Kliniskt undersökningsprotokoll för att upptäcka atypisk och klassisk skrapie hos får

Summary

Ett kort kliniskt undersökningsprotokoll presenteras för att underlätta påvisande av klassisk och atypisk skrapie hos får och getter.

Abstract

Diagnos av skrapie, en överförbar spongiform encefalopati (TSE) av får och getter, är för närvarande baserad på påvisande av sjukdomsrelaterade prion protein genom obduktioner. Om inte ett slumpmässigt urval av får- eller getpopulationen aktivt övervakas för skrapie, är identifieringen av skrapiefall beroende av rapportering av kliniska misstänkta, vilket är beroende av individens förtrogenhet med sjukdomen och förmågan att känna igen kliniska tecken i samband med skrapie. Scrapie kanske inte beaktas i differentialdiagnos av neurologiska sjukdomar i små idisslare, särskilt i länder med låg skrapie prevalens, eller inte erkännas om det presenterar som nonpruritic form som atypiska skrapie. För att underlätta identifieringen av kliniska misstänkta presenteras ett kort undersökningsprotokoll för att bedöma visningen av specifika kliniska tecken i samband med pruritiska och icke-klåda former av TSE hos får, som också kan tillämpas på getter. Detta inkluderar bedömning av beteende, syn (genom testning av hotet svar), pruritus (genom att testa svaret på repor) och rörelse (med och utan ögonbindel). Detta kan leda till en mer detaljerad neurologisk undersökning av rapportera djur som skrapie misstänkta. Det kan också användas i experimentella TSE-studier av får eller getter för att utvärdera sjukdomsprogression eller för att identifiera klinisk slutpunkt.

Introduction

Scrapie är en överförbar spongiform encefalopati (TSE) av får och getter, som tillhör gruppen av protein felveckande störningar, som nötkreatur spongiform encefalopati (BSE) hos nötkreatur, kronisk slösa sjukdom hos rådjur och Creutzfeldt-Jakob sjukdom hos människor. Diagnosen görs efter döden genom att upptäcka den onormala formen av prionproteinet, som är proteinasresistent, vanligtvis i hjärnan. Två stora naturligt förekommande skrapieformer kan särskiljas, som epidemiologiskt, patologiskt och biokemiskt olika: klassisk skrapie och atypisk skrapie. Dessutom kan en neurologisk sjukdom med klassiska skrapieliknande kliniska tecken induceras hos får och getter genom experimentell infektion med BSE-medlet^6,10-11. Faktum är att naturligt förekommande BSE har diagnostiserats hos getter^3,17. Kontroll av klassisk skrapie (och BSE hos får om det inträffade naturligt) har uppnåtts genom avel för genetisk resistens riktad mot prionproteingenen, men detta är svårare för atypiska skrapie,som tros vara en sporadisk sjukdom och har diagnostiserats i länder som anses vara fria från klassisk skrapie, t.ex.

Scrapie är en neurologisk sjukdom hos vuxna får och getter som resulterar i förändringar i beteende, känsla och rörelse, men sjukdomen är långsamt progressiv, och kliniska tecken känns ofta inte igen eftersom djurhållaren eller veterinären kanske inte är bekant med de kliniska tecknen, eller skrapie beaktas inte alls i differentialdiagnos av neurologiska sjukdomar hos små idisslare.

Det föreslagna undersökningsprotokollet utformades för att underlätta klinisk diagnos av skrapie med två syften i åtanke: det bör vara betydligt kortfattat att tillåta skanning av många djur inom en kort tidsperiod men tillräckligt specifik för att möjliggöra påvisande av skrapiedrabbade djur, vilket uppnås genom att bedöma förekomsten av kliniska tecken som ofta påträffas hos skrapie-drabbade djur. Detta protokoll är en liten modifiering från den som används för att övervaka getter för tecken på klassisk skrapie¹¹ och inkluderar ögonbindel av djuret, vilket kan förvärra kliniska tecken som normalt inte är associerade med skrapie⁹.

Protocol

1. Bedömning av hållning

1. Bedöm djurets hållning medan den är ostörd.
2. Djur som påverkas av TSE kan stå med breda armar och ben, kan verka böjda eller stå med en låg huvudtransport.

2. Bedömning av beteende

1. Studera djurets beteende, när det lämnas ensamt, när det kontaktas och när det hanteras.
2. TSE-drabbade djur får uppvisa förändrad menstruation genom att stå åtskilda från andra får eller inte omedelbart följa andra får.
3. När djuret närmar sig kan det springa iväg och kollapsa, eller det kollapsar till golvet när det hanteras. Tvångsmässig medurs eller moturs cirklande kan ses hos får med atypisk skrapie.

3. Testning av hotrespons

1. Håll djurets huvud för testning av hotets svar: flytta handen eller flera fingrar flera gånger mot djurets öga för att inducera ett blinkande svar men var försiktig så att du inte rör vid några ansiktshår eller skapar någon luftturbulens som kan få djuret att blinka.
2. Hotet kan vara frånvarande hos skrapiedrabbade djur, särskilt hos får med atypisk skrapie. Även om testning av hotet svar är den enda hjärnskålen nerv testning används som en del av protokollet, visuella inspektion av ansiktet under detta förfarande kan avslöja andra tecken på neurologiska underskott som normalt inte ses i skrapie, t.ex. ansiktsförlamning. Om djuret inte blinkar som svar på hotet är det lämpligt att testa palpebralreflexen genom att vidröra ögonlocken för att säkerställa att djurets oförmåga att blinka inte orsakas av ansiktsförlamning.

4. Testning av skrapresponsen

1. Se till att djuret är lugnt under detta förfarande eftersom testet inte kan tolkas i ett kämpande djur.
2. Repiga områden på baksidan vid bröst-, ländryggs- och sakralregionerna, pausa mellan varje skrapande episod.
3. Om djuret svarar med rytmiska huvud- eller kroppsrörelser, eller rör sig eller slickar läpparna vid repor i ett visst område, upprepa skraptestet för att bekräfta repors reproducerbarhet.
4. Ett repeterbart svar framkallas vanligtvis hos djur som är pruritiska, vilket vanligtvis inkluderar får med klassisk skrapie eller getter med den pruritiska formen av skrapie, men det finns i allmänhet inget svar hos får med atypisk skrapie om inte andra pruritiska hudförhållanden eller ektoparasiter är närvarande.

5. Kontroll av ullförlust och hudskador

1. Inspektera huden.
2. Pruritus på grund av skrapie orsakar vanligtvis håravfall, som kan vara på undersökningen, ryggen, rumpan, sidan av bröstet eller buken på grund av överdriven gnuggning eller repor där den underliggande huden verkar normal.
3. Nötningar kan förekomma senare om djuret har möjlighet att gnugga på vassa föremål. Bitsår kan förekomma, särskilt på benen, på grund av överdriven nibbling av benen.

6. Poänggivande kroppstillstånd

1. Utvärdera djurets kroppstillstånd genom att palpera rygg- och tvärgående processer hos ländkotorna.
2. Scrapie kan orsaka en progressiv förlust av kroppens tillstånd där de tvärgående processerna hos ländkotorna lätt kan kännas individuellt, och processernas ändar verkar skarpa.

7. Ögonbindel av djuret

1. Täck djurets ögon med en huva, som kan göras genom att använda någon icke-skådad påse där ett hörn är avskuret för att tillåta andning av djuret.
2. Släpp djuret endast om det inte finns några säkerhetsproblem, och det finns ingen risk för skada på grund av ett panikslaget djur; i annat fall hålla i fåren och studera djurrörelser medan de fortfarande kontrollerar djuret.
3. Ögonbindel kan förvärra tecken på ett vestibulärt system eller cerebellar dysfunktion, som kan döljas av djurets förmåga att kompensera genom sin syn. Förlust av balans, inkoordinering eller cirktering kan uppstå, särskilt hos annars kliniskt omärkbara får med atypisk skrapie.

8. Bedömning av djurets rörelse

1. Studera djurets gång- och muskelrörelser när det rör sig fritt.
2. Inkoordinering kan kännetecknas av breda rörelser i bakbenen, hoppa med båda bakbenen eller svänga överdrivet i bakkvartsparterna, vilket kan leda till snubblande eller kort sittande.
3. Närvaron av en huvudtremor är ofta subtil när djuret är ostört men kan bli mer märkbart under eller efter slutförandet av den kliniska undersökningen.

9. Tolkning

1. Tänk på betydelsen av resultaten när det gäller skrapie.
2. Även om förekomsten av enskilda tecken, såsom ett repeterbart svar på repor, tremor, onormalt beteende, cirkrypande, kollapsande episoder, ataxi eller ett frånvarande hotsvar, kan ha olika orsaker, är den kombinerade förekomsten av två eller flera av dessa tecken mycket suggestiv av skrapie hos får eller getter.

Representative Results

Kliniskt friska får. Poll Dorset wether från en scrapie-free flock intracerebrally inokulerad med nötkreatur hjärna av nyazeeländskt ursprung och undersökt vid 49 månader efter inokulering. Detta får har en normal hållning, beter sig normalt, visar ett normalt hotsvar (figur 1), reagerar inte på skraptestet, har en intakt fleece och ett mycket bra kroppstillstånd. Det är kliniskt utmärker när ögonbindel och visar inga tecken på en rörelsestörning.

Atypiska skrapiefår som presenterar med den icke-klåda formen av TSE hos får. Cheviot wether från en scrapie-free flock intracerebrally inokuleras med hjärnan homogenate från en atypiska skrapie fält fall av samma prion protein genotyp (AHQ/AHQ) och undersökts vid 36 månader efter inympning. Detta får har också en normal hållning men beter sig annorlunda än de andra fåren i pennan och cirklar medurs. Den blinkar inte när hotet testas. Repor framkallar inte något svar, och inga fleeceförändringar är uppenbara, men kroppens tillstånd är bara rättvist. Den cirklar medurs när den har ögonbindel (figur 2) och förlorar balansen. Gången är ataxi, och en fin huvudskakning är synlig.

Atypiska BSE-får som presenterar den pruritiska formen av TSE hos får, vilket är kliniskt likt den kliniska presentationen av klassisk skrapie-drabbade får. Av denna anledning ingår inte ett klassiskt skrapfall. Poll Dorset wether från en skrapie-fri flock intracerebrally inokuleras med nötkreatur atypiska (L-typ) BSE hjärnan homogenisera och undersökts vid 50 månader efter inokulering. Detta får står något hukat, tenderar att hålla bakbenen vidöppna och faller på golvet när de fångas. Hotet är svagt. Repor av olika delar av ryggen framkallar huvud- eller läpprörelser (figur 3), och det finns ullförlust med mindre hudtrauma på undersökningen. Kroppens tillstånd är bra. När den har ögonbindel är den ovillig att röra sig och vilar sin bakre ände på hindret för att upprätthålla balansen. Fåren är ataxi och visar förben hypermetria.

Figur 1. Svarstestning av hot. Hotfull gest mot djurets öga framkallar ett blinkande svar. Klicka här om du vill visa större bild.

Figur 2. Ögonbindel. Medurs cirklar framkallat genom ögonbindel får med huva. Klicka här om du vill visa större bild.

Figur 3. Testning av skrapresponsen. Repning av ryggen framkallar läppslickning med huvudets sidrörelser Klicka här för att se större bild.

Discussion

Scrapie är en listad sjukdom av Världshälsoorganisationen för djurhälsa (OIE), som i avsaknad av ett snabbt och tillförlitligt ante mortem-test förlitar sig på jordbrukarnas eller veterinärernas förmåga att känna igen de kliniska tecken som är förknippade med denna sjukdom. De flesta skrapiefall, särskilt atypiska skrapiefall, hittas dock för närvarande genom riktad TSE-övervakning, dvs. genom hjärnundersökning av små idisslare som slaktas eller fallna djur. Avelsfår för resistens mot klassisk skrapie, vilket minskade antalet klassiska skrapfall, minskade sannolikt också människors medvetenhet om sjukdomen så att den mindre ofta beaktas i differentialdiagnosen av neurologiska störningar hos får. Atypisk skrapie har också en låg prevalens med cirka fem fall i slakterier och åtta fall i fall av fall per 10 000 testade i Europa⁴. Dessutom anses pruritus, vanligtvis uppenbart som alopeci med eller utan excoriation, ofta vara ett karakteristiskt tecken på skrapie¹³. Således kan en neurologisk sjukdom utan samtidig pruritus som observerats i atypiska skrapie¹² eller den nonpruritic formen av caprine skrapie¹¹ inte väcka misstanke om skrapie.

Detta undersökningsprotokoll utformades för att identifiera kliniska tecken på TSE hos får genom att utvärdera specifika kliniska tecken associerade med olika typer av skrapie (atypiska och klassiska skrapie, de senare representerade av ett atypiskt BSE-inokulerat får, som presenteras med klassiska skrapieliknande tecken). I klassisk skrapie varierade andelen fall som visade en positiv represpons ("nibble reflex") från 50-77 i över 100 får studerade^5,8. Rörelsestörningar kan observeras i upp till 81% av klassiska skrapiefall baserat på olika studier¹⁸. Inkoordinering är också ett stort tecken i olika naturligt förekommande fall av atypisk skrapie, ofta åtföljd av beteendeförändringar¹, men ytterligare tecken som rapporterats i både naturligt och experimentellt infekterade atypiska skrapie får var cirktering och synnedsättning^12,15,16, varför ögonbindel och testning av hotet svar ingår i undersökning protokollet. Att poänggöra kroppens tillstånd, till exempel med hjälp av ett 6-poängssystem¹⁴, möjliggör utvärdering av utmärgning, vilket kan observeras i skrapie-drabbade får⁵. Även om kliniska kriterier för att underlätta påvisande av skrapie hos får har föreslagits^{tidigare 2,}gällde dessa endast påvisande av klassisk skrapie och tog hänsyn till den kliniska historien, som kanske inte är tillgänglig om djur presenteras på ett slakteri.

Det nuvarande protokollet tillåter screening av många djur för tecken på skrapie på kort tid. Dessutom kan undersökningsprotokollet tillämpas på experimentella studier av skrapie hos får och getter för att övervaka klinisk inlopp, progression och slutpunkt. Det ersätter dock inte en mer detaljerad fysisk och neurologisk undersökning med lämplig registrering av den kliniska fallhistoriken, eventuellt följt av kompletterande diagnostiska tester (undersökning av blod och cerebrospinalvätska; mer sofistikerade bildtekniker om det är lämpligt), vilket kan vara nödvändigt därefter för att utesluta olika andra tillstånd hos små idisslare som förekommer med liknande tecken , såsom metabola eller inflammatoriska neurologiska sjukdomar, hjärnabscesser eller tumörer.

Även om en klinisk undersökning i allmänhet är mindre känslig för att upptäcka TSE-drabbade djur än obduktionstester baserade på påvisande av prionprotein^2,11, särskilt i ett tidigt skede av inkubationsperioden, är detta för närvarande den enda detektionsmetoden hos levande djur och mest relevant för de länder som inte har ett riktat övervakningssystem för att identifiera TSE-drabbade små idisslare.