعات أو 2) انخفاض في إنتاج الحليب نتيجة لعملية الفطام الطبيعي للتزلف.في حين أنه يمكن أن يكون عملية محاولة للحصول على حجم كبير من الحليب من النماذج الحيوانية الصغيرة، ويوضح أن عملنا هو في الواقع احتمال لكلا الماوس ونماذج muntjac؛ لا تتطلب مهارة واسعة ولا جيوب عميقة، ببساطة المثابرة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Materials—Mouse | |||
| Ketamine (KetaVed 100 mg/ml) (dose: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
| Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose: 5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
| Eye lubricant | MWI/Apexa | 701013 | |
| Oxytocin (2 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Materials—Muntjac | |||
| Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | Optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
| Oxytocin (10 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Equipment—Mouse | |||
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 μl pipette tips | Light Labs | B-2004-SH | |
| 1 ml syringes | MWI | 005427 | |
| 27 G needles | MWI | 002031 | |
| Equipment—Muntjac | |||
| 15 ml conical tubes | VWR | 21008-918 | |
| 22 G needles | MWI | 873 | |
| 3 ml luer lock syringes | MWI | 001377 | |
References
- Dueling, S. Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , Available from: http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Muntiacus_reevesi (2004).
- Pei, K., Taber, R., O'Gara, B., Wang, Y. Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China. Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).
- Browning, S. R. Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP. J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).
- Van de perre, P. Transfer of antibody via mother's milk. Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).
- Maden, C. Genetically modified mice produce human milk protein. BioNews. , (2009).
- Rodgers, C. T. Practical aspects of milk collection in the rat. Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).
- Depeters, E. J., Hovey, R. C. Methods for collecting milk from mice. J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).
- Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation. 84 (1), 127-133 (1986).
- Hedrich, H. J., Bullock, G. R. The laboratory mouse. , 735-736 (2004).
- Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).
- Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer. 45 (2), 457-467 (2009).
