Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

마우스 및 꿰 문착 사슴 우유 수집 방법

Published: July 19, 2014 doi: 10.3791/51007

Introduction

동물 모델은 체외 분석에 의해 얻어 질 수없는 질병의 병리에 대한 통찰력을 제공합니다. 가장 효과적인 결과를 제공하기 위해, 밀접 질환 및 그와 관련된 종의 동물 모델을 사용하는 것이 중요하다. 예를 들어, 꿰 문착 (Muntiacus reevesi에), cervid 프리온 단백질 (CerTgPrP)를 3 표현하는 작은 아시아 사슴 1, 2, 형질 전환 마우스는 cervid 종에 유용한 동물 모델입니다. 두 종은 연중 번식을 허용 polyestrous이며, 따라서 임신 관련 조직과 체액에 대한 일관성있는 소스는 cervid 생물학의 특정 메커니즘을 연구 할 수 있습니다. 우유의 연구는 인간보다 동물 모델에서 수행 더 간단하게 (저렴하게)있는 응용 프로그램의 광대 한 배열이있다. 연구원은 1) 전염성 질병 전파의 잠재적 인 소스로 우유와 초유를 조사 수, 개발까지의 자손에게 어머니로부터 전송 2) 면역 글로불린수동 면역 4, 3) 락토페린의 pment 연구자가 현재 시도하고 수동 면역에 관련된 인간의 모유에서 발견되는 단백질은 상업적으로 5를 생산하고 있습니다.

작은 동물에서 우유의 상당한 양을 수집하는 것은 어려운 작업이 될 증명할 수 있습니다. 로저스는 이후 마우스에 사용 된 쥐 6에서 우유를 수집하는 방법을 제안했다. DePeters 및 호비는 진공 원에 부착 착유 유닛 (의 구성을 필요로 우유 컬렉션, 파스퇴르 피펫에 부착 된 고무 피펫 전구에 의해 생성 수동으로 생성 된 진공을 이용 하나, 그리고 제 두 가지 방법을 제안 그러한 마우스 우유 7을 수확 할 수있는 수도꼭지) 등. 여기에서 우리는 마우스 만 쉽게 사용할 실험실 장비 및 기본적인 기술 능력을 필요로 꿰 문착 사슴, 양에서 우유를 수집하기위한 간단하고 저렴한 방법을 제안한다. 우리의 방법은 다양한 우유의 충분한 볼륨을 생성응용 프로그램.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. 마우스 착유 프로토콜

이 프로토콜에서 설명하는 방법은 IACUC에 의해 승인되었다.

자손의 댐 1. 분리

  1. 착유 할 수있는 댐을 선택합니다. 8~12일 컬렉션 21 일 모든 시간 포인트 포스트 분만 업에 가능 최대 우유 컬렉션 비록 제공하기 위해 출산을 게시합니다 4 인 이상 새끼의 쓰레기와 댐을 선택합니다.
  2. 착유 전에 그녀의 쓰레기 최소 2 시간에서 댐을 분리합니다.
    참고 : 주어진 시간에 하나 이상의 댐 우유 하나의 욕망하는 경우, 이는 적절한 음식과 물 공급과 같은 케이지에서 분리 된 댐을 집에 허용됩니다.

옥시토신, 마취 눈 윤활유의 2. 관리

  1. 복강 옥시토신의 2 IU / kg (IP)을 관리 할 수​​ 있습니다. 옥시토신은 우유의 방출을 자극하는 수유의 여성의 유방 동맥에 작용하는 호르몬이다. 옥시토신은 FR을 취득 할 수있다톰 의사.
  2. 5 ~ 10 ㎎ / ㎏ 자일 라진의 IP와 함께 80 ~ 100 ㎎ / kg 케타민을 포함하는 마취제 혼합물을 관리 할 수​​ 있습니다. 예를 들어, 10 밀리리터의 마취 액을 약 30 g의 무게 마우스에 대해 사전에 준비 할 수 있고, 0.1 ml의 자일 라진, 8.9 ML의 H 2 O, 1.0 ML 케타민을 포함 할 것입니다. 0.25 ㎖의 총 마취 우유 수집을위한 충분한 시간을 제공해야하는, 약 20 ~ 30 분 동안이 크기의 마우스를 마취합니다.
    주의 사항 : 동물이 성공적으로 마취 된 것을 확인하려면, 부드럽게 고체 표면에 그녀와 그녀의 뱃속에 배치; 그녀는 그녀의 다리를 이동 또는 그녀가 완전히 마취하면 그녀의 발에 상승을 시도 할 수 없습니다. 완전히 원래 투여 량으로 마취되지 않은 마우스의 경우, 연구자는 다른 관리있다 ¼ 또는 마취제 혼합물 마우스 이미 달성 마우스 및 / 또는 진정 작용의 레벨의 크기에 따라 본래의 복용량의 ½ . 그러나, 이것은 내가 할 수마취 부작용의 가능성을 ncrease, 또한 마우스보다 깊게 마취 및 / 또는 시간의 긴 기간 동안 마취를 당할 수도있다.
    참고 : 하나 이상의 댐을 짜는 경우는 옥시토신과 케타민 (ketamine)과 자일 라진을위한 옥시토신과 진정 작용 시간의 짧은 반감기로 인해 마취 주사를 엇갈리게 할 필요가있다.
  3. 각 눈의 구석에 눈 소량의 윤활유를 적용하고 마취 동안 건조에서 마우스의 눈을 방지하기 위해 확산.

3. 우유 컬렉션

수동 (R1이라 함) 우유, 한 연구원 우유 (R2)를 수집하는 표현하면서 마취 마우스를 개최 한 연구원 : 우유 수집은 쉽게 두 연구원이 수행됩니다. 마우스가 피해를 방지하기 위해 평면에 고정되어있는 경우이 방법은 또한, 한 사람으로 수행 될 수있다.

  1. R2는 P-200 핍에게, 멸균 알코올 준비 패드를 장착해야etman, 각 마우스 깨끗한 피펫 팁, 이러한 1.5 ㎖의 에펜 도르프 튜브 또는 1.2 ㎖의 cryovial와 우유, (재료의 표 참조) 보유하는 컨테이너입니다.
  2. 옥시토신을 적용하는 것을 시작으로, 우유 내림 (그림 1A 참조) 마우스의 유방 영역에 표시 될 것입니다. R1 : 멸균 알코올 준비 패드의 포장을 조심스럽게 전에 착유 할 영역을 청소하려면 마우스의 유방 영역을 닦습니다. 수동으로 우유의 볼 구슬 유두의 기초에 형성하기 시작 때까지 부드럽게 상승 움직임에 유방 조직을 마사지하고 짜내는 엄지 손가락과 집게 손가락을 사용하여 젖꼭지에서 우유를 표현한다.
  3. 피펫 팁의 공기를 해제하고 우유 수집을 위해 준비하는 첫 번째 정지 P-200 pipetman 플런저를 누르십시오.
  4. 우유의 드롭의 상단에 피펫 팁을 놓고 부드럽게 천천히 플런저에 압력을 방출하여 피펫 팁에 우유를 당깁니다. (참조 유두 나 피부에 너무 가까이 팁을 넣어하지 않도록주의그림 1B). 그것은이 모든 방법 피펫 팁의 상단에 우유를 끌어와 어려운 보유 용기에 종종 점성 우유를 추방 할 것 같은 완전히 플런저를 해제 할 필요가 없습니다.
  5. (도 1C 참조) 첫번째 중지 지나서 플런저를 누르면 손가락을 사용하여 용기 내로 우유를 추방. 어떤 액체가 손실되지 않도록 소량의 추방을 용이하게하기 위해, 튜브의 측면에 대한 피펫 팁을 누릅니다.
  6. 어떤 젖꼭지를 건너하지 않도록 수동으로 시계 방향 또는 반 시계 방향으로 하나의 이동, 각 젖꼭지에서 우유를 표현하기 위해 계속합니다. 그것은 다시 와서는 다른 것보다 더 많은 우유를 생산해야 지속적으로 같은 젖꼭지에서 우유를 표현하기 위해 허용하고 유용한 모두 있습니다.

댐 4. 마취 반전

  1. 대부분의 경우,이 둑이 착유 프로세스 중에 일어나 시작하기 시작하는 것이 일반적이다. 이 경우가 아니라면, CAG에 댐을 배치전자 간접적으로 가열 된 순환 담요로 열원, 아래 그녀는 일어나 시작할 때까지.
    참고 : 댐, 일어나 그녀가 그녀 자신에 그녀의 새장에 대해 걸을 수있을 때까지 그녀의 활동의 확대 관찰을 계속하기 시작.
  2. 댐이 투쟁하지 않고 새장에 대해 이동하면, 그녀의 쓰레기와 함께 그녀의 원래 케이지에 그녀를 다시 배치합니다. 악영향 우유 수집 한 후 먹이 새끼의 능력에 대해 언급하지 않았습니다.

2. 문착 착유 프로토콜

이 프로토콜에서 설명하는 방법은 IACUC에 의해 승인되었다.

자손에서 미상의 1. 분리

  1. 착유 할 미상을 선택합니다. 리브스 '문착 사슴은 일반적으로 하나의 새끼 사슴 2를 낳을. 초유 8 필수 영양소에 대한 액세스를 얻을 수있는 새끼 사슴의 기회를 허용하는 암컷에게 출산 후 하루 우유.
    참고 : 새끼 사슴은 보통 숨기고 PROC 동안 다시 나타나지edure; 어머니 - 자식 쌍의 분리는 필요하지 않습니다.

옥시토신, 마취 눈 윤활유의 2. 관리

  1. 근육 옥시토신의 10 IU / kg (IM)를 관리 할 수​​ 있습니다. 옥시토신은 우유 내리기를 자극하는 수유의 여성의 유방 동맥에 작용하는 호르몬이다. 옥시토신은 수의사로부터 획득 할 수있다.
  2. BAM의 마취에게 IM (11)를 관리 butorphanol 0.45 ㎎ / ㎏, azaperone 0.25 ㎎ / ㎏, medetomadine 0.07 ㎎ / ㎏을 포함. BAM 마취 혼합물의 하나의 용량은 전체 우유 수집을위한 충분한 시간을 제공합니다 약 20 ~ 30 분에 대한 문착 마취를합니다. 마취에 대한 또 다른 옵션은 약 10 ~ 15 분 동안 문착 마취가 1-2 ㎎ / ㎏,에서 미다 졸람입니다. 이것은 우유 수집을위한 충분한 시간을 제공하지만 BAM 및 동물이 짧은 시간주기의 끝에서 탈출하려고 시도 할 수 않고, 마취가 더 빠르게 대사된다.
    참고 : 통증에 대한 최소 응답투쟁없이 MJ를 보유하는 R1의 능력 다음에 귀를 접촉시 약간의 반사 신경, 동물이 성공적으로 마취되었음을 나타냅니다.
    주 : 완전히 원래 투여 량으로 마취되지 문착의 경우, 연구자는 다른 관리있다 ¼ 또는 이미왔다 진정의 동물 및 / 또는 레벨의 크기에 따라 마취 혼합물의 일본어 도즈 ½ 달성. 그러나, 이것은 마취 부작용의 가능성을 높일 수 있고, 또한 문착 더 깊게 마취 및 / 또는 시간의 긴 기간 동안 마취를 당할 수도있다.
  3. 마취 동안 건조에서 문착의 눈을 방지하기 위해 각각의 눈과 확산의 모서리에 윤활제의 작은 금액을 적용합니다.

3. 우유 컬렉션

우유 수집은 쉽게 두 연구자와 함께 수행됩니다 에 마취 문착을 보유하는 한 연구원랩 수동 (R1이라 함) 우유, 그리고 편안하고 안전한 위치에 문착의 머리를 유지하고 우유 (R2)를 수집하는 두 번째 연구원을 표현하면서.

  1. 사용되는 마취제에 따라 착유들은 (미다 졸람 유발) 또는 2) 침구없는 대기실에서 청결을 유지하기 위해 (BAM-절차를 수행하는 동안 깨어 있어야 그들에게 안전한 장소를 제공하기 위해 펜에 하나 1)을 수행해야 ) 유도.
  2. R1과 R2는 우유를 유지하는 에탄올을 묻힌 거즈 몇 15의 ML 원뿔 폴리 프로필렌 튜브를 장착해야한다.
  3. 옥시토신을 적용하는 것을 시작으로, 우유 내림은 문착의 유방 영역에 표시 될 것입니다. R1 : 장갑 낀 손과 손가락뿐만 아니라, 전체 유방 및 에탄올을 적신 거즈를 가진 동물의 각각의 유두을 제균. R2 : 호흡의 용이성을 허용하고 반추위의 역류를 방지 할 수있는 안전하고 편안한 위치에 문착의 머리를 잡아. 포집 관의 CL을 잡고 유두에 OSE는 잠재적 인 오염을 방지하기 위해 그것을 건드리지 않고 젖이 되.
  4. 젖꼭지는 우유 부풀어 오른 때까지 부드럽게 상승 움직임에 유방 조직을 짜내는 엄지 손가락과 집게 손가락을 사용하여 하나의 젖꼭지에서 우유를 표현하고 부드럽게 그림 2 참조 (유두에서 그리고 R2 들고 튜브에 우유를 롤 ).
  5. 참고 : R2가 더 우유를 거의 낭비 될 수 있도록 컬렉션 튜브가 위치해야하는 것이 중요하므로 우유, 스트림에 나옵니다.
  6. 문착의 유방은 사분면으로 나누어 져 있습니다. R1 : 우유가 더 이상 쉽게 흘러 나올 때까지 각 사분면에서 우유를 표현하지를 계속합니다. 우유 한 젖꼭지로부터 발현 될 수없는 경우, 제 복귀하기 전에 모든 다른 유두에서 표현. 그것은 다시 와서는 다른 것보다 더 많은 우유를 생산해야 지속적으로 같은 젖꼭지에서 우유를 표현하기 위해 허용하고 유용한 모두 있습니다.

미상 4. 마취 반전

t는 "> 그것은. 대부분의 경우, 암컷은 모든 우유가 표현되기 전에 탈출을 시도합니다 착유 과정에서 일어나 시작 미다 졸람 유도 미상 일반적입니다. 마이너 구속은 우유를 증가하기위한 노력의 일환으로 사용된다 수율은 있지만 연구자와 암컷 모두의 안전과 편안함은 똑같이 중요하다.

  1. BAM의 빠른 반전을위한 ㎎ / medetomadine 피하 2.5 밀리그램 atipamezole 관리 미상 마취.
    주 : 마취의 두 가지 유형으로, 그녀는 비틀 또는 하강하지 않고 자신의 걸을 수있을 때까지 미상의 경과 관찰을 유지하기 위해 필요하고, 흡입의 두려움이나 질식하지 않고 먹고 마실 수있다. 악영향 우유 수집 한 후 간호사 새끼 사슴의 능력에 대해 언급하지 않았습니다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

마우스

우리의 실험에서, 우리는 몇 가지 변수에 의존 한 실험 쥐에서 우유의 약 100 ~ 400 μl를 수집 할 수 있음을 확인했다. 이러한 변수는) 수집을 위해 따로 시간의 양, 2) 옥시토신의 투여 량 투여를, 1을 포함 3) 댐은 간호 및 시간 포스트 분만 4) 양이 얼마나 많은 새끼. 우리의 연구는 댐은 적어도 2 시간 동안 그들의 자손에서 분리 될 때 가장 높은 수익률을 얻을 수있는 것으로 나타났습니다, 한 시간에 적어도 45 분은 착유를위한 마우스마다 따로 설정됩니다. 최대 우유 볼륨 8~12일 옥시토신의 2 IU / kg을 사용하여 분만을 게시 수확했다. 우리의 결과는 쓰레기 크기가 긍정적으로 우유 생산량 9 (그림 3 참조)의 상관 관계를 보였다 다른 연구에 따라 대부분이다.

문착

비록 우유 HAR 량문착에서 기득권은 날마다, 우리가 사용하는 마취 및 / 또는 시간 포스트 분만에 따라, 30 ㎖의 우유 / 댐 / 세션에 5를 수집 할 수 있었다 변수였다. 문착 사슴 polyestrous이다; 우유 (표 1 참조) 2 년에 걸쳐 다양한 시점에서 회수 할 수있다. BAM 유도 미상이 완료 우유 식을 수 있도록, 마취 효과의​​ 더 긴 기간 (20 ~ 30 분)을 유지하는 반면 미다 졸람 유도 미상, 작은 부피 모음 (일반적으로 5 ~ 30 ㎖)을 허용, 적은 10 분 동안 마취하에 남아 (15-130 ㎖). 우유 컬렉션은 우유가 더 이상 암컷에 의해 충분한 양에서 생산되고 때 단종하고, 해당 새끼 사슴은 대부분 건초 사료의 다이어트 영양되고 있었다.

그림 1
그림 1. (A) 댐217;의 젖꼭지는 옥시토신의 주입에 따라 우유와 부풀어 오른된다 (B) 우유의 컬렉션 P-200 pipetman를 사용하여 마취 댐에서 cryovial 1.2 ㎖의 우유 (C) 사출...

그림 2
그림 2. 문착 우유는 15 ML 원뿔 튜브에 수집됩니다.

그림 3
그림 3. 대략적인 우유 생산량은 쓰레기의 크기에 따라 쥐에서 수집하고, 새끼 세.

표 1
표 1. 우유 콜ection 시작 꿰 문착 댐을 수유 날짜를 마무리합니다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

마우스

1 등의 마우스에서 우유를 수집 할 때 고려해야 할 여러 가지 요인이) 수집을 위해 따로 시간의 양, 투여 옥시토신 2) 용량, 3) 댐은 간호 4) 양이 얼마나 많은 새끼가 있습니다 컬렉션의 분만시 이후 경과 된 시간. 지침으로 이전의 연구를 사용하여, 우리는 우유 생산 조건을 최적화하기 위해 밖으로 설정합니다.

이전 연구는 직접 산자 8 우유 생산량 상관 관계가있다. 불행하게도, 쓰레기의 크기가 제어 할 수없는 변수입니다. 그러나, 착유 포스트 분만의 시간을 제어 할 수 있습니다. 실험실 쥐 최대의 우유 분비에 따르면 8~10일 포스트 분만 9시입니다. 우리의 경험은이 문 적합성에 있습니다.

그것은 옥시토신은 우유 생산의 게시물에 바꾸어 놓을 수없는 역할을하는 것으로 밝혀졌다분만 10. 0.1 IU / kg 9 4 IU / kg 6까지 옥시토신의 투여는 설치류 6,7,9에서 우유의 컬렉션에 대해보고되었습니다. 우리는 제안 된 가장 낮은 용량, 0.1 IU / kg 9 투여하여 연구를 시작했다. 이 투여 량을 사용하여, 마우스에 의해 생산 된 우유의 양을 측정하거나 상환하기에 너무 작았 다. 2 IU / kg 6,7에 옥시토신 투여 량을 증가하면, 우유 생산량은 약 120 μL에서 상당히 높았다. 우리는 최적의 우유 컬렉션을 달성하기 위해 옥시토신의 가장 낮은 복용량을 사용하고 싶었 기 때문에, 우리는 2 IU / kg보다 높은 용량을 투여하지 않았다.

우유 생산량은 수집을 위해 따로 시간의 양에 따라 달라집니다. 우리는 3 시간의 최소 재료 준비 및 수집을위한 댐과 1 시간에서 분리 될 수있는 강아지를위한 최적의 컬렉션 2의 시간이 필요하다고 판단했다. 하나의 세션에서 여러 댐에서 우유를 수집하는 데 필요한 전체 시간을 줄일 것각 댐에서 우유를 수집하는 새끼, 설치 자재 30 분 20 ~ 30 분을 분리하는 특정 우유의 양, 즉, 2 시간을 수확. 그들의 새끼로 다시 배치되기 전에 깨어 때까지 각 댐 모니터링해야합니다. 우리는 그녀가 의식을 회복 할 때까지 마우스를 착유 할 수 있기 때문에 착유 위해 곁에 더 많은 시간, 더 높은 우유 생산량에 이르게 지적했다.

인스턴스는 우유 생산량에 영향을 미칠 것이다 동물 모델에서 발생 않습니다. 한 가지 일반적인 문제는 반복적으로 자란 큰 새끼가, 또는 처음 쓰레기를 간호 댐의 한 오래된 댐의 우유에 혈액이나 삼출물의 존재입니다. 이 문제가 발생할 경우, 우리는 특정 젖꼭지에서 우유 수집을 중단하는 것이 좋습니다. 이시기에 피펫 팁을 전환하고 삼출물 또는 혈액을 폐기하는 것이 좋습니다.

이 방법을 수행 연구팀은 또한 동물 모델을 사용하는 경우 대개의 경우와 같이, 결과는 (그림에게 다양 알고 있어야합니다3). 우유 미만 최적 량은 하나의 세션에서 수집되는 경우, 나중에 (예 24-48 시간)에서의 절차를 반복보다는 우유 방출 강제로 실험 조건을 변경하는 것이 바람직하다.

문착

리브스 '문착 댐에서 수집 된 우유의 양은 사용되는 마취제에 의존했다. 선택의 우리의 초기 마취제 미다 졸람했다. R1은 침착 한 처분을했고 문착 진정을 유지할 수있는 경우 문착 자각-것 전에 모두의 안전과 편안함을 미다 졸람은 시간, 즉 짧은 기간 동안 억제 할 수 있도록 충분한 진정 작용을 제공,, R2는 수율을 높일 수있는 착유를 인수 할 수 동물과 핸들러는 매우 중요했고, 우리가 하나가 손상 느꼈다면 우리는 착유 노력을 포기했다. 우리는 과다 복용이 반복 노출 후 필요한 것이라고 문착 미상 빠르게 미다 졸람에 내성이 될 것을 발견하고 우유 수집이 일주일에 두 번 점점 더 어려워.

건물의 허용과 함께 미다 졸람의 부족, 대안 마취 조회 우리를 안내했다. Butorphanol, Azaperone 및 Medetomadine (BAM)의 혼합물을 효과적으로 흰 꼬리 사슴 (11)의 고정에 사용됩니다. 우리 손에, BAM 칵테일 반복 사용 후 적은 약물 내성으로, 안전한 방법으로 우유의 허용 볼륨의 컬렉션을 수 있도록 충분한 마취를 제공하고, 마취의 효과를 반전의 더 나은 제어와.

일부 문착 댐 민감한 젖 고통 및 / 또는 처음 어머니했다. 이 문착는 착유 과정에서 유두에 타박상을 개발하고, 우유 흐름이 둔화 또는 진행중인 세션을 중단하기로 우리에게 메시지를 완전히 중단했다. 이 발생하면, 하나는 유두의 불편이나 멍을 방지하기위한 시도보다 부드러운 착유 기술을 사용한다.

e_content "> 우유 생산) 낮은 우유 수확 1에 의해 발생할 수 있습니다. 여러 차례에 왁스와이지 러짐에 나타난 새끼 사슴이 직전 컬렉션 또는 2) 우유 생산의 감소로 인해 새끼 사슴 이유의 자연적인 과정에 무엇인가를 한.

이 작은 동물 모델에서 우유의 상당한 볼륨을 얻기 위해 시도하는 과정이 될 수 있지만, 우리의 작업은 참으로 마우스와 문착 모델 모두에 대한 가능성이 있음을 보여줍니다; 광범위한 기술이나 자금력, 단순히 인내가 필요없는 둘.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Materials—Mouse
Ketamine (KetaVed 100 mg/ml) (dose: 80-100 mg/kg) MWI/Vedco 011075
Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose: 5-10 mg/kg) MWI/Vedco NADA 139236
Eye lubricant MWI/Apexa 701013
Oxytocin (2 IU/kg) Vet One 501013
Materials—Muntjac
Midazolam (1-2 mg/kg) Amerisource Bergen Drug Corp 924326 Optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic
Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) Fort Dodge Animal Health NADA 135-780
Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) ZooPharm
Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) ZooPharm
Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) Orion Corporation NADA 141-033
Oxytocin (10 IU/kg) Vet One 501013
Equipment—Mouse
P-200 Pipetman Gilson F123601
200 μl pipette tips Light Labs B-2004-SH
1 ml syringes MWI 005427
27 G needles MWI 002031
Equipment—Muntjac
15 ml conical tubes VWR 21008-918
22 G needles MWI 873
3 ml luer lock syringes MWI 001377

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Dueling, S. Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , Available from: http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Muntiacus_reevesi (2004).
  2. Pei, K., Taber, R., O'Gara, B., Wang, Y. Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China. Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).
  3. Browning, S. R. Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP. J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).
  4. Van de perre, P. Transfer of antibody via mother's milk. Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).
  5. Maden, C. Genetically modified mice produce human milk protein. BioNews. , (2009).
  6. Rodgers, C. T. Practical aspects of milk collection in the rat. Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).
  7. Depeters, E. J., Hovey, R. C. Methods for collecting milk from mice. J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).
  8. Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation. 84 (1), 127-133 (1986).
  9. Hedrich, H. J., Bullock, G. R. The laboratory mouse. , 735-736 (2004).
  10. Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).
  11. Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer. 45 (2), 457-467 (2009).

Tags

기본 프로토콜 제 89 마우스 우유 문착 미상
마우스 및 꿰 문착 사슴 우유 수집 방법
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Willingham, K., McNulty, E.,More

Willingham, K., McNulty, E., Anderson, K., Hayes-Klug, J., Nalls, A., Mathiason, C. Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer. J. Vis. Exp. (89), e51007, doi:10.3791/51007 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter