פרוטוקול בדיקה קלינית לגילוי גרוטאות לא טיפוסיות וקלאסיות בכבשים

Summary

פרוטוקול בדיקה קלינית קצר מוצג כדי לסייע באיתור של גרוטאות קלאסיות ולא טיפוסיות בכבשים ועזים.

Abstract

האבחנה של גרוטאות, אנצפלופתיה ספונגיפורמית (TSEs) של כבשים ועזים, מבוססת כיום על גילוי של חלבון פריון הקשור למחלות על ידי בדיקות שלאחר המוות. אלא אם כן מדגם אקראי של אוכלוסיית הכבשים או העזים מנוטר באופן פעיל עבור scrapie, זיהוי של מקרי גרוטאות מסתמך על דיווח של חשודים קליניים, אשר תלוי בהיכרות של הפרט עם המחלה ואת היכולת לזהות סימנים קליניים הקשורים scrapie. Scrapie לא יכול להיחשב באבחנה דיפרנציאלית של מחלות נוירולוגיות בהבעות קטנות, במיוחד במדינות עם שכיחות מגרדת נמוכה, או לא מוכר אם הוא מציג כצורה לאpruritic כמו גרוטאות לא טיפוסיות. כדי לסייע בזיהוי חשודים קליניים, פרוטוקול בדיקה קצר מוצג כדי להעריך את התצוגה של סימנים קליניים ספציפיים הקשורים צורות pruritic ולאpruritic של TSEs בכבשים, אשר יכול להיות מיושם גם על עזים. זה כולל הערכה של התנהגות, ראייה (על ידי בדיקת תגובת האיום), pruritus (על ידי בדיקת התגובה גירוד), ותנועה (עם ובלי כיסוי עיניים). זה עלול להוביל לבדיקה נוירולוגית מפורטת יותר של דיווח על בעלי חיים כחשודים מגרדים. זה יכול לשמש גם במחקרים ניסיוניים TSE של כבשים או עזים כדי להעריך את התקדמות המחלה או לזהות נקודת קצה קלינית.

Introduction

Scrapie הוא אנצפלופתיה ספונגיפורמית (TSE) של כבשים ועזים, השייכת לקבוצה של הפרעות תיקון חלבונים, כמו אנצפלופתיה ספונגיפורמית שור (BSE) בבקר, מחלת בזבוז כרונית בצבי, ומחלת קרויצפלד-יעקב בבני אדם. האבחנה נעשית לאחר המוות על ידי גילוי הצורה החריגה של חלבון הפריון, שהוא עמיד לחלבונים, בדרך כלל במוח. ניתן להבחין בין שתי צורות גרוטאות עיקריות המתרחשות באופן טבעי, שהן אפידמיולוגיות, פתולוגיות ושונות ביוכימית: גרוטאות קלאסיות ומגרדות לא טיפוסיות. בנוסף, מחלה נוירולוגית עם סימנים קליניים דמויי גרוטאות קלאסי יכול להיגרם כבשים ועיזים על ידי זיהום ניסיוני עם סוכן BSE^6,10-11. למעשה, BSE המתרחשים באופן טבעי אובחן עזים^3,17. שליטה של מגרד קלאסי (ו BSE בכבשים אם זה קרה באופן טבעי) הושגה על ידי רבייה עבור התנגדות גנטית מיקוד גן חלבון פריון, אבל זה קשה יותר עבור מגרד לא טיפוסי, אשר הוא האמין להיות מחלה ספורדית אובחן במדינות הנחשבות חופשיות מגרד קלאסי, למשל ניו זילנד⁷.

Scrapie היא מחלה נוירולוגית של כבשים ועזים בוגרים וכתוצאה מכך שינויים בהתנהגות, תחושה, ותנועה, אבל המחלה מתקדמת לאט, סימנים קליניים לעתים קרובות אינם מוכרים כי שומר בעלי חיים או מנתח וטרינרי לא יכול להיות מוכר עם הסימנים הקליניים, או scrapie אינו נחשב בכלל באבחון דיפרנציאלי של מחלות נוירולוגיות בהבעות קטנות.

פרוטוקול הבדיקה המוצע נועד לסייע באבחון הקליני של מגרד עם שתי מטרות בראש: זה צריך להיות קצר במידה ניכרת כדי לאפשר סריקה של בעלי חיים רבים בתוך פרק זמן קצר, אבל ספציפי מספיק כדי לאפשר זיהוי של בעלי חיים מושפעים scrapie, אשר מושגת על ידי הערכת נוכחות של סימנים קליניים נתקל לעתים קרובות בבעלי חיים מושפעים scrapie. פרוטוקול זה הוא שינוי קל מזה המשמש לניטור עזים לסימנים של גרוטאות קלאסיות¹¹ וכולל כיסוי עיניים של החיה, אשר עלול להחריף סימנים קליניים שאינם קשורים בדרך כלל עם scrapie⁹.

Protocol

1. הערכת היציבה

1. להעריך את היציבה של החיה תוך באין מפריע.
2. בעלי חיים המושפעים מ-TSEs עשויים לעמוד עם גפיים רחבות, להיראות רכון, או לעמוד עם עגלת ראש נמוכה.

2. הערכת התנהגות

1. למד את התנהגותו של בעל החיים, כאשר הוא נשאר לבד, כאשר ניגשים אליו, וכאשר מטפלים בו.
2. בעלי חיים המושפעים מ-TSE עשויים להציג מנטציה שונה על ידי עמידה בנפרד מכבשים אחרות או לא מיד לאחר כבשים אחרות.
3. כשמתקרבים לחיה, היא עלולה לברוח ולהתמוטט, או שהיא מתמוטטת על הרצפה כשמטופלים בה. כפייתי בכיוון השעון או נגד כיוון השעון ניתן לראות בכבשים עם גרוטאות לא טיפוסיות.

3. בדיקות תגובה איום

1. החזק את ראשו של בעל החיים לבדיקת תגובת האיום: הזז את היד או מספר אצבעות מספר פעמים לכיוון כל עין של החיה כדי לגרום לתגובה מהבהבת אך היזהר שלא לגעת בשערות פנים או ליצור מערבולת אוויר שעלולה לגרום לחיה למצמץ.
2. תגובת האיום עלולה להיעדר בבעלי חיים מושפעי גרוטאות, במיוחד בכבשים עם גרוטאות לא טיפוסיות. למרות שבדיקת תגובת האיום היא הבדיקה העצבית הגולגולתית היחידה המשמשת כחלק מהפרוטוקול, בדיקה חזותית של הפנים במהלך הליך זה עשויה לחשוף סימנים אחרים של ליקויים נוירולוגיים שאינם נראים בדרך כלל במגרד, למשל שיתוק פנים. אם החיה אינה ממצמצת בתגובה לאיום מומלץ לבדוק את רפלקס הפלפברי על ידי נגיעה בעפעפיים כדי להבטיח שחוסר היכולת של החיה למצמץ אינו נגרם על ידי שיתוק הפנים.

4. בדיקת תגובת השריטה

1. ודאו שהחיה רגועה במהלך הליך זה מכיוון שלא ניתן לפרש את הבדיקה בבעלי חיים נאבקים.
2. אזורי שריטות בגב באזורי בית החזה, המותני והסקרל, עוצרים בין כל פרק גירוד.
3. אם החיה מגיבה בתנועות קצביות של הראש או הגוף, או זזה או מלקקת את שפתיה עם גירוד של אזור מסוים אחד, חזור על בדיקת השריטה כדי לאשר את הרבייה של תגובת השריטה.
4. תגובה חוזרת היא בדרך כלל עורר בבעלי חיים כי הם pruritic, אשר בדרך כלל כולל כבשים עם גרוטאות קלאסיות או עזים עם הצורה pruritic של גרוטאות, אבל בדרך כלל אין תגובה כבשים עם גרוטאות לא טיפוסי אלא אם כן תנאי עור pruritic אחרים או ectoparasites נוכחים.

5. בדיקת אובדן צמר ונגעים בעור

1. תבדקו את העור.
2. Pruritus עקב גרוטאות בדרך כלל גורם לנשירת שיער, אשר עשוי להיות על הסקר, בחזרה, עכוז, בצד החזה או הבטן עקב שפשוף מוגזם או גירוד שבו העור הבסיסי נראה נורמלי.
3. שפשופים עשויים להופיע מאוחר יותר אם לבעל החיים יש הזדמנות לשפשף חפצים חדים. פצעי נשיכה עשויים להופיע, במיוחד על הגפיים, עקב כרסום מוגזם של הגפיים.

6. ניקוד מצב הגוף

1. להעריך את מצב הגוף של החיה על ידי חיטוט התהליכים הגביים והרחבים של החוליות המותני.
2. Scrapie עלול לגרום לאובדן מתמשך של מצב הגוף שבו התהליכים הרוחביים של החוליות המותניות ניתן להרגיש בקלות בנפרד, ואת הקצוות של התהליכים נראים חדים.

7. כיסוי עיניים של החיה

1. לכסות את עיניו של החיה עם מכסה המנוע, אשר יכול להתבצע באמצעות כל שקית שאינה עין דרך שבו פינה אחת מנותקת כדי לאפשר נשימה של החיה.
2. שחררו את החיה רק אם אין חששות בטיחותיים, ואין סכנה לפציעה עקב בעל חיים מבוהל; אחרת לשמור על אחיזת הכבשים וללמוד תנועות בעלי חיים תוך שליטה על החיה.
3. כיסוי עיניים עלול להחריף סימנים של מערכת שיווי המשקל או תפקוד לקוי של המוח הקטן, אשר עשוי להיות מוסתר על ידי היכולת של החיה לפצות באמצעות החזון שלה. אובדן שיווי משקל, חוסר קואורדינציה או הקפה עלולים להיגרם, במיוחד בכבשים לא ראויות לציון מבחינה קלינית עם גרוטאות לא טיפוסיות.

8. הערכת תנועת בעלי החיים

1. למד את תנועות ההליכה והשרירים של החיה כאשר היא נעה בחופשיות.
2. אי-קואורדנציה עשויה להיות מאופיינת בתנועות רחבות של הגפיים האחוריות, מקפץ עם שתי הגפיים האחוריות, או מתנדנד יתר על המידה ברבעים האחוריים, אשר עלול לגרום למעוד או לשבת לזמן קצר.
3. נוכחות של רעד בראש היא לעתים קרובות עדינה כאשר החיה אינה מופרעת אך עשויה להיות מורגשת יותר במהלך או לאחר השלמת הבדיקה הקלינית.

9. פרשנות

1. קחו למשל את משמעות הממצאים ביחס לגרוטאות.
2. למרות נוכחותם של סימנים בודדים, כגון תגובה חוזרת ונשנית גירוד, רעד, התנהגות חריגה, חג, פרקים קורסים, אטקסיה, או תגובה איום נעדר, עשויים להיות סיבות שונות, המופע המשולב של שניים או יותר סימנים אלה מרמז מאוד של גרוטאות כבשים או עזים.

Representative Results

כבשה בריאה מבחינה קלינית. סקר דורסט wether מתוך עדר ללא גרוטאות מחוסן תוך-אופן עם מוח שור ממוצא ניו זילנדי ונבדק ב 49 חודשים לאחר החיסון. לכבשה זו יש יציבה נורמלית, היא מתנהגת כרגיל, מציגה תגובת איום נורמלית (איור 1),אינה מגיבה לבדיקת השריטה, יש לה צמר שלם ומצב גוף טוב מאוד. זה קלינית יוצא דופן כאשר בעיניים מכוסות ולא מראה סימנים של הפרעת תנועה.

כבשים גרוטאות לא טיפוסיות המציגות את הצורה הלא-פרורית של TSEs בכבשים. Cheviot wether מלהקה נטולת גרוטאות מחוסנת תוך-גזעית עם הומוגניאט במוח ממארז שדה גרוטאות לא טיפוסי של אותו גנוטיפ של חלבון פריון (AHQ/AHQ) ונבדק בגיל 36 חודשים לאחר החיסון. כבשה זו יש גם יציבה נורמלית אבל מתנהג באופן שונה לכבשים האחרות בעט ועיגולים בכיוון השעון. הוא אינו ממצמץ כאשר תגובת האיום נבדקת. גירוד אינו מעורר כל תגובה, ואין שינויים פליז ניכרים, אבל מצב הגוף הוא רק הוגן. הוא מקיף בכיוון השעון כשעיניים מכוסות (איור 2)ומאבד שיווי משקל. ההליכה היא אטקסית, ורעד ראש עדין נראה לעין.

כבשים BSE לא טיפוסי מציג עם הצורה pruritic של TSEs בכבשים, אשר דומה קלינית המצגת הקלינית של כבשים קלאסיות מושפעות גרוטאות. מסיבה זו, מקרה גרוטאות קלאסי אינו כלול. Poll Dorset wether מלהקה נטולת גרוטאות מחוסנת תוך-גזעית עם מוח BSE לא טיפוסי (L-type) הומוגנית ונבדקה בחיסון של 50 חודשים לאחר. כבשה זו עומדת מעט רכון, נוטה לשמור על הגפיים האחוריות רחב מבוסס ונופל על הרצפה כאשר נתפס. תגובת האיום חלשה. גירוד של אזורים שונים בגב מעורר תנועות ראש או שפתיים (איור 3), ויש אובדן צמר עם פגיעת עור קלה בסקר. מצב הגוף טוב. כאשר עיניו מכוסות, הוא מסרב לזוז ומניח את הקצה האחורי שלו על המשוכה כדי לשמור על איזון. הכבשים אטקסיות ומציגות היפרמטריה של גפיים.

איור 1. בדיקות תגובה לאיים. מחווה מאיימת כלפי עין החיה מעוררת תגובה מהבהבת. לחץ כאן כדי להציג תמונה גדולה יותר.

איור 2. כיסוי עיניים. הקפה בכיוון השעון עוררה על ידי כיסוי העיניים של הכבשים עם ברדס. לחץ כאן כדי להציג תמונה גדולה יותר.

איור 3. בדיקה של תגובת השריטה. גירוד של הגב מעורר ליקוק שפתיים עם תנועות צדדיות של הראש לחץ כאן כדי להציג תמונה גדולה יותר.

Discussion

Scrapie היא מחלה רשומה על ידי ארגון הבריאות העולמי לבריאות בעלי חיים (OIE), אשר, בהיעדר בדיקה מהירה ואמינה ante mortem, מסתמך על היכולת של החקלאים או וטרינרים לזהות את הסימנים הקליניים הקשורים למחלה זו. רוב מקרי גרוטאות, במיוחד במקרים מגרדים לא טיפוסיים, עם זאת, נמצאים כיום על ידי מעקב TSE ממוקד, כלומר על ידי בדיקה מוחית של מהורהרים קטנים הכפופים לשחיטה או בעלי חיים במלאי שנפלו. גידול כבשים להתנגדות גרוטאות קלאסיות, אשר הפחית את מספר מקרי גרוטאות קלאסי, סביר להניח גם הפחית את המודעות של אנשים למחלה, כך שהוא נחשב לעתים קרובות פחות באבחון דיפרנציאלי של הפרעות נוירולוגיות בכבשים. מגרד לא טיפוסי יש גם שכיחות נמוכה עם כחמישה מקרים בבתי מטבחיים ושמונה מקרים במלאי שנפל לכל 10,000 נבדק באירופה⁴. בנוסף, pruritus, בדרך כלל ניכר כמו התקרחות עם או בלי excoriation, נחשב לעתים קרובות סימן אופייני של scrapie¹³. לכן, מחלה נוירולוגית ללא pruritus בו זמנית כפי שנצפה מגרד לא טיפוסי¹² או הצורה הלא פרורטית של גרוטאות קפרין¹¹ לא יכול להעלות חשד של גרוטאות.

פרוטוקול בדיקה זה נועד לזהות סימנים קליניים של TSE בכבשים על ידי הערכת סימנים קליניים ספציפיים הקשורים לסוגים שונים של גרוטאות (גרוטאות לא טיפוסיות וקלאסיות, האחרונה מיוצגת על ידי כבשה מחוסמת BSE לא טיפוסית, אשר הציגה סימנים קלאסיים דמויי גרוטאות). בגרד קלאסי, אחוז המקרים שהפגינו תגובת שריטה חיובית ("רפלקס כרסום") נע בין 50-77 בלמעלה מ -100 כבשים למדו^5,8. הפרעות תנועה ניתן לראות עד 81% ממקרי גרוטאות קלאסי מבוסס על מחקרים שונים¹⁸. אי-קואורדינציה היא גם סימן מרכזי במקרים טבעיים שונים של גרוטאות לא טיפוסיות, המלוות לעתים קרובות בשינויים התנהגותיים¹, אך סימנים נוספים שדווחו הן באופן טבעי והן באופן ניסיוני נגועים כבשים גרוטאות לא טיפוסיות היו חגים וליקוי ראייה^12,15,16, ולכן כיסוי עיניים ובדיקת תגובת האיום נכללים בפרוטוקול הבדיקה. ניקוד מצב הגוף, למשל באמצעות מערכת ניקוד 6 נקודות¹⁴, מאפשר הערכה של emaciation, אשר ניתן לראות כבשים מושפעות גרוטאות⁵. למרות קריטריונים קליניים כדי לסייע בזיהוי של גרוטאות בכבשים הוצעו בעבר², אלה קשורים רק לגילוי של מגרד קלאסי לקח את ההיסטוריה הקלינית בחשבון, אשר לא יכול להיות זמין אם בעלי חיים מוצגים בבית מטבחיים.

הפרוטוקול הנוכחי מאפשר הקרנה של בעלי חיים רבים לסימני גרוטאות בתוך פרק זמן קצר. יתר על כן, פרוטוקול הבדיקה יכול להיות מיושם על מחקרים ניסיוניים של גרוטאות כבשים ועזים כדי לפקח על התפרצות קלינית, התקדמות, ונקודת קצה. עם זאת, הוא אינו מחליף בדיקה פיזית ונוירולוגית מפורטת יותר בהקלטה מתאימה של היסטוריית המקרים הקליניים, אולי ואחריו בדיקות אבחון נלוות (בדיקת דם ונוזל שדרתי; טכניקות הדמיה מתוחכמות יותר במידת הצורך), אשר עשויות להיות נחוצות לאחר מכן כדי לשלול תנאים שונים אחרים בהרהורים קטנים המציגים סימנים דומים. כגון מחלות נוירולוגיות מטבוליות או דלקתיות, מורסות מוח או גידולים.

למרות שבדיקה קלינית היא בדרך כלל פחות רגישה באיתור בעלי חיים שנפגעו מ- TSE מאשר בדיקות שלאחר המוות המבוססות על גילוי חלבון פריון^2,11, במיוחד בשלב מוקדם של תקופת הדגירה, זוהי כיום שיטת הגילוי היחידה בבעלי חיים חיים ורלוונטית ביותר למדינות שאין להן מערכת מעקב ממוקדת במקום לזהות חומרים מהרהרים קטנים המושפעים מ- TSE.