Summary
Indocyaningrønt angiografi (eller ICGA) udført af haleveneinjektion leverer høj kvalitet ICGA tidsforløb billeder til at karakterisere abnormaliteter i mus årehinden.
Abstract
Indocyaningrøn angiografi (eller ICGA) er en teknik udføres af øjenlæger at diagnosticere abnormiteter i choroidal og retinal vaskulatur af forskellige øjensygdomme såsom aldersrelateret makulær degeneration (AMD). ICGA er især nyttig til billede bageste koroidal vaskulatur i øjet på grund af sin evne til at trænge igennem det pigmenterede lag med sit infrarøde spektrum. ICGA tidsforløb kan opdeles i begyndelsen, midten og sene faser. De tre faser give værdifulde oplysninger om patologi øjenproblemer. Selvom tiden-retters ICGA ved intravenøs (IV) injektion er meget udbredt i klinikken for diagnosticering og behandling af choroide problemer, ICGA ved intraperitoneal injektion (IP) er almindeligt anvendt i dyreforsøg. Her har vi vist den teknik til at opnå høj opløsning ICGA tid-retters billederne i mus ved hale-vene indsprøjtning og konfokal scanning laser oftalmoskopi. Vi brugte denne teknik til billede choroidale lemelser i en musemodel af aldersrelateret makuladegeneration. Selv om det er meget lettere at introducere ICG til musen vasculature af IP, tyder vore data, at det er vanskeligt at opnå reproducerbare ICGA tidsforløb billeder ved IP-ICGA. I modsætning hertil ICGA via haleveneinjektion giver høj kvalitet ICGA tid-retters billeder sammenlignes med humane studier. Desuden viste vi, at ICGA udført på albino mus giver klarere billeder af choroidale fartøjer end der udføres på pigmenterede mus. Vi foreslår, at tidsforløbet IV-ICGA bør blive en almindelig praksis i AMD forskning baseret på dyremodeller.
Introduction
Indocyaningrønt angiografi (ICGA) er en diagnostisk test til billede problemer relateret til blodkarrene i øjet. Absorptionsspektret for ICG spænder fra 790 til 805 nm, mens emissionsspektret spænder fra 770 til 880 nm med topemission ved 835 nm 1. Dette er forskelligt fra de andre populære farvestof, natriumfluorescein, hvis frekvenser falder i det synlige område. Det infrarøde spektrum giver ICG at gennemtrænge retinale pigmentepitel (RPE), serosanguineous væske og lipid ekssudater, som alle nemt kan blokere visualisering af natrium-fluorescein baseret fluoresceinangiografi (FA). ICG er 98% proteinbundet i karrene resulterer i mindre ekstravasation tillader forbedret billeddannelse af choroidale fartøjer og choroidale læsioner 1,2. ICGA er næsten det eneste valg at visualisere choroidal vaskulatur, som er posteriort RPE. Figur 1 viser sammenligning af ICGA og FA i billedbehandling vaskulaturen i muse øjne. FA kan be brugt til billede retinal vaskulatur godt, men ikke den choroidal kar. I modsætning hertil kan ICGA anvendes til billedet både nethinden og årehinden vaskulatur. ICGA udføres med høj opløsning digital billedbehandling systemer eller scanning laseroftalmoskoper (SLO) sammen med infrarød-følsomme videokameraer, som vi vil bruge i denne undersøgelse.
I klinikken har ICGA blevet anbefalet at diagnosticere en række chorioretinal lidelser i forbindelse med koroidale vaskulaturen herunder Polypoidal Choroidal vaskulopati (PCV), Retinal angiomatous spredning (RAP), angioid striber, vitelliform makulært dystrofi, central serøs chorioretinopati, koroidal hemangioma, hemorrhaging retinal arteriolære macroaneurysms, koroidale tumorer og visse former for posterior uveitis 1,3. Kombinationen af ICGA med FA og optisk kohærenstomografi (OLT) giver stærke redskaber til klinikerne i diagnosticering og behandling af eksudativ aldersrelateret maculadegeneration (AMD) 4-10. ICGA er især nyttigt til at diagnosticere tilstande, der involverer årehinden. Faktisk er ICGA betragtes som den gyldne standard til diagnosticering af PCV, en variant af exudativ AMD 11-13. PCV er kendetegnet ved et netværk af forgrening fartøjer med terminal polypoidal dilations i choroidale vasculature 11-13. PCV er ofte forbundet med tilbagevendende serosanguineous afdelinger af RPE og nethinden med lækage og blødning fra polypoidal komponenter 11,14,15. Vi har for nylig rapporteret dannelsen af den første PCV dyremodel af transgent udtrykker human HTRA1, en multifunktionel serinprotease, i muse retinale pigmentepitel (RPE) 16. Vi viste, at øget HTRA1 inducerede karakteristiske træk ved PCV, f.eks polypoidal læsioner.
Her viste vi brug af tidsforløbet ICGA ved haleveneinjektion i AMD forskning ved hjælp af vores HTRA1 musemodel. Vores data tyder på, atIV-ICGA er overlegen i forhold til IP (eller subkutan (SC))-ICGA, der i øjeblikket anvendes inden for området 17,18 til karakterisering læsioner i årehinden.
Erklæring om Animal Research
Dyreforsøg blev udført i henhold til protokoller, der er godkendt af Institutional Animal Care og brug Udvalg (IACUC), og blev udført i overensstemmelse med ARVO erklæring til brug af dyr i Ophthalmic og Vision Research.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1.. Udarbejdelse af instrumenter
- Proceduren udføres i en procedure rum i et dyr facilitet.
- Bær dykkermasker, hår huer, kirurgiske kjoler, sterile mund-covers og handsker, før du begynder eksperimentet.
- Varm vand i et bægerglas til ~ 40 ° C på en kogeplade.
- Placer en steril blå pude oven på en varmepude, der senere vil blive anvendt til at fastholde musen kropstemperatur under billedbehandling. Tænd varmepude.
- Forbered Imaging System:
- Fjern støvhætten og tænd laseren.
- Tag 55 ° linse og montere den på maskinen.
- Åbn imaging software fra computeren og indtaste oplysningerne på musen til billeddannelse under et nyt patients ark (f.eks genotype, alder mv.). Under "device type", vælg Infrarød (IR)-tilstand.
Bemærk: Det er blevet rapporteret, at brugen of en ekstern dobbelt asfæriske linse kan forbedre billedkvaliteten 17-20 selvom vi har ikke noget problem i at få billeder af høj kvalitet med IV-ICGA uden brug af eksterne linser (se repræsentative resultater, figur 1-4).
2. Haleveneinjektion af ICGA
- Spile mus øjne med 1% Tropicamide øjendråber og vente 5 min.
- Musen afvejes for at bestemme mængden af anæstesi (Ketamin / Xylazin / Acepromazin 65-100/10-20/1-3 mg / kg) nødvendig.
- Hent en steril 1-ml sprøjte sammen med en 32 G kanyle. Injicere mus intraperitonealt med anæstetika (13 mg / ml ketamin, 2,6 mg / ml xylazin, 0,3 mg / ml acepromazin i sterilt PBS). Vent musen er fuldt bedøvet (~ 5 min.)
- Anbring musen hale i 40 ° C varmt vand for at forårsage vasodilation af venen.
- Hent en 1 ml sprøjte med en 32 G kanyle. Træk den ønskede mængde ICG, typisk 50 pi 1 mg / ml ICG, som sterilfiltreres med et 0,2 pM sprøjtefilter i et sterilt rør til en 25 g mus (2 mg / kg). Vær forsigtig med ikke at indføre nogen luft ind i sprøjten.
- Tør hale med en spritserviet til at sterilisere området, der skal injiceres.
- Hold halen med den ene hånd, således at den laterale halevene er opad. Med facet af nålen opad, injicere nålen ~ 2 mm ind i venen på en minimal vinkel. Vær omhyggelig med ikke at perforere venen. Tegn tilbage på sprøjten let og se efter spor af blodgennemstrømningen i nålenavet, hvilket indikerer, at nålen med succes blev indsat i venen.
- Injicer langsomt ICG ind i venen. Der bør være minimal modstand, når injektionen. Fjern kanylen og anvende en spritserviet direkte til injektionsstedet i ~ 5-10 sek for at stoppe blødning. Musen er derefter klar til billeddannelse. For at fange den tidlige fase (0-4 min efter injektion), er det essential til billedet musen hurtigt.
Bemærk: Mus øjne kan nemt få tør og kan udvikle grå stær under anæstesi. Det er vigtigt at holde øjet fugtigt ved anvendelse af sterilt PBS under proceduren. Tør overskydende PBS med en steril vatpind, før ICGA optagelse. Andre laboratorier har brugt en kontaktlinse for at undgå dehydrering af hornhinden 17-20.
3. ICG angiografi
- Start med at tage billeder 30-40 sek efter ICG injektion, der tillader indfangning af den tidlige fase af choroidal fyldning indtil nethinde og koroidale oplag er ved maksimal lysstyrke (0-4 min.) Retinale vaskulatur bedst visualiseres ved fokus ~ 35-45 dioptrier og choroidal vaskulatur visualiseres 10-15 dioptrier.
Bemærk: Under den første gennemgang af en dyremodel, anbefales det at tage billeder fra alle vinkler (nasale, tidsmæssige, bryst og bug) at identificere alle mulige abnormalities i vaskulaturen. I den tidlige fase, er begge mellemstore og store koroidale arterier og vener godt visualiseret. I dyremodel anvendt i denne protokol, kan koroidale læsioner (f.eks polypoidal dilations) begynder at dukke 1 min i den tidlige fase. - Indstil billedet fokus på vaskulaturen. Control til lysstyrke og fokus ved hjælp af styremodulet og fokus knop, hhv. Disse værdier kan justeres digitalt og er let holdes konstant. Hold afstand fra muse øje til kameralinsen konstant for at sikre billedkvaliteten er reproducerbar ved hjælp af teknikken, der følger.
Bemærk: Da enheden kan kun billede af en del af den bageste øje, forsøger vi at holde fokus, lysstyrke og afstanden mellem kameralinsen og musen øjet konstant som vi billede af hele bageste øje fra forskellige vinkler. Nøglen til dette er at tilpasse cirkelformet luminescens udsendes af ICG gennem øjet med området view af kameraet. Dette gøres ved at foretage venstre-til-højre, op og ned, og i-og-ud justeringer af kameraets position, indtil hele billedet har nogen mørke områder. Når luminescens og synsfeltet på kameraet er linet op, vil afstanden fra øjet til linsen kunne reproduceres for det næste sæt af billeder såvel som på et optimalt afstand for kvalitet billeddannelse. - Når karrene er i fokus, fange billedrammer ved at trykke på det runde sorte knap på købet modulet. Den runde sorte knap kan også bruges til at reducere eller øge signalet fra ICG for bedste billedkvalitet.
- Bestem den optimale synsvinkel og fokusere dybde til billedet koroidale læsioner. Det er vigtigt at holde positionen af øjet, fokus dybde og andre enhedsindstillinger fastsat for hele tidsforløbet ICGA. Billederne gemmes ved at trykke på knappen Hent på touch screen panel af købet modulet.
- Anskaf billeder i den midterste fase ved 6-15 min agterudis injektion.
Bemærk: Både choroidale og nethindekarrene bliver mindre tydelig. Choroidal vaskulatur forekommer som diffus fluorescens. Choroidal læsioner udviser hyperfluorescence opstår i modsætning til fading omgivende normale baggrundsfluorescens. - Anskaf billeder i den sene fase på 17-25 minutter efter injektion.
Bemærk: Hyperfluorescence svinder. Både choroidale og nethindekarrene ikke længere er synlige. Den synsnerven bliver sort. Hyperfluorescent koroidale læsioner har maksimal kontrast til fading baggrund. - Efter endt erhvervelse af billeder, anvende en klar smøremiddel øjengel til mus øjne og overlade musen på en varmepude til nyttiggørelse.
- Retur mus til deres bure og holde området. Eksporter billeder som TIFF-eller JPEG-filer til videre analyse.
Bemærk: Tidspunktet for hver fase er ikke absolut. Vi fandt, at timingen af each fase kan ændre sig afhængigt af mængden af ICG injiceres. Mere ICG tendens til at forlænge hver fase. Den bedste måde at definere en fase er i overensstemmelse med de vigtigste elementer i hver fase, der er anført ovenfor.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Vi udførte ICGA tidsforløb i HTRA1 transgene mus og kontrol WT søskende, som begge er på CD1 baggrunden. Albino CD1 baggrund blev udvalgt til at lette indocyaningrønt angiografi (ICGA) imaging (se diskussionen). Nogle aneurism ligesom dilations begyndte at dukke op i den tidlige fase i HTRA1 mus (figur 2, en rød pil viser dilatation på spidsen af et skib og en rød cirkel angiver en klynge typen polypoidal læsion). Choroidale skibe er tydeligt i både WT og HTRA1 mus under denne tidlige fill-in fase af ICG farvestof. I midten fase, de hyperfluorescent læsioner i den tidlige fase blev tydeligere og flere læsioner begyndt at dukke mens choroidale skibe begyndte at falme i HTRA1 mus (gule cirkler angiver forekomsten af flere læsioner). I den sene fase, koroidale læsioner af HTRA1 mus blev mere "tydelig", som alle de fartøjer, forsvandt i baggrunden. Synsnerven hoved var mørkt i både WT og HTRA1 mus (grønne pile). De vigtigste elementer i de tre faser er svarer til ICGA tidsforløbet i humane AMD patienter (tidlig fase, 0-3 min; midterste fase, 5-15 min; sen fase, 18-22 min) 1..
Figur 1. Sammenligning af FA og ICGA i billedbehandling mus retinal og choroidal kar. WT CD1 mus blev afbildet ved IV-FA og IV-ICGA hjælp af en multimodalitet Imaging System. Nethindekarrene kan ses i både FA og ICGA. Choroidale fartøjer kan kun ses i ICGA. Klik her for at se større billede .
/ 51061fig2highres.jpg "src =" / files/ftp_upload/51061/51061fig2.jpg "/>
Figur 2. ICGA tidsforløbet af HTRA1 transgene mus ved intravenøs injektion. En WT kontrol og en HTRA1 transgen mus blev afbildet ved ICGA (med haleveneinjektion). En rød pil viser dilatation på spidsen af et fartøj (enkelt polyp) og en rød cirkel angiver en klynge typen polypoidal læsion, der udkom i tidlig fase. Gule cirkler angiver adskillige læsioner, der dukkede op i midten fase. Grønne pile peger til den mørke synsnerven i både WT og HTRA1 mus. Bemærk at polypoidal læsioner vises i den tidlige fase af ICGA og blive mere tydelig i midten fase som i humane studier 21-24. Diskrete dot læsioner vises i midten fase og bliver klar i sene faser (fx den største gule cirkel med angivelse af tre prik læsioner). Klik her for at se større billede . 
Figur 3. ICGA tidsforløbet af HTRA1 transgene mus ved IP-injektion. HTRA1 transgene mus blev afbildet 5, 12 og 20 minutter efter IP-injektion af ICG. Billederne af de to panel rækker blev taget fra to forskellige HTRA1 transgene mus. Bemærk, at den koroidale vaskulaturen er for det meste usynlig selv 5 minutter efter injektion (12 min til musen i den nederste paneler). Klik her for at se større billede .
Figur 4.. ICGA Tidsforløbet for et pigmented (C57BL6) og en albino (CD1) mus ved intravenøs injektion. Bemærk forskellen i klarheden af koroidal vaskulatur mellem pigmenterede og albino mus. Klik her for at se større billede .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
I denne undersøgelse har vi vist, at brug af ICGA til billede choroidale læsioner i HTRA1 transgene mus. Kendetegnene for de tidlige, midterste og sene faser af ICGA i vores musemodel matche tidsforløbet godt i humane undersøgelser 1.. Det er vigtigt at gøre bedre sammenligninger mellem menneskelige patologi og animalske fænotyper, som er uvurderlig for forskning på patofysiologiske mekanismer og behandling strategier for forhold relateret til årehinden som AMD.
Vi først udført ICGA i mus ved IP-injektion og fandt, at tidsforløbet var meget varierende fra mus til mus, sandsynligvis på grund af den varierende absorption af ICG farvestof fra kropshulrummet i maven (figur 3). Dette gør det vanskeligt at sammenligne med humane undersøgelser udført af IV injektion. Desuden angiografiske karakteristika forskellige faser af IV-ICGA er meget nyttige til at karakterisere forskellige typer af choroidale læsioner i dyr modeller. De fleste mennesker vælger at undgå IV injektion (fx i FA) for mus på grund af den tekniske udfordring at udføre haleveneinjektion (mus halevener er lille). Imidlertid er indsatsen godt brugt overvejer reproducerbar karakter af denne teknik, og mængden af oplysninger opnået. Når vi mestrer teknikken med haleveneinjektion, de andre trin er temmelig magen til IP-ICGA. Det er værd at nævne, at man har til at få alt forberedt på forhånd (f.eks Imaging System) for at fange den meget korte tidlige fase (0-4 min.) Vi sammenlignede IP-ICGA vs IV-ICGA for at studere forskellige HTRA1 transgene mus. Vi har gjort ~ 100 mus for hver metode. Konklusionen er, at IV-ICGA er overlegen i forhold til IP-ICGA til at karakterisere læsioner i årehinden. Time-kursus IV-ICGA er blevet vores standard praksis at undersøge AMD musemodeller. Af samme grund, foreslår vi, at forskerne bør overveje at udføre IV-FA for dyreforsøg.
t "> Andre end ruten injektion, bemærkede vi, at pigment farve har også indflydelse på kvaliteten af ICGA. Tidligere undersøgelser rapporterede også denne" pigmentering effekt "18,25. Dog foreligger der ingen oplysninger om påvirkning af pelsfarven på de forskellige faser af ICGA. Vi sammenlignede ICGA mellem pigmenterede mus (C57BL6) og albino mus (CD1) ved tidsforløbet IV-ICGA. Big choroidale skibe synes fuzzy og mindre klar, mens de små skibe er svære at se i C57Bl6 mus, hvilket står i skarp kontrast til den langt skarpere billeder af både store og små choroidale fartøjer i CD1 mus (Figur 4). Den største forskel blev observeret i den tidlige fase, selvom den midterste fase også er påvirket. Der er ingen stor forskel i den sene fase ICGA grund svækkelsen af ICG signal i koroidale kar. Tilsyneladende ICG fluorescens kan delvist blokeret af RPE og melanocytter i årehinden i pigmenterede mus. Som et forslag, kan man overveje at breeding deres AMD-modeller til CD1 baggrunden for at opnå en høj opløsning ICGA.Selvom FA er mere udbredt på AMD dyremodeller ICGA er vigtigt at opdage abnormiteter i choroidale kar. Evnen til at observere mus choroidal vaskulatur ved høj opløsning i realtid høj grad kan hjælpe forskere med at karakterisere AMD musemodeller og korrelerer med histopatologiske data. Kombinationen af ICGA FA og oktober vil være yderst nyttigt at karakterisere fænotypen af AMD modeller diagnosticering af AMD i humane patienter. Da musen er i øjeblikket den mest udbredte dyremodel for AMD forskning 26-29, kan tidsforløbet IV-ICGA spille en større rolle i forskningsverdenen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
YF er en opfinder af to verserende patenter, som er relevante for AMD mus model, der anvendes i dette arbejde. SK, ZB og ADJ har intet at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af NIH tilskud 1R01EY022901, Career Development Award fra forskning til forebygge blindhed (RPB), CMReeves & MA Reeves Foundation, E. Matilda Ziegler Foundation for the Blind, Tempelridderne Eye Foundation, og en ubegrænset bevilling til Institut for oftalmologi ved University of Utah fra RPB. Vi takker Balamurali Ambati til teknisk bistand på Spectralis multimodalitet Imaging System og Tao Zhang for diskussioner og kommentarer til manuskriptet.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Spectralis Multi-Modality Imaging System | Heidelberg Engineering, Germany | SPECTRALIS HRA+OCT | |
| Tropicamide ophthalmic solution (1%) | Bausch & Lomb | NDC 24208-585-64 | for dilation of pupils |
| GenTeal Gel | Genteal | NDC 58768-791-15 | clear lubricant eye gel |
| Ketamine | Vedco Inc | NDC 50989-996-06 | |
| Xylazine | Lloyd Laboratories | NADA 139-236 | |
| Acepromazine | Vedco Inc | NDC 50989-160-11 | |
| 32-G Needle | Steriject | PRE-32013 | |
| 1-ml syringe | BD | 309659 | |
| Indocyanine Green | Pfaltz & Bauer | I01250 |
References
- Duane, T. D., Tasman, W., Jaeger, E. A. Chapter 4a, Indocyanine Green Angiography. Duane's clinical ophthalmology on CD-ROM. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. (2002).
- Alfaro, D. V. Age-related macular degeneration : a comprehensive textbook. , Lippincott Williams & Wilkins. (2006).
- Yannuzzi, L. A. Indocyanine green angiography: a perspective on use in the clinical setting. Am. J. Ophthalmol. 151, 745-751 (2011).
- Destro, M., Puliafito, C. A. Indocyanine green videoangiography of choroidal neovascularization. Ophthalmology. 96, 846-853 (1989).
- Scheider, A., Schroedel, C. High resolution indocyanine green angiography with a scanning laser ophthalmoscope. Am. J. Ophthalmol. 108, 458-459 (1989).
- Guyer, D. R., et al. Digital indocyanine-green angiography in chorioretinal disorders. Ophthalmology. 99, 287-291 (1992).
- Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J. A., Guyer, D. R., Orlock, D. A. Digital indocyanine green videoangiography and choroidal neovascularization. Retina. 12, 191-223 (1992).
- Regillo, C. D., Benson, W. E., Maguire, J. I., Annesley, W. H. Indocyanine green angiography and occult choroidal neovascularization. Ophthalmology. 101, 280-288 (1994).
- Scheider, A., Kaboth, A., Neuhauser, L. Detection of subretinal neovascular membranes with indocyanine green and an infrared scanning laser ophthalmoscope. Am. J. Ophthalmol. 113, 45-51 (1992).
- Kuck, H., Inhoffen, W., Schneider, U., Kreissig, I. Diagnosis of occult subretinal neovascularization in age-related macular degeneration by infrared scanning laser videoangiography. Retina. 13, 36-39 (1993).
- Imamura, Y., Engelbert, M., Iida, T., Freund, K. B., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy: a review. Surv. Ophthalmol. 55, 501-515 (2010).
- Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy. Ophthalmol. Clin. N. Am. 15, 537-554 (2002).
- Spaide, R. F., Yannuzzi, L. A., Slakter, J. S., Sorenson, J., Orlach, D. A. Indocyanine green videoangiography of idiopathic polypoidal choroidal vasculopathy. Retina. 15, 100-110 (1995).
- Coppens, G., Spielberg, L., Leys, A. Polypoidal choroidal vasculopathy, diagnosis and management. Bull. Soc. belge d'Ophtalmol.. , 39-44 (2011).
- Tsujikawa, A., et al. Pigment epithelial detachment in polypoidal choroidal vasculopathy. Am. J. Ophthalmol. 143, 102-111 (2007).
- Jones, A., et al. Increased expression of multifunctional serine protease, HTRA1, in retinal pigment epithelium induces polypoidal choroidal vasculopathy in mice. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 14578-14583 (2011).
- Alex, A. F., Heiduschka, P., Eter, N. Retinal fundus imaging in mouse models of retinal diseases. Methods Mol. Biol. 935, 41-67 (2013).
- Seeliger, M. W., et al. In vivo confocal imaging of the retina in animal models using scanning laser ophthalmoscopy. Vision Res. 45, 3512-3519 (2005).
- Fischer, M. D., Zhour, A., Kernstock, C. J. Phenotyping of mouse models with OCT. Methods Mol. Biol. 935, 79-85 (2013).
- Jian, Y., Zawadzki, R. J., Sarunic, M. V. Adaptive optics optical coherence tomography for in vivo mouse retinal imaging. J. Biomed. Opt. 18, 56007 (2013).
- Ciardella, A. P., Donsoff, I. M., Huang, S. J., Costa, D. L., Yannuzzi, L. A. Polypoidal choroidal vasculopathy. Surv. Ophthalmol. 49, 25-37 (2004).
- Sasahara, M., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy with choroidal vascular hyperpermeability. Am. J. Ophthalmol. 142, 601-607 (2006).
- Silva, R. M., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy and photodynamic therapy with verteporfin. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 243, 973-979 (2005).
- Yannuzzi, L. A., et al. Polypoidal choroidal vasculopathy masquerading as central serous chorioretinopathy. Ophthalmology. 107, 767-777 (2000).
- Janssen, A., et al. Abnormal vessel formation in the choroid of mice lacking tissue inhibitor of metalloprotease-3. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 2812-2822 (2008).
- Ding, X., Patel, M., Chan, C. C. Molecular pathology of age-related macular degeneration. Prog. Retin. Eye Res. 28, 1-18 (2009).
- Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. Animal models of choroidal and retinal neovascularization. Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).
- Pennesi, M. E., Neuringer, M., Courtney, R. J. Animal models of age related macular degeneration. Mol. Aspects Med. 33, 487-509 (2012).
- Elizabeth Rakoczy, P., Yu, M. J., Nusinowitz, S., Chang, B., Heckenlively, J. R. Mouse models of age-related macular degeneration. Exp. Eye Res. 82, 741-752 (2006).
