Summary
Indocianina verde Angiografia (o ICGA) eseguita tramite iniezione coda vena offre immagini di alta qualità dei corsi tempo ICGA di caratterizzare anomalie nel topo coroide.
Abstract
Indocianina verde Angiografia (o ICGA) è una tecnica eseguita da oculisti per diagnosticare anomalie del sistema vascolare della retina e della coroide di varie malattie oculari come la degenerazione maculare legata all'età (AMD). ICGA è particolarmente utile per l'immagine della vascolarizzazione della coroide posteriore dell'occhio grazie alla sua capacità di penetrare attraverso lo strato pigmentato con il suo spettro infrarosso. Decorso ICGA può essere diviso in inizio, metà e fasi tardive. Le tre fasi forniscono preziose informazioni sulla patologia di problemi agli occhi. Anche se il tempo portate da ICGA endovenosa (IV) iniezione è ampiamente usato in clinica per la diagnosi e la gestione dei problemi coroide, ICGA mediante iniezione intraperitoneale (IP) è comunemente utilizzato nella ricerca animale. Qui abbiamo dimostrato la tecnica per ottenere immagini ad alta risoluzione ICGA volta portate nei topi tramite iniezione coda vena e confocale laser oftalmoscopia a scansione. Abbiamo usato questa tecnica per l'immagine della coroide lesioni in un modello murino di età-correlate degenerazione maculare. Anche se è molto più facile introdurre ICG alla vascolarizzazione mouse IP, i nostri dati indicano che è difficile ottenere immagini riproducibili corso tempo ICGA da IP-ICGA. Al contrario, ICGA tramite iniezione coda vena fornisce ICGA immagini time-Corso di alta qualità paragonabili a studi umani. Inoltre, abbiamo dimostrato che ICGA eseguita su topi albino dà immagini più chiare dei vasi coroideali quella eseguita su topi pigmentati. Suggeriamo che il tempo-corso IV-ICGA dovrebbe diventare una pratica standard nella ricerca di AMD basata su modelli animali.
Introduction
Indocianina angiografia verde (ICGA) è un test diagnostico per problemi di immagine legati ai vasi sanguigni negli occhi. Lo spettro di assorbimento ICG varia 790-805 nm mentre lo spettro di emissione varia 770-880 nm con il picco di emissione a 835 nm 1. Questo è diverso dall'altro colorante popolare, fluoresceina sodica, il cui spettro rientra nel campo del visibile. Lo spettro infrarosso permette ICG di penetrare attraverso l'epitelio pigmentato retinico (RPE), fluido sieroematico, e essudati lipidici, ognuno dei quali può facilmente bloccare la visualizzazione da base di sodio fluoresceina angiografia con fluoresceina (FA). ICG è del 98% legato alle proteine nel sistema vascolare con conseguente stravaso di meno, consentendo una maggiore rappresentazione dei vasi coroideali e lesioni della coroide 1,2. ICGA è quasi l'unica scelta per visualizzare vascolarizzazione della coroide, che è posteriore RPE. Figura 1 mostra il confronto dei ICGA e FA in vasi di imaging in occhi di topo. FA può be utilizzato per l'immagine del sistema vascolare e della retina, ma non il sistema vascolare della coroide. Al contrario, ICGA può essere utilizzato per l'immagine sia retinica e vascolarizzazione della coroide. ICGA viene eseguita con sistemi di imaging digitale ad alta risoluzione o oftalmoscopi scansione laser (SLO) insieme con videocamere a infrarossi sensibili, che useremo in questo studio.
Nella clinica, ICGA è stato raccomandato nella diagnosi di una serie di disturbi corioretiniche che coinvolge il sistema vascolare della coroide compreso Polypoidal coroide vasculopatia (PCV), retina angiomatose proliferazione (RAP), strie vascolari, vitelliforme distrofia maculare, corioretinopatia sierosa centrale, emangioma della coroide, emorragia retinica macroaneurysms arteriolare, tumori della coroide, e alcune forme di uveite posteriore 1,3. La combinazione di ICGA con FA e Optical Coherence Tomography (OCT) fornire strumenti potenti per i medici nella diagnosi e gestione delle essudativa maculare legata all'etàdegenerazione (AMD) 4-10. ICGA è particolarmente utile per le condizioni che comportano la coroide diagnosi. In realtà, ICGA è considerato il gold standard per la diagnosi di PCV, una variante di AMD essudativa 11-13. PCV è caratterizzato da una rete di ramificazione navi con dilatazioni polypoidal terminali nel sistema vascolare coroideale 11-13. PCV è spesso associata a ricorrenti distaccamenti sieroematico del RPE e della retina con perdite e sanguinamento dai componenti polypoidal 11,14,15. Recentemente abbiamo riportato la generazione del primo modello animale PCV da transgenically esprimendo HTRA1 umano, una serina proteasi multifunzionale, nel topo dell'epitelio pigmentato retinico (RPE) 16. Abbiamo dimostrato che l'aumento HTRA1 indotto caratteristiche del PCV, ad esempio lesioni polypoidal.
Qui abbiamo dimostrato l'uso del time-course ICGA tramite iniezione vena della coda nella ricerca AMD utilizzando il nostro modello di topo HTRA1. I nostri dati suggeriscono cheIV-ICGA è superiore a IP (o sottocutanea (SC))-ICGA che sono attualmente utilizzati nel campo 17,18 per la caratterizzazione di lesioni nella coroide.
Dichiarazione sulla Animal Research
Gli esperimenti sugli animali sono stati condotti secondo protocolli approvati dalla Institutional Animal Care ed uso commissione (IACUC), e sono stati eseguiti in conformità con la Dichiarazione ARVO per l'uso di animali in Oftalmica e Vision Research.
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Protocol
1. Preparazione degli strumenti
- La procedura viene eseguita in una sala operatoria in un impianto animale.
- Indossare mascherine, cuffie capelli, camici chirurgici, piede copertine sterili, guanti prima di iniziare l'esperimento.
- Riscaldare l'acqua in un becher a ~ 40 ° C su una piastra.
- Collocare un tampone sterile blu sulla cima di una piastra elettrica che verrà utilizzato successivamente per mantenere la temperatura corporea del mouse durante l'imaging. Accendere il riscaldamento pad.
- Preparare il sistema di imaging:
- Togliere il coperchio antipolvere e accendere il laser.
- Estrarre la lente 55 ° e montarlo sulla macchina.
- Aprire il software di imaging dal computer e inserire le informazioni del mouse per l'imaging in un nuovo foglio del paziente (ad esempio genotipo, età, ecc.). In "tipo di dispositivo", scegliere la modalità a infrarossi (IR).
Nota: E 'stato riportato che l'uso of una lente asferica doppia esterna può migliorare la qualità dell'immagine 17-20 anche se non abbiamo alcun problema a ottenere immagini di alta qualità da parte IV-ICGA senza l'utilizzo di lenti esterne (vedi risultati rappresentativi, Figure 1-4).
2. Coda Vena Iniezione di ICGA
- Dilatare gli occhi di topo con 1% soluzione oftalmica Tropicamide ed attendere 5 min.
- Pesare il mouse per determinare la quantità di anestesia (Ketamina / xylazina / Acepromazine 65-100/10-20/1-3 mg / kg) necessari.
- Recupero di una siringa sterile da 1 ml con un ago G 32. Iniettare il mouse per via intraperitoneale con anestetici (13 mg / ml di ketamina, 2,6 mg / ml xylazina, 0,3 mg / ml acepromazina in PBS sterile). Attendere che il mouse è completamente anestetizzato (~ 5 min).
- Posizionare la coda di topo in 40 ° C acqua calda per provocare vasodilatazione della vena.
- Recuperare una siringa da 1 ml con un ago G 32. Prelevare la quantità desiderata di ICG, tipicamente 50 microlitri di 1 mg / ml ICG, che è sterile filtrata con un filtro a siringa da 0,2 mM in una provetta sterile, per un 25 g mouse (2 mg / kg). Fare attenzione a non introdurre aria nella siringa.
- Pulire la coda con alcool per sterilizzare la zona da iniettare.
- Tenere la coda con una mano in modo che la vena caudale laterale è alto. Con la smussatura dell'ago verso l'alto, iniettare l'ago ~ 2 millimetri nella vena con un angolo minimo. Fare attenzione a non forare la vena. Disegnare indietro sulla siringa leggermente e cercare tracce di flusso di sangue nel mozzo dell'ago, che indica che l'ago è stato inserito correttamente nella vena.
- Iniettare lentamente ICG nella vena. Ci dovrebbe essere una resistenza minima quando si inietta. Rimuovere l'ago e applicare un tampone imbevuto di alcol direttamente al sito di iniezione per ~ 5-10 sec per fermare le emorragie. Il mouse è pronto per l'imaging. Per raggiungere la fase precoce (0-4 minuti dopo l'iniezione), è Essential per l'immagine con il mouse rapidamente.
Nota: gli occhi del mouse possono ottenere facilmente secca e possono sviluppare la cataratta in anestesia. E 'importante per mantenere l'occhio umido applicando PBS sterile durante la procedura. Pulire l'eccesso di PBS con un tampone di cotone sterile prima della registrazione ICGA. Altri laboratori hanno utilizzato una lente a contatto per evitare la disidratazione del 17-20 cornea.
3. ICG Angiografia
- Inizia a prendere le immagini 30-40 secondi dopo ICG iniezione, che consente la cattura della prima fase del riempimento della coroide fino circolazione della retina e della coroide sono alla massima luminosità (0-4 min). La vascolarizzazione retinica è meglio visualizzato alla messa a fuoco ~ 35-45 diottrie e vascolare della coroide è visualizzato a 10-15 diottrie.
Nota: Durante la prima visita di un modello animale, si consiglia di acquisire immagini da tutte le angolazioni (nasali, temporale, dorsale e ventrale) per individuare tutte le possibili abnormalities nel sistema vascolare. Durante la prima fase, entrambe le arterie e le vene della coroide medie e grandi sono ben visualizzati. Nel modello animale utilizzato in questo protocollo, le lesioni della coroide (ad esempio polypoidal dilatazioni) possono iniziare a comparire 1 min in fase precoce. - Impostare la messa a fuoco dell'immagine sul sistema vascolare. Controllo per la luminosità e messa a fuoco utilizzando il modulo di controllo e la manopola di messa a fuoco, rispettivamente. Questi valori sono regolabili digitalmente e sono facilmente mantenute costanti. Mantenere la distanza dall'occhio mouse per il costante obiettivo della fotocamera per assicurare una qualità dell'immagine è riproducibile con la tecnica che segue.
Nota: Poiché il dispositivo può solo immagine una porzione dell'occhio posteriore, cerchiamo di mantenere la messa a fuoco, luminosità, e la distanza tra la lente e l'occhio telecamera topo costante come immagine dell'intero posteriore dell'occhio da diverse angolazioni. La chiave di questo è quello di allineare la luminescenza di forma circolare emessa dal ICG attraverso l'occhio con il campo di view della telecamera. Questo si ottiene facendo da sinistra a destra, su e giù, e in-and-out regolazioni della posizione della telecamera fino a quando l'intera immagine ha aree scure. Quando la luminescenza e il campo visivo della telecamera sono allineati, la distanza dall'occhio alla lente può essere riproducibile per la successiva serie di immagini e ad una distanza ottimale per l'imaging di qualità. - Una volta che il sistema vascolare è a fuoco, catturare i fotogrammi dell'immagine premendo il pulsante rotondo nero sul modulo di acquisizione. Il pulsante nero rotondo può anche essere utilizzato per ridurre o aumentare il segnale di ICG per una migliore qualità dell'immagine.
- Determinare l'angolo di visione ottimale e la profondità di messa a fuoco dell'immagine lesioni della coroide. È importante mantenere la posizione dell'occhio, la profondità di messa a fuoco, e altre impostazioni dei dispositivi fissi per tutto il tempo portate ICGA. Le immagini vengono salvate premendo il tasto acquisire sul pannello touch screen del modulo di acquisizione.
- Acquisire le immagini nella fase centrale a 6-15 min poppainiezione er.
Nota: Sia la coroide e vasi retinici diventano meno distinti. Vascolare della coroide appare fluorescenza diffusa. Le lesioni della coroide espositrici iperfluorescenza emergono in contrasto con la dissolvenza circostante sfondo normale fluorescenza. - Acquisire le immagini in fase tardiva a 17-25 minuti dopo l'iniezione.
Nota: iperfluorescenza svanisce. Entrambi i vasi della coroide e della retina non sono più visibili. La testa del nervo ottico diventa nero. Le lesioni della coroide Hyperfluorescent hanno un contrasto massimo con lo sfondo dissolvenza. - Dopo aver terminato l'acquisizione delle immagini, applicare un gel trasparente lubrificante occhio agli occhi del mouse e lasciare il mouse su una piastra elettrica per il recupero.
- Topi tornare alle loro gabbie e la zona della holding. Esportare le immagini come file TIFF o JPEG per ulteriori analisi.
Nota: I tempi di ciascuna fase non è assoluto. Abbiamo trovato che i tempi di bisfase ch potrebbe cambiare a seconda della quantità di ICG iniettato. Più ICG tende a prolungare ogni fase. Il modo migliore per definire una fase corrisponde alle caratteristiche di ciascun fase sopra elencati.
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Representative Results
Abbiamo eseguito andamento nel tempo ICGA in HtrA1 topi transgenici e fratellini WT di controllo, che sono entrambi sullo sfondo CD1. Il CD1 sfondo albino è stato scelto per facilitare indocianina angiografia con verde (ICGA) immagini (vedi la discussione). Alcuni aneurisma come dilatazioni cominciarono ad apparire nella prima fase nel topo HTRA1 (Figura 2, una freccia rossa indica la dilatazione sulla punta di una nave e un cerchio rosso indica un tipo di cluster di lesione polypoidal). Vasi coroideali sono chiaramente visibili sia in topi WT e HtrA1 durante questo inizio di fill-in fase di colorante ICG. Nella fase intermedia, le lesioni hyperfluorescent nella fase iniziale sono diventate più chiare e più lesioni cominciarono ad apparire, mentre i vasi coroideali cominciato a svanire nel topo HTRA1 (cerchi gialli indicano la comparsa di altre lesioni). Nella fase tardiva, lesioni della coroide del mouse HTRA1 divennero più "distinto", come tutte le navi svanirono in secondo piano. Il nervo ottico la testa era buio sia WT e topi HtrA1 (frecce verdi). Le caratteristiche principali delle tre fasi sono simili al corso di tempo ICGA nei pazienti con AMD umani (prima fase, 0-3 min; fase intermedia, 5-15 min; fase tardiva, 18-22 min) 1.
Figura 1. Confronto tra FA e ICGA nel topo imaging della retina e della coroide vascolare. Topi WT CD1 sono stati immaginata dal IV-FA e IV-ICGA utilizzando un sistema di imaging multimodale. Vasi retinici possono essere visti sia in FA e ICGA. Vasi coroideali possono essere visti solo in ICGA. Clicca qui per vedere l'immagine ingrandita .
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Figura 2. Decorso ICGA di HTRA1 topi transgenici per iniezione IV. Un controllo WT e un mouse HTRA1 transgenico sono stati ripresi da ICGA (con iniezione di vena della coda). Una freccia rossa indica la dilatazione sulla punta di una nave (singolo polipo) e un cerchio rosso indica una lesione polypoidal tipo cluster, che è apparso nel prima fase. Cerchi gialli indicano diverse lesioni che apparivano nella fase centrale. Frecce verdi indicano la testa del nervo ottico buio sia in topi WT e HtrA1. Si noti che le lesioni polypoidal appaiono nella fase iniziale della ICGA e diventano più distinti nella fase centrale, come negli studi umani 21-24. Le lesioni dot discreti appaiono nella fase centrale e diventare evidente nelle fasi tardive (ad esempio, il più grande cerchio giallo indica tre lesioni dot). Clicca qui per vedere l'immagine ingrandita . 
Figura 3. Decorso ICGA di HTRA1 topi transgenici mediante iniezione IP. HtrA1 topi transgenici sono stati ripresi 5, 12, e 20 minuti dopo l'iniezione IP di ICG. Le immagini delle due righe del pannello sono stati prelevati da due diversi topi transgenici HTRA1. Si noti che il sistema vascolare della coroide è in gran parte invisibile anche 5 minuti dopo l'iniezione (12 min per il mouse nei pannelli inferiori). Clicca qui per vedere l'immagine ingrandita .
Figura 4. Decorso ICGA di un pigmentoed (C57Bl6) e un albino (CD1) topo mediante iniezione IV. Notare la differenza nella chiarezza dei vasi della coroide tra pigmentato e topi albini. Clicca qui per vedere l'immagine ingrandita .
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Discussion
In questo studio, abbiamo dimostrato l'uso di ICGA per immagini delle lesioni della coroide in HtrA1 topi transgenici. Le caratteristiche del primo, mezzo, e fasi tardive della ICGA nel nostro modello di topo corrispondono il decorso bene negli studi umani 1. Questo è importante per fare meglio il confronto tra patologia e animali fenotipi umani, che sono di valore inestimabile per la ricerca sui meccanismi fisiopatologici e strategie di trattamento di condizioni relative alla coroide come AMD.
Per prima eseguito ICGA nei topi mediante iniezione IP verificando che il decorso era altamente variabile dal topo topo, probabilmente a causa dell'assorbimento variabile del colorante ICG dalla cavità corporea nell'addome (Figura 3). Questo rende difficile il confronto con gli studi umani provocati da iniezione IV. Inoltre, le caratteristiche angiografiche diverse fasi del IV-ICGA sono molto utili per la caratterizzazione di differenti tipi di lesioni coroideali in animali modelli. La maggior parte delle persone scelgono di evitare l'iniezione IV (ad esempio in FA) per i topi a causa della sfida tecnica di eseguire l'iniezione vena della coda (vene coda di topo sono minuscole). Tuttavia, lo sforzo è ben speso considerando la natura riproducibile di questa tecnica e la quantità di informazioni ottenute. Una volta che abbiamo imparato la tecnica di iniezione coda vena, gli altri passaggi sono piuttosto simili a IP-ICGA. Vale la pena ricordare che si deve ottenere tutto preparato in anticipo (ad es Imaging System), al fine di catturare la brevissima fase iniziale (0-4 min). Abbiamo confrontato IP-ICGA vs IV-ICGA per studiare vari topi transgenici HtrA1. Abbiamo fatto ~ 100 topi per ciascun metodo. La conclusione è che IV-ICGA è superiore a IP-ICGA per caratterizzare lesioni nella coroide. Time-Corso IV-ICGA è diventata la nostra pratica standard per esaminare modelli murini AMD. Per lo stesso motivo, suggeriamo che i ricercatori dovrebbero prendere in considerazione l'esecuzione di IV-FA per la ricerca sugli animali.
t "> A parte il percorso di iniezione, abbiamo notato che il colore pigmento influenza anche la qualità di ICGA. Precedenti studi riportati anche questo" effetto pigmentazione "18,25. Tuttavia, non sono disponibili informazioni sulla influenza del colore del mantello sulla diversa fasi di ICGA. Abbiamo confrontato ICGA tra topi pigmentato (C57Bl6) e topo albino (CD1) dal decorso IV-ICGA. Grandi vasi coroideali appaiono sfocate e meno chiara, mentre i piccoli vasi sono difficili da vedere in topi C57BL6, che è in netto contrasto alle immagini molto più nitide di grandi e piccoli vasi della coroide in topi CD1 (Figura 4). La più grande differenza è stata osservata nella fase iniziale anche se la fase centrale è anche influenzata. Non c'è grande differenza nel ICGA fase di ritardo a causa di la dissolvenza del segnale ICG nei vasi della coroide. Apparentemente, ICG fluorescenza può essere parzialmente bloccato dal RPE e melanociti nella coroide nei topi pigmentati. Come suggerimento, si può prendere in considerazione breeding loro modelli AMD in secondo piano CD1 di ottenere alta risoluzione ICGA.Sebbene FA è più ampiamente usato su modelli animali AMD, ICGA è essenziale nel rilevare anomalie nel sistema vascolare della coroide. La capacità di osservare il mouse vascolare della coroide ad alta risoluzione in tempo reale può aiutare molto i ricercatori nella caratterizzazione di modelli murini AMD e in correlazione con i dati istopatologici. La combinazione di ICGA, FA e PTOM sarà estremamente utile per caratterizzare il fenotipo di modelli AMD come nella diagnosi di AMD in pazienti umani. Dal momento che il mouse è attualmente il modello animale più utilizzato per la ricerca AMD 26-29, time-course IV-ICGA può svolgere un ruolo più ampio nella comunità di ricerca.
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Disclosures
YF è un inventore di due brevetti pendenti che sono rilevanti per il modello di topo AMD utilizzato in questo lavoro. SK, ZB, e ADJ hanno nulla da rivelare.
Acknowledgments
Questo lavoro è stato sostenuto da NIH concedere 1R01EY022901, il Career Development Award da Research per prevenire la cecità (RPB), CMReeves & MA Reeves Foundation, E. Matilda Ziegler Foundation for the Blind, Cavalieri Templari Eye Foundation, e una sovvenzione illimitata al Dipartimento di Oftalmologia presso l'Università dello Utah da RPB. Ringraziamo Balamurali Ambati per l'assistenza tecnica sul Spectralis Multi-Modalità Imaging System e Zhang Tao per le discussioni e commenti sul manoscritto.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Spectralis Multi-Modality Imaging System | Heidelberg Engineering, Germany | SPECTRALIS HRA+OCT | |
| Tropicamide ophthalmic solution (1%) | Bausch & Lomb | NDC 24208-585-64 | for dilation of pupils |
| GenTeal Gel | Genteal | NDC 58768-791-15 | clear lubricant eye gel |
| Ketamine | Vedco Inc | NDC 50989-996-06 | |
| Xylazine | Lloyd Laboratories | NADA 139-236 | |
| Acepromazine | Vedco Inc | NDC 50989-160-11 | |
| 32-G Needle | Steriject | PRE-32013 | |
| 1-ml syringe | BD | 309659 | |
| Indocyanine Green | Pfaltz & Bauer | I01250 |
References
- Duane, T. D., Tasman, W., Jaeger, E. A. Chapter 4a, Indocyanine Green Angiography. Duane's clinical ophthalmology on CD-ROM. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. (2002).
- Alfaro, D. V. Age-related macular degeneration : a comprehensive textbook. , Lippincott Williams & Wilkins. (2006).
- Yannuzzi, L. A. Indocyanine green angiography: a perspective on use in the clinical setting. Am. J. Ophthalmol. 151, 745-751 (2011).
- Destro, M., Puliafito, C. A. Indocyanine green videoangiography of choroidal neovascularization. Ophthalmology. 96, 846-853 (1989).
- Scheider, A., Schroedel, C. High resolution indocyanine green angiography with a scanning laser ophthalmoscope. Am. J. Ophthalmol. 108, 458-459 (1989).
- Guyer, D. R., et al. Digital indocyanine-green angiography in chorioretinal disorders. Ophthalmology. 99, 287-291 (1992).
- Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J. A., Guyer, D. R., Orlock, D. A. Digital indocyanine green videoangiography and choroidal neovascularization. Retina. 12, 191-223 (1992).
- Regillo, C. D., Benson, W. E., Maguire, J. I., Annesley, W. H. Indocyanine green angiography and occult choroidal neovascularization. Ophthalmology. 101, 280-288 (1994).
- Scheider, A., Kaboth, A., Neuhauser, L. Detection of subretinal neovascular membranes with indocyanine green and an infrared scanning laser ophthalmoscope. Am. J. Ophthalmol. 113, 45-51 (1992).
- Kuck, H., Inhoffen, W., Schneider, U., Kreissig, I. Diagnosis of occult subretinal neovascularization in age-related macular degeneration by infrared scanning laser videoangiography. Retina. 13, 36-39 (1993).
- Imamura, Y., Engelbert, M., Iida, T., Freund, K. B., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy: a review. Surv. Ophthalmol. 55, 501-515 (2010).
- Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy. Ophthalmol. Clin. N. Am. 15, 537-554 (2002).
- Spaide, R. F., Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J., Orlach, D. A. Indocyanine green videoangiography of idiopathic polypoidal choroidal vasculopathy. Retina. 15, 100-110 (1995).
- Coppens, G., Spielberg, L., Leys, A. Polypoidal choroidal vasculopathy, diagnosis and management. Bull. Soc. belge d'Ophtalmol.. , 39-44 (2011).
- Tsujikawa, A., et al. Pigment epithelial detachment in polypoidal choroidal vasculopathy. Am. J. Ophthalmol. 143, 102-111 (2007).
- Jones, A., et al. Increased expression of multifunctional serine protease, HTRA1, in retinal pigment epithelium induces polypoidal choroidal vasculopathy in mice. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 14578-14583 (2011).
- Alex, A. F., Heiduschka, P., Eter, N. Retinal fundus imaging in mouse models of retinal diseases. Methods Mol. Biol. 935, 41-67 (2013).
- Seeliger, M. W., et al. In vivo confocal imaging of the retina in animal models using scanning laser ophthalmoscopy. Vision Res. 45, 3512-3519 (2005).
- Fischer, M. D., Zhour, A., Kernstock, C. J. Phenotyping of mouse models with OCT. Methods Mol. Biol. 935, 79-85 (2013).
- Jian, Y., Zawadzki, R. J., Sarunic, M. V. Adaptive optics optical coherence tomography for in vivo mouse retinal imaging. J. Biomed. Opt. 18, 56007 (2013).
- Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Huang, S. J., Costa, D. L., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy. Surv. Ophthalmol. 49, 25-37 (2004).
- Sasahara, M., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy with choroidal vascular hyperpermeability. Am. J. Ophthalmol. 142, 601-607 (2006).
- Silva, R. M., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy and photodynamic therapy with verteporfin. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 243, 973-979 (2005).
- Yannuzzi, L. A., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy masquerading as central serous chorioretinopathy. Ophthalmology. 107, 767-777 (2000).
- Janssen, A., et al. Abnormal vessel formation in the choroid of mice lacking tissue inhibitor of metalloprotease-3. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 2812-2822 (2008).
- Ding, X., Patel, M., Chan, C. C. Molecular pathology of age-related macular degeneration. Prog. Retin. Eye Res. 28, 1-18 (2009).
- Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. Animal models of choroidal and retinal neovascularization. Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).
- Pennesi, M. E., Neuringer, M., Courtney, R. J. Animal models of age related macular degeneration. Mol. Aspects Med. 33, 487-509 (2012).
- Elizabeth Rakoczy, P., Yu, M. J., Nusinowitz, S., Chang, B., Heckenlively, J. R. Mouse models of age-related macular degeneration. Exp. Eye Res. 82, 741-752 (2006).
